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一株宽谱裂解性溶藻弧菌噬菌体ФV170的分离鉴定及生物学特性
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作者 付汉清 林茂 +3 位作者 翟少伟 李忠琴 王淑红 程聪 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期819-828,共10页
【背景】溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是水产养殖中重要的条件致病菌,对海水养殖业造成了极大的危害。传统的抗生素疗法引发的耐药问题已经成为全球面临的严峻挑战之一,而作为可替代抗生素的噬菌体疗法已被证实能够有效治疗弧菌病。... 【背景】溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是水产养殖中重要的条件致病菌,对海水养殖业造成了极大的危害。传统的抗生素疗法引发的耐药问题已经成为全球面临的严峻挑战之一,而作为可替代抗生素的噬菌体疗法已被证实能够有效治疗弧菌病。【目的】深入研究溶藻弧菌噬菌体ФV170的生物学特性,为该菌株在水产动物病害控制中的应用提供数据支持。【方法】以溶藻弧菌V170为宿主菌,采用斑点法从凡纳滨对虾养殖水体中筛选噬菌体,并以双层平板法对噬菌体进行纯化、生长、效价等方面的研究;利用电镜观察噬菌体形态;通过酶切方法分析噬菌体的基因组大小及其类型。【结果】分离得到一株宽谱裂解性噬菌体ФV170,其噬菌斑边缘整齐且通透,12 h直径达1.5 mm。鉴定结果显示,噬菌体ФV170头部为正廿面体的立体对称结构,直径为60 nm-65 nm,尾部长为65 nm-75 nm,宽14 nm-18 nm,核酸类型为dsDNA,基因组大小约为45 kb,对氯仿不敏感,属于有尾噬菌体目(Caudovirales)肌尾噬菌体科(Myoviridae)。此外,噬菌体ФV170可裂解15株溶藻弧菌中的7株,属于种内宽谱;最佳感染复数为0.01;一步生长曲线显示潜伏期为10 min,裂解量为101.3;对65°C以上温度敏感。【结论】分离得到一株宽谱裂解性溶藻弧菌噬菌体,该噬菌体具有治疗海水养殖过程中溶藻弧菌病的潜力。 展开更多
关键词 噬菌体 溶藻弧菌 噬菌体治疗 凡纳滨对虾 生物学特性
Bacteriophages Isolated in China for the Control of Pectobacterium carotovorum Causing Potato Soft Rot in Kenya
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作者 Peter Muturi Junping Yu +3 位作者 Alice Nyambura Maina Samuel Kariuki Frantis B.Mwaura Hongping Wei 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2019年第3期287-294,共8页
Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of... Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of applying phages to control potato soft rot caused by Pectobacterium carotovorum.Eleven bacteriophages isolated from soil and water samples collected in Wuhan,China,were used to infect P.carotovorum host strains isolated from potato tubers showing soft rot symptoms in Nakuru county,Kenya.The efficacy of the phages in controlling soft rot disease was evaluated by applying individual phage strains or a phage cocktail on potato slices and tubers at different time points before or after inoculation with a P.carotovorum strain.The phages could lyse 20 strains of P.carotovorum,but not Pseudomonas fluorescens control strains.Among the 11 phages,Pectobacterium phage Wc5r,interestingly showed cross-activity against Pectobacterium atrosepticum and two phage-resistant P.carotovorum strains.Potato slice assays showed that the phage concentration and timing of application are crucial factors for effective soft rot control.Phage cocktail applied at a concentration of 1×10^9 plaque-forming units per milliliter before or within an hour after bacterial inoculation on potato slices,resulted in>90%reduction of soft rot symptoms.This study provides a basis for the development and application of phages to reduce the impact of potato soft rot disease. 展开更多
关键词 PECTOBACTERIUM carotovorum POTATO soft ROT BACTERIOPHAGES PHAGE resistance
小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体的分离鉴定及在鲜切蔬菜中的靶向抑菌作用 预览
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作者 张羽嘉 薛宇 +3 位作者 高璐 欧阳敏 肖丽霞 杨振泉 《美食研究》 北大核心 2019年第2期43-47,共5页
为研发食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Y. enterocolitica,Ye)的生物抑菌剂,对从动物粪便样品中分离纯化的1株Ye噬菌体Yep-YZU 01进行生物学特性、p H、热稳定性分析,并探究Yep-YZU 01在鲜切蔬菜模型中的靶向抑菌效果。透射显微电镜结果表... 为研发食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Y. enterocolitica,Ye)的生物抑菌剂,对从动物粪便样品中分离纯化的1株Ye噬菌体Yep-YZU 01进行生物学特性、p H、热稳定性分析,并探究Yep-YZU 01在鲜切蔬菜模型中的靶向抑菌效果。透射显微电镜结果表明:Yep-YZU 01头部呈现正六面体结构,具有带尾鞘的尾巴,形态归属于肌尾噬菌体科;Yep-YZU 01具有跨种裂解特性,能同时裂解Ye及福氏志贺氏菌;一步生长曲线测定结果显示Yep-YZU 01潜伏期约为10 min,爆发期约为120 min;在p H为7~10条件下Yep-YZU 01存活率较高,最适温度在40℃以下。应用培养基及鲜切蔬菜作为模型测定Yep-YZU 01靶向抑菌效果,结果能使鲜切莴苣中Ye总数下降2. 10 lg CFU/g。获得的噬菌体Yep-YZU 01具有广谱高效的裂解特性,在鲜切蔬菜中Ye的生物控制中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森氏菌 噬菌体 鲜切蔬菜 抑菌 生物控制 烹饪卫生
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Identifying peptides that specifically bind to MDA-MB-468 breast cancer cells 预览
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作者 Xiaoli Dai Qing Zhang +1 位作者 Huili Zhang Hongtao Xu 《肿瘤学与转化医学:英文版》 2019年第3期119-122,共4页
Objective To use phage display technique to screen for small polypeptides that specifically bind to MDA-MB-468 cells.Methods A random heptapeptide phage display library was used for in vitro screening against target M... Objective To use phage display technique to screen for small polypeptides that specifically bind to MDA-MB-468 cells.Methods A random heptapeptide phage display library was used for in vitro screening against target MDA-MB-468 cells.SC1180 cells were used for subtractive selection.High-affinity phage DNA was extracted,and peptides were sequenced.Results(1)The original library capacity of the polypeptide library was 2×10^13 pfu/mL,and phage titer was determined over 4 rounds.The average library capacity was 1.8×10^13 pfu/mL.(2)Subtractive screening showed that the phage library volume of each round was 1.8×10^12 pfu/mL,and that there was an enrichment effect in each subsequent round.Screening was stopped after the fourth round.(3)PCR results showed that the size of 39 products(78.0%)and 11 products(22%),were 300 bp and 258 bp,respectively.Thirty positive phages were selected for DNA extraction and sequencing,and the corresponding amino acid sequence was LMTRXSK.The sequence had no homology with known genes or proteins.Conclusion Using the phage display technique,we identified that the short polypeptide,LMTRXSK,specifically binds MDA-MB-468 human breast cancer cells. 展开更多
关键词 PHAGE BREAST cancer specific binding PEPTIDE
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病毒基因工程药物研究进展 预览
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作者 李远远 王鋆坦 +1 位作者 李彩霞 徐钟 《国外医药:抗生素分册》 CAS 2019年第4期323-328,共6页
随着病原微生物耐药性日趋严重,以及疑难病症的个性化治疗需求增多,利用活体微生物药物进行疾病治疗越来越被关注。采用现代生物技术和合成生物学手段,将具有疾病治疗作用的效应物分子的合成基因导入微生物中,创造具有靶向治疗效果的活... 随着病原微生物耐药性日趋严重,以及疑难病症的个性化治疗需求增多,利用活体微生物药物进行疾病治疗越来越被关注。采用现代生物技术和合成生物学手段,将具有疾病治疗作用的效应物分子的合成基因导入微生物中,创造具有靶向治疗效果的活体微生物药物这是前沿性研究领域。本文阐述以病毒为治疗载体的活体药物的研究进展,包括用于疾病治疗的病毒的种类和所携带效应物的表达调控,为抗生素类小分子药物替代治疗提供借鉴方法。 展开更多
关键词 噬菌体 载体 靶向治疗 药物
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副溶血性弧菌广谱裂解性噬菌体的筛选及其在海产品安全控制中的应用 预览
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作者 郑小双 高璐 +2 位作者 张辉 饶胜其 杨振泉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期141-148,共8页
以致病性副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)菌株作为宿主,从污水样品中分离裂解性噬菌体,并对其生物学特性及其在模拟污染黄鱼中Vp的抑菌作用进行研究。结果获得5株广谱裂解性噬菌体,形态鉴定属于肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长... 以致病性副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)菌株作为宿主,从污水样品中分离裂解性噬菌体,并对其生物学特性及其在模拟污染黄鱼中Vp的抑菌作用进行研究。结果获得5株广谱裂解性噬菌体,形态鉴定属于肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)和盖噬菌体科(Corticoviridae),裂解谱结果显示单噬菌体分别可以对5~24株不同来源的Vp菌株产生裂解效应,由5株噬菌体构成的混合物VppMIX能裂解所有Vp菌株(42株)。噬菌体分离株在60℃和pH 4~10条件下具有良好的裂解活性。单噬菌体不敏感突变频率(bacteriophage insensitive mutant frequency,BIMF)在10-3~10-5范围内,但VppMIX能够显著降低的BIMF值达到10^-6。应用Vp模拟污染黄鱼片作为模型研究VppMIX的抑菌效果,结果显示在25℃恒温保藏12 h后,不同剂量VppMIX处理的黄鱼样品中Vp载量比对照组(未处理)降低了1.41~4.98(lg(CFU/g))(P<0.01)。本研究为海产品中致病性Vp的控制提供了新型生物抑菌剂。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 噬菌体 广谱 抑菌作用
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乳酸乳球菌噬菌体与宿主相互作用研究进展 预览
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作者 赵慧莹 李言郡 +3 位作者 陈苏 欧凯 王健 何国庆 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第12期331-334,340共5页
发酵乳制品主要依靠乳酸菌对牛奶酸化并形成独特的风味。然而,乳酸菌因易受噬菌体感染而导致乳制品发酵缓慢甚至失败,这对乳制品行业造成巨大的经济损失。乳酸乳球菌是发酵乳制品行业中应用十分广泛的一种乳酸菌,目前其宿主上的受体分... 发酵乳制品主要依靠乳酸菌对牛奶酸化并形成独特的风味。然而,乳酸菌因易受噬菌体感染而导致乳制品发酵缓慢甚至失败,这对乳制品行业造成巨大的经济损失。乳酸乳球菌是发酵乳制品行业中应用十分广泛的一种乳酸菌,目前其宿主上的受体分子和相应噬菌体受体结合蛋白结构分析方面的研究已经取得一定进展。这些乳酸乳球菌模型系统对加深其他乳酸菌噬菌体-宿主相互作用的认识、揭示不同乳酸菌噬菌体-宿主相互作用机制的异同提供理论依据。本文综述了目前所发现的乳酸乳球菌噬菌体及其宿主之间的相互作用,探讨受体主要成分与编码受体结合蛋白基因的研究,为研究其他乳酸菌噬菌体种群及防治措施提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 噬菌体 受体 受体结合蛋白
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噬菌体AB3及其裂解酶作用于鲍曼不动杆菌生物被膜的体外研究
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作者 张劼 李秀娟 《国际呼吸杂志》 2019年第1期8-12,共5页
目的比较鲍曼不动杆菌噬菌体AB3、裂解酶LysAB3及抗生素在降解鲍曼不动杆菌生物被膜效率的差异。方法扩增LysAB3基因序列前端的354bp(118aa),以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化后命名为裂解酶蛋白LysAB3。... 目的比较鲍曼不动杆菌噬菌体AB3、裂解酶LysAB3及抗生素在降解鲍曼不动杆菌生物被膜效率的差异。方法扩增LysAB3基因序列前端的354bp(118aa),以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化后命名为裂解酶蛋白LysAB3。用结晶紫法及噻唑蓝(MTT)法测定经噬菌体AB3、LysAB3及各抗生素组处理后,鲍曼不动杆菌生物被膜及被膜菌的差异;并用激光共聚焦显微镜观察各组生物被膜形态及厚度的变化。结果噬菌体AB3及LysAB3处理24h后,鲍曼不动杆菌生物被膜明显降解,被膜活菌数量明显下降。结论噬菌体AB3及其编码的裂解酶LysAB3在体外实验中,可有效降解鲍曼不动杆菌生物被膜及被膜菌。 展开更多
关键词 裂解酶类 鲍氏不动杆菌 噬菌体 生物被膜
不同化学杀菌剂对乳杆菌噬菌体P2的灭活效果
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作者 马瑞瑞 刘颖 +3 位作者 郭静 柴诗雨 孟根其其格 陈霞 《食品科技》 CAS 北大核心 2019年第3期318-322,共5页
噬菌体污染是乳品工业生产中导致发酵失败的最主要因素。实验使用不同浓度的化学杀菌剂(乙醇、异丙醇、次氯酸钠、过氧乙酸)灭活噬菌体P2并在3 min内完成对其灭活效果的评估。结果显示,随化学杀菌剂浓度的增加,其对噬菌体P2的灭活效果... 噬菌体污染是乳品工业生产中导致发酵失败的最主要因素。实验使用不同浓度的化学杀菌剂(乙醇、异丙醇、次氯酸钠、过氧乙酸)灭活噬菌体P2并在3 min内完成对其灭活效果的评估。结果显示,随化学杀菌剂浓度的增加,其对噬菌体P2的灭活效果也呈现增加趋势。其中,100%异丙醇可使P2的存活率瞬间下降2.17个对数级;100%乙醇溶液可使其降低1.94个对数级;800 mg/kg次氯酸钠可使噬菌体P2下降3.16个对数级。过氧乙酸对噬菌体P2的灭活效果不明显,0.9%的过氧乙酸仅使13%的噬菌体失活。 展开更多
关键词 化学杀菌剂 噬菌体 灭活效果
Generation of Monoclonal Antibody to Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus GP4 Protein and Identification of Its Minic Epitopes 预览
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作者 Liu Peng Yuan Qing +7 位作者 Li Wei-qun Yin Xue-ting Ghulam Abbas Li Peng-chong Zhang Chao-fan Huang Xiao-dan Zhang Rui-li Li Guang-xing 《东北农业大学学报:英文版》 CAS 2019年第2期49-59,共11页
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)GP4 protein was prokaryotically expressed,and used as an antigen to immunize six-week-old BALB/c female mice.With conventional cell fusion method,an anti-PRRSV... Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)GP4 protein was prokaryotically expressed,and used as an antigen to immunize six-week-old BALB/c female mice.With conventional cell fusion method,an anti-PRRSV GP4 protein monoclonal antibody(Mab)5F12 was successfully prepared.It was identified as IgG2b subclass and had better stability and specificity,which not only responded with recombinant PRRSV GP4 protein,but also with PRRSV.Phage display technique had varieties of applications,in particular,the identification of key antigen epitopes for the development of therapeutic and diagnostic reagents and vaccines.In this study,Mab-5F12 was used as the target for biopanning a 12-mer phage random peptide library.After four rounds of biopanning,two phage-displayed peptides,named P-A and P-G(AKFEVCSPVVLG and GVNQENMLHFSF)were identified that recognized Mab-5F12 specifically.Sequence analysis showed that one or more of the peptides exhibited partial sequence similarity to the native GP4 protein sequence,which corresponded to 69-80 and 84-95 aa segments of the HP-PRRSV GP4 protein.Furthermore,real-time quantitative RT-PCR and indirect immunofluorescence assay indicated consistently the abilities of P-A and P-G to block viral infection in Marc-145 cells and they could function as antiviral agents for PRRSV. 展开更多
关键词 PORCINE REPRODUCTIVE and respiratory syndrome virus(PRRSV) GP4 protein MONOCLONAL antibody PHAGE display technique viral infection
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大肠埃希菌CRISPRs间隔序列的来源研究
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作者 梁文娟 崔聪聪 +5 位作者 段广才 刘慧莹 徐亚珂 郗园林 杨海燕 陈帅印 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期137-140,共4页
目的研究大肠埃希菌全基因组中规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPRs)的间隔序列分布及来源规律。方法通过BLAST、CRISPRs finder、ClustalX和CRISPRTarget分析CRISPR/Cas、间隔序列及其来源。结果 203株大肠埃希菌中74.4%含有I-E CRIS... 目的研究大肠埃希菌全基因组中规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPRs)的间隔序列分布及来源规律。方法通过BLAST、CRISPRs finder、ClustalX和CRISPRTarget分析CRISPR/Cas、间隔序列及其来源。结果 203株大肠埃希菌中74.4%含有I-E CRISPR/Cas,9.4%含有I-F CRISPR/Cas,17.2%存在CRISPR3-4;CRISPR1,CRISPR2,CRISPR3和CRISPR4的间隔序列数目范围分别为1-25、1-27、4-7和2-22;其独特间隔序列数目分别为339、346、57和66。CRISPRTarget分析I-E和I-F CRISPR/Cas的间隔序列分别匹配816条质粒和293条噬菌体,2 428条质粒和139条噬菌体,差异有统计学意义(χ~2=319.30,P<0.01)。结论大肠埃希菌中CRISPR/Cas分布广泛,I-E和I-F CRISPR/Cas可能发挥不同的免疫功能。 展开更多
关键词 规律成簇的间隔短回文重复序列 间隔序列 噬菌体 质粒 大肠埃希菌
1株貂源绿脓杆菌噬菌体的分离与鉴定 预览
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作者 齐心 梅纪坤 张灿 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期48-51,共4页
从水貂粪便中分离并纯化1株绿脓杆菌噬菌体,为测定其各项生物学特性。从水貂场采集粪便,利用双层平板法分离噬菌体,对分离到的噬菌体进行电镜形态观察、裂解谱、效价、最佳感染复数、温度和pH值敏感性以及一步生长曲线的测定。结果显示... 从水貂粪便中分离并纯化1株绿脓杆菌噬菌体,为测定其各项生物学特性。从水貂场采集粪便,利用双层平板法分离噬菌体,对分离到的噬菌体进行电镜形态观察、裂解谱、效价、最佳感染复数、温度和pH值敏感性以及一步生长曲线的测定。结果显示,从水貂样品中分离纯化得到一株绿脓杆菌噬菌体,命名为phage30。电镜形态特征表明,该噬菌体头部为二十面体的立体对称结构,直径约为60nm,尾部长180nm,属于有尾噬菌体目,长尾噬菌体科;噬菌体裂解率为29.63%(8/27);在宿主菌中增殖的效价为4.3×10^10PFU/mL。生物学特性测定结果表明,噬菌体在pH值5~11、温度40℃以下裂解活性基本保持不变,最佳感染复数为0.01;一步生长曲线测定结果显示,噬菌体潜伏期约为60min,暴发期约120min,裂解量约为156。表明从水貂粪便分离到这1株绿脓杆菌噬菌体,属长尾噬菌体科,具有宿主谱宽、裂解性能高、pH值和热稳定性好的特征,具有潜在的开发价值。 展开更多
关键词 水貂 绿脓杆菌 噬菌体 分离 生物学特性
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大肠杆菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性分析 预览
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作者 王海磊 陈景超 鲁欣欣 《河南师范大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期67-73,共7页
利用野生型大肠杆菌MG1655为宿主菌,从下水道污水中分离得到一株噬菌体,编号为Phage1.其噬菌斑大小为3~4mm,透射电镜观察发现该噬菌体有正多面体头部和弯曲尾部,属于长尾科噬菌体.对该噬菌体的生物学特性包括最佳感染复数、一步生长曲... 利用野生型大肠杆菌MG1655为宿主菌,从下水道污水中分离得到一株噬菌体,编号为Phage1.其噬菌斑大小为3~4mm,透射电镜观察发现该噬菌体有正多面体头部和弯曲尾部,属于长尾科噬菌体.对该噬菌体的生物学特性包括最佳感染复数、一步生长曲线、温度、氯仿、pH进行检测,结果显示该噬菌体的潜伏期为10min,繁殖周期为20min,对温度、氯仿以及pH耐受性良好.经基因组测序鉴定,该噬菌体为E.coliT1噬菌体. 展开更多
关键词 大肠杆菌 噬菌体 分离鉴定 噬菌斑
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基于序列信息高度集成的长单链DNA自组装及制备
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作者 贾友礼 顾宏周 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1008-1017,共10页
DNA折纸术(DNA origami)是DNA纳米自组装的一种主流方法,通常1条DNA主链在成百上千条合成的DNA短链辅助下,通过碱基互补配对原则折叠并锁定生成所设计的纳米结构.单链DNA折纸术(single-stranded DNA origami,ssDNA origami)是传统DNA折... DNA折纸术(DNA origami)是DNA纳米自组装的一种主流方法,通常1条DNA主链在成百上千条合成的DNA短链辅助下,通过碱基互补配对原则折叠并锁定生成所设计的纳米结构.单链DNA折纸术(single-stranded DNA origami,ssDNA origami)是传统DNA折纸术的一种进化和衍生,它摒除了传统折纸术对众多短序列的需求,通过高度集成序列信息至1条长单链DNA中,实现了由1条DNA序列自组装成复杂可控的纳米结构.由于体系中不存在过量的短DNA链杂质,并且同样可以顺利移植成单链RNA折纸术,单链DNA折纸术较传统DNA折纸术可能具备更好的生物和材料应用前景.本文概括了长单链DNA自组装的研究进展,总结了几种常用的长单链DNA制备的方法,并展望了该技术的应用前景. 展开更多
关键词 DNA纳米自组装 单链DNA折纸术 长单链DNA制备 噬菌体
嗜热链球菌噬菌体与宿主相互作用研究进展 预览
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作者 赵慧莹 李言郡 +3 位作者 陈苏 欧凯 王健 何国庆 《乳业科学与技术》 2019年第1期27-32,共6页
嗜热链球菌噬菌体对许多发酵乳制品的生产构成了主要威胁。随着乳品发酵中的嗜热链球菌噬菌体不断被分离发现,其生理特性、感染机制等信息正在逐渐被完善。了解这类噬菌体的生物多样性,并确定嗜热链球菌噬菌体与宿主的相互作用,可以为... 嗜热链球菌噬菌体对许多发酵乳制品的生产构成了主要威胁。随着乳品发酵中的嗜热链球菌噬菌体不断被分离发现,其生理特性、感染机制等信息正在逐渐被完善。了解这类噬菌体的生物多样性,并确定嗜热链球菌噬菌体与宿主的相互作用,可以为防治乳制品工业环境中的噬菌体提供理论基础。本文从嗜热链球菌噬菌体分类、噬菌体感染宿主的分子机制、吸附受体和受体结合蛋白方面进行综述,以期为其他乳酸菌噬菌体的研究和防治措施提供参考。 展开更多
关键词 嗜热链球菌 噬菌体 相互作用 受体
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噬菌体展示技术筛选胃癌高表达CD44分子特异性多肽序列的可行性分析 预览 被引量:1
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作者 林小波 贾环 +3 位作者 于照祥 李四光 李贞 常伟平 《山东医药》 2018年第24期10-13,共4页
目的探讨噬菌体展示技术筛选胃癌高表达CD44分子特异性多肽序列的可行性。方法使用噬菌体展示随机十二肽文库,以CD44纯化蛋白为筛选靶点,进行4轮亲和力筛选。从第四轮的洗脱物中随机挑选30个噬菌体克隆,对这些克隆进行测序并对序列进行... 目的探讨噬菌体展示技术筛选胃癌高表达CD44分子特异性多肽序列的可行性。方法使用噬菌体展示随机十二肽文库,以CD44纯化蛋白为筛选靶点,进行4轮亲和力筛选。从第四轮的洗脱物中随机挑选30个噬菌体克隆,对这些克隆进行测序并对序列进行生物信息学分析。通过ELISA法检测噬菌体克隆对CD44分子的亲和力,挑选阳性克隆,再通过细胞免疫荧光法进一步鉴定阳性克隆。结果从第4轮的洗脱物中随机挑选的30个噬菌体克隆中共有7种多肽序列,重复20次六肽基序WHXXXX。该基序与CD44透明质酸结合域能很好地结合,ELSIA法挑选出S1、S2、S5、S7四个阳性克隆。细胞免疫荧光法鉴定出对CD44亲和力最好的克隆为S1-WHXXXXXXQQA。结论通过噬菌体展示技术筛选S1-WHXXXXXXQQA多肽序列对CD44的亲和力和特异性最好;该序列有望成为特异性探针用于胃癌的分子影像学诊断。 展开更多
关键词 胃癌 噬菌体 噬菌体展示技术 多肽 CD44
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噬菌体vB_SalS_DZ的生物学特性及对鸡沙门氏菌病的疗效 预览
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作者 宋新慧 商延 +11 位作者 张庆 宋胜敏 柳林 由佳 朱应民 齐静 李璐璐 胡明 骆延波 张印 戴美学 刘玉庆 《山东农业科学》 2018年第7期42-47,共6页
抗药性沙门氏菌的出现,严重影响了抗生素对沙门氏菌病的治疗效果,而噬菌体治疗是一种可能的替代方法。本试验研究了沙门氏菌噬菌体vB_SalS_DZ的基本生物学特性及其对沙门氏菌SM86的治疗效果。噬菌体vB_SalS_DZ的生物学特性分析显示其效... 抗药性沙门氏菌的出现,严重影响了抗生素对沙门氏菌病的治疗效果,而噬菌体治疗是一种可能的替代方法。本试验研究了沙门氏菌噬菌体vB_SalS_DZ的基本生物学特性及其对沙门氏菌SM86的治疗效果。噬菌体vB_SalS_DZ的生物学特性分析显示其效价可达109pfu/mL,透射电镜结果显示该噬菌体属于有尾目T4噬菌体。对pH值的适应范围宽,在pH值4~12内能保持较高的裂解活性;该噬菌体的最适pH值在5.0左右。最佳感染复数为10-6,感染宿主菌的潜伏期和爆发期均为60min;基因组中不携带抗性基因和毒力基因。噬菌体vB_SalS_DZ可以使感染沙门氏菌病的SPF鸡死亡率降低50个百分点,这表明该噬菌体在治疗特定的沙门氏菌感染中具有较大的应用潜能。 展开更多
关键词 沙门氏菌 噬菌体 生物学特性 噬菌体治疗
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噬菌体作为药物治疗存在的挑战和机遇 预览
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作者 向宇波 王卉 石廷玉 《国外医药:抗生素分册》 CAS 2018年第5期440-445,共6页
噬菌体治疗在过去一个世纪里既受到热捧也受到质疑。如何开发出新的抗致死性病原菌治疗策略成为世界卫生组织的首要目标,虽然偶尔有噬菌体的治疗取得成功的案例,但是目前还难以实现系统性的临床治疗。在噬菌体发现一百周年纪念之际,... 噬菌体治疗在过去一个世纪里既受到热捧也受到质疑。如何开发出新的抗致死性病原菌治疗策略成为世界卫生组织的首要目标,虽然偶尔有噬菌体的治疗取得成功的案例,但是目前还难以实现系统性的临床治疗。在噬菌体发现一百周年纪念之际,尤其是抗生素抗性曰益严峻的今天,似乎是重振噬菌体治疗的最好时机。噬菌体广泛存在于环境中、食物、体内和体外。目前,人们逐渐认识到噬菌体对人类健康的影响,本文分析了噬菌体在微生物组中的作用,对人类健康的影响,成为抗生素抗性基因转移载体的可能性,以及作为药物治疗存在的挑战和机遇。 展开更多
关键词 噬菌体 抗生素抗性 生物膜 噬菌体治疗
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云南省玉龙县鼠疫疫源地鼠疫噬菌体的分离及鉴定
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作者 钟佑宏 段存娟 +7 位作者 郭英 董珊珊 张艳 张海鹏 丁奕博 谭红丽 石丽媛 王鹏 《中华地方病学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期707-710,共4页
目的 调查云南省玉龙县鼠疫疫源地宿主动物的鼠疫噬菌体携带情况,并对分离鼠疫噬菌体进行初步鉴定。方法 2016年,在春、秋两季,分别采集玉龙县鼠疫疫源地内5个鼠疫流行自然村的鼠类动物标本,以鼠疫疫苗株EV76为饲养菌,采用双层平... 目的 调查云南省玉龙县鼠疫疫源地宿主动物的鼠疫噬菌体携带情况,并对分离鼠疫噬菌体进行初步鉴定。方法 2016年,在春、秋两季,分别采集玉龙县鼠疫疫源地内5个鼠疫流行自然村的鼠类动物标本,以鼠疫疫苗株EV76为饲养菌,采用双层平板法分离鼠疫噬菌体,并鉴定噬菌斑形态。结果 ①春季采集动物标本409份,未分离到鼠疫噬菌体;秋季采集动物标本444份,分离到鼠疫噬菌体40株,分离率为9.01%(40/444)。②在5个鼠疫流行自然村均分离到了鼠疫噬菌体,各村间分离率比较差异无统计学意义(χ2 = 5.055,P 〉 0.05)。③在40株鼠疫噬菌体中,37株分离自齐氏姬鼠,2株分离自大绒鼠,1株分离自长尾大麝鼩。④分离鼠疫噬菌体的噬菌斑出现大(直径1.5 - 2.5 mm)、中(0.5 - 〈 1.5 mm)、小(〈 0.5 mm)3种类型。结论 云南省玉龙县鼠疫疫源地宿主动物携带较高数量的鼠疫噬菌体,噬菌斑形态多样,其生物学特性可能存在多态性。 展开更多
关键词 鼠疫(耶尔森氏)杆菌 噬菌体 鉴定
江西和广东烟草青枯菌对噬菌体的敏感性及聚类分析 预览
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作者 余成鹏 胡蓉花 +3 位作者 陈小强 苏颖 林培炯 刘琼光 《江西农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期699-707,共9页
为探索不同噬菌体对不同烟草青枯菌的侵染能力,选择从土壤中分离的6个青枯菌噬菌体,通过双层平板噬菌斑检测法,测定6个噬菌体P1521、P1553、P1556-1、P1556-2、P574-2和P7-1对江西和广东两省烟区75个烟草青枯菌的侵染和裂解情况,并基于... 为探索不同噬菌体对不同烟草青枯菌的侵染能力,选择从土壤中分离的6个青枯菌噬菌体,通过双层平板噬菌斑检测法,测定6个噬菌体P1521、P1553、P1556-1、P1556-2、P574-2和P7-1对江西和广东两省烟区75个烟草青枯菌的侵染和裂解情况,并基于青枯菌对3个噬菌体的敏感性差异,进一步对75个青枯菌进行聚类分析。结果表明:6个噬菌体分别可侵染65、63、61、57、57和24个烟草青枯菌菌株,噬菌体P1556-1和P1521寄主范围较广,噬菌体P1553寄主范围较窄;基于P1556-1、P574-2和P1553等3个噬菌体,对75个青枯菌进行聚类分析,将75个烟草青枯菌分为7个遗传组(Rs-I~Rs-VII),其中Rs-IV菌株数量较多,包括31个青枯菌,占供试菌株的41.33%,这些菌株对P1553噬菌体均表现不敏感,而对其它2个噬菌体敏感。 展开更多
关键词 烟草青枯病 茄科劳尔氏菌 噬菌体 寄主范围 遗传组
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