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灯盏乙素对Chang Liver细胞中CYP2C9的影响 预览
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作者 丁未尧 陈丽平 赖泳 《大理大学学报》 CAS 2019年第2期5-9,共5页
目的:探讨灯盏乙素对Chang Liver细胞中CYP2C9表达的影响。方法:采用MTT(噻唑蓝)法检测灯盏乙素对Chang Liver细胞增殖活力的影响,采用RT-PCR和Western-blot法分别检测细胞中CYP2C9 mRNA和蛋白的相对表达量。结果:灯盏乙素对Chang Live... 目的:探讨灯盏乙素对Chang Liver细胞中CYP2C9表达的影响。方法:采用MTT(噻唑蓝)法检测灯盏乙素对Chang Liver细胞增殖活力的影响,采用RT-PCR和Western-blot法分别检测细胞中CYP2C9 mRNA和蛋白的相对表达量。结果:灯盏乙素对Chang Liver细胞增殖有抑制作用,呈浓度依赖性,半数抑制率(IC50)为1.87 mmol/L。RT-PCR结果表明,与DMSO(二甲基亚砜)组比,药物浓度为5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L时,细胞CYP2C9 mRNA表达量显著下降(P<0.05)。Western-blot结果表明,与DMSO组比较,药物浓度为20.0、40.0 μmol/L时细胞CYP2C9 蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:灯盏乙素对Chang Liver细胞中CYP2C9 mRNA和蛋白的表达有不同程度的抑制作用。 展开更多
关键词 灯盏乙素 CYP2C9 MRNA表达 蛋白表达 CHANG Liver细胞
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虫草头孢提取物Fr.8组分对HepG-2胰岛素抵抗的改善作用 预览
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作者 韩一凤 耿燕 +4 位作者 孟照敏 杜妍 许泓瑜 史劲松 许正宏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期111-117,共7页
为探讨虫草头孢正己烷分离组分Fr.8对高胰岛素诱导的HepG-2细胞胰岛素抵抗的改善作用,作者建立了稳定的胰岛素抵抗细胞模型,并检测了Fr.8组分对胰岛素抵抗细胞(HepG-2/IR)的葡萄糖消耗、葡萄糖摄取及相关基因转录和蛋白质表达的影响。... 为探讨虫草头孢正己烷分离组分Fr.8对高胰岛素诱导的HepG-2细胞胰岛素抵抗的改善作用,作者建立了稳定的胰岛素抵抗细胞模型,并检测了Fr.8组分对胰岛素抵抗细胞(HepG-2/IR)的葡萄糖消耗、葡萄糖摄取及相关基因转录和蛋白质表达的影响。结果显示,5μmol/L胰岛素是诱导细胞成为HepG-2/IR的最佳作用浓度;Fr.8组分在无细胞毒性范围内可显著增加HepG-2/IR对葡萄糖的消耗及摄取;Fr.8(>25μg/mL)可明显上调IR、IRS1、IRS2、Glut2、AMPKαmRNA的表达水平,并上调IR、IRS、Glut2、p-AMPKα、p-AKT蛋白质的表达。研究表明,虫草头孢Fr.8可改善HepG-2胰岛素抵抗,其机制可能与胰岛素受体及底物、葡萄糖转运蛋白2、p-AMPKα和p-AKT蛋白的激活有关。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 HEPG-2细胞 虫草头孢 mRNA表达 蛋白质表达
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河川沙塘鳢GHR和IGF-2基因克隆及mRNA的时序表达 预览
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作者 朱文旭 张宏叶 +5 位作者 王涛 王丹 张红燕 尹绍武 陈树桥 周国勤 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2019年第4期421-433,共13页
生长激素/胰岛素样生长因子-轴(growth hormone/insulin-like growth-axis,GH/IGF-轴)是调控鱼类生长的主要内分泌轴线。为探讨生长相关基因GHR、IGF-2对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)生长发育的调控机制,采用cDNA末端快速扩增(R... 生长激素/胰岛素样生长因子-轴(growth hormone/insulin-like growth-axis,GH/IGF-轴)是调控鱼类生长的主要内分泌轴线。为探讨生长相关基因GHR、IGF-2对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)生长发育的调控机制,采用cDNA末端快速扩增(RACE)和实时荧光定量PCR等技术,对河川沙塘鳢的GHR、IGF-2基因进行了克隆和表达模式分析。研究结果显示:河川沙塘鳢GHR基因的cDNA全长序列为2 179 bp,开放阅读框为1 830 bp,共编码609个氨基酸,IGF-2基因的cDNA全长序列为1 586 bp,开放阅读框642 bp,共编码213个氨基酸。采用qRT-PCR方法检测了GHR、IGF-2基因在9个不同组织(脑、肝、心、肌肉、脾、肠、性腺、鳃、肾)和8个胚胎不同发育时期(受精卵期、桑椹胚期、原肠胚期、神经胚期、体节期、口裂期、出膜后1 d、出膜后3 d)的表达情况。结果表明:IGF-2和GHR基因在所检测的9种组织中均有表达,其中以肝脏、肌肉、性腺、脑中的表达量较高,在胚胎发育阶段GHR和IGF-2基因表达呈先上升后下降的趋势,在原肠胚期表达量较高,表明其在胚胎发育过程中发挥重要作用。qRT-PCR进一步比较了雌、雄河川沙塘鳢GHR和IGF-2基因在不同生长发育阶段(90、150、210、270、330 d)脑、肝、肌肉mRNA的表达量,结果表明:各时期雄鱼GHR和IGF-2基因在肝组织中表达量均显著高于雌鱼,肌肉和脑GHR基因mRNA的表达量则无显著差异。而IGF-2基因则仅在雌、雄鱼210 d的脑和150、210 d的肌肉存在显著性差异,推测肝GHR和IGF-2基因mRNA表达的雌雄差异是河川沙塘鳢雌雄生长差异的主要原因之一。 展开更多
关键词 河川沙塘鳢 GHR IGF-2 基因克隆 MRNA表达量
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多疣壁虎胚胎发育过程中角蛋白的表达分析 预览
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作者 陈铭月 王飞飞 +2 位作者 李鹏 严洁 周开亚 《南京师大学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期99-104,共6页
角蛋白包括α角蛋白和β角蛋白两种类型.迄今α角蛋白被发现存在于所有的脊椎动物中,而β角蛋白仅存在于鸟类和爬行类表皮及其附属物中.本研究通过同源搜索比对鉴定了多疣壁虎(Gekko japonicus)的 1个β角蛋白基因: G.japonicus claw ke... 角蛋白包括α角蛋白和β角蛋白两种类型.迄今α角蛋白被发现存在于所有的脊椎动物中,而β角蛋白仅存在于鸟类和爬行类表皮及其附属物中.本研究通过同源搜索比对鉴定了多疣壁虎(Gekko japonicus)的 1个β角蛋白基因: G.japonicus claw keratin-like(LOC107121854),暂命名为 ge-gprp-13 ,和1个α角蛋白基因: G.japonicus keratinocyte associated protein 2(KRTCAP2),暂命名为 ge-krtcap 2 .利用荧光定量PCR方法比较分析了多疣壁虎 ge-gprp-13和ge-krtcap 2 基因在其胚胎发育过程中的mRNA表达模式.研究结果表明,在多疣壁虎胚胎发育的不同时期,α角蛋白基因( ge-krtcap 2 )和β角蛋白基因(ge-gprp-13)的表达模式不同:在趾部发育的初期,α角蛋白基因先表达,而β角蛋白基因主要在趾部发育的后期进行表达,并且在趾部形成的整个过程中,β角蛋白基因的表达量远远高于α角蛋白基因的表达量. 展开更多
关键词 多疣壁虎 α角蛋白 β角蛋白 MRNA表达
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MITF在白色北极狐不同组织器官中的差异表达
5
作者 李寒妹 葛丛丛 +3 位作者 王国森 王子贤 刘铮铸 巩元芳 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第11期151-153,157共4页
为了探索小眼畸形相关转录因子(MITF)基因与狐狸毛色形成间的关系,试验采用实时荧光定量PCR技术,对MITF基因在白色北极狐皮肤、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉7个组织器官中的表达量进行了测定。结果表明:MITF基因在皮肤中表达量最... 为了探索小眼畸形相关转录因子(MITF)基因与狐狸毛色形成间的关系,试验采用实时荧光定量PCR技术,对MITF基因在白色北极狐皮肤、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉7个组织器官中的表达量进行了测定。结果表明:MITF基因在皮肤中表达量最高,其表达水平分别是心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和肌肉的19.5倍、3.2倍、1.8倍、5.3倍、9.7倍和31.0倍,差异达极显著水平(P<0.01)。推测MITF基因可能与白色北极狐的白色毛皮形成有密切联系。 展开更多
关键词 白色北极狐 小眼畸形相关转录因子 MRNA 实时荧光定量PCR 表达
冬虫夏草对氧化损伤小鼠抗氧化作用研究 预览
6
作者 罗胜勇 栗原博 +2 位作者 乐智勇 于留荣 曹晖 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第13期63-67,共5页
研究冬虫夏草对氧化损伤模型小鼠体内抗氧化能力的影响及作用机制。将60只小鼠随机分为空白组、模型组、维生素E阳性组、冬虫夏草高、中、低组,采用D-半乳糖连续背部注射建立小鼠氧化损伤模型。连续给各受试样品4周后,测定小鼠血清及肝... 研究冬虫夏草对氧化损伤模型小鼠体内抗氧化能力的影响及作用机制。将60只小鼠随机分为空白组、模型组、维生素E阳性组、冬虫夏草高、中、低组,采用D-半乳糖连续背部注射建立小鼠氧化损伤模型。连续给各受试样品4周后,测定小鼠血清及肝、脑组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、蛋白羰基、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性及总抗氧化能力(total antioxidant activity,T-AOC);实时定量聚合酶链式反应法测定小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px mRNA表达水平。与模型组比较,冬虫夏草可明显降低小鼠血清中MDA、蛋白羰基含量,升高血清中GSH含量及SOD、GSH-Px、T-AOC活性;明显降低小鼠肝脏及脑组织中MDA含量,升高SOD、GSH-Px活性;明显升高小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px mRNA表达水平。冬虫夏草能明显提高氧化损伤小鼠的体内抗氧化能力,其机制可能与调节抗氧化酶基因表达有关。 展开更多
关键词 冬虫夏草 D-半乳糖 抗氧化 MRNA表达
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CYP3A65及上游核受体基因PXR和AHR2在斑马鱼生长发育阶段的表达 预览
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作者 祁美娟 石美智 +5 位作者 张婧娴 陈君君 张湘奇 杨姣 郭澄 韩永龙 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1416-1422,共7页
为了选择处于最佳生长阶段的斑马鱼用于药物代谢研究,本实验考察不同生长阶段斑马鱼全鱼、肝脏和肠道组织中CYP3A65及其上游核受体基因(PXR、AHR2)mRNA表达水平的变化规律。实验测定CYP3A65、PXR和AHR2相对表达量,并通过比较核受体基因... 为了选择处于最佳生长阶段的斑马鱼用于药物代谢研究,本实验考察不同生长阶段斑马鱼全鱼、肝脏和肠道组织中CYP3A65及其上游核受体基因(PXR、AHR2)mRNA表达水平的变化规律。实验测定CYP3A65、PXR和AHR2相对表达量,并通过比较核受体基因与代谢酶基因mRNA之间的相关性来证实核受体基因的调控作用。结果显示,144 hpf和75 dpf两个生长阶段的斑马鱼中CYP3A65、PXR和AHR2 mRNA表达量最高;斑马鱼生长阶段中代谢酶基因和核受体基因的表达趋势一致,且受肝脏、肠道组织占全鱼比重的影响。研究表明,幼鱼期144 hpf斑马鱼及稚鱼期75 dpf的斑马鱼最适用于CYP3A65代谢研究;CYP3A65与PXR、CYP3A65与AHR2的mRNA表达之间有显著的相关性,与AHR2的相关性更显著。 展开更多
关键词 斑马鱼 CYP3A65 PXR AHR2 MRNA表达 发育阶段
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斑马鱼E3泛素连接酶基因的生物信息学分析和mRNA表达 预览
8
作者 李宝钧 王伟伟 安丽霞 《畜牧与饲料科学》 2019年第8期12-16,共5页
[目的]对斑马鱼E3泛素连接酶基因进行生物信息学分析,并研究其mRNA表达情况。[方法]利用生物信息学方法分析斑马鱼E3泛素连接酶基因的cDNA序列、蛋白质二级结构、结构域、氨基酸序列同源性,并构建进化树;利用整胚原位杂交技术研究目的... [目的]对斑马鱼E3泛素连接酶基因进行生物信息学分析,并研究其mRNA表达情况。[方法]利用生物信息学方法分析斑马鱼E3泛素连接酶基因的cDNA序列、蛋白质二级结构、结构域、氨基酸序列同源性,并构建进化树;利用整胚原位杂交技术研究目的基因在斑马鱼体内的mRNA表达模式。[结果]在NCBI基因库中找出TRIM54、TRIM55a、TRIM55b、TRIM63a、TRIM63b和TRIM101 6个斑马鱼E3泛素连接酶基因。这些基因之间有较高的同源性,二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,编码的蛋白质均含有3个保守结构域:环锌指、B-box锌指和卷曲螺旋。进化树分析显示,所有基因聚为4组:各物种TRIM54基因聚为一组;各物种TRIM55基因聚为一组,但靠近于斑马鱼TRIM101基因分支;TRIM63基因分为一组。整胚原位杂交结果显示,这些TRIM基因的mRNA均在受精后24 h的斑马鱼的肌节中表达,且TRIM55a、TRIM63a和TRIM101基因表达量较高。这些TRIM基因在肌肉发育和肌肉功能中可能发挥作用。[结论]斑马鱼的6个E3泛素连接酶基因有较高的保守性,其mRNA特异性表达于肌节部位。结果对深入研究这些基因在鱼类肌肉中的作用和指导鱼类生产具有一定的意义。 展开更多
关键词 斑马鱼 E3泛素连接酶 生物信息学 MRNA表达
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氟对斑马鱼甲状腺内分泌功能的干扰效应 被引量:1
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作者 郭文静 王天玉 +5 位作者 薛文娟 王国栋 贺鑫晋 吴盼红 陈剑杰 曹谨玲 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1340-1347,共8页
为探究氟对斑马鱼甲状腺内分泌功能的干扰效应,本研究以雌性斑马鱼成鱼为研究对象,分别以不同浓度氟(0、20、 40、80 mg·L-1)暴露45 d和90 d,对斑马鱼的生长发育指数进行测定,用组织学方法对斑马鱼甲状腺组织结构进行显微观察,用... 为探究氟对斑马鱼甲状腺内分泌功能的干扰效应,本研究以雌性斑马鱼成鱼为研究对象,分别以不同浓度氟(0、20、 40、80 mg·L-1)暴露45 d和90 d,对斑马鱼的生长发育指数进行测定,用组织学方法对斑马鱼甲状腺组织结构进行显微观察,用酶联免疫吸附法检测血浆中T3和T4激素水平,并用实时荧光定量PCR方法检测HPT轴上内分泌相关基因的表达.结果显示,与对照组相比,氟暴露组雌性斑马鱼的生长发育指数随着暴露浓度和时间的增加而呈下降趋势(p<0.05);甲状腺组织病变程度随着氟暴露浓度的增大和时间的延长而加重;氟暴露45 d时,T3和T4水平呈升高趋势,90 d时,T4水平呈下降趋势且在80 mg·L-1组下降显著(p<0.05);氟暴露45 d时,40 mg·L-1组除crh处,其他mRNA表达均显著下降(p<0.05),80 mg·L-1组除tg、nis、ttr外其他mRNA表达均显著下降(p<0.05);暴露90 d时tg、dio1、dio2的mRNA表达水平在40 mg·L-1和80 mg·L-1组显著上升(p<0.05),ugt1ab mRNA表达在80 mg·L-1组显著下降(p<0.05).综上,氟可通过影响雌性斑马鱼的生长发育、甲状腺组织结构、激素水平及HPT轴上内分泌相关基因的表达,从而对其甲状腺内分泌功能产生一定程度的干扰,进而影响机体的生长发育.本研究结果对水环境中氟的生态毒性效应及风险评估提供了理论资料. 展开更多
关键词 氟化钠 雌性斑马鱼 甲状腺 激素水平 MRNA表达
大鼠肝癌细胞Mael、Ddx4 mRNA及蛋白的表达及意义 预览
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作者 古丽米热·依米提 王延蛟 斯坎德尔·白克力 《山东医药》 CAS 2019年第11期53-55,共3页
目的 检测大鼠肝癌细胞中蛋白质漩涡同系物基因(Mael)和生殖细胞特异性蛋白4(Ddx4)的表达变化,探讨Mael和Ddx4基因在肝癌发病中的意义。方法 将大鼠肝癌细胞CBRH-7919作为肝癌细胞组,正常肝细胞BRL作为正常肝细胞组,采用qRT-PCR法检测M... 目的 检测大鼠肝癌细胞中蛋白质漩涡同系物基因(Mael)和生殖细胞特异性蛋白4(Ddx4)的表达变化,探讨Mael和Ddx4基因在肝癌发病中的意义。方法 将大鼠肝癌细胞CBRH-7919作为肝癌细胞组,正常肝细胞BRL作为正常肝细胞组,采用qRT-PCR法检测Mael、Ddx4基因mRNA表达,采用Westernblotting法检测Mael、Ddx4蛋白表达。结果 肝癌细胞组Mael、Ddx4mRNA及蛋白表达均高于正常肝细胞组(P均<0.01)。结论 大鼠肝癌细胞中Mael、Ddx4基因和蛋白表达均明显增高。 展开更多
关键词 蛋白质漩涡同系物 生殖细胞特异性蛋白 肝癌 MRNA转录 蛋白表达 大鼠
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蚤状溞caspase-3基因在不同环境条件下的表达分析 预览
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作者 吴乐乐 叶功照 +1 位作者 童巧琼 王丹丽 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期29-34,共6页
以蚤状溞(Daphniapulex)为研究对象,采用Real-TimePCR技术分析了蚤状溞caspase-3mRNA表达水平随着不同培养温度、种群密度和食物种类变化;用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC测定了Caspase-3酶活在不同培养温度、种群密度和食物种类条... 以蚤状溞(Daphniapulex)为研究对象,采用Real-TimePCR技术分析了蚤状溞caspase-3mRNA表达水平随着不同培养温度、种群密度和食物种类变化;用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC测定了Caspase-3酶活在不同培养温度、种群密度和食物种类条件下的变化,并通过整体原位杂交检测了caspase-3基因在蚤状溞不同生殖状态下的定位表达。研究结果:蚤状溞caspase-3mRNA表达量随着温度和种群密度的增加而增加;以Banta培养液培养的蚤状溞caspase-3mRNA表达量与小球藻培养的表达量无显著差异(P>0.05);且caspase-3mRNA的表达量与Caspase-3酶活的变化规律相一致;整体原位杂交结果显示,caspase-3基因在蚤状溞活体细胞几乎都有表达,在两性溞中表达量较高,孤雌成溞中表达量较低。caspase-3基因的表达与环境有关,而蚤状溞的衰老和caspase-3mRNA的表达及Caspase-3的酶活有关,但环境因子如何影响caspase-3基因的表达进而调控枝角类生殖转换还需今后进一步的研究。 展开更多
关键词 蚤状溞 CASPASE-3基因 MRNA表达 酶活 原位杂交
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囊型包虫病患者Th9细胞相关因子mRNA表达特点研究 预览
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作者 陈媛 庞楠楠 +5 位作者 赵骁 赵慧 安梦婷 闫芳 张峰波 丁剑冰 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第8期908-912,共5页
目的通过检测囊型包虫病患者外周血中白细胞介素(IL)-9、嘌呤盒1(PU.1)和干扰素调节因子-4(IRF-4)和IL-4mRNA表达水平,初步探讨Th9细胞相关因子在细粒棘球蚴感染后机体免疫应答中所起的可能作用。方法收集已确诊为囊型包虫病未接受治疗... 目的通过检测囊型包虫病患者外周血中白细胞介素(IL)-9、嘌呤盒1(PU.1)和干扰素调节因子-4(IRF-4)和IL-4mRNA表达水平,初步探讨Th9细胞相关因子在细粒棘球蚴感染后机体免疫应答中所起的可能作用。方法收集已确诊为囊型包虫病未接受治疗的患者33例作为CE组、经过外科手术和阿苯达唑药物治疗成功的33例CE患者作为治疗后组(PCE组)、30例年龄和性别与患者匹配的健康对照组作为HC组,应用实时荧光定量PCR技术检测各组外周血中IL-9、PU.1、IRF-4和IL-4 mRNA表达水平,并进行统计学分析。结果CE组PU.1、IL-9的表达水平明显高于HC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PU.1在CE组的表达水平明显高于PCE组,差异有统计学意义(P<0.05),IL-9在CE组的表达水平稍高于PCE组,差异无统计学意义(P>0.05)。同时,PU.1、IL-9在PCE组和HC组的表达差异无统计学意义(P>0.05);IRF-4在CE组和PCE组的表达较HC组稍高,而且IRF-4在CE组、HC组、PCE组的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);IL-4在CE组的表达水平明显高于HC组和PCE组,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-9与PU.1、IL-4之间存在明显的正相关(P<0.05),与IRF-4之间无相关性(P>0.05)。结论Th9细胞相关因子IL-9、PU.1、IL-4可能参与了细粒棘球蚴感染过程中的免疫应答和调控机制。 展开更多
关键词 囊型包虫病 TH9细胞 MRNA表达 感染免疫
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重金属胁迫下河蚬内脏中GST mRNA表达及酶活性分析 预览 被引量:1
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作者 郑双艳 刘清 +1 位作者 张霞丽 谢彦海 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期369-375,共7页
采用RACE技术克隆河蚬(Corbicula fluminea)谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因全长序列,利用DNAMAN6.0软件序列进行比对,Smart分析保守域和功能位点,SignalIP4.0预测分析该基因信号肽,MEGA5.0绘制系统进化树,利用... 采用RACE技术克隆河蚬(Corbicula fluminea)谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因全长序列,利用DNAMAN6.0软件序列进行比对,Smart分析保守域和功能位点,SignalIP4.0预测分析该基因信号肽,MEGA5.0绘制系统进化树,利用荧光定量PCR和酶活性技术检测Cd^2+、Cu^2+和Pb^2+胁迫后GST在河蚬肝胰腺中的表达特征,为河蚬内脏GSTmRNA和酶生物标志物评价指标的建立提供参考。结果表明,GST基因全长952bp(GenBank登录号:KX211963),编码一个由217个氨基酸组成的多肽,理论等电点PI为5.98,分子量为25.169kD。氨基酸序列中含有GST基因家族特有的GST-N结构域和GST-C结构域,系统进化分析表明,河蚬GST基因与菲律宾帘蛤(Rudiraps philippinarum)同源性最高,为90.32%。重金属胁迫结果显示:GSTmRNA表达量和酶活性均高于相同时间点的对照组,并随着胁迫时间的延长呈先升高后降低趋势,每个实验组峰值出现时间略有差异,且峰值结果均显著高于相应的对照组(P<0.05)。Cd2+胁迫后GSTmRNA表达和酶活性峰值均出现在24h,且mRNA在48h的表达量也显著高于对照组(P<0.05);Cu^2+胁迫后GSTmRNA表达峰值和酶活性峰值分别出现在12h和48h,且在24h胁迫组酶活性也显著高于对照组(P<0.05);Pb^2+胁迫后GSTmRNA表达和酶活性峰值均出现在48h,且24h的mRNA表达量也显著高于对照组(P<0.05)。综上,河蚬GST对重金属刺激敏感,说明河蚬内脏中GST可以作为水体环境重金属污染的指示分子。 展开更多
关键词 河蚬 GST 重金属 MRNA表达 酶活性
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鸡YAP1基因在不同生长发育时期卵泡中的时空表达分析
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作者 张峰玮 秦宁 +3 位作者 孙雪 牛小天 刘德会 徐日福 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期71-76,共6页
为探讨YAP1基因在鸡卵泡生长发育中的调控作用,以150 d海兰褐蛋鸡为供试材料,采用相对定量RT-PCR方法对YAP1基因在鸡卵巢组织不同发育时期卵泡中的mRNA转录水平进行检测分析,并用免疫组织化学方法对YAP1蛋白质分子在鸡前等级卵泡中的时... 为探讨YAP1基因在鸡卵泡生长发育中的调控作用,以150 d海兰褐蛋鸡为供试材料,采用相对定量RT-PCR方法对YAP1基因在鸡卵巢组织不同发育时期卵泡中的mRNA转录水平进行检测分析,并用免疫组织化学方法对YAP1蛋白质分子在鸡前等级卵泡中的时空表达模式进行蛋白定位分析。结果表明:鸡YAP1基因mRNA在卵巢间质、前等级卵泡和不同等级化的卵泡中均有表达,但在不同等级的卵泡中表达差异不显著(P>0.05),呈现出组成型表达的特点。鸡YAP1蛋白质分子主要在卵巢间质组织、前等级卵泡卵母细胞和颗粒细胞中有表达,但在膜层细胞中未检测到其表达信号。此结果表明,YAP1分子可能主要以自分泌或旁分泌的方式在前等级卵泡的生长发育过程中发挥着重要调节作用。 展开更多
关键词 YAP1基因 MRNA表达 免疫组织化学方法 卵泡发育
BCAR3、SCEL及LIFR mRNA在帕金森病患者血清胞外囊泡中异常表达 预览
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作者 刘郁 张静静 +1 位作者 吕荣祥 王文盛 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2019年第2期127-131,共5页
目的对比分析帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者和健康个体血清胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)中差异表达的mRNA。方法收集2016年1-2017年12月于我院就诊的PD患者22例,健康对照个体16例,收集所有受试者血清并提取EVs,透射... 目的对比分析帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者和健康个体血清胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)中差异表达的mRNA。方法收集2016年1-2017年12月于我院就诊的PD患者22例,健康对照个体16例,收集所有受试者血清并提取EVs,透射电子显微镜观察其形态。采用表达谱芯片分析PD患者和健康对照个体血清EVs间差异表达的mRNA,qRT-PCR对显著差异表达的mRNA进行验证。结果透射电子显微镜下可见直径约30~100nm的囊泡。囊泡中46个mRNA在健康个体和PD患者血清EVs中存在显著差异(P<0.01),其中26个mRNA在PD患者血清EVs中表达上调,20个mRNA表达水平下调。经qRT-PCR证实,BCAR3、SCEL、KLHK12、GIPR、DZANK1持续上调(P<0.05),LIFR、ANKRD53和TMEM100持续下调(P<0.05),其中BCAR3、SCEL及LIFR在PD患者血清EVs中表达水平和去EVs的血清中表达水平存在显著差异(P<0.01)。结论与健康对照个体相比,BCAR3、SCEL在PD患者血清EVs中表达水平显著上调,LIFR表达水平显著下调,且3个基因特异性地存在于PD患者血清EVs中。 展开更多
关键词 胞外囊泡 MRNA 帕金森病 差异表达
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东北七鳃鳗TRAF6基因克隆、表达分析及亚细胞定位研究 预览
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作者 丁少青 周泽斌 +5 位作者 王雅倩 罗鑫 何缘圆 任建峰 李伟明 张庆华 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期9-16,共8页
为研究TRAF6在TLR信号介导的先天免疫中的调控作用,研究通过克隆技术获得了东北七鳃鳗(Lethenteron morii)TRAF6基因的cDNA全长,命名为LmTRAF6。利用实时荧光定量方法(qPCR)分析了LmTRAF6在幼鱼和成鱼中各组织的表达情况以及在铜绿假单... 为研究TRAF6在TLR信号介导的先天免疫中的调控作用,研究通过克隆技术获得了东北七鳃鳗(Lethenteron morii)TRAF6基因的cDNA全长,命名为LmTRAF6。利用实时荧光定量方法(qPCR)分析了LmTRAF6在幼鱼和成鱼中各组织的表达情况以及在铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)感染后脂肪体、鳃、肠和肾组织在不同时间点的表达量变化。利用双酶切技术构建pEGFP-TRAF6重组质粒并转染HEK293T细胞,48h后进行荧光观察并拍照。结果表明,LmTRAF6的cDNA全长为2751 bp,开放阅读框(ORF)为1785 bp,编码594个氨基酸。其蛋白结构域高度保守,具有RING结构、两个锌指结构、环-环(Coiledcoil)α螺旋结构域和MATH结构域。通过系统进化树分析,发现LmTRAF6与哺乳类以及鱼类TRAF6的亲缘关系较近,与果蝇、中国对虾TRAF6的亲缘关系较远。qPCR结果显示,LmTRAF6在各组织中均有表达,在幼鱼的心脏、皮肤、鳃、肝中的表达量相对较高,而在肠中表达量相对较低。在成鱼的肾、鳃、肌肉中的表达量相对较高,而在心脏中表达量相对较低。成鱼LmTRAF6在铜绿假单胞菌感染后,鳃、肠和肾的表达量在24h达到峰值。细胞定位显示,LmTRAF6在HEK293T的细胞质和细胞核中均有表达。以上结果为进一步探究七鳃鳗中TRAF6在TLR信号通路中的作用奠定了理论基础。 展开更多
关键词 东北七鳃鳗 TRAF6基因 铜绿假单胞菌 基因克隆 mRNA表达 细胞定位
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低鱼粉饲料添加枯草芽孢杆菌对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼生长、消化酶活性、抗氧化酶活性及其mRNA表达的影响 预览
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作者 李军亮 杨奇慧 +4 位作者 谭北平 董晓慧 迟淑艳 刘泓宇 章双 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1126-1137,共12页
为探究低鱼粉饲料添加枯草芽孢杆菌对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼生长、消化酶活性、抗氧化酶活性及其mRNA表达水平的影响,实验以720尾初始均重为(7.00±0.02)g的珍珠龙胆石斑鱼幼鱼为研究对象,分为8个处理,每个处理3个重复,设计1个正常鱼... 为探究低鱼粉饲料添加枯草芽孢杆菌对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼生长、消化酶活性、抗氧化酶活性及其mRNA表达水平的影响,实验以720尾初始均重为(7.00±0.02)g的珍珠龙胆石斑鱼幼鱼为研究对象,分为8个处理,每个处理3个重复,设计1个正常鱼粉对照组(鱼粉含量35%),1个低鱼粉对照组(鱼粉含量15%)。投喂不同添加比例0(正常鱼粉对照组)、0(低鱼粉对照组)、0.10%、0.25%、0.50%、0.75%、1.00%和1.25%枯草芽孢杆菌的饲料,养殖期8周。结果显示,低鱼粉条件下,添加不同比例枯草芽孢杆菌对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼的成活率无显著影响。增重率与特定生长率随添加量的变化呈先上升后下降趋势,但均显著高于低鱼粉对照组,低于正常鱼粉对照组;当添加0.75%枯草芽孢杆菌时,饲料系数最低,其他各组显著低于低鱼粉组,高于正常鱼粉组,而蛋白质效率的变化规律则与饲料系数相反。随枯草芽孢杆菌添加量的增加,肠蛋白酶、淀粉酶活性先升高后降低。血清过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性,在添加0.75%枯草芽孢杆菌的饲料组达到最大值。肝脏过氧化氢酶mRNA相对表达水平在添加量为0.50%达到最大值,谷胱甘肽还原酶mRNA表达水平在枯草芽孢杆菌添加量为0.75%时达到最大值。通过哈维氏弧菌攻毒实验7 d,珍珠龙胆石斑鱼存活率随枯草芽孢杆菌添加量的增加显著升高。以增重率为判断依据,根据折线模型得出,低鱼粉条件下(豆粕替代配方中20%鱼粉),饲料中添加0.63%枯草芽孢杆菌(1.0×108 cfu/mL)可显著促进珍珠龙胆石斑鱼幼鱼的生长,提高抗病力、消化酶、血清过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性及其mRNA表达水平。 展开更多
关键词 珍珠龙胆石斑鱼 枯草芽孢杆菌 生长 酶活性 MRNA表达
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中华鳖Foxl2基因克隆及外源性激素对其表达的影响 预览
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作者 高丽丽 刁晓明 +2 位作者 李云 翟旭亮 周春龙 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期45-51,共7页
外源性激素在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性别决定有重要作用,为给中华鳖性别决定机制研究提供生物学信息,首次克隆和分析了中华鳖Foxl2cDNA部分序列。为研究其在遗传和生理水平的差异,以10mg/kg剂量17α-甲基睾酮(MT)和17β-雌二醇(E2... 外源性激素在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性别决定有重要作用,为给中华鳖性别决定机制研究提供生物学信息,首次克隆和分析了中华鳖Foxl2cDNA部分序列。为研究其在遗传和生理水平的差异,以10mg/kg剂量17α-甲基睾酮(MT)和17β-雌二醇(E2)分别对中华鳖雌雄个体注射,检测0、6h、12h、24h、48h、7d和14d性腺Foxl2mRNA表达水平。获得中华鳖Foxl2基因(GenBank登录号:KP734210)部分cDNA长903bp,共编码300个氨基酸,属于叉头框转录因子家族,参与卵巢发育和功能维持;多重序列比对显示,Foxl2具有典型的FH结构域,与红耳龟的同源性最高,达到99%;系统进化树分析显示,中华鳖Foxl2基因与爬行动物Foxl2基因聚为一个亚支,且与西部锦龟Foxl2基因距离最近。荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,注射E2后24h,卵巢Foxl2mRNA表达水平被极显著上调(P<0.001),7d和14d后,精巢Foxl2mRNA表达水平极显著上升(P<0.001);注射MT后24h,精巢和卵巢Foxl2mRNA的表达水平均极显著升高(P<0.001)。结果表明,E2和MT促进Foxl2表达,E2促进其表达的性别差异比MT明显。研究可为了解Foxl2的功能及明确外源性激素调控中华鳖Foxl2的分子机制提供基础资料。 展开更多
关键词 中华鳖 Foxl2基因 雌二醇 甲基睾酮 MRNA表达
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重金属镉在鲫鱼鳃组织中的积累及其对P-糖蛋白基因表达的影响 预览
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作者 师玲 刘晓宇 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第19期221-225,共5页
以鲫鱼(Carassius auratus)为试验材料,研究了在2.12、4.23、8.46 mg/L不同浓度镉(CdCl2·2.5H2O)的胁迫下,Cd在鲫鱼鯉组织96 h内的富集量及其对P-糖蛋白(P-glycopmtein,P-gp)活性和mRNA表达的影响。结果表明,不同Cd浓度和时间处理... 以鲫鱼(Carassius auratus)为试验材料,研究了在2.12、4.23、8.46 mg/L不同浓度镉(CdCl2·2.5H2O)的胁迫下,Cd在鲫鱼鯉组织96 h内的富集量及其对P-糖蛋白(P-glycopmtein,P-gp)活性和mRNA表达的影响。结果表明,不同Cd浓度和时间处理均对鲫鱼腮内的Cd富集量、P-gp的活性变化及基因表达量有明显影响。暴露于2.12 mg/L Cd后,Cd的富集量在48 h达到最大值,之后有所降低并趋于稳定;暴露于4.23,8.46 mg/L Cd后,Cd的富集量随着处理时间的延长明显升高,呈明显的时间依赖关系。在Cd的胁迫下,鲫鱼鯉组织中P-gp的活性以及mRNA的表达显著升高(P<0.05),且在不同Cd浓度处理下,P-gp活性和mRNA的表达均在72 h达到最大。研究表明P-gp在鲫鱼自身抗Cd机制中发挥了作用,可较敏感地反映水环境中重金属Cd浓度或含量。 展开更多
关键词 鲫鱼 P-糖蛋白 活性 MRNA表达
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MAPK1基因多态性及mRNA表达与缺血性脑卒中神经功能缺损程度的相关分析 预览
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作者 陈昭霞 龙建雄 +5 位作者 郭晓婧 黄焦 杨佳磊 朱路路 吴旭龙 苏莉 《内科》 2019年第2期125-128,141共5页
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)基因rs6928、rs13515、rs1063311多态性及MAPK1基因mRNA表达与缺血性脑卒中(IS)患者神经功能缺损严重程度的相关性。方法采用MassarraySNP基因分型技术对MAPK1基因的rs6928、rs13515、rs1063311多态... 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)基因rs6928、rs13515、rs1063311多态性及MAPK1基因mRNA表达与缺血性脑卒中(IS)患者神经功能缺损严重程度的相关性。方法采用MassarraySNP基因分型技术对MAPK1基因的rs6928、rs13515、rs1063311多态性进行基因分型,运用qRT-PCR实验技术测定MAPK1基因mRNA表达水平,使用NIHSS量表对IS患者进行神经功能缺损评分。结果校正性别、年龄之后,在加性模型、隐性模型中,rs6928多态性与IS患者NIHSS评分具有相关性(P<0.05)。MAPK1基因mRNA表达水平与IS患者NIHSS评分无相关性(P>0.05)。结论MAPK1基因rs6928多态性可能会影响IS患者神经功能缺损的严重程度。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 MAPK1基因 单核苷酸多态性 MRNA表达 NIHSS评分
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