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microRNA-99b表达调控对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用 预览 被引量:4
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作者 吴维光 孙小丽 +1 位作者 陈勍 林仲秋 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第10期 752-755,共4页
目的:探讨上调microRNA-99b(miR-99b)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。方法:利用转染试剂将Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor转染宫颈癌HeLa细胞,荧光实时定量PCR方法检测miR-99b表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT... 目的:探讨上调microRNA-99b(miR-99b)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。方法:利用转染试剂将Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor转染宫颈癌HeLa细胞,荧光实时定量PCR方法检测miR-99b表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测其靶基因CDC-25A蛋白的表达。结果:转染Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor的HeLa细胞,miR-99b表达增高86.45倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,同时细胞CDC-25A蛋白表达降低。结论:上调miR-99b表达可通过降低靶基因CDC-25A表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,miR-99b可能成为治疗宫颈癌的靶基因。 展开更多
关键词 HELA细胞 mir-99b 增殖 凋亡
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和厚朴酚通过上调miR-99a/b抑制HeLa细胞增殖和侵袭 预览
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作者 徐雅杰 张志强 于鹤 《医学研究杂志》 2018年第11期101-106,共6页
目的 探究和厚朴酚对宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响,并初步探讨相关分子机制.方法 将培养的对数期的人宫颈癌HeLa细胞分为对照组、Scramble组、miR-99a/b mimic组、和厚朴酚高、中、低剂量组.MTT实验用于检测不同干预对HeLa细胞增殖... 目的 探究和厚朴酚对宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响,并初步探讨相关分子机制.方法 将培养的对数期的人宫颈癌HeLa细胞分为对照组、Scramble组、miR-99a/b mimic组、和厚朴酚高、中、低剂量组.MTT实验用于检测不同干预对HeLa细胞增殖的影响,Transwell小室用于测定HeLa的侵袭能力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)用于检测细胞中miR-99a、miR-99b的表达情况,蛋白免疫印迹(WB)检测细胞中cyclin D1、MMP7蛋白表达.结果 和厚朴酚高、中、低剂量组细胞增殖率和侵袭细胞数均明显低于对照组和DMSO溶剂组(P<0.05),并呈剂量依赖性.minic组和厚朴酚高、中、低剂量组miR-99a和miR-99b表达水平明显高于对照组和Scramble组(P<0.05);随着和厚朴酚剂量的增加,HeLa细胞中miR-99a和miR-99b表达水平逐渐升高.和厚朴酚高、中、低剂量组miR-99a和miR-99b表达水平明显高于对照组和Scramble组(P<0.05),且呈剂量依赖性.和厚朴酚高、中、低剂量组HeLa细胞增殖率和侵袭能力明显低于对照组和Scramble组,呈现剂量依赖性.Western blot法检测结果显示,minic组和和厚朴酚高、中、低剂量组cyclin D1和MMP7表达水平明显低于对照组和Scramble组(P<0.05);随着和厚朴酚剂量的增加,HeLa细胞中cyclin D1和MMP7表达水平明显降低.结论 和厚朴酚可能通过上调miR-99a/b表达,进而抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭,为宫颈癌的靶向治疗提供一定的理论依据. 展开更多
关键词 和厚朴酚 宫颈癌 mir-99a mir-99b
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miR-99b通过下调mTOR的表达抑制胃腺癌细胞系SGC-7901的增殖及迁移 被引量:1
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作者 王战豪 潘逼然 +2 位作者 张彤彤 郭元彪 张莉萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期230-234,共5页
目的:探讨hsa-miR-99b在胃腺癌细胞系的表达及其影响胃腺癌细胞系增殖和迁移的潜在作用机制。方法:Real-time PCR检测miR-99b在人胃上皮细胞系GES-1和人胃腺癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MGC-803中的表达。用人工合成的miR-99b模拟物转... 目的:探讨hsa-miR-99b在胃腺癌细胞系的表达及其影响胃腺癌细胞系增殖和迁移的潜在作用机制。方法:Real-time PCR检测miR-99b在人胃上皮细胞系GES-1和人胃腺癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MGC-803中的表达。用人工合成的miR-99b模拟物转染SGC-7901细胞构建过表达miR-996细胞系,转染对照模拟物作为对照组,CCK-8法检测过表达miR-99b的SGC-7901细胞的增殖情况,Transwell法检测SGC-7901细胞系的迁移情况,Western blotting检测SGC-7901细胞系中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)的表达情况。结果:miR-99b在胃腺癌细胞系中的表达水平显著低于胃上皮细胞系,其中以SCG-7901细胞最甚。转染miR-99b模拟物48 h后,实验组SCG-7901细胞增殖能力低于对照组(0.20±0.00 vs 0.27±0.02,P〈0.05);与转染对照模拟物的细胞相比,转染24 h后,实验组SCG-7901穿膜细胞数低于对照组[(226.67±25.17)vs(523.33±25.17)个,P〈0.05]。miR-99b可下调人胃腺癌细胞系SGC-7901中m TOR蛋白的表达。结论:miR-99b在胃腺癌细胞系中的表达明显下调,miR-99b抑制人胃腺癌细胞系SGC-7901增殖和迁移的作用可能与下调m TOR表达有关。 展开更多
关键词 mir-99b 胃腺癌 细胞增殖 细胞迁移 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
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