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Aβ斑块靶向近红外荧光探针的合成及评价
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作者 张婷 张志荣 程妍 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期320-324,共5页
目的制备近红外荧光探针ZZN-4、ZZN-6,并考察其光学性质及与Aβ1-42聚集体、APP/PS1转基因小鼠脑内Aβ斑块的结合能力。方法以2-喹啉甲醛及4-(二甲氨基)肉桂醛为原料,通过缩合反应制备探针ZZN-4、ZZN-6,并通过1HNMR、13CNMR、MS确认结... 目的制备近红外荧光探针ZZN-4、ZZN-6,并考察其光学性质及与Aβ1-42聚集体、APP/PS1转基因小鼠脑内Aβ斑块的结合能力。方法以2-喹啉甲醛及4-(二甲氨基)肉桂醛为原料,通过缩合反应制备探针ZZN-4、ZZN-6,并通过1HNMR、13CNMR、MS确认结构。考察所制备探针的紫外吸收及与蛋白结合前、后荧光性质的变化;通过蛋白结合饱和实验测定探针与Aβ1-42聚集体结合的解离常数(Kd);对APP/PS1转基因小鼠脑切片进行体外荧光染色,考察其与Aβ斑块的结合能力。结果ZZN-4、ZZN-6与Aβ1-42聚集体结合后,荧光最大发射波长均发生蓝移(分别为635、629nm),但仍处于近红外区;荧光强度分别增强52.4、15.9倍;其中,ZZN-4与Aβ1-42聚集体结合的Kd为6.89nmol·L^-1。APP/PS1转基因鼠脑切片的荧光染色结果表明:ZZN-4可与Aβ斑块特异性结合。结论荧光探针ZZN-4在体外表现出对Aβ1-42聚集体的高亲和力,并对脑切片Aβ斑块具有较好的靶向性,有潜力成为阿尔兹海默症患者脑内Aβ斑块的近红外荧光成像剂。 展开更多
关键词 阿尔兹海默症 Aβ斑块 近红外荧光探针 成像 喹啉类 体外 结合能力 染色 光学性质 蛋白结合饱和实验 靶向性 APP/PS1转基因小鼠脑切片
暴马丁香花粉萌发适宜培养基的筛选 预览
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作者 魏佳祺 赵爽 +1 位作者 张新超 齐国辉 《林业与生态科学》 2019年第2期190-195,共6页
为了探明影响暴马丁香花粉萌发的因素,筛选适宜花粉萌发的培养基,以暴马丁香新鲜花粉为试材,采用离体培养方法,通过正交设计L16(45)研究培养基中不同浓度的蔗糖、硼酸、氯化钙及pH值4个因素对暴马丁香花粉萌发的影响。结果表明:4个因素... 为了探明影响暴马丁香花粉萌发的因素,筛选适宜花粉萌发的培养基,以暴马丁香新鲜花粉为试材,采用离体培养方法,通过正交设计L16(45)研究培养基中不同浓度的蔗糖、硼酸、氯化钙及pH值4个因素对暴马丁香花粉萌发的影响。结果表明:4个因素对暴马丁香花粉萌发影响的主次关系依次为硼酸、氯化钙、蔗糖和pH值,适宜的蔗糖浓度为100~150g/L,此时的发芽率平均为23.1%~26.6%;适宜的硼酸浓度为0.65g/L,此时的发芽率平均为33.4%;适宜的氯化钙浓度为0.15g/L,此时的发芽率平均为27.5%;适宜的pH值为5,此时的发芽率平均为26.8%。暴马丁香花粉萌发的最适培养基成分组合为蔗糖浓度150g/L、硼酸浓度0.65g/L、氯化钙浓度0.15g/L、pH值5,在此培养基下花粉发芽率达到53.94%。 展开更多
关键词 暴马丁香 花粉萌发 离体培养 培养基
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益气养阴方含药血清联合化疗药物对KG1α细胞增殖的影响 预览
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作者 周琦浩 李双双 +1 位作者 朱里洁 童向民 《中国中医药科技》 CAS 2019年第5期658-661,共4页
目的:观察益气养阴方含药血清联合化疗药物(阿糖胞苷、喜树碱、紫杉醇)对KG1a细胞增殖作用的影响。方法:予Wistar大鼠中药制剂灌胃制备含药血清;实验分为空白血清组,5%、10%、15%、20%含药血清组,化疗药单用组,含药血清联合化疗药组;各... 目的:观察益气养阴方含药血清联合化疗药物(阿糖胞苷、喜树碱、紫杉醇)对KG1a细胞增殖作用的影响。方法:予Wistar大鼠中药制剂灌胃制备含药血清;实验分为空白血清组,5%、10%、15%、20%含药血清组,化疗药单用组,含药血清联合化疗药组;各组细胞培养12、24、48、72 h,采用CCK8检测KG1a细胞增殖抑制率。结果:15%含药血清组12 h对KG1α细胞增殖抑制效果最为明显,随着时间的推移,抑制效果稍有所减弱,与空白血清组比较差异具有统计学意义(P <0. 01)。阿糖胞苷、紫杉醇对于KG1α细胞的抑制效果不明显;但在含药血清的协同作用下,对KG1α细胞的抑制作用明显增加,12 h即表现出明显的抑制作用,与空白血清组及单用化疗药组比较有显著统计学意义(P <0. 01)。喜树碱对KG1α细胞的抑制作用明显,并随着时间增加而增强;在含药血清的作用下,抑制效果进一步增强。结论:中药益气养阴方含药血清可增加KG1α细胞对化疗药的敏感性,增加细胞生长的抑制率。 展开更多
关键词 益气养阴方 血清药理学 KG1α细胞 细胞增殖 阿糖胞苷 喜树碱 紫杉醇 体外实验
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白杨素衍生物的合成及体外抗弓形虫活性研究
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作者 尚凡凡 金澜 +2 位作者 张海滨 朴莲荀 全哲山 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2574-2580,共7页
设计并合成了18个未见报道的白杨素类衍生物,采用噻唑蓝(MTT)比色法对所有化合物进行体外抗弓形虫活性测定,其化学结构均经过1H NMR,13C NMR以及HRMS的联合确证.结果显示,7-甲氧基-8-(N,N-双(二乙羟基)-磺酰胺基)-白杨素(D2)的选择性指... 设计并合成了18个未见报道的白杨素类衍生物,采用噻唑蓝(MTT)比色法对所有化合物进行体外抗弓形虫活性测定,其化学结构均经过1H NMR,13C NMR以及HRMS的联合确证.结果显示,7-甲氧基-8-(N,N-双(二乙羟基)-磺酰胺基)-白杨素(D2)的选择性指数为1.76,其抗弓形虫活性明显强于先导化合物白杨素及阳性对照药磺胺嘧啶,具有深入的研究价值. 展开更多
关键词 白杨素类衍生物 合成 抗弓形虫活性 体外 选择性指数
乳腺癌组织miRNAs的异常表达及犀黄丸对体外乳腺癌细胞候选miRNAs的表达影响
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作者 许涛 李萍 +3 位作者 庞国莲 易帆 曾召琼 谢小兵 《中国医师杂志》 CAS 2019年第7期979-983,共5页
目的研究乳腺癌组织中差异性表达的miRNAs以及犀黄丸提取液对体外乳腺癌细胞系候选miRNAs的表达影响。方法采用miRNAs表达谱芯片检测石蜡包埋(FFPE)乳腺癌组织、癌旁组织以及不同分子分型的癌组织之间的miRNAs差异性表达谱,非监督聚类... 目的研究乳腺癌组织中差异性表达的miRNAs以及犀黄丸提取液对体外乳腺癌细胞系候选miRNAs的表达影响。方法采用miRNAs表达谱芯片检测石蜡包埋(FFPE)乳腺癌组织、癌旁组织以及不同分子分型的癌组织之间的miRNAs差异性表达谱,非监督聚类分析软件分析芯片结果;利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测106例乳腺癌组织、22例癌旁组织以及66例乳腺良性病变组织候选miRNAs的表达水平;犀黄丸提取液干预乳腺癌T-47D细胞及MDA-MB-231细胞,采用qPCR技术检测细胞中候选miRNAs的表达水平。结果 miRNAs表达谱芯片结果显示与癌旁组织相比,miR-130b在乳腺癌组织中呈现高表达(P <0. 05),miR-205在恶性程度更高的Basal-like型癌组织中表达显著低于Luminal型(P <0. 05);qPCR结果显示miR-130b在癌组织和癌旁组织中的表达均显著高于良性病变组织(t=6. 123,P=0. 000;t=-2. 073,P=0. 041),miR-205在癌组织中表达水平显著低于良性病变组织(t=-3. 375,P=0. 001);体外细胞实验显示,犀黄丸提取液干预后,miR-130b在T-47D细胞中表达降低(t=4. 341,P=0. 012),而miR-205在MDA-MB-231细胞中表达升高(t=-3. 266,P=0. 031)。结论 miR-130b的升高和miR-205的降低与乳腺癌的发生发展相关;miR-130b的升高和miR-205的降低可能是犀黄丸发挥抗癌作用途径之一。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 微RNAS 犀黄丸 肿瘤细胞 培养的 体外研究
体外法研究五株酵母菌对牛瘤胃代谢的复合效应 预览
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作者 赵亚军 裴彩霞 +2 位作者 刘强 钞瑞敏 陈婧 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期106-112,共7页
[目的]本文旨在研究高精料条件下,产朊假丝酵母(Candida utilis,I)、酿酒酵母A(Saccharomyces cerevisiae A,Ⅱ)、酿酒酵母B(Saccharomyces cerevisiae B,Ⅲ)、酿酒酵母C(Saccharomyces cerevisiae C,Ⅳ)和热带假丝酵母(Candida tropica... [目的]本文旨在研究高精料条件下,产朊假丝酵母(Candida utilis,I)、酿酒酵母A(Saccharomyces cerevisiae A,Ⅱ)、酿酒酵母B(Saccharomyces cerevisiae B,Ⅲ)、酿酒酵母C(Saccharomyces cerevisiae C,Ⅳ)和热带假丝酵母(Candida tropicalis,V)等5株酵母菌及其不同组合对牛瘤胃代谢影响,确定酵母菌之间的复合效应并筛选出优良的酵母菌组合。[方法]通过体外发酵技术,研究并分析5株酵母菌及其组合在添加量为1×108 CFU·30mL-1活菌数发酵液时,对牛瘤胃微生物体外发酵参数的影响。[结果]试验结果显示,不同酵母菌对瘤胃发酵的影响不同。在维持瘤胃内环境稳态方面,Ⅱ与Ⅳ和V存在复合效应,Ⅱ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅴ组合较各单一菌株均可显著提高发酵液pH值(P<0.05),降低发酵液总产气量(P<0.05);Ⅲ和Ⅳ、Ⅳ和V在降低氨氮(NH3-N)浓度方面存在复合效应。在调节瘤胃发酵模式方面,Ⅱ、Ⅲ和V以及Ⅱ、Ⅳ和V之间存在复合效应,乙酸比例及乙丙比均显著低于组内各单一及2株组合菌,丙酸比例均显著高于组内各单一及2株组合菌(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在戊酸形成方面存在复合效应,戊酸比例极显著高于组内各单一及2株组合菌(P<0.01)。[结论]在高精料条件下,Ⅱ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅴ、Ⅲ+Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ、I+Ⅲ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅲ+Ⅴ、Ⅱ+Ⅳ+Ⅴ菌株组合间存在复合效应。其中,Ⅱ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅴ组合在维持瘤胃pH值、稳定瘤胃内环境方面效果显著,是该条件下较为优良的酵母组合。 展开更多
关键词 体外法 瘤胃发酵 酵母 复合效应
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依折麦布与瑞舒伐他汀对平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1 mRNA表达的影响
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作者 李佳 申晓彧 《中国医师杂志》 CAS 2019年第4期513-515,520共4页
目的研究依折麦布联合瑞舒伐他汀对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1(Caveolin-1)mRNA表达的影响。方法将大鼠胸主动脉VSMCs分为9个组,分别为空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3、10、30μmol... 目的研究依折麦布联合瑞舒伐他汀对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1(Caveolin-1)mRNA表达的影响。方法将大鼠胸主动脉VSMCs分为9个组,分别为空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3、10、30μmol/L)、不同浓度的瑞舒伐他汀组(0.1、1.0、5.0μmol/L)、联合组(依折麦布30μmol/L+瑞舒伐他汀5.0μmol/L),油红O染色鉴定泡沫细胞模型,real-time PCR检测各组细胞Caveolin-1 mRNA表达。结果与空白对照组相比,泡沫细胞组Caveolin-1 mRNA表达降低[(0. 248 7±0. 042 0) vs (1. 004 1±0. 017 1)],差异有统计学意义(P<0.05);与泡沫细胞组相比,不同浓度的依折麦布组[(0.371 3±0.025 2)、(0.489 8±0. 027 9)、(0. 726 1±0. 029 1)]及瑞舒伐他汀组[(0. 460 2±0. 022 8)、(0. 623 7±0.028 8)、(0.751 8±0.043 1)]Caveolin-1 mRNA表达增加,各组间差异有统计学意义(P <0.05),且呈一定浓度依赖性(P<0. 05);且联合组(0. 937 6±0. 029 7)与单药组比较,Caveolin-1 mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论依折麦布及瑞舒伐他汀均促进平滑肌源性泡沫细胞中胆固醇的逆向转运(RCT),此过程可能通过上调Caveolin-1 mRNA的表达实现;且两者联合此作用更显著。 展开更多
关键词 依折麦布 瑞舒伐他汀钙 平滑 血管 窖蛋白1 体外研究
索拉菲尼抑制肿瘤细胞PKM2蛋白表达 预览
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作者 次旦旺久 林坤 +2 位作者 卢再鸣 赵相轩 王晓明 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第22期3973-3976,共4页
目的:探讨索拉菲尼对肿瘤细胞中PKM2蛋白表达的影响。方法:以人肝癌细胞HepG2、人胆管癌细胞QBC939、人肺癌细胞NCI-H446、人宫颈癌细胞Hela为研究对象,体外培养上述肿瘤细胞;光镜下观察不同肿瘤细胞经不同浓度索拉菲尼处理后细胞形态... 目的:探讨索拉菲尼对肿瘤细胞中PKM2蛋白表达的影响。方法:以人肝癌细胞HepG2、人胆管癌细胞QBC939、人肺癌细胞NCI-H446、人宫颈癌细胞Hela为研究对象,体外培养上述肿瘤细胞;光镜下观察不同肿瘤细胞经不同浓度索拉菲尼处理后细胞形态学改变;CCK-8法检测索拉菲尼对上述肿瘤细胞增殖的影响。用Western blot检测索拉菲尼对上述细胞的PKM2表达变化。结果:光镜下观察可见随着索拉菲尼浓度的增加,肿瘤细胞离巢、凋亡,并且随着浓度的增加而增加。细胞增殖实验可见,索拉菲尼显著抑制HepG2、QBC939、NCI-H446、Hela细胞的增殖,不同浓度(2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L、20.0μmol/L)的索拉菲尼处理上述细胞48 h后,各药物处理组与对照组比较(P均<0.01),呈剂量效应关系;索拉菲尼处理上述肿瘤细胞48 h的IC50分别为10.61μmol/L、13.88μmol/L、15.66μmol/L、12.86μmol/L。Western blot检测结果显示,不同浓度的索拉非尼显著抑制HepG2、QBC939、NCI-H446、Hela细胞的PKM2的蛋白表达,并且表达与浓度呈剂量关系。蛋白表达半定量分析可见,各肿瘤细胞经过索拉菲尼处理后与对照组比较,蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:索拉菲尼能抑制人多种肿瘤细胞增殖并显著抑制PKM2蛋白表达。 展开更多
关键词 索拉菲尼 肿瘤细胞 体外实验
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长链非编码RNA LINC01204上调GPC5基因表达对膀胱癌恶性生物学行为的影响
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作者 张建东 李建文 +1 位作者 赵志平 张雁钢 《中国医师杂志》 CAS 2019年第5期700-704,共5页
目的探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、... 目的探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、J82、5637和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中LINC01204的表达量。以表达量最低的膀胱癌细胞为转染对象,用携带LINC01204的慢病毒颗粒转染细胞(观察组)和阴性对照慢病毒颗粒转染细胞(对照组),qRT-PCR检测两组细胞中LINC01204和GPC5 mRNA表达量。Western blot检测两组细胞中GPC5蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell小室实验分别测定细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果膀胱癌组织中LINC01204表达量(0.773±0.063)明显低于癌旁组织(3.665±0.330),差异有统计学意义(t=8.612,P<0.001)。膀胱癌细胞株BIU-87(0.320±0.034)、T24(0.515±0.056)、J82(0.644±0.039)、5637(0.147±0.018)中LINC01204表达水平均低于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1(1.009±0.077),差异均有统计学意义(t=8.160,P<0.001;t=5.179,P=0.002;t=4.221,P=0.006;t=10.890,P<0.001),5637细胞表达量最低。观察组5637细胞中LINC01204表达量(11.000±1.028)明显高于对照组(1.019±0.119),差异均有统计学意义(t=9.651,P<0.001)。观察组GPC5 mRNA表达量(4.476±0.347)明显高于对照组(1.046±0.163),差异均有统计学意义(t=8.962,P<0.001)。Western blot结果显示,观察组5637细胞中GPC5蛋白表达上调。与对照组相比,观察组转染LINC01204后的5637细胞从第3天(0.686±0.044 vs 0.536±0.026,t=2.943,P=0.026)开始增殖能力明显降低。观察组5637细胞迁移数[(118.300±16.260)个]明显低于对照组[(208.200±22.930)个],差异均有统计学意义(t=3.198,P=0.019)。观察组5637细胞侵袭数[(50.390±5.368)个]明显低于对照组[(97.480±15.350)个],差异均有统计学意义(t=2.896,P=0.028)。结论 LINC01204可上调GPC5基因的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移� 展开更多
关键词 RNA 长链非编码 磷脂酰肌醇蛋白聚糖类 膀胱肿瘤 细胞增殖 细胞迁移分析 体外研究
冬凌草甲素对肝癌细胞增殖的抑制作用及其对E-cadherin、Vimentin表达的影响 预览
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作者 史国军 叶兴涛 +3 位作者 屠小龙 施航 董晶 陆宁 《中国中医药科技》 CAS 2019年第4期526-529,共4页
目的:观察冬凌草甲素对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖抑制作用并探讨其作用机制。方法:采用不同浓度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)... 目的:观察冬凌草甲素对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖抑制作用并探讨其作用机制。方法:采用不同浓度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、波形蛋白(Vimentin)的表达。荧光定量PCR检测上游基因mRNA的表达。结果:MTT法检测结果显示不同浓度的冬凌草甲素可抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性。免疫组化法显示,人肝癌SMMC-7721细胞的E-cad蛋白随冬凌草甲素浓度增加而表达增加,Vimentin蛋白随药物浓度增加而表达下降。荧光定量PCR结果显示,冬凌草甲素可上调人肝癌细胞E-cad上游基因mRNA的表达,抑制Vimentin上游基因mRNA的表达。结论:冬凌草甲素能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,其机制与上调E-cad蛋白及mRNA的表达,降低Vimentin蛋白及mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 肝肿瘤 上皮细胞间充质转化 E-钙黏蛋白 波形蛋白 体外实验
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衢枳壳黄酮组分抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的作用机制研究 预览
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作者 徐霄 汪洋 +2 位作者 王思为 钟松阳 楼丽君 《中国中医药科技》 CAS 2019年第4期529-532,共4页
目的:研究衢枳壳黄酮组分(the flavonoids from Quzhiqiao,TFQ)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264. 7细胞的抗炎作用机制。方法:LPS(1 mg·L^-1)诱导RAW264. 7细胞建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓... 目的:研究衢枳壳黄酮组分(the flavonoids from Quzhiqiao,TFQ)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264. 7细胞的抗炎作用机制。方法:LPS(1 mg·L^-1)诱导RAW264. 7细胞建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度TFQ对RAW264.7细胞活性的影响,RT-PCR法检测细胞炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β) mRNA表达情况,Western blot法和免疫荧光法分别检测细胞核因子-κB(NF-κB p65)表达情况和入核情况。结果:TFQ在10~100 mg·L^-1时,对RAW264. 7细胞活性无影响。RT-PCR结果表明,TFQ能够降低LPS诱导的RAW264. 7细胞炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β表达,以TFQ 100 mg·L^-1作用显著(P <0. 05);Western blot法和免疫荧光结果表明,TFQ能够显著抑制p65蛋白表达与入核。结论:TFQ具有抑制LPS诱导的RAW264. 7细胞炎症反应的作用,其机制可能与抑制p65活化减少炎性因子表达有关。 展开更多
关键词 衢枳壳 黄酮组分 RAW264.7 炎性因子 NF-κB 体外实验
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某污染场地土壤重金属生物可给性及其对修复目标的影响研究 预览
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作者 张玉 熊杰 +2 位作者 唐翠梅 庄相宁 裴宇 《中国氯碱》 CAS 2019年第6期41-47,共7页
采用体外实验方法(in vitro)对中国西南部某遗留污染场地土壤中重金属进行了生物可给性(BA)测定,分析基于BA结果修正的土壤修复目标。结果表明:砷(As)、铅(Pb)、铜(Cu)、镍(Ni)等4种重金属在模拟胃液和小肠液中的溶解态浓度远小于土壤... 采用体外实验方法(in vitro)对中国西南部某遗留污染场地土壤中重金属进行了生物可给性(BA)测定,分析基于BA结果修正的土壤修复目标。结果表明:砷(As)、铅(Pb)、铜(Cu)、镍(Ni)等4种重金属在模拟胃液和小肠液中的溶解态浓度远小于土壤中的重金属总量,即土壤中的重金属不能完全被人体吸收;As和Pb在胃阶段的生物可给性高于小肠阶段,而Cu和Ni在胃阶段的生物可给性低于小肠阶段;影响重金属生物可给性的因素主要有土壤pH值、w(Fe)、w(Mn)和重金属总量。并运用试验测定的生物可给性因子对As、Cu、Ni的修复目标值进行了修正,在避免对人体造成危害的同时,使场地内待修复的Cu污染土壤方量减少了100%,Ni污染土壤方量减少了31%,节约了修复成本,避免了过度修复。 展开更多
关键词 污染场地 in VITRO 重金属 生物可给性 土壤修复目标
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苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白对膀胱癌迁移能力的影响及机制研究
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作者 庞昆 陈波 +4 位作者 郝林 史振铎 周荣升 臧光辉 韩从辉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期184-188,共5页
目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能... 目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能力,并用Western blot分别检测两种肿瘤细胞加入MAP30后基质金属蛋白酶(MMPs)和黏附分子N-cadherin等蛋白的表达。结果细胞划痕迁移实验:5637细胞加药组和对照组在8 h和22 h迁移率比较差异均有统计学意义(P<0.05),T24细胞加药组和对照组间8 h迁移率差异无统计学意义(P>0.05),在22 h迁移率差异有统计学意义(P<0.05)。MAP30干预后,人膀胱癌5637细胞和T24细胞中Vimentin、Fibronectin、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin蛋白的表达明显降低。人膀胱癌5637细胞E-Cadherin表达降低,但人膀胱癌T24细胞未检测到目的条带。结论苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白MAP30通过抑制上皮-间质细胞转化(EMT)途径和抑制MMPs表达,可以有效抑制人膀胱癌5637和T24细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 核糖体失活蛋白质类 1型 膀胱肿瘤 细胞迁移分析 上皮细胞-间质转化 体外研究
银杏抗菌肽蛋白基因原核表达及其重组蛋白的体内外抑菌作用研究 预览
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作者 刘蕾 何光志 王文佳 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第18期2513-2518,共6页
目的:获取银杏抗菌肽(GBA)重组蛋白,并考察其体内外抗菌活性,为解决病原菌耐药问题、规模化生产植物源性新型抗菌剂提供实验基础。方法:根据Genebank中公布的GBA基因序列(FJ865399),利用基因技术构建重组质粒pET32a(+)-GBA,再以大肠杆... 目的:获取银杏抗菌肽(GBA)重组蛋白,并考察其体内外抗菌活性,为解决病原菌耐药问题、规模化生产植物源性新型抗菌剂提供实验基础。方法:根据Genebank中公布的GBA基因序列(FJ865399),利用基因技术构建重组质粒pET32a(+)-GBA,再以大肠杆菌原核表达获取重组蛋白,并采用凝胶电泳和Western blotting法对所得蛋白进行纯化及鉴定。采用纸片扩散法考察所获重组蛋白对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、鼠伤寒沙门氏菌的药物敏感度;采用肉汤稀释法测定重组蛋白最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);考察重组蛋白对金黄色葡萄球菌感染模型小鼠的保护作用。结果:成功表达并纯化获得目标重组蛋白(大小约32 kDa)。该重组蛋白对金黄色葡萄球菌中度敏感,对其他3种细菌低度敏感;对金黄色葡萄球菌的MIC为(50.00±5.00)mg/mL、MBC为(138.33±12.58)mg/mL,MIC显著高于其他3种细菌(P<0.05)。高剂量重组蛋白(8.0 g/kg)能显著降低金黄色葡萄球菌导致的小鼠死亡率(P<0.05),对小鼠的保护效果与阳性药物青霉素接近。结论:所获重组蛋白对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显,对大肠杆菌和绿脓杆菌有一定的抑制作用,对鼠伤寒沙门氏菌抑制作用较弱;该蛋白高剂量给药对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 银杏 抗菌肽 载体质粒 重组蛋白 原核表达 抑菌作用 体内 体外 小鼠
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阿霉素通过两种方式诱导乳腺癌耐药细胞株的比较研究
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作者 李晓玲 张莉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期194-196,共3页
目的通过两种不同方式诱导乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADM),比较两种诱导方式的生物学特性。方法以乳腺癌MCF-7细胞株为亲本细胞,采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法分别诱导乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2;显微镜下观察细... 目的通过两种不同方式诱导乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADM),比较两种诱导方式的生物学特性。方法以乳腺癌MCF-7细胞株为亲本细胞,采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法分别诱导乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2;显微镜下观察细胞形态,MTT法检测不同浓度ADM对MCF-7、MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2的抑制率,计算耐药指数(RI);绘制生长曲线,计算细胞倍增时间(Td);经不同浓度阿霉素(ADM)冻存后检测RI变化;流式细胞仪检测细胞周期。结果采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法成功诱导了乳腺癌耐药细胞株,且对紫杉醇和顺铂产生了交叉耐药性;MCF-7/ADM1的RI高于MCF-7/ADM2(P<0.05);三种细胞株Td分别为:24.01、34.04、32.71 h。两种耐药细胞株冻存后RI变化不明显(P>0.05)。与亲本细胞比较,耐药细胞株S、G2/M期细胞减少,G0/G1期细胞增多。结论两种方式均可诱导耐药细胞株,且其耐药性相对稳定,并可对紫杉醇及顺铂产生交叉耐药,但其生物学特性有所差异,有待进一步研究其耐药机制及逆转靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 抗药性 多柔比星 体外研究
鸡球虫体外培养模型研究进展 预览
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作者 吴彩艳 戚南山 +6 位作者 李娟 吕敏娜 林栩慧 胡俊菁 于林增 廖申权 孙铭飞 《动物医学进展》 北大核心 2019年第11期91-95,共5页
鸡球虫病对养鸡业危害十分严重,由于抗球虫药物的使用甚至滥用,鸡球虫的抗药性日趋广泛而严峻。为了研究鸡球虫入侵机制以及快速高通量筛选抗球虫制剂的需要,鸡球虫的体外培养技术从20世纪70年代初至今已历经近50年,研究取得了一定的进... 鸡球虫病对养鸡业危害十分严重,由于抗球虫药物的使用甚至滥用,鸡球虫的抗药性日趋广泛而严峻。为了研究鸡球虫入侵机制以及快速高通量筛选抗球虫制剂的需要,鸡球虫的体外培养技术从20世纪70年代初至今已历经近50年,研究取得了一定的进展,逐步形成了一整套比较完备的体外培养技术体系。论文主要就鸡球虫的原代细胞培养模型、传代细胞培养模型和鸡胚培养模型在建立和应用方面进行详细阐述,为研究鸡球虫相关工作提供参考。 展开更多
关键词 鸡球虫 体外 培养模型
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鲑鱼降钙素对磨损颗粒诱导后人巨噬细胞RANK/RANKL/OPG骨溶解通路的影响
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作者 冷屹 胡懿郃 +3 位作者 曾敏 汪龙 李明清 谢杰 《中国医师杂志》 CAS 2019年第1期64-68,共5页
目的通过检测经磨损颗粒刺激诱导后的人巨噬细胞在鲑鱼降钙素干预下骨溶解信号通路中核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)的mRNA表达,探讨鲑鱼降钙素对人巨噬细胞骨溶解通路的影响。方法从一例... 目的通过检测经磨损颗粒刺激诱导后的人巨噬细胞在鲑鱼降钙素干预下骨溶解信号通路中核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)的mRNA表达,探讨鲑鱼降钙素对人巨噬细胞骨溶解通路的影响。方法从一例髋关节假体松动患者的髋臼侧假体周围界膜组织中提取聚乙烯磨损颗粒,MTT法测出人巨噬细胞对聚乙烯磨损颗粒(浓度为0.1 mg/ml)的最佳反应细胞浓度并用于实验。用磨损颗粒刺激人的巨噬细胞,并用不同药物浓度的鲑鱼降钙素干预,将磨损颗粒及巨噬细胞随机分成五组,每组六份:A组为对照组;B组为颗粒组;C组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-8mol/L)组;D组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-10mol/L)组;E组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-12 mol/L)组,共同培养48 h后,qPCR方法检测巨噬细胞RANK、RANKL、OPG的mRNA表达。结果(1)RANK表达:颗粒刺激后B组较A组表达升高,鲑鱼降钙素干预后,C、D组RANK表达量下降。(2)RANKL表达:颗粒刺激后B钮表达较A组升高,药物干预后C、D、E组皆明显低于B组。(3)OPG表达:A组表达最高,颗粒刺激后B组表达下降,药物干预后C、D、E组表达有所上升。(4)RANKL/OPG:B组的RANKIJOPG比率最大,药物干预后,C、D、E组比率皆下降。结论(1)磨损颗粒刺激诱导前后的人巨噬细胞有RANK、RANKL、OPG表达;(2)磨损颗粒有诱导巨噬细胞向破骨细胞转化的作用;(3)鲑鱼降钙素干预后,可影响骨溶解通路各因子(RANK/RANKL/OPG)mRNA表达,阻止向破骨细胞转化。 展开更多
关键词 降钙素 巨噬细胞 核因子ΚB受体活化因子 RANK配体 骨保护素 骨质溶解 体外研究
长链非编码RNA AL136359.1通过上调AKR1B10的表达对胆管癌细胞增殖和迁移的影响
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作者 蔡民 许浏 +1 位作者 沈兰 张杰 《中国医师杂志》 CAS 2019年第4期532-535,共4页
目的检测AL136359.1在胆管癌组织及细胞中的表达改变,分析其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测8例胆管癌组织和4种胆管癌细胞株(QBC939、RBE、HCCC-9810和TFK-1)中AL136359.1的表达。在表达最低的胆管... 目的检测AL136359.1在胆管癌组织及细胞中的表达改变,分析其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测8例胆管癌组织和4种胆管癌细胞株(QBC939、RBE、HCCC-9810和TFK-1)中AL136359.1的表达。在表达最低的胆管癌细胞株转染携带AL136359. 1的质粒增加AL136359. 1的表达,qRT-PCR验证转染效率。qRT-PCR和Western blot检测醛酮还原酶1B10(AKR1B10)mRNA和蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验检测AL136359. 1高表达对胆管癌细胞增殖能力和迁移能力的影响。结果 AL136359. 1在胆管癌组织的表达(0. 41±0. 05)明显低于癌旁组织(2. 94±0. 44,P<0. 01),在胆管癌细胞株的表达明显低于人正常胆管上皮细胞(P<0. 01),在QBC939细胞的表达最低(P <0. 01)。AL136359. 1高表达可引起AKR1B10 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)。AL136359. 1高表达可明显抑制胆管癌细胞的增殖能力和迁移能力(P <0.01)。结论 AL136359.1在胆管癌组织和细胞株中表达减少,AL136359. 1高表达可上调AKR1B10基因的表达,参与抑制胆管癌QBC939细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 RNA 长链非编码 细胞增殖 细胞迁移 体外研究
全蝎白术蛴螬混合发酵品体内外抗RSV病毒的作用研究
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作者 张瑞 李佳怿 +5 位作者 毛会秀 刘金虎 杨培 王集会 刘玉红 田洪波 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1070-1073,共4页
目的研究全蝎白术蛴螬混合发酵品(SAHHFP)体内外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的药理作用。方法将SAHHFP用不同极性的溶剂、不同的提取方式提取,分别得到不同的极性部位,用MTT法进行体外抗RSV病毒实验,通过比较抗病毒治疗指数TI来确定最佳提取... 目的研究全蝎白术蛴螬混合发酵品(SAHHFP)体内外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的药理作用。方法将SAHHFP用不同极性的溶剂、不同的提取方式提取,分别得到不同的极性部位,用MTT法进行体外抗RSV病毒实验,通过比较抗病毒治疗指数TI来确定最佳提取方法;体内抗RSV病毒实验,用RSV病毒感染小鼠模型,通过计算胸腺指数、肺指数、酶联免疫试剂盒检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、一氧化氮(NO)三种细胞因子的含量等来观察体内抗病毒效果。结果体外抗病毒方面,SAHHFP 50%超声醇提液抗病毒效果最好;体内抗病毒方面,SAHHFP高中低三个剂量的肺指数抑制率以及三种细胞因子的含量均高于模型组。结论 SAHHFP 50%超声醇提液对RSV病毒在体外和体内都有较好的抑制作用,且和模型组相比,具有显著性差异。 展开更多
关键词 发酵全蝎白术蛴螬 呼吸道合胞病毒 体内 体外 抗病毒
金丝草化学成分及其体外抗HBV活性 预览
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作者 王慧娜 尹志峰 +2 位作者 尹鑫 李洪波 赵桂琴 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1308-1312,共5页
目的研究金丝草Pogonatherum crinitum(Thunb.) Kunth的化学成分及其体外抗HBV活性。方法金丝草70%乙醇提取物正丁醇部位采用大孔树脂、硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。H... 目的研究金丝草Pogonatherum crinitum(Thunb.) Kunth的化学成分及其体外抗HBV活性。方法金丝草70%乙醇提取物正丁醇部位采用大孔树脂、硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。HepG2.2.15细胞模型检测体外抗HBV活性。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为5-羟基-4′-甲氧基黄酮-7-O-芸香糖苷(1)、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基呫吨酮(2)、芹菜素-7-O-β-D-(6″-E-p-香豆酰基)-葡萄糖苷(3)、大豆素-7,4′-二-O-葡萄糖苷(4)、5,7,3′-三羟基-4′-甲氧基黄酮-3-O-芸香糖苷(5)、N-乙酰苯丙氨酸(6)、焦谷氨酸甲酯(7)、杜鹃花酸(8)。化合物6对HepG2.2.15细胞分泌表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg)有一定的抑制作用,IC50分别为55.5、69.5μg/mL。结论所有化合物均为首次从金发草属植物中分离得到。化合物6有一定的体外抗HBV活性。 展开更多
关键词 金丝草 化学成分 分离鉴定 生物活性 体外
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