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低氧训练中过表达血红素加氧酶1促进小鼠骨骼肌线粒体的生物合成 预览
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作者 赵延礼 秦海兰 +2 位作者 崔浩 甘罗曼 司立宁 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第19期2991-2995,共5页
背景:近年对低氧训练机制的研究主要围绕低氧训练对机体血液系统的调节作用展开,但结果具有两面性,提示还有非血液系统调节机制。目的:探讨血红素加氧酶1在低氧训练中对小鼠骨骼肌线粒体含量及生物合成的调节作用。方法:SPF级8周龄雄性... 背景:近年对低氧训练机制的研究主要围绕低氧训练对机体血液系统的调节作用展开,但结果具有两面性,提示还有非血液系统调节机制。目的:探讨血红素加氧酶1在低氧训练中对小鼠骨骼肌线粒体含量及生物合成的调节作用。方法:SPF级8周龄雄性过表达血红素加氧酶1转基因小鼠20只,野生型小鼠20只,由兰州大学医学院提供。2种小鼠分别被随机分为2组(共4组):野生小鼠低氧静息组、野生小鼠低氧训练组、转基因小鼠低氧静息组和转基因小鼠低氧训练组。低氧训练组小鼠在青海大学基础医学研究中心进行跑台运动(速度20 m/min,坡度5°,60 min/d,5 d/周,共4周)。各组小鼠均于末次训练结束3 d后行速度20 m/min,坡度5°持续跑台运动并记录各组小鼠力竭运动时间,电镜检测骨骼肌线粒体数量,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,萤光素酶发光法检测线粒体ATP合成活性,Western blot检测骨骼肌血红素加氧酶1、COX Ⅳ和PGC-1α蛋白表达量。结果与结论:①与野生小鼠低氧静息组相比,野生小鼠低氧训练组和转基因小鼠低氧训练组力竭运动时间增加,线粒体数目略有增多,线粒体膜电位和ATP合成增加,血红素加氧酶1、COX Ⅳ和PGC-1α蛋白表达量增加;②与野生小鼠低氧训练组相比,转基因小鼠低氧训练组力竭运动时间明显增加,线粒体数目显著增多,线粒体膜电位和ATP合成增加,COX Ⅳ和PGC-1α蛋白表达量显著增加;③结果说明,血红素加氧酶1在低氧训练中具有延长小鼠力竭运动时间的作用,其机制可能与增加骨骼肌线粒体数量和生物合成有关。 展开更多
关键词 血红素加氧酶1 低氧训练 骨骼肌 线粒体 膜电位 力竭运动 ATP合成 线粒体膜电位 国家自然科学基金
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内质网与线粒体相互作用在糖尿病心肌病中的作用
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作者 钟祯 张霄旦 李万根 《国际内分泌代谢杂志》 2019年第1期57-60,共4页
糖尿病心肌病一种独立于高血压、冠心病等疾病的特异性心肌病变,是2型糖尿病患者致死的主要原因,但目前糖尿病心肌病的发病机制尚未完全阐明。内质网和线粒体是细胞内重要的细胞器,参与细胞各项生命活动,这两种细胞器间的相互作用与细... 糖尿病心肌病一种独立于高血压、冠心病等疾病的特异性心肌病变,是2型糖尿病患者致死的主要原因,但目前糖尿病心肌病的发病机制尚未完全阐明。内质网和线粒体是细胞内重要的细胞器,参与细胞各项生命活动,这两种细胞器间的相互作用与细胞内各种信号转导密切相关。最近一些研究表明,高糖可致细胞内内质网与线粒体连接松散,相互作用减弱,内质网与线粒体之间相互作用的变化可通过调节内质网应激、细胞缺氧应激、Ca^2+稳态等,参与糖尿病心肌病的发生、发展。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 线粒体 内质网 线粒体结合内质网膜
沉默FoxM1通过促进线粒体释放细胞色素C诱导口腔鳞癌细胞凋亡 预览
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作者 王晓庚 刘林 +2 位作者 左健 张非煜 李若萱 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期430-435,共6页
目的:研究沉默叉头框蛋白M1 (FoxM1)基因对口腔鳞癌细胞凋亡影响及机制。方法:口腔鳞癌SCC9细胞感染FoxM1-shRNA慢病毒或阴性对照慢病毒,用RT-qPCR和Western blot测定沉默效果。MTT法测定细胞活力变化,平板克隆实验测定细胞克隆形成能... 目的:研究沉默叉头框蛋白M1 (FoxM1)基因对口腔鳞癌细胞凋亡影响及机制。方法:口腔鳞癌SCC9细胞感染FoxM1-shRNA慢病毒或阴性对照慢病毒,用RT-qPCR和Western blot测定沉默效果。MTT法测定细胞活力变化,平板克隆实验测定细胞克隆形成能力变化,流式细胞术测定细胞凋亡变化,Western blot测定细胞中cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平变化,JC-1法测定细胞线粒体膜电位变化,Western blot测定细胞线粒体和胞浆中细胞色素C(cytochrome C)蛋白水平的变化。结果:FoxM1-shRNA慢病毒感染成功下调口腔鳞癌细胞中FoxM1的表达(P<0.05),阴性对照慢病毒对细胞中FoxM1表达水平没有影响。沉默FoxM1的口腔鳞癌细胞活力降低(P<0.05),细胞克隆形成能力也降低(P<0.05),细胞凋亡率及cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平均升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05),胞浆中cytochrome C蛋白水平升高(P<0.05),线粒体中cytochrome C蛋白水平降低(P<0.05)。结论:沉默FoxM1可以通过降低口腔鳞癌细胞线粒体膜电位、促进线粒体释放cytochrome C而诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 线粒体 叉头框蛋白M1 细胞凋亡
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基于iTRAQ技术研究采后1-甲基环丙烯和乙烯利处理对茭白线粒体蛋白质组变化的影响 预览
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作者 罗海波 周涛 +5 位作者 孔晓雪 陶明煊 姜丽 王利斌 王韦华 郁志芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期216-225,共10页
为探讨茭白采后衰老的分子机制,应用同位素标记相对与绝对定量蛋白质组学技术研究了茭白常温贮藏期间线粒体蛋白质表达谱的变化及1-甲基环丙烯(1-methyleyelopropene,1-MCP)和乙烯利(ethylene,ET)处理对茭白线粒体蛋白质组变化的影响。... 为探讨茭白采后衰老的分子机制,应用同位素标记相对与绝对定量蛋白质组学技术研究了茭白常温贮藏期间线粒体蛋白质表达谱的变化及1-甲基环丙烯(1-methyleyelopropene,1-MCP)和乙烯利(ethylene,ET)处理对茭白线粒体蛋白质组变化的影响。结果表明:共鉴定到肽段数大于等于2的可信蛋白1908个,与贮藏0d相比,对照(CK)组、ET和1-MCP处理组茭白贮藏3d和6d后,共有315个蛋白表达量变化倍数在2.0倍以上且重复组数据统计学差异显著(P<0.05)。生物信息学分析显示代谢途径、次生代谢产物生物合成、氨基酸生物合成与代谢、核苷酸代谢、含碱基小分子代谢途径等可能与茭白采后衰老有关,三羧酸循环、氧化磷酸化、磷酸戊糖途径、C5支链二元酸代谢及氨基酸代谢途径可能在茭白采后衰老中发挥重要作用。这些差异表达蛋白的生物学功能分析表明,茭白采后碳水化合物水解加速,磷酸戊糖途径加强而糖酵解途径和氧化磷酸化减弱,导致能量合成减少,同时形成氧化胁迫,这可能激活Ca^2+/MAPKs、细胞色素c和茉莉酸等信号途径,造成初级代谢紊乱和次级代谢产物(如木质素)积累,从而促进细胞凋亡或细胞坏死,最终加速衰老。 展开更多
关键词 茭白 线粒体 同位素标记相对与绝对定量 生物信息学 衰老
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恶性肿瘤线粒体丙酮酸代谢障碍研究进展
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作者 马向明 曹立瀛 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期199-204,共6页
目的肿瘤细胞的生物学特征都与线粒体异常的能量代谢作用存在千丝万缕的联系,恢复线粒体内丙酮酸正常代谢途径可达到控制或清除肿瘤的效果。本研究主要探讨丙酮酸在肿瘤细胞线粒体中的代谢情况及其机制的研究,也讨论了以肿瘤细胞的氧化... 目的肿瘤细胞的生物学特征都与线粒体异常的能量代谢作用存在千丝万缕的联系,恢复线粒体内丙酮酸正常代谢途径可达到控制或清除肿瘤的效果。本研究主要探讨丙酮酸在肿瘤细胞线粒体中的代谢情况及其机制的研究,也讨论了以肿瘤细胞的氧化代谢为靶标的新的癌症治疗方法。方法检索PubMed数据库检索系统,以“肿瘤细胞、丙酮酸、线粒体”为关键词,检索2000-01-01-2017-12-31的相关文献。纳入标准:与肿瘤细胞线粒体丙酮酸转运的文献;与肿瘤细胞线粒体内丙酮酸氧化代谢异常相关的文献;与肿瘤细胞线粒体内丙酮酸羧化异常相关的文献。剔除标准:重复性文献;发表时间较久远的文献;机制阐述不明确的文献。根据纳入标准及剔除标准符合分析的文献53篇。结果肿瘤细胞中普遍存在线粒体丙酮酸载体的减少或功能丧失。大多数肿瘤细胞中存在丙酮酸脱氢酶复合体的活性降低导致丙酮酸在线粒体内氧化障碍。丙酮酸羧化酶介导的葡萄糖依赖的回补反应可能是一些肿瘤细胞维持增殖和生长所必须的。丙酮酸代谢是细胞能量代谢的关键,针对癌细胞异常丙酮酸代谢的药物开发应该是可以预见成效的。结论恶性肿瘤的线粒体丙酮酸代谢障碍可以成为很好的靶向药物作用靶点,但面临诸多挑战,还需进一步探索与研究。 展开更多
关键词 丙酮酸 线粒体 代谢 恶性肿瘤
Salvianolic Acid A Protects Neonatal Cardiomyocytes against Hypoxia/Reoxygenation-Induced Injury by Preserving Mitochondrial Function and Activating Akt/GSK-3β Signals
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作者 LI Xue-li FAN Ji-ping +1 位作者 LIU Jian-xun LIANG Li-na 《中国结合医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期23-30,共8页
Objective: To investigate the effects of salvianolic acid A(SAA) on cardiomyocyte apoptosis and mitochondrial dysfunction in response to hypoxia/reoxygenation(H/R) injury and to determine whether the Akt signaling pat... Objective: To investigate the effects of salvianolic acid A(SAA) on cardiomyocyte apoptosis and mitochondrial dysfunction in response to hypoxia/reoxygenation(H/R) injury and to determine whether the Akt signaling pathway might play a role. Methods: An in vitro model of H/R injury was used to study outcomes on primary cultured neonatal rat cardiomyocytes. The cardiomyocytes were treated with 12.5, 25, 50 μg/m L SAA at the beginning of hypoxia and reoxygenation, respectively. Adenosine triphospate(ATP) and reactive oxygen species(ROS) levels were assayed. Cell apoptosis was evaluated by flow cytometry and the expression of cleavedcaspase 3, Bax and Bcl-2 were detected by Western blotting. The effects of SAA on mitochondrial dysfunction were examined by determining the mitochondrial membrane potential(△Ψm) and mitochondrial permeability transition pore(m PTP), followed by the phosphorylation of Akt(p-Akt) and GSK-3β(p-GSK-3β), which were measured by Western blotting. Results: SAA significantly preserved ATP levels and reduced ROS production. Importantly, SAA markedly reduced the number of apoptotic cel s and decreased cleaved-caspase 3 expression levels, while also reducing the ratio of Bax/Bcl-2. Furthermore, SAA prevented the loss of △Ψm and inhibited the activation of m PTP. Western blotting experiments further revealed that SAA significantly increased the expression of p-Akt and p-GSK-3β, and the increase in p-GSK-3β expression was attenuated after inhibition of the Akt signaling pathway with LY294002. Conclusion: SAA has a protective effect on cardiomyocyte H/R injury; the underlying mechanism may be related to the preservation of mitochondrial function and the activation of the Akt/GSK-3β signaling pathway. 展开更多
关键词 salvianolic acid A CARDIOMYOCYTE HYPOXIA/REOXYGENATION INJURY mitochondria Akt/GSK-3β
调气活血养阴方对慢性萎缩性胃炎大鼠壁细胞超微结构的影响
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作者 刘凯歌 苏泽琦 +6 位作者 于春月 李依聪 曹婉琛 张琦 李诺 李健 丁霞 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期289-295,共7页
目的观察调气活血养阴方对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠壁细胞超微结构的影响,从微观角度探索调气活血养阴方延缓或阻断CAG向胃癌转化的机制。方法将26只雄性大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(16只),造模组采用四因素联合法造模,即N-甲基-N... 目的观察调气活血养阴方对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠壁细胞超微结构的影响,从微观角度探索调气活血养阴方延缓或阻断CAG向胃癌转化的机制。方法将26只雄性大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(16只),造模组采用四因素联合法造模,即N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)、雷尼替丁饲料、饥饱失常和水杨酸钠灌胃,造模第26周,正常组和造模组各随机抽检7只大鼠,经胃组织病理染色确认造模组CAG造模成功后,将造模组剩余9只大鼠随机分为模型组、胃复春组和调气活血养阴方组,其中胃复春组以0.432 g/(kg·d)的剂量给予胃复春混悬液灌胃,调气活血养阴方组以1.838 g/(kg·d)的剂量给予调气活血养阴方灌胃治疗12周,正常组和模型组给予相同体积的高温高压灭菌水灌胃。第26周和39周取材,制作胃组织电镜标本,在透射电镜下观察壁细胞的超微结构。结果造模第26周,正常组大鼠壁细胞处于静息状态,造模组壁细胞处于分泌状态,正常组和造模组的线粒体数目差异无统计学意义,线粒体结构也无明显差异。第39周干预后,正常组大鼠线粒体结构异常的比例低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠壁细胞处于分泌静止状态,线粒体数目最少,结构破坏严重。经调气活血养阴方治疗后,壁细胞多处于分泌状态,线粒体数量较模型组增多(P<0.01),结构异常的线粒体数目减少(P<0.01)。结论调气活血养阴方可能通过改善壁细胞超微结构、促进线粒体的能量代谢、调节壁细胞的分泌状态、增强其泌酸功能而起到延缓或阻断CAG进展的作用。 展开更多
关键词 调气活血养阴方 慢性萎缩性胃炎 壁细胞 线粒体 超微结构 大鼠
重症肌无力患者调节性T细胞线粒体自噬状态与其代谢的相关性研究 预览
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作者 阳玉洁 袁江 +6 位作者 彭小倩 曾佩 徐勇 邹利 卢祖能 Md Rezaul Karim 王云甫 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期1-6,共6页
目的探讨外周血调节性T细胞(regulatory T cell,Tregs)线粒体自噬异常参与重症肌无力(myasthenia gravis,MG)发病的细胞代谢机制。方法选择2016年10月至2018年4月作者医院收治的MG患者15例,另选择同期体检的15名健康成年人作为对照组。... 目的探讨外周血调节性T细胞(regulatory T cell,Tregs)线粒体自噬异常参与重症肌无力(myasthenia gravis,MG)发病的细胞代谢机制。方法选择2016年10月至2018年4月作者医院收治的MG患者15例,另选择同期体检的15名健康成年人作为对照组。采用Ficoll密度梯度离心法分离出人外周血单个核细胞(PBMC),选用基于分离柱的人CD4^+CD25^+Tregs分选试剂盒分离得到Tregs,以健康人群的Tregs作为对照组(health control,HCs),将MG患者的Tregs分为MG组、MG经羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)诱导组(MGCCCP)、MG经环孢素(CsA)诱导组(MG-CsA)。采用流式细胞仪检测各组Tregs线粒体质量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、细胞凋亡水平,采用酶标仪检测各组Tregs乳酸水平。结果与对照组比较,MG组线粒体受损比例、细胞凋亡比例、平均ROS水平、乳酸水平升高(P<0.05),ROS正常细胞比例降低(P<0.05);与MG组比较,MG-CCCP组线粒体受损比例、细胞凋亡比例、乳酸水平降低(P<0.05),平均ROS水平、ROS正常细胞比例升高(P<0.05);与MG组比较,MG-CsA组线粒体受损比例、细胞凋亡比例、乳酸水平、平均ROS水平升高(P<0.05),而ROS正常细胞比例降低(P<0.05)。结论MG患者Tregs线粒体质量下降,导致其ROS释放增加,ROS正常细胞比例减少,糖酵解生成的乳酸增多,细胞凋亡增加,CCCP通过促进MG患者Tregs线粒体自噬,可清除部分受损线粒体,缓解代谢压力,减少细胞凋亡,而CsA可通过抑制MG患者Tregs线粒体自噬,加剧代谢紊乱,使细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 重症肌无力 T淋巴细胞 调节 线粒体 自噬 代谢
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Organelle aging:Lessons from model organisms
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作者 Mark Bouska Kerui Huang +1 位作者 Ping Kang Hua Bai 《遗传学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第4期171-185,共15页
Most cellular processes descend into failure during aging. While a large collection of longevity pathways has been identified in the past decades, the mechanism for age-related decline of cellular homeostasis and orga... Most cellular processes descend into failure during aging. While a large collection of longevity pathways has been identified in the past decades, the mechanism for age-related decline of cellular homeostasis and organelle function remains largely unsolved. It is known that many organelles undergo structural and functional changes during normal aging, which significantly contributes to the decline of tissue function at old ages. Since recent studies have revealed an emerging role of organelles as regulatory hubs in maintaining cellular homeostasis, understanding of organelle aging will provide important insights into the cellular basis of organismal aging. Here we review current progress on the characterization of age-dependent structural and functional alterations in the more well-studied organelles, as well as the known mechanisms governing organelle aging in model organisms, with a special focus on the fruit fly Drosophila melanogaster. 展开更多
关键词 LONGEVITY Mitochondria Nucleus AUTOPHAGOSOME LYSOSOME PROTEASOME Cell membrane
冷刺激对小鼠脂肪组织褐色化和脂代谢的影响
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作者 郁苗 陆叶 +3 位作者 汪文敏 宋海昭 徐俐 周林康 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第7期1201-1205,1217共6页
目的:探讨4摄氏度冷刺激对小鼠脂肪组织褐色化的影响。方法:野生型小鼠在4摄氏度环境下饲养一周,称取小鼠重量并取不同的脂肪组织固定,进行H&E染色;对血液中甘油三酯、脂肪酸的水平进行检测;检测不同脂肪组织中脂肪含量和相关蛋白... 目的:探讨4摄氏度冷刺激对小鼠脂肪组织褐色化的影响。方法:野生型小鼠在4摄氏度环境下饲养一周,称取小鼠重量并取不同的脂肪组织固定,进行H&E染色;对血液中甘油三酯、脂肪酸的水平进行检测;检测不同脂肪组织中脂肪含量和相关蛋白的表达水平。结果:野生型小鼠在4℃环境下饲养一周后体重明显降低。血液中甘油三酯、脂肪酸和甘油的水平明显下降。皮下白色脂肪组织(subcutaneous white adipose tissue, SWAT),腹腔生殖腺旁白色脂肪(gonadal visceral white adipose tissue, GWAT)和褐色脂肪(brown adipose tissue, BAT)中的脂肪含量明显降低,其中SWAT和BAT中脂肪含量降低近50%。SWAT发生明显的褐色化现象,组织中出现含有多个脂滴的脂肪细胞,同时褐色化的标志蛋白UCP1(uncoupling protein 1)和Cidea明显增加。GWAT中脂滴仍呈现单室大脂滴,脂肪细胞变小,脂肪积累降低约14%,低于SWAT和BAT中的相应变化。BAT组织中脂滴明显变小,UCP1的表达明显增加。同时我们在三种脂肪组织中都观察到线粒体相关蛋白CPT1 (Carnitine palmitoyltransferase I)的明显增加。结论:冷刺激能明显改变小鼠的脂代谢状态,全身的脂肪积累明显降低。SWAT发生明显的褐色化现象,Cidea和UCP1的表达明显增加。SWAT, GWAT和BAT脂肪组织中有明显的线粒体活性的增加。 展开更多
关键词 冷刺激 脂肪组织 脂肪积累 褐色化 线粒体
槲皮黄酮改善心肌细胞肥大过程中对线粒体功能及动力学的影响 预览
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作者 吴舜 陈明君 周燕 《天津中医药》 CAS 2019年第1期83-86,共4页
[目的]探讨槲皮黄酮对原代心肌细胞肥大、线粒体功能及动力学的影响。[方法]原代培养大鼠心肌细胞,采用血管紧张素II(AngII)及槲皮黄酮共同干预细胞48、72 h 后,BCA 试剂盒检测细胞中蛋白浓度,倒置显微镜分析心肌细胞直径;酶标仪检测心... [目的]探讨槲皮黄酮对原代心肌细胞肥大、线粒体功能及动力学的影响。[方法]原代培养大鼠心肌细胞,采用血管紧张素II(AngII)及槲皮黄酮共同干预细胞48、72 h 后,BCA 试剂盒检测细胞中蛋白浓度,倒置显微镜分析心肌细胞直径;酶标仪检测心肌细胞内三磷酸腺苷(ATP)及活性氧(ROS)含量,JC-1 方法分析心肌细胞线粒体膜电位(MMP);蛋白免疫印迹(Western Blot)方法测定线粒体动力学相关蛋白视神经萎缩蛋白(OPA1)、动力相关蛋白(Drp1)及磷酸化动力相关蛋白1(p-Drp1)表达量。[结果]与空白组比较,模型组心肌细胞中总蛋白浓度、细胞直径大小及ROS 水平显著升高(P<0.05),ATP 和MMP 值则显著降低(P<0.05),Western Blot 结果发现OPA1 蛋白表达水平显著降低(P<0.05),p-Drp1 蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,槲皮黄酮处理72 h 后心肌细胞中总蛋白浓度、细胞直径大小及ROS 水平显著降低(P<0.05),ATP 和MMP 值则显著升高(P<0.05),Western Blot 结果发现OPA1 蛋白表达水平显著增高(P<0.05),p-Drp1 蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。[结论]槲皮黄酮对AngII 引起的心肌细胞肥大具有保护作用,其作用机制可能与降低心肌细胞线粒体功能障碍、稳定线粒体动力学平衡相关。 展开更多
关键词 槲皮黄酮 心肌细胞 肥大 线粒体
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AMPK/PGC-1α信号通路对高压氧诱导的氧化应激反应的调节作用
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作者 卫衍鹏 彭彬 +2 位作者 袁圆 王国华 姜正林 《中华航海医学与高气压医学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期100-103,115共5页
目的通过观察高压氧(hyperbaric oxygen, HBO)对小鼠肝细胞线粒体DNA(Mt-DNA)拷贝数和抗氧化蛋白表达的影响,探讨HBO诱导的氧化应激反应及其机制。方法将28只雄性C57BL/6小鼠按照数字表法随机分成5组:正常对照组(常压空气暴露)、HBO组(0... 目的通过观察高压氧(hyperbaric oxygen, HBO)对小鼠肝细胞线粒体DNA(Mt-DNA)拷贝数和抗氧化蛋白表达的影响,探讨HBO诱导的氧化应激反应及其机制。方法将28只雄性C57BL/6小鼠按照数字表法随机分成5组:正常对照组(常压空气暴露)、HBO组(0.20 MPa)暴露1、5、14、28 d组(HBO 1、5、14、28 d);暴露结束后立即处死并取其肝组织,提取肝组织总DNA及总蛋白后,采用qPCR实验检测Mt-DNA的拷贝数,Western blotting实验检测超氧化物歧化酶2(SOD2)、线粒体转录因子A(TFAM)、解偶联蛋白2(UCP2)和AMPK/PGC-1α信号通路蛋白的表达水平。结果与对照组(1.00±0.19)相比,HBO 1 d组(0.61±0.18)、HBO 5 d组(0.58±0.01)、HBO 14 d组(0.74±0.07)及HBO 28 d组(0.71±0.07)的Mt-DNA拷贝数均明显减少(P<0.05或P<0.01);抗氧化蛋白SOD2、TFAM、UCP2和AMPK/PGC-1α信号通路蛋白的表达均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 AMPK/PGC-1α信号通路通过增加细胞抗氧化能力和减少Mt-DNA的拷贝数调节HBO诱导的氧化应激反应,是机体应对HBO诱导氧化应激的适应机制。 展开更多
关键词 AMPK/PGC-1α信号通路 高压氧 氧化应激 小鼠 肝细胞 线粒体
κ-阿片受体激动剂U50,488H抑制缺血/再灌注心肌线粒体分裂的作用及机制
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作者 王渊博 周亚光 +8 位作者 田心 王旭 张淑苗 冯娜 李娟 王跃民 顾晓明 付锋 裴建明 《心脏杂志》 CAS 2019年第2期125-130,共6页
目的研究外源性κ-阿片受体激动剂U50,488H对缺血/再灌注心肌线粒体分裂的影响及机制。方法将SD大鼠随机分为6组:假手术(Sham)组,心肌缺血/再灌注(MI/R)组,MI/R+κ-阿片受体激动剂U50,488H(MI/R+U)组,MI/R+κ-阿片受体阻断剂nor-BNI+U50... 目的研究外源性κ-阿片受体激动剂U50,488H对缺血/再灌注心肌线粒体分裂的影响及机制。方法将SD大鼠随机分为6组:假手术(Sham)组,心肌缺血/再灌注(MI/R)组,MI/R+κ-阿片受体激动剂U50,488H(MI/R+U)组,MI/R+κ-阿片受体阻断剂nor-BNI+U50,488H(MI/R+N+U)组,MI/R+磷脂酰激醇3-激酶(pi 3-kinases,PI3K)抑制剂wortmannin+U50,488H(MI/R+W+U)组,MI/R+蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)抑制剂MK2206+U50,488H(MI/R+M+U)组。血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)试剂盒检测血清CK水平;三苯基氯化四氮唑(triphenyte-trazoliumchloride,TTC)-伊文氏蓝双染检测心肌梗死面积;Western blot检测细胞内磷酸化PI3K、磷酸化Akt(Ser 473)、磷酸化线粒体动力相关蛋白(dynamin-related protein,Drp)1(Ser 637)的表达;透射电镜观察线粒体形态。结果与Sham组相比,MI/R组血清CK水平明显升高(P<0.01),出现明显的心肌梗死(P<0.01),磷酸化PI3K、磷酸化Akt表达增加(P<0.05),磷酸化Drp1表达降低(P<0.01),线粒体分裂明显增加(P<0.01);与MI/R组相比,MI/R+U组血清CK水平明显降低(P<0.01),心肌梗死面积减小(P<0.01),磷酸化PI3K、磷酸化Akt和磷酸化Drp1的表达显著增加(P<0.01),线粒体分裂减少(P<0.01)。给予nor-BNI、wortmannin或MK2206后,U50,488H的上述作用均被阻断。结论缺血/再灌注可引起心肌损伤和线粒体分裂增加,κ-阿片受体激活后通过PI3K-Akt通路使Drp1磷酸化增加,抑制缺血/再灌注心肌的线粒体分裂,减轻心肌损伤。 展开更多
关键词 心肌缺血/再灌注 Κ-阿片受体 线粒体分裂 Drp1
抑郁大鼠前额叶皮质区AIF、Cyt-c蛋白表达的意义
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作者 耿雪松 王健 《吉林中医药》 2019年第2期228-231,共4页
目的观察慢性不可预见性温和应激联合孤养方式诱导的抑郁模型大鼠前额叶皮质细胞AIF(凋亡诱导因子)和Cty-c(细胞色素C)表达,探讨抑郁大鼠前额叶神经元线粒体凋亡途径凋亡程度与抑郁发作认知功能障碍的关系。方法将24只雄性SD大鼠随机分... 目的观察慢性不可预见性温和应激联合孤养方式诱导的抑郁模型大鼠前额叶皮质细胞AIF(凋亡诱导因子)和Cty-c(细胞色素C)表达,探讨抑郁大鼠前额叶神经元线粒体凋亡途径凋亡程度与抑郁发作认知功能障碍的关系。方法将24只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,采用慢性不可预见性温和应激联合孤养的方法建立抑郁大鼠模型,应用糖水偏好实验、水迷宫实验、矿场实验进行抑郁行为学检测,应用western blot检测AIF及Cyt-c变化程度,通过免疫组化观察抑郁大鼠前额叶AIF、 Cyt-c蛋白表达情况。结果模型组糖水偏好糖水摄入量明显低于对照组(t=2.52,P <0.05),水迷宫潜伏期模型组明显低于对照组(t=3.33,P <0.05),矿场实验模型组运动距离明显低于对照组(t=2.87,P <0.05),模型组AIF(t=-2.565,P <0.05)及Cyt-c(t=-4.134,P <0.05)蛋白表达明显高于对照组,免疫组化观察到前额叶神经细胞AIF及Cyt-c的表达高于对照组。结论抑郁大鼠前额叶神经元线粒体凋亡程度的上调是抑郁发作认知功能障碍的影响因素之一。 展开更多
关键词 抑郁 前额叶 线粒体 凋亡
MFN2调控线粒体动态变化的研究进展 预览
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作者 林晓莹 黄浩峰 +4 位作者 陈浩 李树朋 赵斌 钟望涛 冯杜 《中国医药导报》 CAS 2019年第13期42-45,共4页
线粒体通过自噬清除受损或多余线粒体以维持线粒体稳态。线粒体分裂融合是线粒体自噬的基础,线粒体融合蛋白-2(MFN2)参与调节线粒体分裂融合。MFN2突变会引起线粒体功能障碍,导致腓骨肌萎缩等神经退行性疾病。本文主要综述了近年来MFN2... 线粒体通过自噬清除受损或多余线粒体以维持线粒体稳态。线粒体分裂融合是线粒体自噬的基础,线粒体融合蛋白-2(MFN2)参与调节线粒体分裂融合。MFN2突变会引起线粒体功能障碍,导致腓骨肌萎缩等神经退行性疾病。本文主要综述了近年来MFN2功能及其在线粒体自噬及神经退行性疾病领域所取得的研究进展,旨在为相关领域进一步的研究提供参考。 展开更多
关键词 线粒体融合蛋白-2 线粒体 线粒体自噬 神经退行性疾病
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姜黄素对氧化应激条件下心肌细胞线粒体的保护作用 预览
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作者 廖雪艳 汪克纯 《实用临床医药杂志》 CAS 2019年第3期38-43,共6页
目的 探讨姜黄素对氧化应激条件下心肌细胞线粒体的保护作用。方法 体外培养H9c2心肌细胞,分为正常对照组、过氧化氢(H 2O 2)组、姜黄素组(姜黄素预处理)。除对照组外,其余各组用H 2O 2处理6 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。姜黄素组... 目的 探讨姜黄素对氧化应激条件下心肌细胞线粒体的保护作用。方法 体外培养H9c2心肌细胞,分为正常对照组、过氧化氢(H 2O 2)组、姜黄素组(姜黄素预处理)。除对照组外,其余各组用H 2O 2处理6 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。姜黄素组建模前30 min加入相应浓度的姜黄素。6 h后MTT观察H9c2心肌细胞存活率;分光光度计检测细胞培养液中培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性和线粒体中丙二醛(MDA)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;流式细胞仪检测线粒体膜电位;酶标仪检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量及ATP酶;激光共聚焦观察细胞内活性氧(ROS)和活性氮簇(RNS)的产生;透射电镜观察线粒体的形态结构。结果 姜黄素可以显著提高氧化应激条件下H9c2心肌细胞存活率。与对照组相比,H 2O 2组线粒体及线粒体嵴水肿增加,密度降低,呈空泡化,LDH和CK-MB水平显著升高(P<0.05),ROS、RNS和线粒体内MDA水平显著升高(P<0.05),SOD、ATP、线粒体钠钾ATP酶(Na+k+-ATPase)和钙镁ATP酶(Ca 2+Mg 2+-ATPase)活性水平及线粒体膜电位显著降低(P<0.05)。与H 2O 2组相比,姜黄素组线粒体及线粒体嵴水肿减轻,密度增加,空泡化程度减轻,LDH和CK-MB水平显著降低(P<0.05),ROS、RNS和线粒体内MDA水平显著降低(P<0.05),SOD、ATP、线粒体Na+k+-ATPase和Ca 2+Mg 2+-ATPase活性水平及线粒体膜电位显著增加(P<0.05)。结论 姜黄素可以减轻氧化应激条件下H9c2心肌细胞的线粒体损伤,其机制可能与清除细胞内氧化应激产物,增强线粒体内抗氧化酶活性有关。 展开更多
关键词 姜黄素 氧化应激 线粒体 乳酸脱氢酶 肌酸激酶同工酶 丙二醛 超氧化物歧化酶
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姜黄素调控脂多糖诱导成骨细胞线粒体功能改变及凋亡研究
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作者 李广悦 尹东青 +2 位作者 徐凌 丁慧芬 许芸 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期581-587,共7页
目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和姜黄素(curcumin,Cur)对成骨细胞线粒体功能活性改变及凋亡的影响。方法:体外培养小鼠原代成骨细胞,并将细胞分为 4 组:无任何处理的对照组(N 组);10 μmol/L 姜黄素预处理 2 h,使用正常培养... 目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和姜黄素(curcumin,Cur)对成骨细胞线粒体功能活性改变及凋亡的影响。方法:体外培养小鼠原代成骨细胞,并将细胞分为 4 组:无任何处理的对照组(N 组);10 μmol/L 姜黄素预处理 2 h,使用正常培养基培养 24 h 组(Cur 组);用 1 mg/L LPS 处理 24 h 组(LPS 组);用 10 μmol/L 姜黄素预处理 2 h,然后再用 1 mg/L LPS 处理成骨细胞 24 h 组(Cur +LPS 组)。利用线粒体荧光探针测量线粒体活性氧的产生,检测线粒体氧化呼吸链酶活性、线粒体膜电位、细胞内 ATP 的合成及细胞凋亡情况。结果:在经过 1 mg/L LPS 刺激后,小鼠成骨细胞线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成为对照组的 2.59 倍;与对照组相比,LPS 组氧化呼吸链酶Ⅰ活性降低 21%,氧化呼吸链酶Ⅲ活性降低 26%,氧化呼吸链酶Ⅳ活性降低 28%;线粒体细胞膜电位降低 32%,ATP 合成量为(0.79±0.06)μmol/mg 蛋白,细胞凋亡数目增加 3.2 倍;而Cur+LPS 组较 LPS 组相比,小鼠成骨细胞内 ROS 水平降低(1.48±0.21 vs. 2.59±0.32,P=0.003),氧化呼吸链酶Ⅰ活性升高(0.98±0.02 vs. 0.79±0.03,P=0.000),氧化呼吸链酶Ⅲ活性升高(0.93±0.03 vs. 0.74±0.03,P=0.004),氧化呼吸链酶Ⅳ活性升高(0.92±0.05 vs. 0.72±0.02,P=0.009),线粒体膜电位增加(0.91±0.04 vs. 0.68±0.04,P=0.002),ATP 合成量增加(1.53±0.05vs. 0.79±0.06,P=0.000),细胞凋亡数目减少(1.67±0.42 vs. 5.33±0.80,P=0.002)。结论:姜黄素预处理组的成骨细胞线粒体功能得以明显改善,并且细胞凋亡数目明显减少,为姜黄素可能被进一步应用于临床治疗慢性牙周炎提供一定的实验依据。 展开更多
关键词 脂多糖 姜黄素 成骨细胞 线粒体 活性氧 细胞凋亡
结肠参与慢性肾功能衰竭大鼠氧化应激的激活
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作者 郭织运 李和文 +2 位作者 夏振娜 许静 董睿 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期43-48,共6页
目的探讨慢性肾功能衰竭(CRF)胃肠道症状的发生机制,明确结肠是否参与CRF氧化应激的激活。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组(10只)和CRF组(20只),CRF组大鼠予以5/6肾切除建立CRF模型,对照组仅打开肾包膜后缝合。成模后10周处死大鼠,... 目的探讨慢性肾功能衰竭(CRF)胃肠道症状的发生机制,明确结肠是否参与CRF氧化应激的激活。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组(10只)和CRF组(20只),CRF组大鼠予以5/6肾切除建立CRF模型,对照组仅打开肾包膜后缝合。成模后10周处死大鼠,收集2组大鼠的血清及回盲瓣附近结肠组织。检测大鼠肾功能指标血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)以评估造模是否成功,检测大鼠血清及结肠组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(TAC)和8-羟脱氧鸟苷(8-OHdG)以评估氧化应激水平,检测泛素细胞色素C诱导核心蛋白酶Ⅰ(UQCRC1)mRNA和蛋白水平以评估线粒体功能。结果与对照组相比,CRF组血清BUN及SCr水平升高,提示造模成功;CRF组血清及结肠组织中MDA水平升高(P<0.05),但2组间8-OHdG和抗氧化指标SOD、TAC差异无统计学意义(P>0.05);CRF组结肠组织中UQCRC1蛋白水平较对照组低(P<0.05),但UQCRC1mRNA水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论CRF大鼠的结肠组织中存在氧化与抗氧化反应失衡现象,其机制可能涉及线粒体的功能障碍。 展开更多
关键词 慢性肾功能衰竭 胃肠道功能障碍 氧化性应激 线粒体
线粒体调控造血干细胞功能的研究进展
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作者 刘子闲 董芳 +2 位作者 张森 韩明哲 依马秀夫 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期277-282,共6页
线粒体是真核细胞中特有的双层膜细胞器,其目前已知作用包括能量代谢、信号转导、细胞增殖与凋亡的调控等。近年来研究显示,线粒体在造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)功能维持和细胞定向分化调节中发挥着重要作用:线粒体合成... 线粒体是真核细胞中特有的双层膜细胞器,其目前已知作用包括能量代谢、信号转导、细胞增殖与凋亡的调控等。近年来研究显示,线粒体在造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)功能维持和细胞定向分化调节中发挥着重要作用:线粒体合成受限及线粒体及时清除是抵抗氧化应激、维持HSC稳态的重要手段;线粒体累积将导致HSC增殖甚至衰老;线粒体通过调节细胞内钙离子浓度调控HSC谱系分化。本文就以上相关内容进行详细探讨,旨在深入理解线粒体如何影响HSC的功能,为HSC的代谢调控研究提供理论参考。 展开更多
关键词 线粒体 造血干细胞 静息状态 细胞分化 衰老
中药通过线粒体自噬保护缺血心肌的研究进展
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作者 赵雨薇 付建华 +4 位作者 李磊 李玲美 辛高杰 郑秋生 刘建勋 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期210-217,共8页
缺血性心脏病是全球死亡率最高的疾病之一,人们迫切需要新的治疗方法和预防手段。一般情况下,心肌细胞依赖于线粒体氧化磷酸化所产生的三磷酸腺苷(ATP)来维持其舒缩功能和离子泵功能。细胞自噬是一种广泛存在于真核细胞内的程序性降解机... 缺血性心脏病是全球死亡率最高的疾病之一,人们迫切需要新的治疗方法和预防手段。一般情况下,心肌细胞依赖于线粒体氧化磷酸化所产生的三磷酸腺苷(ATP)来维持其舒缩功能和离子泵功能。细胞自噬是一种广泛存在于真核细胞内的程序性降解机制,是机体组织的一种自我防御机制和自我修复过程,也是细胞凋亡的一种方式,是维持人体细胞能量平衡的一种基本现象。线粒体自噬是细胞选择性自噬的一种,是受损线粒体利用自噬机制选择性清除受损的蛋白质和细胞器来维持细胞内环境稳定。线粒体自噬对于维持心肌细胞的稳态非常重要。随着现代生物学研究的深入,越来越多的中药或其提取物被证实可以通过自噬或者调节线粒体的功能来改善缺血/再灌注后的心肌细胞损伤。这更加启发着中医药工作者以线粒体为靶向寻找有效的治疗措施。基于以上背景,本文就线粒体自噬在缺血性心脏病中的作用以及中医药在该领域的干预研究进行综述。 展开更多
关键词 缺血性心脏病 线粒体 自噬 中医药
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