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The Role of Prostaglandin E2 on Osteoblast Proliferation Induced by Hydroxyapatite 认领
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作者 Erwan Sugiatno Endang Herminajeng Wihaskoro Sosroseno 《生物科学与医学(英文)》 2020年第1期42-55,共14页
Objective: Prostaglandin E2 (PGE2) plays a crucial role in regulating bone cell differentiation and proliferation. The aim of the present study was to determine whether PGE2 may regulate osteoblast proliferation induc... Objective: Prostaglandin E2 (PGE2) plays a crucial role in regulating bone cell differentiation and proliferation. The aim of the present study was to determine whether PGE2 may regulate osteoblast proliferation induced by hydroxyapatite. Materials and Methods: Osteoblasts (HOS cell line) pre-treated with cyclooxygenase (COX) inhibitors (indomethacin, aspirin and nimesulide) were then cultured. The cells were also pre-treated with or without nimesulide and then cultured with PGE2. The cell cultures were also treated with SQ22536 (adenylyl cyclase inhibitor) and added with Db-cAMP (cAMP analog), and/or PGE2. KT5720 [protein kinase A (PKA) inhibitor.], Db-cAMP and/or forskolin (adenylyl cyclase activator)-treated cultures were used to assess the role of PKA. The role of EP2 and/or EP4 was determined by using EP2 antagonist (PF-04418948) and EP4 antagonist (L-161,982) with PGE2. All cells were cultured with or without hydroxyapatite. The levels of PGE2 and cAMP were detected from the culture supernantants and the cell proliferation was assessed colorimetrically. Results: Nimesulide and indomethacin but not aspirin suppressed partially the cell proliferation but fully PGE2 production. PGE2 abrogated nimesulide-mediated suppression of cell proliferation. The cell proliferation was enhanced by low but suppressed by high concentration of PGE2. Moreover, the SQ22536-mediated suppression of cell proliferation was abolished by Db-cAMP but not PGE2. Conversely, PGE2, Db-cAMP or forskolin failed to eliminate KT5720-mediated suppression of cell proliferation. The effect of PGE2 on cell proliferation and cAMP levels was mediated predominantly via EP2 and to a lesser extent, EP4. The results of the controls for all experiments were significantly lower than hydroxyapatite-stimulated cell cultures. Conclusion: These results suggest thatPGE2, acting via a COX-2-, cAMP-PKA- and both EP2 and EP4-dependent pathway may partially regulate hydroxyapatite-induced human osteoblasts in an autocrine fashion. 展开更多
关键词 HYDROXYAPATITE OSTEOBLAST PGE2 PROLIFERATION
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文章速递3D打印钛合金多孔材料对体外成骨细胞系MC3T3-E1的生物安全性 认领
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作者 景丽 史文 +4 位作者 曹雨 刘瑞赛 刘璐 李建宇 刘辉 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2020年第10期1374-1380,共7页
目的利用电子束熔融成型技术(EBM)3D打印钛合金多孔支架材料,检测其对成骨细胞(OB)的生物安全性。方法打印3种拓扑单元结构的多孔钛合金材料(2.0、2.25及2.5 mm的Dode-Medium单元结构),制备各组材料在多个时间点的浸提液(浸泡时间设24... 目的利用电子束熔融成型技术(EBM)3D打印钛合金多孔支架材料,检测其对成骨细胞(OB)的生物安全性。方法打印3种拓扑单元结构的多孔钛合金材料(2.0、2.25及2.5 mm的Dode-Medium单元结构),制备各组材料在多个时间点的浸提液(浸泡时间设24、48、72、96 h),并将浸提液用于成骨细胞系MC3T3-E1的体外培养。通过MTT实验,计算成骨细胞的相对增殖率(RGR);通过苏木精-伊红(HE)染色,形态学观察成骨细胞的生长状态;通过碱性磷酸酶(ALP)测定,分析成骨细胞的分化活性;通过免疫荧光染色,观察成骨细胞中I型胶原(ColⅠ)的表达水平。结果在各组材料浸提液孵育下,成骨细胞贴壁牢固、增殖活跃,生长状态良好。与DMEM孵育的阴性对照组比较,各材料浸提液组成骨细胞的相对增殖率无显著性差异;与DMSO孵育的阳性对照组比较,各材料浸提液组成骨细胞的相对增殖率显著升高(P<0.01);各组材料浸提液的细胞毒性程度评估均≤1。与DMEM孵育的阴性对照组比较,各材料浸提液组成骨细胞的ALP活性与ColⅠ含量均无显著性差异;与DMSO孵育的阳性对照组比较,各材料浸提液组成骨细胞的ALP活性与ColⅠ含量均显著升高(P<0.01)。结论以EBM技术3D打印钛合金多孔材料,其浸提液不会影响成骨细胞的体外增殖与分化,即具有良好的生物安全性。 展开更多
关键词 钛合金 3D打印 多孔材料 生物安全性 成骨细胞
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文章速递MAPK/JNK信号通路介导血管紧张素Ⅱ促进成骨细胞凋亡的研究 认领
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作者 李广悦 《检验医学与临床》 CAS 2020年第19期2768-2772,共5页
目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)调控小鼠成骨细胞凋亡的分子机制。方法用10-6 mol/L AngⅡ刺激小鼠成骨细胞24 h,利用原位末端转移酶标记技术检测成骨细胞凋亡情况。并将成骨细胞分为4组,对照组(α-MEM培养基处理细胞1 h);AngⅡ组(10-6 mo... 目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)调控小鼠成骨细胞凋亡的分子机制。方法用10-6 mol/L AngⅡ刺激小鼠成骨细胞24 h,利用原位末端转移酶标记技术检测成骨细胞凋亡情况。并将成骨细胞分为4组,对照组(α-MEM培养基处理细胞1 h);AngⅡ组(10-6 mol/L AngⅡ处理细胞1 h);AngⅡ+SP600125组[使用c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路抑制剂(SP600125)预处理细胞1 h,再用AngⅡ处理1h];AngⅡ+vehicle组(加入对应量的二甲基亚砜预处理1 h,再用AngⅡ处理细胞1 h)。利用免疫印迹法检测凋亡信号通路相关蛋白(Bax、Bcl-2、细胞色素C)及应激活化蛋白激酶(SAPK)/JNK信号通路的表达,同时使用试剂盒检测Caspase-3活性。结果10-6 mol/L AngⅡ处理后,成骨细胞凋亡数目增加2倍,同时细胞内SAPK/JNK通路活化,Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显增加,细胞色素C从细胞核内向细胞质内转移增加,Caspase-3活性明显增加,而使用SP600125后可明显抑制上述改变。结论AngⅡ可促进小鼠成骨细胞凋亡,凋亡效应可由SAPK/JNK通路所介导。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 成骨细胞 凋亡 信号通路
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文章速递MG63细胞对载辛伐他汀纳米胶束摄取的高效液相色谱法测定 认领
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作者 牛茂 冯先玲 许有诚 《深圳职业技术学院学报》 CAS 2020年第5期36-40,共5页
本实验旨在应用高效液相色谱(HPLC)法定量检测人成骨样细胞—MG63细胞对载辛伐他汀纳米胶束(SVNs)的摄取情况.首先,建立检测SVNs中SV含量的HPLC法,确定色谱条件,并对该方法的专属性与准确性进行评价.其次,将SVNs与辛伐他汀(SV)干预细胞... 本实验旨在应用高效液相色谱(HPLC)法定量检测人成骨样细胞—MG63细胞对载辛伐他汀纳米胶束(SVNs)的摄取情况.首先,建立检测SVNs中SV含量的HPLC法,确定色谱条件,并对该方法的专属性与准确性进行评价.其次,将SVNs与辛伐他汀(SV)干预细胞,在加药后的不同时间终止实验,反复冻融破碎细胞,提取胞内药物并用HPLC法对其进行检测.结果显示,当流动相比例为30:70(V/V)时,定量检测SVNs中SV含量的标准曲线拟合方程为y=33782x-1424.5(R2=0.9999),线性范围为0.2~3.2µg/mL.该方法专属性与准确性均较高,并成功检测出了被MG63细胞摄取到胞内的药物含量.同时,在加药早期,SVNs与SV相比,SVNs被MG63细胞摄取的速度较慢,但胞内药物含量显著高于SV,SVNs与SV被MG63细胞摄取存在显著差异. 展开更多
关键词 辛伐他汀 纳米胶束 高效液相色谱法 成骨细胞 细胞摄取
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文章速递淫羊藿苷纳米微粒对大鼠成骨细胞成熟与矿化的影响 认领
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作者 葸慧荣 高玉海 +1 位作者 陈克明 马慧萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1352-1357,共6页
目的观察淫羊藿苷纳米微粒(ICA-NS)对出生48 h内的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞成熟与矿化的作用。方法显微镜观察淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞形态的影响;Hoechst 3342/PI双染色法检测淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞的毒性反应;碱性磷酸酶检测试... 目的观察淫羊藿苷纳米微粒(ICA-NS)对出生48 h内的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞成熟与矿化的作用。方法显微镜观察淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞形态的影响;Hoechst 3342/PI双染色法检测淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞的毒性反应;碱性磷酸酶检测试剂盒检测成骨细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性;茜苏红染料对淫羊藿苷纳米微粒处理过的细胞进行染色,观察钙化结节的数量和面积;检测成骨细胞中与成骨相关的特异性蛋白表达情况。结果与淫羊藿苷组相比,淫羊藿苷纳米微粒组细胞形态无明显变化,且Hoechst 3342/PI双染色法结果进一步显示淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞无明显毒副作用;碱性磷酸酶活性测定结果显示淫羊藿苷纳米微粒显著提高了成骨细胞中碱性磷酸酶水平,而且淫羊藿苷纳米微粒组茜苏红钙化结节染色面积明显增大,颜色显著加深,成骨性相关蛋白的表达量也显著高于对照组。结论淫羊藿苷纳米微粒能显著促进成骨细胞的矿化与成熟,且对成骨细胞无明显毒副作用。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 纳米微粒 大鼠 成骨细胞
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微小RNA 155对骨免疫的调控及其在牙周炎中作用的研究进展 认领
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作者 孙坚炜 雷利红 +1 位作者 谭静怡 陈莉丽 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2020年第5期607-615,共9页
牙周炎是以牙龈炎症和牙槽骨进行性破坏为特征的慢性感染性疾病,牙周菌斑微生物和宿主免疫反应之间的相互作用影响着疾病的过程和进展。骨免疫学作为一个新的交叉学科领域,主要研究骨骼系统和免疫系统之间的分子交互机制,与牙周炎的发... 牙周炎是以牙龈炎症和牙槽骨进行性破坏为特征的慢性感染性疾病,牙周菌斑微生物和宿主免疫反应之间的相互作用影响着疾病的过程和进展。骨免疫学作为一个新的交叉学科领域,主要研究骨骼系统和免疫系统之间的分子交互机制,与牙周炎的发生密切相关。微小RNA 155(miR-155)是一种真核生物内源性非编码RNA,可与目标基因mRNA的3'-非编码区结合而抑制其表达,参与机体的免疫、造血、炎症等生理或病理过程。大量研究表明,在牙周炎发展过程中miR-155的表达量发生改变,但目前文献报道的结果尚不一致,且miR-155还可通过多条途径参与骨骼系统的调控。本文对miR-155在骨免疫及牙周炎发生中的调节作用进行综述,以期为牙周炎的临床治疗提供新的思路和策略。 展开更多
关键词 微小RNA 骨免疫 牙周炎 骨代谢 成骨细胞 破骨细胞
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FoxO1在1,25(OH)2D3调控高糖环境下成骨细胞代谢中的作用 认领
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作者 周佳琦 舒林径 +3 位作者 熊毅 张艺馨 向琳 伍颖颖 《口腔疾病防治》 2020年第1期24-29,共6页
目的探究1,25(OH)2D3对高糖环境下骨代谢的调控作用,为1,25(OH)2D3对高糖环境下成骨细胞的可能调控机制提供证据。方法将成骨细胞系MC3T3-E1细胞分3组培养:①对照组,低糖(5.5 mmol/L)DMEM培养基培养;②高糖组:高糖(22 mmol/L)DMEM培养... 目的探究1,25(OH)2D3对高糖环境下骨代谢的调控作用,为1,25(OH)2D3对高糖环境下成骨细胞的可能调控机制提供证据。方法将成骨细胞系MC3T3-E1细胞分3组培养:①对照组,低糖(5.5 mmol/L)DMEM培养基培养;②高糖组:高糖(22 mmol/L)DMEM培养基培养;③高糖+1,25(OH)2D3组:高糖DMEM+1,25(OH)2D3培养基培养。利用CCK-8法检测各组细胞增殖活性;Annexin V,FITC凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况;茜素红半定量分析细胞分化水平;分别通过qRT-PCR检测叉头转录因子-1(forkhead transcription factor 1,FoxO1)mRNA表达,免疫荧光观察FoxO1蛋白表达变化和其与细胞核的相对位置关系。结果相较于对照组,高糖组成骨细胞过度增殖、凋亡显著增加、成骨分化受抑制(P <0.05),FoxO1 mRNA增加(P=0.006),FoxO1蛋白核内转移增加(P=0.001)。相较于高塘组,高糖+1,25(OH)2D3组细胞的过度增殖受到抑制、凋亡减少、成骨分化较高糖组改善(P <0.05),FoxO1 mRNA减少(P=0.006),FoxO1蛋白核内转移受阻(P <0.001)。结论 1,25(OH)2D3可能通过降低高糖环境中成骨细胞FoxO1 mRNA表达,阻止FoxO1向细胞核内转移,抑制高糖环境下成骨细胞的异常增殖、凋亡,并逆转高糖对成骨分化的抑制作用。 展开更多
关键词 成骨细胞 成骨分化 高糖血症 糖尿病 叉头转录因子 1 增殖 凋亡 1 25(OH)2D3 维生素D 骨代谢
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MACF1对成骨细胞微丝骨架和细胞力学性能的调节作用 认领
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作者 胡丽芳 吴自祥 +5 位作者 丛晓岚 Mitchel Alioscha-Perez 王哲 蒋冬梅 骞爱荣 Hichem Sahli 《陕西师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期98-104,111,共8页
为探索细胞骨架关键交联分子微管微丝交联因子1(microtubule actin crosslinking factor 1,MACF1)对成骨细胞微丝骨架和细胞力学性能的调节作用,以MACF1低表达的小鼠成骨细胞及其对照细胞为研究对象,通过细胞免疫荧光染色和激光扫描共... 为探索细胞骨架关键交联分子微管微丝交联因子1(microtubule actin crosslinking factor 1,MACF1)对成骨细胞微丝骨架和细胞力学性能的调节作用,以MACF1低表达的小鼠成骨细胞及其对照细胞为研究对象,通过细胞免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜,观察成骨细胞微丝骨架;运用微丝图像分析系统对微丝特性进行定量分析;采用原子力显微镜检测细胞弹性模量。结果发现,与对照组相比,MACF1低表达显著改变了小鼠成骨细胞的微丝分布角度,增加了成骨细胞的微丝长度与数量,显著减小了成骨细胞的刚度。研究结果为深入认识MACF1在成骨细胞中的功能奠定了实验基础,并为由成骨细胞功能改变引起的骨质疏松等骨骼疾病防治研究提供了新靶标。 展开更多
关键词 MACF1 成骨细胞 微丝 图像分析 细胞力学性能
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去甲斑蝥素通过双向调控骨吸收和骨形成用于防治骨质疏松症的体外研究 认领
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作者 黄飞日 姜文兵 苏忠良 《全科医学临床与教育》 2020年第5期407-410,F0002,F0003,共6页
目的 通过观察去甲斑螯素对成骨细胞和破骨细胞的作用,探讨其在防治骨质疏松症中的作用.方法 将小鼠胚胎成骨细胞前体细胞分为对照组、模型组、低剂量组和高剂量组,高、低剂量组分别予以0.1 μmol/L、1 μmol/L 去甲斑蝥素干预.小鼠胚... 目的 通过观察去甲斑螯素对成骨细胞和破骨细胞的作用,探讨其在防治骨质疏松症中的作用.方法 将小鼠胚胎成骨细胞前体细胞分为对照组、模型组、低剂量组和高剂量组,高、低剂量组分别予以0.1 μmol/L、1 μmol/L 去甲斑蝥素干预.小鼠胚胎成骨细胞前体细胞用成骨培养基诱导,非对照组用脂多糖进行干预,3周后通过茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)染色检验成骨变化.骨髓来源巨噬细胞(BMMs)提取自6周龄的C57BL-6J小鼠,非对照组细胞培养基加入50 ng/ml RANKL向破骨细胞诱导6 d,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、细胞骨架染色观察破骨细胞形态及活性.结果 ALP染色和茜素红染色显示,与模型组比较,去甲斑螯素干预组具有更强的碱性磷酸酶活性和更多的矿化结节,可有效改善脂多糖对成骨分化和矿化的抑制作用,增强成骨细胞活性.通过TRAP染色和细胞骨架染色观察,可见与模型组比较,去甲斑螯素干预后,成熟破骨细胞的数量和面积均显著减少,抑制了破骨细胞分化.结论 去甲斑螯素能通过剂量依赖性可有效增强成骨细胞活性,促进骨形成,并显著抑制破骨细胞生成,是一种治疗骨质疏松的理想药物. 展开更多
关键词 去甲斑螯素 骨质疏松 成骨细胞 破骨细胞
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缺氧诱导因子通路在骨发育中的作用及研究进展 认领
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作者 郭庆圆 刘洪臣 《中华老年口腔医学杂志》 2020年第2期115-118,128,共5页
缺氧诱导因子是氧依赖性的转录激活因子,在血管生成、红细胞生成、能量代谢和细胞周期中起着至关重要的作用。骨髓是缺氧微环境,富含生长因子、血管丰富,骨髓的缺氧水平可诱导缺氧诱导因子通路,该通路对骨发育有着深远的影响。目前已知... 缺氧诱导因子是氧依赖性的转录激活因子,在血管生成、红细胞生成、能量代谢和细胞周期中起着至关重要的作用。骨髓是缺氧微环境,富含生长因子、血管丰富,骨髓的缺氧水平可诱导缺氧诱导因子通路,该通路对骨发育有着深远的影响。目前已知缺氧诱导因子在骨发育的过程中可以调节多种蛋白和信号通路,而这些蛋白和信号通路大多能对细胞的分化、增殖及功能进行调节。本文综述缺氧诱导因子通路在骨发育中的作用及研究进展,从而进一步探讨缺氧诱导因子在骨发育调控中的机制。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子 骨发育 成骨细胞 破骨细胞
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咖啡因对大鼠正畸牙移动过程中成骨细胞代谢的影响 认领
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作者 孙鹏 于路 +1 位作者 全圣爱 刘美艳 《江苏医药》 CAS 2020年第8期785-787,791,F0003,共5页
目的探讨咖啡因对大鼠正畸牙移动过程中成骨细胞代谢的影响。方法54只健康雄性SD大鼠建立正畸牙移动模型,随机均分为三组:空白对照(A)组不给予咖啡因,低剂量(B)组按照每天2.5 mg/100 g给予咖啡因,高剂量(C)组按照每天10 mg/100 g给予咖... 目的探讨咖啡因对大鼠正畸牙移动过程中成骨细胞代谢的影响。方法54只健康雄性SD大鼠建立正畸牙移动模型,随机均分为三组:空白对照(A)组不给予咖啡因,低剂量(B)组按照每天2.5 mg/100 g给予咖啡因,高剂量(C)组按照每天10 mg/100 g给予咖啡因。分别在实验的第1、3、7、14、21和28天每组处死3只大鼠,应用HE染色观察第一磨牙牙周组织形态学变化,应用免疫组化染色方法观察第一磨牙近中根根中1/3处远中(张力区)前列腺素E2(PGE2)的表达。结果HE染色结果显示,C组张力区成骨细胞不如A、B组活跃,成骨细胞数量较少,新骨形成量少于A、B组,成骨活动不如A、B组活跃。免疫组化染色结果显示,C组大鼠第一磨牙近中根张力区PGE2阳性表达面积百分比高于A、B组(P<0.05),而A组与B组相比无统计学差异(P>0.05)。结论在模型大鼠正畸牙移动过程中,适量饮用咖啡因对成骨细胞代谢无明显影响,而高剂量咖啡因可能通过影响部分因子如PGE2的代谢对成骨细胞产生抑制作用。 展开更多
关键词 咖啡因 正畸 成骨细胞 前列腺素E2 大鼠
飞天蜈蚣七提取物对大鼠成骨细胞的保护作用及对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用 认领
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作者 杨森 潘亚磊 +3 位作者 李引刚 刘艳平 李世蒙 秦鹏俊 《中南药学》 CAS 2020年第3期435-439,共5页
目的探讨飞天蜈蚣七提取物对原代大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化及对Wnt和β-catenin蛋白表达的影响。方法离体培养大鼠原代成骨细胞,采用EdU染色法、碱性磷酸酶法、矿化结节染色法考察不同浓度飞天蜈蚣七提取物对成骨细胞增殖、分化和... 目的探讨飞天蜈蚣七提取物对原代大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化及对Wnt和β-catenin蛋白表达的影响。方法离体培养大鼠原代成骨细胞,采用EdU染色法、碱性磷酸酶法、矿化结节染色法考察不同浓度飞天蜈蚣七提取物对成骨细胞增殖、分化和矿化等作用的影响;采用Western blot法检测飞天蜈蚣七提取物对Wnt、β-catenin蛋白表达的影响。结果飞天蜈蚣七提取物浓度在100、200mg·L^-1可提高成骨细胞增殖、分化和矿化能力,提高Wnt和β-catenin的蛋白表达水平。结论飞天蜈蚣七提取物可在一定浓度范围内增加大鼠成骨细胞的活力、增殖、分化和矿化作用,通过Wnt/β-catenin信号通路发挥促进成骨的作用可能是其防治骨质疏松症的机制。 展开更多
关键词 飞天蜈蚣七提取物 成骨细胞 增殖 分化 矿化 WNT/Β-CATENIN信号通路
骨关节炎患者滑膜细胞对于成骨细胞骨向分化的影响及机制研究 认领
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作者 陈铿 方浩 +1 位作者 徐苏洋 徐天阳 《临床和实验医学杂志》 2020年第12期1303-1307,共5页
目的探索骨关节炎患者滑膜细胞对成骨细胞骨向分化的影响及其相关机制。方法取骨关节炎患者滑膜组织及正常滑膜组织,采用酶消化法分离培养滑膜细胞,并传代,取第2代滑膜细胞和成骨细胞进行实验。首先将滑膜细胞与成骨细胞在体外进行共培... 目的探索骨关节炎患者滑膜细胞对成骨细胞骨向分化的影响及其相关机制。方法取骨关节炎患者滑膜组织及正常滑膜组织,采用酶消化法分离培养滑膜细胞,并传代,取第2代滑膜细胞和成骨细胞进行实验。首先将滑膜细胞与成骨细胞在体外进行共培养,实验分为两组,取P2代骨关节炎患者滑膜细胞与成骨细胞transwell共培养作为实验组(A组),正常滑膜细胞与成骨细胞transwell共培养作为对照组(B组),共培养36 h后,利用CCK-8法检测成骨细胞存活率,实时荧光定量PCR检测成骨细胞miR-21表达。然后,体外培养成骨细胞,构建过表达miR-21的重组慢病毒表达载体并转染入成骨细胞,实验分为两组,转染对照组(C组),miR-21转染组(D组),体外培养7 d后,实时荧光定量PCR检测成骨细胞miR-21表达以及成骨相关基因骨钙素(OCN)、RUNX2及I型胶原(Collagen I)mRNA表达,茜素红S法检测钙离子吸光度,ELISA法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,western blot法检测OCN、RUNX2蛋白表达。结果共培养36 h后,A组与B组成骨细胞存活率无显著差异[(98.21±1.07)%vs.(96.14±0.93)%,P>0.05],而A组miR-21表达量明显高于B组(4.61±0.47 vs.0.32±0.11,P<0.05);体外培养7 d后,D组miR-21表达量明显高于C组(11.02±0.97 vs.0.41±0.08,P<0.05),而D组OCN、RUNX2及Collagen I基因表达显著低于C组(0.33±0.06 vs.1.04±0.27,0.27±0.03 vs.0.99±0.12,0.73±0.08 vs.1.05±0.08,P<0.05),D组钙离子吸光度和ALP活性显著低于C组(P<0.05),此外,D组OCN、RUNX2蛋白相对表达量均明显低于C组(1.02±0.16 vs.15.66±1.37,1.03±0.11 vs.8.47±0.94,P<0.05)。结论骨关节炎成骨细胞内miR-21水平呈高表达,而成骨细胞存活率却未受明显影响。骨关节炎患者滑膜细胞miR-21可抑制成骨细胞的矿化作用。 展开更多
关键词 骨性关节炎 MICRORNA-21 滑膜细胞 成骨细胞 矿化作用
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慢性肾脏病继发小鼠颌骨异常的形态学研究 认领
14
作者 张耀元 陈宏裕 +1 位作者 王华 王林 《口腔医学》 CAS 2020年第5期404-410,共7页
目的研究慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)继发颌骨异常的形态学变化,并从细胞学角度对骨量变化进行探究。方法使用腺嘌呤饮食诱导建立CKD小鼠模型,每4周监测血清生化指标尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、钙(Ca)、磷(P)的变化,并于造... 目的研究慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)继发颌骨异常的形态学变化,并从细胞学角度对骨量变化进行探究。方法使用腺嘌呤饮食诱导建立CKD小鼠模型,每4周监测血清生化指标尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、钙(Ca)、磷(P)的变化,并于造模12周末行肾脏组织HE染色观察。造模12周末取小鼠下颌骨行Micro-CT和HE染色分析。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)水平。体外培养颌骨间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)检测其增殖和成骨分化能力。诱导骨髓单核细胞(bone marrow macrophages, BMMs)成破骨细胞观察破骨分化能力。结果与正常对照组相比,CKD组的血清BUN、CREA、P和Ca水平升高(P<0.05),肾脏组织HE染色示肾小球数目减少,肾间质炎性细胞浸润和纤维化。Micro-CT示CKD组的下颌骨的骨密度降低,骨量下降(P<0.05);HE染色提示CKD组下颌骨类骨质增加,骨小梁形态不规则;ELISA示CKD组的血清PTH水平明显升高(P<0.05)。体外实验显示,与正常对照组相比,CKD组MSCs增殖和早期成骨分化能力增强(P<0.05),但晚期形成矿化结节的能力有所下降(P<0.05);以及CKD组破骨细胞分化能力更强(P<0.05)。结论 CKD继发甲状旁腺功能亢进可致MSCs高增殖,但晚期出现成骨矿化障碍,并且其破骨细胞分化能力增强,加速骨转化。颌骨表现为骨量下降,骨微结构改变。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 甲状旁腺激素 骨微结构 成骨细胞 破骨细胞
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鸢尾素对脂多糖诱导小鼠成骨细胞凋亡的保护作用 认领
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作者 叶文斌 林达生 +1 位作者 王江泽 丁真奇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1059-1061,共3页
目的探讨鸢尾素(Irisin)对成骨细胞炎性反应的保护作用及其机制。方法2018年8月至2019年4月,往小鼠成骨细胞(MC3T3-E1,购自北京北纳生物公司)加入鸢尾素预处理后,再经脂多糖(LPS)刺激。实验分为6组:对照组(Control组)、LPS(5 mg/L)、LPS... 目的探讨鸢尾素(Irisin)对成骨细胞炎性反应的保护作用及其机制。方法2018年8月至2019年4月,往小鼠成骨细胞(MC3T3-E1,购自北京北纳生物公司)加入鸢尾素预处理后,再经脂多糖(LPS)刺激。实验分为6组:对照组(Control组)、LPS(5 mg/L)、LPS+Irisin(25μg/L)、LPS+Irisin(50μg/L)、LPS+Irisin(100μg/L)和LPS+Irisin(200μg/L)组。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量,流式细胞术检测线粒体活性与细胞凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测单磷酸腺苷酸活化蛋白激酶-α(AMPK-α)、p-AMPK-α与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。两组比较采用t检验,多组比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),两两比较采用LSD检验。结果(1)与Control组比较(0.864±0.021),LPS组细胞增殖明显下降(0.719±0.018),而100μg/L(0.760±0.033)与200μg/L(0.809±0.025)Irisin预处理组细胞增殖的明显增加(F=23.625,P<0.05),差异有统计学意义;(2)与Control组比较(286.600±33.448),LPS组ROS含量显著增加(402.600±42.694),而Irisin预处理组(25~200μg/L)(323.400±27.437、322.600±28.325、309.000±42.936、307.800±24.045)明显抑制ROS形成(F=6.986,P<0.01),差异有统计学意义;(3)与Control组比较,LPS刺激后明显降低线粒体活力[(31.800±3.242)%、(15.667±1.804)%,t=7.532,P<0.01],细胞凋亡率显著增加[(7.610±0.229)%、(14.057±1.631)%,t=6.777,P<0.01],差异有统计学意义。p-AMPK-α表达显著降低[(0.546±0.178)、(0.186±0.093),t=6.777,P<0.01],而Caspase-3水平明显升高[(0.212±0.031)、(0.324±0.026),t=4.811,P<0.01],差异有统计学意义;(4)与LPS处理组比较,Irisin+LPS组中MC3T3-E1线粒体活性明显升高[(10.157±0.774)%、(27.500±1.572)%,t=17.145,P<0.01],细胞凋亡率显著减少[(11.927±0.385)%、(7.017±1.080)%,t=7.417,P<0.01],p-AMPK-α表达显著升高[(0.356±0.059)、(0.551±0.044),t=4.567,P<0.05],凋亡蛋白Caspase-3显著下降[(0.384 展开更多
关键词 鸢尾素 成骨细胞 脂多糖 细胞凋亡 单磷酸腺苷酸活化蛋白激酶
葛根素对高浓度糖皮质激素环境下MC3T3-E1前成骨细胞生物学性能的影响 认领
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作者 陈振宇 潘颖菁 +2 位作者 张艳 贺玺 黄达鸿 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第6期544-547,共4页
目的:通过体外细胞培养以及相关干预,探讨葛根素对高浓度糖皮质激素环境下MC3T3-E1生物学性能的影响。方法:体外培养MC3T3-E1前成骨细胞,分为一对照组与五组实验组,在高浓度糖皮质激素(10^-6 mmol/L)环境下使用梯度浓度葛根素(0、1×... 目的:通过体外细胞培养以及相关干预,探讨葛根素对高浓度糖皮质激素环境下MC3T3-E1生物学性能的影响。方法:体外培养MC3T3-E1前成骨细胞,分为一对照组与五组实验组,在高浓度糖皮质激素(10^-6 mmol/L)环境下使用梯度浓度葛根素(0、1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8、1×10^-9 mol/L)进行干预;使用CCK-8试剂盒分别检测培养1 d、4 d、7 d时的细胞增殖、碱性磷酸酶试剂盒检测细胞培养1 d、4 d、7 d时的ALP活性,培养7 d时实时定量PCR检测细胞OPG mRNA的表达,培养24 h鬼笔环肽染色并在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架形态变化。结果:CCK-8结果显示,对照组与各实验组差异具有统计学意义(P<0.05),培养4 d时各实验组之间比较1×10^-7mol/L组细胞增殖最明显(P<0.05);ALP检测结果显示,同一时间点各实验组ALP表达均有提升,且与对照组差异有统计学意义(P<0.05);激光共聚焦鬼笔环肽染色结果显示,在1×10^-7mol/L组细胞铺展面积最大,结构清晰;PCR结果显示,各实验组OPG mRNA的表达量均高于对照组并与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:葛根素能够在高浓度糖皮质激素环境下促进MC3T3-E1增殖、伸展及分化。 展开更多
关键词 葛根素 糖皮质激素 成骨细胞 增殖 分化
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褪黑素防治骨质疏松症的研究现状 认领
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作者 王旭东 黄东生 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期741-745,共5页
骨质疏松症是一种危害严重且发病率逐年增加的全身性代谢性骨病,是中老年的常见病、多发病。褪黑素是一种由松果体分泌的调节生物昼夜节律的信号分子。近年来国内外研究发现褪黑素具有促进成骨细胞增殖分化、抑制破骨细胞活性从而促进... 骨质疏松症是一种危害严重且发病率逐年增加的全身性代谢性骨病,是中老年的常见病、多发病。褪黑素是一种由松果体分泌的调节生物昼夜节律的信号分子。近年来国内外研究发现褪黑素具有促进成骨细胞增殖分化、抑制破骨细胞活性从而促进骨代谢平衡的作用。其中,褪黑素在多项骨质疏松症相关细胞实验、动物实验以及临床试验的骨代谢研究中均取得了良好的治疗效果。因其具有治疗骨质疏松症的潜在作用,笔者就其研究进展作一综述,并提出今后可能的研究方向和亟待解决的关键问题。 展开更多
关键词 褪黑素 骨质疏松 骨代谢 成骨细胞 破骨细胞
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Research Progress on the Role of Endoplasmic Reticulum Stress in Osteogenic Differentiation 认领
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作者 Nianqiang Jin Hongchen Sun 《临床护理研究》 2020年第2期61-64,共4页
The endoplasmic reticulum(ER)is the main site for regulating protein synthesis and processing.Endoplasmic reticulum stress plays a role in regulating the osteogenic differentiation of stem cells and general osteoblast... The endoplasmic reticulum(ER)is the main site for regulating protein synthesis and processing.Endoplasmic reticulum stress plays a role in regulating the osteogenic differentiation of stem cells and general osteoblasts.Bone marrow stromal cells(BMSCs,also known as bone marrow mesenchymal stem cells)are a group of progenitor cells that contain a small number of bone stem cells(SSCs)that rebuild cartilage,bone,stroma,and fat cells that support hematopoiesis and bone marrow.Therefore,due to their self-renewal and differentiation capabilities,they have become an important resource for researching regenerative medicine and tissue engineering treatment strategies.Exposure of osteoblasts to physical and biochemical stimuli facilitates rapid activation of early tissue repair processes in organisms.Therefore,the rational regulation of the induction conditions of osteoblasts has become a hot research topic.This article reviews the recent advances in the role of endoplasmic reticulum stress in the process of osteoblast differentiation. 展开更多
关键词 Endoplasmic reticulum STRESS BMSC OSTEOBLAST OSTEOBLASTS DIFFERENTIATION
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阿魏酸对过氧化氢诱导成骨细胞损伤的影响 认领
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作者 邬钰 陈艳莉 +3 位作者 陈胜柱 陈艳芳 黄宏靓 陈珺 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2020年第2期140-147,共8页
目的研究阿魏酸(ferulic acid,FA)对过氧化氢诱导氧化损伤的成骨细胞功能的影响。方法酶消化法分离提取大鼠颅骨成骨细胞并进行体外传代培养,以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红(alizarin red S,ARS)染色进行细胞鉴定... 目的研究阿魏酸(ferulic acid,FA)对过氧化氢诱导氧化损伤的成骨细胞功能的影响。方法酶消化法分离提取大鼠颅骨成骨细胞并进行体外传代培养,以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红(alizarin red S,ARS)染色进行细胞鉴定;通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测定细胞存活率及ALP检测试剂盒检测ALP分泌,并筛选出适合的过氧化氢损伤浓度和FA作用浓度。将细胞分为对照组(C组)、氧化损伤模型组(M组)和FA给药组(M+FA组),流式细胞术检测各组成骨细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量,ARS染色检测各组钙化结节形成大小,并以实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ-PCR)检测成骨功能相关基因的表达情况。结果(1)确定过氧化氢致损浓度为200μmol/L、作用时间1 h;FA给药浓度为640μmol/L,作用时间为72 h。(2)与C组相比,M组成骨细胞的存活率降低了60%(P<0.0001),细胞培养上清液中ALP含量显著降低(P<0.0001),细胞ROS含量上升约为C组3倍,细胞着色变浅、未能生成明显的钙化结节,成骨特异性转录因子(runt-related transcription factor 2,RUNX-2)、骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)、成骨相关转录因子(osterix,OSX)等成骨功能相关基因的表达亦有所降低;与M组相比,M+FA组成骨细胞的存活率显著提高(P<0.01),细胞上清液中ALP含量显著提高(P<0.01),ROS含量降低了一半,钙化结节数量增加、细胞着色加深,成骨功能相关基因OPG、OSX的表达均显著升高(P<0.05),但FA对RUNX-2表达无明显影响。结论FA干预能明显改善过氧化氢所致氧化损伤成骨细胞的存活能力,增加细胞ALP分泌水平和细胞体外矿化能力,亦明显上调成骨功能相关基因的表达。 展开更多
关键词 阿魏酸 过氧化氢 氧化损伤 成骨细胞
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BICC1对骨髓基质细胞定向分化的调控作用研究 认领
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作者 杨俊英 李晓霞 《天津医科大学学报》 2020年第3期199-203,共5页
目的:探讨BICC1在骨髓基质细胞向成骨细胞及脂肪细胞分化过程中的作用。方法:构建Bicc1过表达质粒Bicc1-pcDNA3.1,以pcDNA3.1为对照,分别转染小鼠骨髓基质细胞ST2。对两组细胞进行成脂和成骨诱导,在成骨诱导14 d时碱性磷酸酶染色检测成... 目的:探讨BICC1在骨髓基质细胞向成骨细胞及脂肪细胞分化过程中的作用。方法:构建Bicc1过表达质粒Bicc1-pcDNA3.1,以pcDNA3.1为对照,分别转染小鼠骨髓基质细胞ST2。对两组细胞进行成脂和成骨诱导,在成骨诱导14 d时碱性磷酸酶染色检测成骨分化情况,在成脂诱导5 d时利用油红O染色检测脂滴形成情况;采用qRT-PCR及Western blot技术检测细胞Bicc1过表达对成骨及成脂相关因子的影响。结果:酶切及测序结果显示Bicc1过表达质粒构建成功,将其转染到ST2细胞后,Bicc1 mRNA表达水平较对照组升高15.23倍(P<0.05)。成骨诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞碱性磷酸酶染色增强,成骨相关因子Osterix、碱性磷酸酶、Osteopontin、Runt相关转录因子2(Runx2)和骨钙素的mRNA和/或蛋白表达水平显著上升(均P<0.05)。成脂诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞中脂滴形成减少,油红OD520较对照组明显降低(P<0.01),成脂相关因子过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白(FABP4/aP2)和adipsin的mRNA及蛋白表达水平显著下降(均P<0.05)。结论:BICC1可促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,抑制其向脂肪细胞分化。 展开更多
关键词 Bicc1 骨髓基质细胞 分化 成骨细胞 脂肪细胞
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