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原花青素B2对人牙周膜细胞炎症介质表达的影响 预览
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作者 顾丽芬 杨涛 +2 位作者 高颖 周薇 宋忠臣 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期120-125,共6页
目的·观察原花青素B2 对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙周膜细胞(human periodontalligament cells,hPDLCs)炎症介质表达的影响。方法·组织块法体外培养hPDLCs;噻唑蓝比色法观察原花青素B2 对hPDLCs... 目的·观察原花青素B2 对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙周膜细胞(human periodontalligament cells,hPDLCs)炎症介质表达的影响。方法·组织块法体外培养hPDLCs;噻唑蓝比色法观察原花青素B2 对hPDLCs 活性的影响;原花青素B2 预处理hPDLCs 1 h 后,予以LPS,实时荧光定量PCR 和ELISA 检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6 及IL-8 的mRNA 和蛋白的表达;荧光显微镜下观察细胞内活性氧的变化;Griess 法检测培养上清液中一氧化氮(NO)的水平。结果·当原花青素B2 浓度达到100.00 μg/mL 时可增强hPDLCs 的活性。原花青素B2 可抑制LPS 诱导的IL-1β、IL-6 及IL-8 的mRNA 和蛋白的表达,降低活性氧和NO 的水平。结论·原花青素B2 可抑制牙龈卟啉单胞菌LPS 诱导的hPDLCs 炎症介质的表达,发挥一定的抗炎作用。 展开更多
关键词 牙周膜细胞 原花青素B2 脂多糖 炎症介质
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低功率微波对人正常及脂多糖诱导的牙周膜细胞增殖的影响 预览
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作者 谢文泵 庄文捷 黄璇叶 《中外医学研究》 2019年第8期165-167,共3页
目的:探讨微波辐照对人牙周膜细胞增殖的影响。方法:运用微波理疗仪(输出功率调节为14 W)以连续波、垂直极化照射方式对人牙周膜细胞行微波辐射(频率2 450 MHz),24、48 h后MTS法检测人牙周膜细胞(h PDLCs)增殖效应。结果:微波辐照对健康... 目的:探讨微波辐照对人牙周膜细胞增殖的影响。方法:运用微波理疗仪(输出功率调节为14 W)以连续波、垂直极化照射方式对人牙周膜细胞行微波辐射(频率2 450 MHz),24、48 h后MTS法检测人牙周膜细胞(h PDLCs)增殖效应。结果:微波辐照对健康h PDLCs增殖效应影响,微波照射24、48 h后,照射40 s组,实验组中吸光度值(OD值)低于对照组(P<0.01);微波辐照对炎症h PDLCs增殖效应影响,微波照射24、48 h后,照射10、20、40 s组,实验组中吸光度值(OD值)都低于对照组(P<0.01)。结论:长时间(40 s)低功率微波辐照健康人牙周膜细胞能明显抑制正常牙周膜增殖,促进细胞凋亡。低功率微波照射10、20、40 s对炎性的人牙周膜细胞的增殖均具有明显抑制作用,随着微波辐射强度的增高对其增殖抑制率也愈大,呈现明显的剂量依赖性。低功率微波照射时间为10~20 s时能抑制炎症人牙周膜细胞过度增殖,又不影响人健康牙周膜细胞的增殖。 展开更多
关键词 低功率微波 牙周膜细胞 内毒素脂多糖 细胞活力测定 增殖效应
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微小RNA在人牙周膜来源细胞成骨分化中的作用 预览
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作者 郝奕霖 房付春 吴补领 《国际口腔医学杂志》 CSCD 2018年第1期46-49,共4页
人牙周膜来源细胞是一个异质性细胞群,能够分化成成骨细胞,参与牙槽骨改建、修复和牙周再生。微小RNA(miRNA)被认为在细胞调控分化进程中发挥了关键作用,也是维持细胞分化特性和调节分化的关键因子,miRNA靶向结合目的基因,通过... 人牙周膜来源细胞是一个异质性细胞群,能够分化成成骨细胞,参与牙槽骨改建、修复和牙周再生。微小RNA(miRNA)被认为在细胞调控分化进程中发挥了关键作用,也是维持细胞分化特性和调节分化的关键因子,miRNA靶向结合目的基因,通过上调或下调的调控方式产生促进或抑制成骨的作用。本文总结目前miRNA在人牙周膜来源细胞成骨分化过程中的相关研究,就miRNA在矿化或机械力诱导作用条件下可能发挥的功能、调控的靶基因及通路进行综述。 展开更多
关键词 微小RNA 牙周膜干细胞 牙周膜细胞 成骨分化
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五倍子联合黄芩提取物复合液对牙周膜细胞增殖和周期的影响 预览
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作者 谭学东 黎淑芳 +2 位作者 朱晓莹 黄跃斌 雷茗 《中国药业》 CAS 2018年第8期9-11,共3页
目的 观察五倍子联合黄芩提取物复合液防治牙周病的效果及对牙周膜细胞(PDLC)增殖和周期的影响。方法 选取医院口腔门诊2015年5月至2016年7月收治的因正畸需要拔除的无龋、无牙周病的青少年患者32例,采用细胞培养技术体外培养人体PDLC... 目的 观察五倍子联合黄芩提取物复合液防治牙周病的效果及对牙周膜细胞(PDLC)增殖和周期的影响。方法 选取医院口腔门诊2015年5月至2016年7月收治的因正畸需要拔除的无龋、无牙周病的青少年患者32例,采用细胞培养技术体外培养人体PDLC,根据细胞生长情况,并按加入药物的不同分为黄芩提取液组(LPS组)、五倍子组和复合液组(LPS+五倍子组)。采用四氮唑蓝(MTT)法观察3组细胞增殖情况,采用考马斯亮蓝染色法测定细胞总蛋白含量,采用碱性磷酸酶法检测3组细胞的活性。结果 复合液组细胞3,6,12,24 h增殖数、细胞总蛋白含量、细胞周期,均大于LPS组与五倍子组(P〈0.05)。结论 五倍子联合黄芩提取物复合液对PDLC有保护作用,能促进蛋白质合成,并进一步增加细胞增殖及细胞活性。 展开更多
关键词 五倍子 黄芩提取物 牙周病 牙周膜细胞 细胞增殖 细胞活性
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中药黄芩苷干预人牙周膜成纤维细胞的作用及分子机制 预览
5
作者 李丽华 贾艾敏 +4 位作者 杨明辉 刘震 王丽恒 蒋红 邱亚 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第28期4475-4480,共6页
背景:黄芩苷作为一种重要的中药提取物,近年来的应用被越来越多的研究所提及。实验表明黄芩苷可以促进人牙周膜成纤维细胞的增殖并向成骨分化,但具体分子机制尚不清楚。目的:研究中药提取物黄芩苷对人牙周膜成纤维细胞的增殖促进作用... 背景:黄芩苷作为一种重要的中药提取物,近年来的应用被越来越多的研究所提及。实验表明黄芩苷可以促进人牙周膜成纤维细胞的增殖并向成骨分化,但具体分子机制尚不清楚。目的:研究中药提取物黄芩苷对人牙周膜成纤维细胞的增殖促进作用及潜在的分子机制。方法:通过细胞原代培养及光学显微镜下观察人牙周膜成纤维细胞的形态。CCK8法检测黄芩苷对人牙周膜成纤维细胞增殖的促进作用;采用实时定量PCR分析黄芩苷对增殖细胞核抗原表达的影响;实时定量PCR以及流式细胞术分析黄芩苷对细胞凋亡的抑制作用;Western blot及实时定量PCR分析黄芩苷对细胞中骨形态发生蛋白2蛋白与mRNA表达的影响;加入骨形态发生蛋白2抗体来检测黄芩苷对细胞增殖凋亡的作用以及骨形态发生蛋白2表达的变化。结果与结论:(1)与对照组相比,黄芩苷能够明显促进人牙周膜成纤维细胞增殖,并上调增殖细胞核抗原的mRNA表达水平;(2)与对照组相比,黄芩苷能够上调Bcl-2 mRNA表达水平,下调Bad mRNA表达水平,流式细胞术结果也显示黄芩苷能够抑制细胞的凋亡;(3)黄芩苷能够浓度与时间依赖性地上调骨形态发生蛋白2蛋白与mRNA水平;加入骨形态发生蛋白2中和抗体可减弱黄芩苷的调控作用;(4)结果表明,黄芩苷能够促进人牙周膜成纤维细胞的增殖,其发挥作用的机制可能与上调骨形态发生蛋白2表达有关。 展开更多
关键词 中草药 牙周膜 细胞增殖 骨形态发生蛋白质类 组织工程 黄芩苷 人牙周膜成纤维细胞 增殖 凋亡 骨形态发生蛋白2 牙周病 成骨分化
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脂多糖对人牙周韧带细胞中MT1-MMP表达的影响 被引量:1
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作者 刘念 曹颖光 朱光勋 《临床口腔医学杂志》 2018年第2期77-79,共3页
目的:探索在不同浓度及作用时间的脂多糖刺激下MT1-MMP在人牙周韧带细胞中的表达。方法:体外培养人牙周韧带细胞,取4~7代细胞分别以脂多糖梯度浓度和梯度时间进行干预,利用Western Blot和实时定量荧光PCR检测细胞中MT1-MMP在蛋白及基... 目的:探索在不同浓度及作用时间的脂多糖刺激下MT1-MMP在人牙周韧带细胞中的表达。方法:体外培养人牙周韧带细胞,取4~7代细胞分别以脂多糖梯度浓度和梯度时间进行干预,利用Western Blot和实时定量荧光PCR检测细胞中MT1-MMP在蛋白及基因水平上的表达。结果:Western Blot结果示脂多糖刺激下人牙周韧带细胞中MT1-MMP的蛋白表达强度升高,并在一定范围内呈现浓度和时间依赖性(P〈0.05);定量PCR结果显示MT1-MMP mRNA的表达变化趋势与Western Blot结果相一致(P〈0.05)。结论:脂多糖刺激下人牙周韧带细胞中的MT1-MMP表达显著升高,MT1-MMP可能在牙周组织炎性反应中发挥一定作用。 展开更多
关键词 脂多糖 牙周韧带细胞 MT1-MMP
CCN3调控牙周膜成纤维细胞的增殖和凋亡
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作者 李凤霞 王俊 马玉云 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2017年第5期504-509,共6页
目的:探讨CCN3对牙周膜成纤维细胞(periodontal ligament fibroblasts,PDLFs)增殖和凋亡的作用及可能的机制。方法:构建重组载体pc DNA.3.1-CCN3并转染人PDLFs过表达CCN3,转染CCN3 siRNA,抑制其表达量。转染Fra-1 siRNA到抑制CCN3的... 目的:探讨CCN3对牙周膜成纤维细胞(periodontal ligament fibroblasts,PDLFs)增殖和凋亡的作用及可能的机制。方法:构建重组载体pc DNA.3.1-CCN3并转染人PDLFs过表达CCN3,转染CCN3 siRNA,抑制其表达量。转染Fra-1 siRNA到抑制CCN3的PDLFs,同时抑制CCN3和Fra-1的表达量。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CCN3、Fra-1 mRNA表达水平,Western印迹法检测CCN3、Fra-1和Bcl-2蛋白表达量。MTT和Brd U实验分别检测PDLFs的生长活力和增殖能力。试剂盒方法检测caspase-3的活性。采用SPSS20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:转染pc DNA.3.1-CCN3的实验中,CCN3 mRNA(P〈0.05)和蛋白(P〈0.05)表达量显著上升。转染CCN3 siRNA的实验中,CCN3 mRNA(P〈0.05)和蛋白(P〈0.05)表达量显著下降。CCN3表达量被抑制后,PDLFs的增殖能力(P〈0.05)和生长活力(P〈0.05)显著上升,caspase-3活性(P〈0.05)和Bcl-2蛋白表达量(P〈0.05)分别降低和升高。然而,CCN3过表达时作用相反。CCN3过表达或抑制可分别显著降低(P〈0.05)或促进(P〈0.01)Fra-1的表达量。另外,同时抑制CCN3和Fra-1,可促进PDLFs的凋亡(P〈0.01)且抑制其增殖能力(P〈0.05)。结论:抑制CCN3可通过上调Fra-1的表达,促进PDLFs的增殖能力并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 CCN3 牙周膜成纤维细胞 Fra-1 细胞增殖 细胞凋亡
牙周韧带细胞膜片技术用于牙周组织再生的研究进展 预览 被引量:4
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作者 姜雨汐 刘树泰 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期204-208,共5页
为了解决中重度牙周炎引发的牙周组织破坏后无法自主再生的问题,细胞膜片工程根据引导性组织再生术的基本原理,通过将使用温敏培养皿等方法获取的完整细胞片层直接移植贴附到缺损部位的方法,实现获取牙骨质、牙槽骨及嵌入二者的牙周... 为了解决中重度牙周炎引发的牙周组织破坏后无法自主再生的问题,细胞膜片工程根据引导性组织再生术的基本原理,通过将使用温敏培养皿等方法获取的完整细胞片层直接移植贴附到缺损部位的方法,实现获取牙骨质、牙槽骨及嵌入二者的牙周韧带同时再生的目标。近年来,细胞膜片技术不断发展,逐步克服了单层细胞膜片厚度偏低、血管化不良及自体细胞来源不足等问题,其中运用牙周韧带细胞膜片进行牙周组织再生已经正式进入临床试验阶段。本文对近年来牙周韧带细胞膜片及其他常用细胞膜片在牙周组织再生方向应用的新进展作一综述。 展开更多
关键词 细胞膜片技术 牙周韧带细胞 UpCell培养皿 去细胞化 牙周组织再生
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弱激光照射对受张应力刺激的人牙周膜细胞成骨分化相关蛋白表达的影响 预览
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作者 李琳琳 刘珺 +3 位作者 刘昌翠 张晨 姜委杰 林炜 《青岛大学医学院学报》 CAS 2017年第2期168-170,173共4页
目的通过建立人牙周膜细胞(hPDLCs)体外张应力加载模型,探讨弱激光照射(LLLI)对受张应力刺激的hPDLCs成骨分化相关蛋白表达的影响。方法取健康青少年(12~16岁)因正畸治疗拔除的双尖牙根中1/3牙周膜组织,进行hPDLCs原代分离培养... 目的通过建立人牙周膜细胞(hPDLCs)体外张应力加载模型,探讨弱激光照射(LLLI)对受张应力刺激的hPDLCs成骨分化相关蛋白表达的影响。方法取健康青少年(12~16岁)因正畸治疗拔除的双尖牙根中1/3牙周膜组织,进行hPDLCs原代分离培养。取第4代细胞,随机分为空白组(A组)、张应力加载组(B组)和张应力加载并LLLI组(C组),接种于6孔板中。采用免疫印迹法检测加力前及加力后2、6、12、24h时各组细胞成骨分化相关蛋白碱性磷酸酶(ALP)和核心结合因子(Runx2)的表达。结果 C组细胞加力2h时ALP即出现高表达,6h时Runx2出现高表达,而B组细胞两指标则随时间延长表达量逐渐增高,至24h时达到峰值。加力后不同时间ALP、Runx2蛋白表达量C组〉B组〉A组,各组之间差异有统计学意义(F=7.29~71.19,P〈0.05)。结论LLLI能够加快并增强受周期性张应力刺激的hPDLCs成骨分化相关蛋白的表达。 展开更多
关键词 激光疗法 小剂量 牙周膜 应力 物理 细胞分化 碱性磷酸酶 核心结合因子类
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镁离子对人牙周韧带细胞体外成骨能力的影响 预览
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作者 姜雨汐 张佳 +6 位作者 魏凌飞 曲伟栋 刘玲玲 石方玉 江久汇 李翠英 刘树泰 《口腔医学研究》 北大核心 2017年第6期609-613,共5页
目的:探究不同浓度Mg2+对hPDLCs成骨向分化的影响,为后续牙周组织再生实验选择合适的Mg2+注入浓度提供依据。方法:取P3-P5代hPDLCs于Mg2+浓度分别为0、10、15、25、35、50mmol/L条件中常规培养,用CCK-8法检测hPDLCs增殖情况。成骨... 目的:探究不同浓度Mg2+对hPDLCs成骨向分化的影响,为后续牙周组织再生实验选择合适的Mg2+注入浓度提供依据。方法:取P3-P5代hPDLCs于Mg2+浓度分别为0、10、15、25、35、50mmol/L条件中常规培养,用CCK-8法检测hPDLCs增殖情况。成骨诱导后比较各组ALP活性差异及茜素红矿化结节着色情况,进行RT-qPCR检测成骨相关基因Runx2、ALP、Col1、OPN及Bglap的表达差异。采用SPSS16.0软件,运用单因素方差分析进行统计学分析。结果:10、15、25 mmol/L Mg2+浓度可促进细胞增殖并提高ALP活性,35、50 mmol/L Mg2+浓度抑制细胞增殖及ALP活性。结论:适宜浓度镁离子(025mmol/L)可促进hPDLCs早期成骨分化并抑制矿化。 展开更多
关键词 牙周韧带细胞 镁离子 细胞增殖 成骨分化 骨桥蛋白
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地塞米松对人牙周膜细胞白细胞介素6和白细胞介素8表达的调节作用 预览
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作者 唐晓琳 潘春玲 李琛 《中国医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期449-452,462共5页
目的 探讨地塞米松(Dex)对人牙周膜细胞(hPDLCs)中白细胞介素(IL)6 和 IL-8 表达的调节作用。方法 Dex 或牙龈卟啉单胞菌(P. g)-脂多糖(LPS)分 6 组处理 hPDLCs:10-9 mol/L Dex 组,10-6 mol/L Dex 组,10 μg/mL P. g -L... 目的 探讨地塞米松(Dex)对人牙周膜细胞(hPDLCs)中白细胞介素(IL)6 和 IL-8 表达的调节作用。方法 Dex 或牙龈卟啉单胞菌(P. g)-脂多糖(LPS)分 6 组处理 hPDLCs:10-9 mol/L Dex 组,10-6 mol/L Dex 组,10 μg/mL P. g -LPS 组,10-9 mol/L Dex+10 μg/mL P. g -LPS 组,10-6 mol/L Dex+10 μg/mL P. g -LPS 组,0.1%无水乙醇(对照组)。分别用 ELISA 法和实时定量 PCR 法检测 IL-6、IL-8 蛋白和 mRNA 表达水平。结果 24 h 和 48 h 时,10-9 mol/L Dex 组和 10-6 mol/L Dex 组 IL-6 和 IL-8 蛋白表达水平显著低 于对照组(P 〈 0.05)。48 h 时 10- 9 mol/L Dex 组和 10- 6 mol/L Dex 组 hPDLCs IL-6 mRNA 水平显著低于对照组(P 〈 0.05);而 10- 6 mol/L Dex 组 IL-8 mRNA 的表达水平显著高于对照组(P 〈 0.05)。24 h 和 48 h 时 10- 9 mol/L Dex+10 μg/mL P. g-LPS 组和 10- 6 mol/L Dex+10 μg/mL P. g-LPS 组 IL-6 蛋白和 mRNA 表达水平显著低于 10 μg/mL P. g-LPS 组(P 〈 0.05)。24 h 时 10-9 mol/L Dex+10 μg/mL P. g-LPS 组和 10-6 mol/L Dex+10 μg/mL P. g-LPS 组 IL-8 蛋白表达水平显著低于 10 μg/mL P. g-LPS 组(P 〈 0.05),但 48 h 未见统计 学差异。48 h 时,10-6 mol/L Dex+10 μg/mL P. g-LPS 组 IL-8 mRNA 水平显著高于 10 μg/mL P. g-LPS 组(P 〈 0.05)。结论 Dex 可 以显著抑制 hPDLCs 固有的和 P. g-LPS 诱导产生的 IL-6 的表达,但是 Dex 对 hPDLCs IL-8 的表达具有复杂的调节作用,需注意高 浓度 Dex 长时间作用时对 hPDLCs IL-8 表达的促进作用。 展开更多
关键词 地塞米松 糖皮质激素 牙周膜细胞 骨向诱导 白细胞介素6 白细胞介素8
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细胞外调节蛋白激酶信号通路调控牙周膜干细胞内皮分化的机制研究 被引量:1
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作者 朱宏 罗兰堃 +3 位作者 王颖 谈珺 薛芃 王勤涛 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期154-159,共6页
目的 探讨细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路在牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)内皮向分化中的作用,为PDLSC分化调控提供实验基础.方法 使用血管内皮生长因子(vascular end... 目的 探讨细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路在牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)内皮向分化中的作用,为PDLSC分化调控提供实验基础.方法 使用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b-FGF)联合诱导PDLSC向内皮细胞分化(诱导组),对诱导分化的细胞使用ERK1/2磷酸化阻断剂U0126进行处理(诱导+U0126组),同时用二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)作为对照(诱导+DMSO组),空白对照组为未经诱导的PDLSC;蛋白质印迹法检测诱导组0、1、3、6及12h的胞内磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)表达水平;各组诱导7d后提取细胞RNA,实时荧光定量PCR法检测细胞内CD31、血管内皮钙黏素(vascular endothelial-cadherin,VE-cadherin)和VEGF mRNA的表达情况;各组诱导14d,流式细胞计数法检测CD31+和VE-cadherin+细胞比例,基质胶管腔形成实验检测细胞的管腔形成能力.计量资料采用均值±标准差表示,两组间比较采用独立样本t检验;多组间比较采用单因素方差分析.结果 诱导1、3h后p-ERK1/2与ERK1/2比值分别升高至1.24±0.12、1.03±0.24,均显著高于诱导前(0.58±0.17)(P<0.01);实时荧光定量PCR结果显示,诱导+U0126组CD31、VEGF mRNA相对表达水平分别降至0.09±0.18、0.49±0.17,均显著低于诱导组细胞(P<0.05);流式细胞检测结果显示,诱导+U0126组CD31+、VE-cadherin+细胞比值分别降至5.22±0.85、3.56±0.87,均显著低于诱导组细胞(P<0.05);基质胶管腔形成实验显示诱导组的分支节点数、管腔数目、管腔长度分别升高至62.3±10.0、145.0±14.8及(32 129.7±4 413.9)像素,而诱导+U0126组分别下降至7.0±2.7、33.5±6.4及(15 951.0±758.1)像素,均显著低于诱导组(P<0.05).结论 PDLSC内皮分化过程受ERK通路正向调控,阻断ERK1/2磷酸化可以抑� 展开更多
关键词 牙周膜 干细胞 细胞外信号调节MAP激酶类 细胞分化
间隙连接蛋白Connexin43对力刺激下人牙周膜细胞成骨相关转录因子表达的影响 预览 被引量:2
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作者 李盛楠 张华菁 +1 位作者 霍波 张丁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期22-26,共5页
目的研究间隙连接蛋白Connexin43(Cx43)在牵张力刺激下对牙周膜成纤维细胞成骨相关转录因子表达的影响。方法对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)施加变形量为5%的牵张力,在受力1、2、4、8、24 h后检测成骨相关转录因子Osterix... 目的研究间隙连接蛋白Connexin43(Cx43)在牵张力刺激下对牙周膜成纤维细胞成骨相关转录因子表达的影响。方法对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)施加变形量为5%的牵张力,在受力1、2、4、8、24 h后检测成骨相关转录因子Osterix、RUNX2及Cx43 mRNA的表达。分别采用间隙连接的阻断剂18α-GA和基因沉没Cx43的方法阻断Cx43后观察Osteix、RUNX2 mRNA表达的变化。结果对h PDLFs施加牵张力时,h PDLFs内的Cx43、 展开更多
关键词 牙周膜细胞 机械力 CONNEXIN 43 成骨转录因子
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丝氨酸蛋白酶HtrA1在人牙周膜组织中的表达及对人牙周膜细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 李冉 张旗 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期87-92,共6页
目的观察丝氨酸蛋白酶HtrA1在人牙周膜组织中的表达,探讨其在人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)增殖中的作用。方法收集武汉大学口腔医学院口腔颌面外科门诊拔除的12至25岁健康前磨牙6颗和第三磨牙3颗,要求牙... 目的观察丝氨酸蛋白酶HtrA1在人牙周膜组织中的表达,探讨其在人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)增殖中的作用。方法收集武汉大学口腔医学院口腔颌面外科门诊拔除的12至25岁健康前磨牙6颗和第三磨牙3颗,要求牙根完整、无龋坏和牙周组织炎症,反转录PCR和免疫组化染色方法分别检测HtrA1在人牙周膜组织中的mRNA和蛋白的表达,组织块法体外培养原代hPDLC,甲基噻唑基四唑比色法检测细胞增殖。用慢病毒转染的方法获得HtrA1基因过表达和基因沉默稳定细胞株,并以空载体慢病毒为对照,然后分别在培养的第1、3、5、7、9d,细胞计数CCK.8试剂盒(cell countingkit-8,CCK-8)检测HtrA1对hPDLC增殖的影响。结果反转录PCR结果显示HtrA1 mRNA在人牙周膜组织中呈阳性表达,免疫组化染色结果显示HtrA1蛋白在人牙周膜组织中也呈阳性表达,并主要表达于hPDLC胞质和胞外基质中。hPDLC经体外培养后生长曲线符合该细胞生长特征。慢病毒成功将HtrA1基因过表达和基因沉默后,CCK.8检测结果显示体外培养1、3、5、7、9d后,分别与各自的空载体对照组相比,过表达HtrA1使hPDLC的增殖速率显著减弱(A值分别为0.897±0.060、0.890±0.083、1.631±0.038、1.111±0.041、1.110±0.189),而基因沉默HtrA1后hPDLC增殖速率显著加快(A值分别为0.329±0.021、0.529±0.044、0.973±0.056、1.626±0.102、2.344±0.198)(P〈0.05)。结论HtrA1在mRNA和蛋白水平均表达于人牙周膜组织中,并对hPDLC的增殖起重要调节作用。 展开更多
关键词 丝氨酸蛋白酶类 牙周膜 细胞增殖
表没食子儿茶素没食子酸酯对人牙周膜细胞增殖及成骨分化的影响 被引量:1
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作者 刘洁 逯宜 +2 位作者 王珍珍 杜文治 裴丹丹 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期758-764,共7页
目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC)增殖及成骨分化的影响,探讨其对促进牙周骨组织再生的作用.方法 收集新鲜拔除的前磨牙,分离其牙周韧... 目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC)增殖及成骨分化的影响,探讨其对促进牙周骨组织再生的作用.方法 收集新鲜拔除的前磨牙,分离其牙周韧带并进行hPDLC原代培养.取第4代hPDLC,分别给予0、2、4、6、8、10 μmol/L EGCG处理,处理24、48、72 h时采用细胞增殖与毒性检测试剂盒(cell counting kit,CCK)检测细胞增殖情况,培养第7、14天时检测碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性,培养第21天时采用茜素红对矿化结节进行染色及定量分析,处理7d时采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor-2,Runx2)、ALP和Ⅰ型胶原的表达情况.结果 4μmol/L EGCG作用于hPDLC 24 h时促进细胞增殖,8、10 μmol/L EGCG作用于hPDLC 24、72h时抑制细胞增殖.2、4、6、8、10 μmol/L EGCG成骨诱导21 d时均可见红染的矿化物,hPDLC吸光度值分别为0.119±0.001、0.167±0.003、0.173±0.003、0.110±0.001、0.083±0.003,除10 μmol/LEGCG组与无EGCG组(0.077±0.001)间差异无统计学意义外,其余组均显著高于无EGCG组(P值均<0.05).各浓度EGCG均可促进细胞Ⅰ型胶原、ALP表达,其中4、6 μmol/L效果最显著;4、6μmol/LEGCG可促进细胞Runx2表达,且4μmol/L组促进效果优于6μmol/L组.结论 4μmol/LEGCG在早期对细胞增殖有促进作用,4~6 μmol/L EGCG能显著增强hPDLC的成骨向分化. 展开更多
关键词 没食子酸 儿茶索 牙周膜 细胞增殖 成骨分化
根管封闭剂对牙周膜细胞生物相容性的影响 预览 被引量:1
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作者 胡佳 邹晓英 +1 位作者 庄姮 高学军 《北京大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期871-877,共7页
目的:研究氧化锌丁香油类(zinc oxide and eugenol based sealers,ZOE)、环氧树脂类(epoxy resin sealers,ERS)、硅酮基类(silicone based sealers,SBS)根管封闭剂对牙周膜细胞(human periodontal ligmant cells,h PDLCs)的增... 目的:研究氧化锌丁香油类(zinc oxide and eugenol based sealers,ZOE)、环氧树脂类(epoxy resin sealers,ERS)、硅酮基类(silicone based sealers,SBS)根管封闭剂对牙周膜细胞(human periodontal ligmant cells,h PDLCs)的增殖和矿化潜能的影响。方法:选用3颗不同人牙齿来源的h PDLCs进行重复实验,采用酶消化法+组织块培养法进行h PDLCs体外原代培养,按照培养基的不同成分分组:(1)ZOE固化24 h浸提液培养基组;(2)ZOE固化1周浸提液培养基组;(3)ZOE固化2周浸提液培养基组;(4)ERS固化24 h浸提液培养基组;(5)ERS固化1周浸提液培养基组;(6)ERS固化2周浸提液培养基组;(7)SBS固化24 h浸提液培养基组;(8)SBS固化1周浸提液培养基组;(9)SBS固化2周浸提液培养基组;(10)不含浸提液培养基组(对照组)。采用倒置显微镜观察h PDLCs细胞形态的变化,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(methyl-thiazol-diphenyltetrazolium,MTT)法测定细胞增殖能力,试剂盒法测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性。选取固化2周的各组材料制备矿化诱导浸提液,不含浸提液的矿化培养基为阳性对照组,采用茜素红染色法及氯化十六烷基吡啶半定量法分析矿化物形成情况。结果:比较相对增殖率(relative growth rate,RGR),ZOE固化2周内均具有中度或严重细胞毒性(RGR为13.6%~39.9%);ERS固化24 h具有轻微细胞毒性(RGR为63.6%~76.4%),固化1周后轻微或无细胞毒性(RGR为87.6%~95.3%);SBS固化后无明显细胞毒性(RGR为91.8%~106.7%)。比较ALP活性,SBS不同固化时间组间差异无统计学意义(F=3.397,P=0.053),且均高于ZOE和ERS组。半定量法检测数据显示,ZOE:D562 nm=0.180±0.050,ERS:D562 nm=2.968±0.201,SBS:D562 nm=3.623±0.039,对照组:D562 nm=3.477±0.102, 展开更多
关键词 根管封闭剂 牙周膜 细胞 培养的 细胞增殖 牙再矿化
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炎症微环境下重组人釉原蛋白对人牙周膜成纤维细胞炎症因子表达的影响 预览 被引量:2
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作者 廖蔚文 宋忠臣 +1 位作者 束蓉 董家辰 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期33-37,共5页
目的 观察在炎症微环境下,重组人釉原蛋白(rhAm)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)炎症因子表达的影响。方法 体外培养hPDLCs,采用免疫组织化学染色法鉴定hPDLCs。用10μg/m L牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)脂... 目的 观察在炎症微环境下,重组人釉原蛋白(rhAm)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)炎症因子表达的影响。方法 体外培养hPDLCs,采用免疫组织化学染色法鉴定hPDLCs。用10μg/m L牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)脂多糖(LPS)模拟炎症微环境,选取20μg/m L rhAm作用于hPDLCs,运用实时荧光定量PCR和ELISA技术检测炎症因子白介素(IL)-1β、IL-6和IL-8的表达。结果 免疫组织化学染色结果证实,培养细胞为hPDLCs。在所检测的4个时间点(6、12、24、72 h),10μg/m L P.gingivalis LPS均可诱导IL-1β、IL-6和IL-8的表达;加入20μg/mL rhAm后,各因子表达均有所降低。结论 rhAm可以抑制炎症微环境下h PDLCs炎症因子的表达。 展开更多
关键词 牙周膜成纤维细胞 炎症微环境 重组人釉原蛋白 炎症因子
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胞外信号调节激酶1/2信号转导通路调控牙周膜细胞成骨分化的研究 预览
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作者 伍栋 鲍光辉 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期268-272,共5页
目的探索细胞外信号调节激酶(ERK 1/2信号转导通路是否参与调控牙周膜细胞的成骨分化。方法取体外培养的第3代牙周膜细胞进行研究。实验分为空白对照组、成骨诱导组和实验组(在成骨诱导培养基中加入10 nmol·L-1 ERK1/2磷酸化的... 目的探索细胞外信号调节激酶(ERK 1/2信号转导通路是否参与调控牙周膜细胞的成骨分化。方法取体外培养的第3代牙周膜细胞进行研究。实验分为空白对照组、成骨诱导组和实验组(在成骨诱导培养基中加入10 nmol·L-1 ERK1/2磷酸化的抑制剂PD98059)。培养1周和3周后通过定量聚合酶链反应(q PCR)、碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色检测其成骨能力。结果成骨诱导可促进牙周膜细胞中ERK1/2的磷酸化。培养1周后,抑制ERK1/2的磷酸化可上调成骨标志物Runx2、ALP和骨钙蛋白(OCN)的表达,与成骨诱导组相比较,OCN的表达差异具有统计学意义(P〈0.05),Runx2、ALP的表达差异也具有统计学意义(P〈0.01)。培养3周后,实验组牙周膜细胞成骨标志物Runx2、ALP和OCN的表达仍较成骨诱导组高,ALP染色和钙结节形成较成骨诱导组强,其中Runx2、ALP的表达差异具有统计学意义(P〈0.05),OCN的表达差异也具有统计学意义(P〈0.01)。结论 ERK1/2信号转导通路参与了调控体外培养的牙周膜细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 ERK1/2 牙周膜细胞 成骨
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复合聚己内酯静电纺丝膜的制备与细胞相容性的研究
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作者 陈静 高凌云 +1 位作者 王愉惠 刘月华 《临床口腔医学杂志》 2016年第5期281-284,共4页
目的:研究复合聚己内酯(PCL)静电纺丝膜的制备,比较3种纺丝膜的细胞相容性。方法:通过加入胶原(COL)和羟基磷灰石(HA),并按一定比例制成纯PCL膜、PCL+5%COL膜和PCL+5%COL+1%HA膜。扫描电镜观察膜片形貌,接触角实验检测材料... 目的:研究复合聚己内酯(PCL)静电纺丝膜的制备,比较3种纺丝膜的细胞相容性。方法:通过加入胶原(COL)和羟基磷灰石(HA),并按一定比例制成纯PCL膜、PCL+5%COL膜和PCL+5%COL+1%HA膜。扫描电镜观察膜片形貌,接触角实验检测材料亲水性。MTT法检测牙周膜细胞在3组膜片上的增殖情况。活-死细胞染色法比较牙周膜细胞与膜片复合培养9 d时细胞存活情况。DAPI染色观察牙周膜细胞在3组纺丝膜上的分布情况。结果:扫描电镜结果显示,纯PCL膜纤维表面光滑平整,PCL+5%COL膜纤维表面存在微小凹坑,PCL+5%COL+1%HA膜纤维表面有突起结节,结节表面光滑连续。PCL+5%COL+1%HA膜水接触角显著小于纯PCL膜和PCL+5%COL膜。牙周膜细胞在PCL+5%COL+1%HA膜上的细胞增殖和活性显著优于其他两种膜片(P〈0.01),细胞分布更密集。结论:将COL、HA与PCl混纺,可以获得在微观形貌上与纯PCL纺丝膜存在差异的纳米纤维膜。PCL+5%COL+1%HA膜表现出较好的细胞相容性。 展开更多
关键词 静电纺丝 牙周膜细胞 微观形貌 细胞相容性
不同培养方法对牙周膜细胞生物学特性的影响
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作者 郑巍 《中国城乡企业卫生》 2016年第7期13-15,共3页
目的探讨酶消化法和组织块法是否影响牙周膜细胞的特性。方法培养牙周膜细胞,检测克隆形成能力及细胞周期分析,Stro-1的表达,实时定量RT-PCR检测。结果酶消化法培养的PDLCs+G2M明显高于组织块法的PDLC;酶消化法培养的PDLC克隆形式能力... 目的探讨酶消化法和组织块法是否影响牙周膜细胞的特性。方法培养牙周膜细胞,检测克隆形成能力及细胞周期分析,Stro-1的表达,实时定量RT-PCR检测。结果酶消化法培养的PDLCs+G2M明显高于组织块法的PDLC;酶消化法培养的PDLC克隆形式能力明显高于组织块法培养的PDLC;酶消化法培养的PDLC Stro-1的表达明显高于组织块法培养的PDLC;酶消化法培养的PDLC成骨标志物的表达明显高于组织块法培养的PDLC。酶消化法培养的牙周膜细胞具有更强的增殖能力和间充质干细胞含量更多,成骨标志物表达更强。结论酶消化法和组织块法影响牙周膜细胞的某些特性。 展开更多
关键词 牙周膜细胞 培养方法 酶消化法 组织块法
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