期刊文献+
共找到8篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
Sigma因子6促进拟南芥MIRNA基因转录 预览
1
作者 杨天宇 郑丙莲 《复旦学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期169-175,182共8页
本研究在筛选拟南芥miRNA水平异常的突变体的过程中,分离得到了一个新的突变体m112,随后通过图位克隆结合基因组测序发现M112的突变基因编码Sigma因子6(SIG6).通过Northernblot和小分子RNA测序,明确了sig6突变体中成熟miRNA的累积下调;... 本研究在筛选拟南芥miRNA水平异常的突变体的过程中,分离得到了一个新的突变体m112,随后通过图位克隆结合基因组测序发现M112的突变基因编码Sigma因子6(SIG6).通过Northernblot和小分子RNA测序,明确了sig6突变体中成熟miRNA的累积下调;通过荧光定量PCR检测pri-miRNA的表达,发现sig6突变体中pri-miRNA水平下调;进一步的MIRNA基因的启动子融合报告基因GUS染色结果显示在sig6突变体中,MIRNA基因启动子的活性减弱.这些实验结果表明SIG6通过影响MIRNA基因的转录参与了miRNA的生物合成,为人们进一步了解miRNA的生物合成途径提供了帮助. 展开更多
关键词 MIRNA pri-miRNA SIG6 Sigma因子 PolⅡ
在线阅读 免费下载
成簇pri-miRNAs表达载体的构建及表达验证
2
作者 曲妍佳 李晓宁 +4 位作者 张萌萌 范雅婷 肖君华 李凯 周宇荀 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第20期3805-3811,3823共8页
目的:旨在建立一个多重表达任意miRNA的方案,实现多个pri-miRNA表达阅读框的串联,用于miRNA簇或者miRNA家族的功能研究。方法:通过改造CRISPR/Cas9系统共表达载体42230,插入EGFP编码序列以及单个pri-miRNA序列,实现单个pri-miRNA表达... 目的:旨在建立一个多重表达任意miRNA的方案,实现多个pri-miRNA表达阅读框的串联,用于miRNA簇或者miRNA家族的功能研究。方法:通过改造CRISPR/Cas9系统共表达载体42230,插入EGFP编码序列以及单个pri-miRNA序列,实现单个pri-miRNA表达载体可视化的构建。在单个pri-miRNA表达载体的基础上,通过同源重组的方式,插入下一个pri-miRNA序列,实现多个pri-miRNA表达阅读框的串联表达。结果:以miR29家族的三个miRNA为例,验证了在pri-miRNA表达阅读框串联方面的可行性;在多重的pri-miRNA表达载体中,miRNA成熟体验证结果表明,pri-miR29a和pri-miR29b能够在哺乳动物细胞中被加工成熟,其成熟体明显地过表达。在转染的293A细胞中,miR29家族的靶基因PTEN的表达水平显著降低。结论:所构建的pri-miRNA多重表达方案,能够实现多个外源miRNA在同一细胞中的共表达,对于探索miRNA家族和miRNA簇的拮抗或协同调控功能起到重要的推进作用。 展开更多
关键词 pri-miRNA miR29家族 多重表达载体 PTEN
绵羊骨骼肌特异表达miR-133前体在不同绵羊群体中的多态检测 预览 被引量:2
3
作者 宋广超 张伟 +3 位作者 许瑞霞 赵伟利 刘守仁 甘尚权 《家畜生态学报》 北大核心 2015年第1期18-23,共6页
试验旨在研究骨骼肌中特异表达miR-133前体在不同绵羊群体中的多态,分析其与绵羊骨骼肌发育表型的相关性。采用PCR—SSCP技术对miR-133前体序列在特克赛尔羊、中国美利奴细毛羊、阿勒泰羊和湖羊四种不同产肉性能的绵羊群体进行了多态... 试验旨在研究骨骼肌中特异表达miR-133前体在不同绵羊群体中的多态,分析其与绵羊骨骼肌发育表型的相关性。采用PCR—SSCP技术对miR-133前体序列在特克赛尔羊、中国美利奴细毛羊、阿勒泰羊和湖羊四种不同产肉性能的绵羊群体进行了多态性检测,并分析多态性位点对miR-133前体序列二级结构、二级结构稳定性及加工、成熟的影响。结果表明,miR-133前体序列下游194bp(g.54047535)处检测到A〉G突变,并且该SNP与绵羊的产肉性能存在明显的相关性,在特克赛尔羊中GG是优势基因型,G等位基因频率高达0.86,是中国美利奴细毛羊群体该位点频率的4倍。二级结构的生物信息学预测结果表明,该SNP位点致使miR-133前体的二级结构发生明显改变,自由能值降低3.2kJ/mol。以上结果提示,绵羊miR-133前体序列的SNP(g.54047535)位点可能对miR-133前体的加工成熟具有重要影响,并最终影响绵羊的产肉性能。 展开更多
关键词 primiRNA pre—miRNA miR-133 多态性 骨骼肌 绵羊
在线阅读 下载PDF
miRNA的生物合成过程 预览 被引量:12
4
作者 李伟 金由辛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期 707-711,共5页
MicroRNA(miRNA)是一类真核生物内源性的小分子单链RNA,通常为18~25 nt长,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解或者抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控.近几年来,在动物细胞和植物组织中,上百种miRNA被陆续发现... MicroRNA(miRNA)是一类真核生物内源性的小分子单链RNA,通常为18~25 nt长,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解或者抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控.近几年来,在动物细胞和植物组织中,上百种miRNA被陆续发现.这些小分子调控RNA是从60~200 nt的具有发夹状结构的前体中被切割出来而成熟的,在动物细胞中,miRNA基因的转录初产物(pri-miRMA)很快被一种核糖核酸酶ⅢDrosha加工成为miRNA前体(pre-miRNA),然后由细胞核转运至细胞质中,经另一种核糖核酸酶ⅢDicer识别剪切为成熟miRNA.对这一过程进行了简要的综述,并且对植物miRNA的成熟过程也进行了探讨.对miRNA的生物合成过程的深入了解,将有助于研究这一类起重要调控作用的RNA是如何行使功能的,从而进一步研究其在生长发育及各种疾病中所起的重要作用. 展开更多
关键词 miRNA的成熟 MIRNA miRNA初级转录产物 miRNA前体
在线阅读 下载PDF
植物pri-miRNA转录及加工过程中的重要因子
5
作者 宋家会 蔡强 莫蓓莘 《生命科学》 CSCD 2017年第4期406-413,共8页
MicroRNA(miRNA)是真核生物内源的一类长度为20~24 nt的非编码小RNA,它们通过切割靶标基因mRNA或阻止其翻译在转录后水平调控基因的表达。miRNA广泛参与植物的生长发育、代谢及各类胁迫反应过程,在植物基因表达调控网络中发挥重要作... MicroRNA(miRNA)是真核生物内源的一类长度为20~24 nt的非编码小RNA,它们通过切割靶标基因mRNA或阻止其翻译在转录后水平调控基因的表达。miRNA广泛参与植物的生长发育、代谢及各类胁迫反应过程,在植物基因表达调控网络中发挥重要作用。编码miRNA的MIR基因首先经过DNA依赖的RNA聚合酶Pol II复合体转录形成pri-miRNA,之后pri-miRNA再经过DCL1加工复合体的一系列加工形成成熟的miRNA。现介绍参与植物pri-miRNA转录和加工过程的重要蛋白及其作用方式,并阐述植物miRNA在转录及转录后水平复杂且精密的调控机制。 展开更多
关键词 植物MIRNA MIR基因转录 pri-miRNA加工 蛋白因子
在Hela细胞中验证miRNA-21对TLR4的调控 预览 被引量:1
6
作者 赵婧 岳鹏 +3 位作者 黄家芳 汪玉涛 马婷 陈宝荣 《中国组织工程研究》 北大核心 2015年第2期220-224,共5页
背景:miRNA通过调节特异靶基因的表达,在疾病的发展及预后中起着重要作用。目的:探索miRNA-21在宫颈癌Hela细胞中对TLR4基因的调控关系。方法:通过miR NA靶基因预测网站寻找可能与miR NA-21相互作用的靶基因,利用已构建的携带pri-miR... 背景:miRNA通过调节特异靶基因的表达,在疾病的发展及预后中起着重要作用。目的:探索miRNA-21在宫颈癌Hela细胞中对TLR4基因的调控关系。方法:通过miR NA靶基因预测网站寻找可能与miR NA-21相互作用的靶基因,利用已构建的携带pri-miRNA-21基因重组腺病毒载体,包装并大量扩增病毒感染Hela细胞,检测荧光蛋白的表达水平,提取感染48 h蛋白,通过Western印迹检测TLR4蛋白表达。从蛋白水平验证在Hela细胞中miRNA-21与靶基因TLR4的靶向调控关系。结果与结论:100 MOI的重组腺病毒pAd/pri-miR NA-21、pAd/neg可以成功感染Hela细胞。生物信息学方法显示miRNA-21和TLR4存在可能的结合位点。发现感染pAd/pri-miR NA-21组与对照组pAd/neg及空白组相比,TLR4蛋白的表达量明显降低。证实了miRNA-21可以负调节靶基因TLR4的表达。 展开更多
关键词 组织构建 组织工程 重组腺病毒载体 pri-miRNA-21 TLR4基因 HELA细胞 靶基因
在线阅读 下载PDF
柯萨奇B病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织微小RNA1初始体和连接蛋白43的表达 预览 被引量:1
7
作者 李勇 伍伟锋 +1 位作者 林松 唐少东 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 北大核心 2009年第2期 148-150,共3页
目的观察柯萨奇B病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织微小RNA1初始体(pri—miRNA-1)和连接蛋白43(Cx43)表达变化,探讨病毒性心肌炎(VMC)室性心律失常发生机制。方法40只4周龄雄性Balb/C小鼠随机分为VMC组(n=20)和对照组(n=20)。... 目的观察柯萨奇B病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织微小RNA1初始体(pri—miRNA-1)和连接蛋白43(Cx43)表达变化,探讨病毒性心肌炎(VMC)室性心律失常发生机制。方法40只4周龄雄性Balb/C小鼠随机分为VMC组(n=20)和对照组(n=20)。VMC组小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)Nancy株悬液0.1ml,对照组小鼠腹腔注射不含病毒的RPMII640培养基0.1ml,分别于接种病毒后第14天无痛苦处死全部小鼠并留取心脏。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心室肌组织pri-miRNA-1的表达,免疫组织化学法检测Cx43蛋白水平表达,并进行半定量分析。结果(1)VMC组小鼠心室肌组织pri—miRNA-1表达量明显高于对照组(0.82±0.04VS0.63±0.07,P〈0.01);②VMC组小鼠心室肌组织炎症病灶中变性、坏死周围心肌细胞Cx43表达明显减弱,甚至阴性,分布不规则,Cx43蛋白表达明显低于对照组(0.27±0.01VS0.42±0.02,P〈0.01);③VMC组小鼠心室肌组织的pri—miRNA-1表达量与Cx43蛋白水平呈显著负相关(r=一0.868,P〈0.01)。结论CVB心肌炎小鼠急性期心肌组织pri—miRNA-1表达上调,Cx43蛋白表达下降,miRNA-1可能通过抑制Cx43表达促进室性心律失常的发生。 展开更多
关键词 心血管病学 心肌炎 柯萨奇病毒 小鼠 微小RNA1初始体 连接蛋白43
在线阅读 下载PDF
柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎小鼠心肌组织微小RNA1初始体和连接蛋白43的表达
8
作者 林松 李勇 +1 位作者 伍伟锋 唐少东 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期754-756,共3页
目的观察柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌组织微小RNA1初始体(pri-miRNA-1)和连接蛋白43(Cx43)的表达变化,探讨VMC室性心律失常的发生机制。方法4周龄雄性Balb/c小鼠70只随机分为VMC组40只(14d和28d2个亚组各2... 目的观察柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌组织微小RNA1初始体(pri-miRNA-1)和连接蛋白43(Cx43)的表达变化,探讨VMC室性心律失常的发生机制。方法4周龄雄性Balb/c小鼠70只随机分为VMC组40只(14d和28d2个亚组各20只)和对照组30只(14d和28d2个亚组各15只)。VMC组腹腔注射CVB3Nancy株悬液0.1mL,对照组腹腔注射不含病毒的RPMI1640培养基0.1mL。2组小鼠分别在接种第14、28天无痛苦处死,取心室肌,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其心室肌组织pri—miRNA-1、dicerlmRNA的表达,免疫组织化学法检测其Cx43的表达。结果1.VMC组14d和28d小鼠心窒肌组织pri-miRNA-1表达水平均屁著高于对照组(0.82±0.04vs0.64±0.01,0.79±0.03vs0.62±0.01 Pa〈0.01);2.VMC组14d和28d小鼠心室肌组织dicerl mRNA表达水平均显著高于对照组(0.91±0.03vs0.72±0.02,0.87±0.02vs0.71±0.02Pa〈0.01);3.VMC组小鼠心室肌组织炎性病灶巾变性、坏死周围心肌细胞Cx43表达明显减弱,甚至阴性,分布不规则,VMC组14d和28d亚组Cx43蛋白表达均显著低于对照组(0.27±0.01vs0.42±0.02,0.22±0.02vs0.44±0.02Pa〈0.01);4.VMC组小鼠心事肌组织pri—miRNA—1表达水平与Cx43蛋白水平呈显著负相关(r=-0.798P〈0.01),与dicedmRNA表达水平呈显著正相关(r=0.828P〈0.01)。结论VMC小鼠心肌组织pri-miRNA—1和diced参与了CVB、的发生机制,diced表达升高可能通过促进miRNA-1生成、抑制Cx43的表达促进室性心律失常的发生。 展开更多
关键词 心肌炎 柯萨奇病毒 微小RNA1初始体 连接蛋白43 小鼠
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈