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乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌的实时荧光定量PCR检测方法 预览
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作者 张娜娜 刘洋 +5 位作者 俞漪 赵渝 窦同海 徐琼 段文锋 翁史昱 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期27-32,共6页
目的:为快速准确检测乳酸菌饮料中的嗜酸乳杆菌,建立实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法:根据嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR保守区域设计特异性引物与探针,借助建立的实时荧光定量PCR方法进行特异性、... 目的:为快速准确检测乳酸菌饮料中的嗜酸乳杆菌,建立实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法:根据嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR保守区域设计特异性引物与探针,借助建立的实时荧光定量PCR方法进行特异性、灵敏度、重复性以及抗干扰能力验证,并利用模拟样品对方法进行检验,最后对市售的实际样品进行检测。结果:该方法的特异性较好;方法的绝对灵敏度达到3pg,相对灵敏度达103CFU/mL;重复性检测表明相对标准偏差在2.6%以下。同时进行杂菌干扰实验,在纯基因组水平和培养物水平混合大肠杆菌,扩增均无明显影响,表明建立的方法抗干扰能力较好。利用建立的实时荧光定量PCR方法对模拟样品进行检测并建立标准曲线,得出R2为0.987,线性较好,可进行实际样品的检测。对市售的11份样品进行检测,其中6份含有嗜酸乳杆菌菌株,5份不含嗜酸乳杆菌菌株,标记嗜酸乳杆菌的样品全部检测出嗜酸乳杆菌且含量在5.83×10^2~3.68×10^4CFU/mL之间。结论:建立的实时荧光定量PCR方法可快速、准确地检测出乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 嗜酸乳杆菌 定量 检测
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杨树枯萎病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 预览
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作者 洒荣波 晁强 +2 位作者 王晓辉 隋君康 刘训理 《山东农业科学》 2019年第2期131-135,共5页
为建立荧光定量PCR检测杨树枯萎病的方法和明确前期分离的拮抗菌N6-34对杨树枯萎病致病菌尖孢镰刀菌的作用,本试验采用常规PCR法扩增尖孢镰刀菌的特异性片段,将此片段与载体连接构建质粒,提取质粒DNA在实时荧光定量PCR仪上采用两步法进... 为建立荧光定量PCR检测杨树枯萎病的方法和明确前期分离的拮抗菌N6-34对杨树枯萎病致病菌尖孢镰刀菌的作用,本试验采用常规PCR法扩增尖孢镰刀菌的特异性片段,将此片段与载体连接构建质粒,提取质粒DNA在实时荧光定量PCR仪上采用两步法进行扩增并绘制实时荧光定量PCR标准曲线,同时对杨树进行不同灌根处理(T1:1×106cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和未接N6-34菌株的发酵培养液各20mL;T2:1×106cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和灭活的N6-34菌株发酵培养液各20mL;T3:1×106cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和N6-34菌株的发酵培养液各20mL),并于10、20、30d取样检测杨树根际尖孢镰刀菌数量。结果表明:本研究建立的方法能应用于土传尖孢镰刀菌导致的杨树枯萎病的检测;T1处理的尖孢镰刀菌的数量随处理时间的延长呈先下降后上升的趋势,T2和T3中的尖孢镰刀菌数量则呈下降趋势,表明N6-34能够抑制尖孢镰刀菌。本研究对指导杨树种植和病害预报具有极为重要的应用价值,能够为杨树病害管理提供科学依据。 展开更多
关键词 荧光定量PCR 杨树枯萎病 尖孢镰刀菌 定量检测
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土壤中寄生性杂草弯管列当种子检测体系的建立及应用
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作者 王亚娇 栗秋生 +3 位作者 郑贵银 纪莉景 吴玉星 孔令晓 《植物检疫》 北大核心 2019年第2期19-22,共4页
弯管列当是一种根寄生性杂草,其种子微小,在土壤中极难检测。为了建立土壤中弯管列当种子定量检测体系,本研究扩增了弯管列当的ITS基因,以含ITS基因的阳性质粒为参考构建了标准曲线,并对该标准曲线进行验证。结果表明该方法具有高效、... 弯管列当是一种根寄生性杂草,其种子微小,在土壤中极难检测。为了建立土壤中弯管列当种子定量检测体系,本研究扩增了弯管列当的ITS基因,以含ITS基因的阳性质粒为参考构建了标准曲线,并对该标准曲线进行验证。结果表明该方法具有高效、灵敏的特点,为弯管列当的检测检疫提供高效方法。同时我们从不同地块采集了土壤,通过该方法检测了土壤中弯管列当的种子数量,为弯管列当的发生预测预报提供了依据。 展开更多
关键词 弯管列当 种子 荧光定量PCR 定量检测
单细胞蛋白定量检测方法综述 预览
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作者 李秀锋 范蓓媛 +3 位作者 刘力行 王军波 陈德勇 陈健 《传感器与微系统》 CSCD 2019年第10期1-3,7共4页
单细胞水平的蛋白检测方法能够精细地反映生命事件的发生过程,同时对于少量样本的检测也至关重要。综述了不同类型的单细胞蛋白定量检测方法,包括传统技术如流式细胞术、质谱流式细胞术、酶联免疫斑点检测法和毛细管电泳法,以及基于微... 单细胞水平的蛋白检测方法能够精细地反映生命事件的发生过程,同时对于少量样本的检测也至关重要。综述了不同类型的单细胞蛋白定量检测方法,包括传统技术如流式细胞术、质谱流式细胞术、酶联免疫斑点检测法和毛细管电泳法,以及基于微流控芯片的新技术。比较了这些方法的原理、主要优缺点。与传统方法相比,微流控技术能更好地操纵单细胞,检测更灵敏,在单细胞蛋白检测领域具有更大潜力。 展开更多
关键词 单细胞分析 蛋白检测 定量检测 微流控技术
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超声成像自动检测系统开发 预览 被引量:1
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作者 方震东 范孟豹 +1 位作者 曹丙花 张振林 《仪表技术与传感器》 CSCD 北大核心 2019年第1期68-71,75共5页
采用常规超声检测工件时,检测效率低,无法得到直观的检测结果。为了提高超声检测的检测速度、检测适用范围及灵活性,采用电子扫描、动态闸门、信号去噪及成像算法,结合三轴机械扫描架,研制了超声成像自动检测软硬件系统。采用双晶探头对... 采用常规超声检测工件时,检测效率低,无法得到直观的检测结果。为了提高超声检测的检测速度、检测适用范围及灵活性,采用电子扫描、动态闸门、信号去噪及成像算法,结合三轴机械扫描架,研制了超声成像自动检测软硬件系统。采用双晶探头对4mm厚的碳纤维复合材料试样内分层孔缺陷进行了检测扫查试验,对检测系统的性能进行了初步验证。通过对-6dB法成像矩阵数据进行双线性插值法的方式,对碳纤维复合材料分层孔缺陷进行定量分析,孔缺陷面积定量误差降低了6%~7%,直径定量误差降低了3%~4%,有效提高了缺陷定量精度。试验结果表明所研制的系统能够实现对试件内缺陷信号特征提取及成像,满足检测的要求。 展开更多
关键词 超声成像检测 信号去噪 动态闸门 双线性插值法 缺陷定量
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Fluorescent probe gold nanodots to quick detect Cr(VI) via oxidoreduction quenching process
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作者 Yueqi Zhao Yuanqing Sun +7 位作者 Yingnan Jiang Shanliang Song Tianxin Zhao Yue Zhao Xinyu Wang Baoquan Li Bai Yang Quan Lin 《中国科学:化学英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第1期133-141,共9页
A method is described here for the quickly(<30 s) accurate determination of Cr(Ⅵ)(Cr2O72-), based on fluorescent probes gold nanodots(AuNDs, excitation/emission peaks at 395/604 nm) coated with glutathione(GSH). T... A method is described here for the quickly(<30 s) accurate determination of Cr(Ⅵ)(Cr2O72-), based on fluorescent probes gold nanodots(AuNDs, excitation/emission peaks at 395/604 nm) coated with glutathione(GSH). The fluorescence of the AuNDs responses linearly to Cr(Ⅵ) concentrations, ranging widely from 1 nM to 10 m M with detection limit as low as 0.35 nM. At the same time, the AuNDs is demonstrated highly selective for Cr(Ⅵ) detection over other acid group ions and metal ions without any masking reagent. These make probability for practical use. The quenching mechanism is investigated deeply via fluorescent lifetime, XPS and TEM analysis. Different from most reported quenching explanation of aggregation derived from charge attraction, these results verify the redox reaction between Cr2O72-and sulfhydryl(–S) of GSH. The Au(Ⅰ)–S bonds of AuNDs broke, accompanies with the oxidation of –S to form S–S bonds. As a result, AuNDs cross linked to each other. In the end, the fluorescence quenched. Attractively, the present study provides a new strategy for pollutant detection, such as from harmful Cr(Ⅵ) of Cr2O72-to nontoxic Cr(Ⅲ). 展开更多
关键词 fluorescent probe of Cr (Ⅵ) Au NANODOTS quick and quantitative DETECTION fluorescence QUENCHING mechanism POLLUTANT DETECTION
番茄细菌性斑点病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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作者 柴阿丽 帕提古丽 +4 位作者 郭威涛 石延霞 谢学文 席先梅 李宝聚 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期182-192,共11页
以番茄细菌性斑点病病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv. tomato,Pst)的致病相关基因HrpZ为靶序列,设计了特异性引物Pst3F/Pst3R,能从Pst基因组DNA中特异性扩增出大小为161 bp的目的片段。建立的Pst实时荧光定量PC... 以番茄细菌性斑点病病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv. tomato,Pst)的致病相关基因HrpZ为靶序列,设计了特异性引物Pst3F/Pst3R,能从Pst基因组DNA中特异性扩增出大小为161 bp的目的片段。建立的Pst实时荧光定量PCR检测技术体系的检测灵敏度比普通PCR高1 000倍。利用实时荧光定量PCR检测体系,检测模拟带菌种子中Pst的带菌量,检测下限为4.21 cfu·g^-1;检测人工接种叶片组织中Pst的带菌量,检测到1级发病叶片带菌量为4.15×102 cfu·g^-1。对田间采集的63个番茄细菌性斑点病明显症状和疑似症状样本,分别进行了实时荧光定量PCR、普通PCR和病原菌分离检测,检测到54个样本中含有Pst,3种方法检测结果一致。结果表明,建立的Pst实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点,可以快速准确地定量检测番茄种子和发病组织中Pst的含量,为番茄细菌性斑点病的早期预防和流行监测提供了有效的技术手段。 展开更多
关键词 番茄 丁香假单胞菌番茄致病变种 实时荧光定量PCR 种子检测 组织检测
LIBS检测大宗物流重金属含量的系统设想与实验研究 预览
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作者 侯玉文 王婧璇 王麒齐 《天津科技》 2019年第6期56-59,62共5页
创新性地提出利用激光诱导击穿光谱技术对大宗物流中重金属危险品元素的含量进行检测的系统设计设想,通过查新进行了探索性设计和前期实验室阶段的研究实验,归纳了利用LIBS定量检测大宗物流中重金属元素含量的实验方法,并通过对双脉冲... 创新性地提出利用激光诱导击穿光谱技术对大宗物流中重金属危险品元素的含量进行检测的系统设计设想,通过查新进行了探索性设计和前期实验室阶段的研究实验,归纳了利用LIBS定量检测大宗物流中重金属元素含量的实验方法,并通过对双脉冲及飞秒脉冲等新技术的应用选项实验明确了处理大宗物流中重金属危险品元素含量的路径,对今后的商用仪器研究方向提出了建议。随着LIBS技术的进一步完善,LIBS系统可能成为大宗物流重金属污染和危险品现场检测的有力工具。 展开更多
关键词 激光诱导击穿光谱技术 定量检测 重金属危险品 大宗物流
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支气管定量技术对支气管扩张的自动检测及形态分析
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作者 吴博云 杨卷红 +3 位作者 于楠 郭佑民 田宏哲 任转琴 《实用放射学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1332-1335,共4页
目的探讨三维支气管分割及定量分析技术在支气管扩张诊断中的可行性及应用优势。方法选取2014年6月至2015年3月在西安交通大学第一附属医院诊断为支气管扩张的患者,测量扩张支气管206支。分别使用2种方法检测扩张支气管:(1)CT定量分析软... 目的探讨三维支气管分割及定量分析技术在支气管扩张诊断中的可行性及应用优势。方法选取2014年6月至2015年3月在西安交通大学第一附属医院诊断为支气管扩张的患者,测量扩张支气管206支。分别使用2种方法检测扩张支气管:(1)CT定量分析软件(FACT-Digital lungTM)自动检测各代支气管扩张程度、支气管内直径、分代及所在肺叶;(2)由2位影像医师在同部位观察轴位CT,测量并计算该点支气管与伴行血管内直径比值,当支气管/血管>1,即支气管扩张;当支气管/血管<1,即支气管正常。另选取同一患者、同一叶同代非扩张支气管206支进行对照检测。结果(1)CT定量分析软件与传统手工测量方法比较,2种支气管检测方法所获得的结果具有良好的一致性(r=0.961;P=0.014)。(2)扩张程度>0组,软件自动测量扩张程度与手工测量扩张程度(即支气管与伴行血管管径比值)有相关性(r=0.722;P=0.000)。结论 CT三维支气管扩张自动检测方法具有简便、直观、可量化扩张程度的特点,与以往的非定量方法比较有很好的一致性。 展开更多
关键词 定量分析 支气管扩张 自动检测 可行性
磁性纳米标记检测技术在生物医学即时检测领域的研究进展 预览
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作者 康静茹 杨欣 +2 位作者 张德军 胡军 杨海 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期364-371,共8页
基于磁性纳米材料的磁标记检测技术具有灵敏度高、线性范围广、信号检测便捷等优点。由于生物样品自身磁背景信号极低,相比于光学标记检测技术,磁标记检测技术在蛋白质、核酸、细胞、病原体及生物组织检测中均表现出更高的灵敏度,在生... 基于磁性纳米材料的磁标记检测技术具有灵敏度高、线性范围广、信号检测便捷等优点。由于生物样品自身磁背景信号极低,相比于光学标记检测技术,磁标记检测技术在蛋白质、核酸、细胞、病原体及生物组织检测中均表现出更高的灵敏度,在生物医学即时检测领域展现了良好的应用前景。该文围绕磁性纳米粒在即时检测领域的最新研究进展,重点介绍了其在蛋白质、核酸以及几类病原体检测方面的应用,并对基于磁性纳米粒的即时检测技术发展方向及应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 磁性纳米粒 定量检测 生物医学诊断 即时检测 超顺磁性
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基于权限的Android应用风险评估方法 预览 被引量:1
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作者 卜同同 曹天杰 《计算机应用》 CSCD 北大核心 2019年第1期131-135,共5页
针对Android权限机制存在的问题以及传统的应用风险等级评估方法的不足,提出了一种基于权限的Android应用风险评估方法。首先,通过对应用程序进行逆向工程分析,提取出应用程序声明的系统权限、静态分析的权限以及自定义的权限,和通过动... 针对Android权限机制存在的问题以及传统的应用风险等级评估方法的不足,提出了一种基于权限的Android应用风险评估方法。首先,通过对应用程序进行逆向工程分析,提取出应用程序声明的系统权限、静态分析的权限以及自定义的权限,和通过动态检测获取应用程序执行使用到的权限;然后,从具有恶意倾向的组合权限、“溢权”问题和自定义权限三个方面对应用程序进行量性风险评估;最后,采用层次分析法(AHP)计算上述三个方面的权重,评估应用的风险值。对6245个软件样本进行训练,构建自定义权限数据集和具有恶意倾向的权限组合数据集。实验结果表明,与Androguard相比,所提方法能更精确地评估应用软件的风险值。 展开更多
关键词 Android安全 风险评估 应用权限 量性评估 静态分析 动态检测
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智能手机光谱仪的开发与水中六价铬的定量检测 预览
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作者 秦永乐 张校亮 +1 位作者 谭慷 李晓春 《仪表技术与传感器》 CSCD 北大核心 2019年第7期22-25,66共5页
光谱仪是进行生化检测与光谱分析时所需的基本仪器,近些年来,研究开发小型、便携式的光谱仪已经成为重要的研究方向。设计了基于智能手机的光谱检测方法及装置,该装置以手机内置LED 灯为宽谱光源,以 DVD 光盘聚碳酸酯层的周期性凹槽结... 光谱仪是进行生化检测与光谱分析时所需的基本仪器,近些年来,研究开发小型、便携式的光谱仪已经成为重要的研究方向。设计了基于智能手机的光谱检测方法及装置,该装置以手机内置LED 灯为宽谱光源,以 DVD 光盘聚碳酸酯层的周期性凹槽结构作为衍射光栅,利用智能手机进行光谱分析。以水中 Cr^6+为例,利用显色反应生成紫红色络合物,采用所开发装置结合分光光度法实现了水中Cr^6+的快速定量检测。检测结果与常用的分光光度计结果一致,检测限为0.02 mg/L,达到了国标对饮用水中 Cr^6+含量的检测要求。 展开更多
关键词 光谱仪 智能手机 内置光源 DVD 光栅 六价铬 定量检测
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肺炎支原体核酸定量在儿童下呼吸道感染患者精准诊疗中的价值
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作者 王颖颖 余坚 +3 位作者 章婷婷 陈向南 白伟伟 陈占国 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第18期2177-2180,共4页
目的探讨肺炎支原体核酸(MPDNA)定量检测在儿童下呼吸道感染患者诊断和治疗监测中的价值。方法选取本院2017年9月-2018年5月住院儿童下呼吸道感染患者138例,采用标准化吸痰留取标本,进行MPDNA荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,并对其中13例患儿... 目的探讨肺炎支原体核酸(MPDNA)定量检测在儿童下呼吸道感染患者诊断和治疗监测中的价值。方法选取本院2017年9月-2018年5月住院儿童下呼吸道感染患者138例,采用标准化吸痰留取标本,进行MPDNA荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,并对其中13例患儿进行MPDNA连续监测,从初诊至21d,每7d检测1次MPDNA定量。最后统计分析MP DNA定量在儿童下呼吸道感染诊疗中的拷贝数变化。结果138 例儿童下呼吸道感染的患者中MPNDA阳性患儿121例(87. 7%),其阳性患儿中男女之间与不同年龄段之间DNA定量值差异均无统计学意义(P >0.05)。其中选取的13例阳性患儿,通过大环内酯类抗生素的治疗,除1 d和7 d之间差异无统计学意义(P>0.05),其他进行两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。虽然部分患者在治疗过程中MP DNA定量拷贝数有反复,但最终总体呈下降趋势。结论MPDNA定量在儿童MP感染的治疗监测中具有重要意义,同时规范化的标本取材有助于MP感染患者的精准诊疗。 展开更多
关键词 肺炎支原体 儿童下呼吸道感染 定量检测
水中大肠菌群微滴数字PCR定量检测方法的建立 预览
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作者 马薇 孔义军 +1 位作者 吴伟健 刘桂环 《环境保护科学》 CAS 2019年第1期58-66,共9页
以大肠菌群的lacZ基因为靶基因,建立一种快速、稳定、灵敏、特异的微滴数字聚合酶链式反应(Droplet Digital Polymerase Chain Reaction,ddPCR)定量检测方法。对ddPCR反应体系中试剂浓度、退火温度等条件优化筛选的同时,考察了方法的线... 以大肠菌群的lacZ基因为靶基因,建立一种快速、稳定、灵敏、特异的微滴数字聚合酶链式反应(Droplet Digital Polymerase Chain Reaction,ddPCR)定量检测方法。对ddPCR反应体系中试剂浓度、退火温度等条件优化筛选的同时,考察了方法的线性范围、精密度和定量限。最终确定反应体系中的最佳引物和探针浓度分别为0.2和0.5μmol/L,最佳退火温度为56℃。大肠菌群lacZ基因组DNA浓度范围为3.95~7.80×10^4拷贝(copies)/20μL ddPCR反应液时,方法的线性关系良好(R^2=0.999)。文章所建立的方法可检出每微升单个拷贝数的大肠菌群lacZ基因组DNA,且具有快速测定、灵敏度高、特异性强、重复性良好等特点,为建立水污染早期应急机制提供了重要的参考价值。 展开更多
关键词 大肠菌群 微滴数字PCR 定量检测
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同位素稀释质谱法测定土壤中氨基酸的含量
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作者 张鹏帅 侯捷 +2 位作者 雷雯 杜晓宁 侯静华 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第6期603-607,共5页
建立了同位素稀释质谱法测定土壤中缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸共4种氨基酸含量的检测方法。通过在样品中加入同位素内标试剂——稳定同位素15N标记的氨基酸,经酸解、固相萃取等前处理手段对目标氨基酸进行提取、富集以及衍生化... 建立了同位素稀释质谱法测定土壤中缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸共4种氨基酸含量的检测方法。通过在样品中加入同位素内标试剂——稳定同位素15N标记的氨基酸,经酸解、固相萃取等前处理手段对目标氨基酸进行提取、富集以及衍生化后,利用GC-MS/MS多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果表明,在线性范围内,4种氨基酸的线性相关系数(R2)均大于0.999,加标回收率为92.2%~108%,方法检出限(LOD)为1.4~2.9μg/kg,定量限(LOQ)为5.2~8.8μg/kg。方法高效、重现性好,可用于土壤中氨基酸的定量检测。 展开更多
关键词 土壤中氨基酸 同位素稀释 定量检测 GC-MS/MS
基于蓝光光盘扫描成像技术的高通量生物分子点阵定量检测仪 预览
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作者 任双宝 张校亮 +1 位作者 谭慷 李晓春 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1430-1434,共5页
蓝光光盘不仅可以作为超清电影的存储媒介,而且由于其优良的光学特性和纳米级别的表面平整度,可以替代传统硅片作为生化反应的基底材料,并且结合蓝光光驱的高精度光学读取和伺服系统,可以用于研发新型的高通量分析传感装置。光盘表面制... 蓝光光盘不仅可以作为超清电影的存储媒介,而且由于其优良的光学特性和纳米级别的表面平整度,可以替代传统硅片作为生化反应的基底材料,并且结合蓝光光驱的高精度光学读取和伺服系统,可以用于研发新型的高通量分析传感装置。光盘表面制备的生物反应点阵会对光驱激光束的正常反射形成干扰,从而使得光驱光电探测器接收到的激光强度相应降低,通过采集光盘扫描过程中光电探测器的光强值信号,经蓝光光盘扫描成像分析,实现了对生物分子的定量检测。文中在光盘表面打印不同大小和灰度的喷墨点阵,结果表明该成像技术的分辨率可达100μm,验证了系统高通量检测的特点和定量检测的可行性。在蓝光光盘表面制备了生物反应点阵,经成像分析实现了对链霉亲和素浓度的定量检测,检测限达到0.01 mol/L。 展开更多
关键词 生化传感 蓝光光盘 成像 点阵 定量检测
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基于微滴式和芯片式数字PCR技术的转基因克螟稻成分的定量检测 预览
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作者 邓婷婷 黄文胜 +1 位作者 葛毅强 陈颖 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期311-318,共8页
以转基因克螟稻品系为研究对象,通过大米内源蔗糖磷酸合成酶基因和转基因克螟稻品系特异性序列的绝对拷贝数分析,建立转基因克螟稻成分的双重数字聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)定量分析方法。本研究中转基因克螟稻定... 以转基因克螟稻品系为研究对象,通过大米内源蔗糖磷酸合成酶基因和转基因克螟稻品系特异性序列的绝对拷贝数分析,建立转基因克螟稻成分的双重数字聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)定量分析方法。本研究中转基因克螟稻定量体系中最适DNA添加量在10pg~13ng之间,模板断裂程度、PCR扩增退火温度等因素对定量结果的影响不大。其定量的绝对灵敏度达1copies/μL,可在微滴式和芯片式数字PCR平台上准确检测质量分数在0.1%~100%之间的转基因克螟稻成分,尤其是对低于1%的样品,其定量准确性高于传统的实时荧光PCR方法。本研究建立的转基因克螟稻成分定量分析方法适用性较好,可用于转基因水稻规范化与标准化的定量分析。 展开更多
关键词 转基因大米 克螟稻 定量 数字聚合酶链式反应
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溶剂萃取法检测绝缘油二苄基二硫醚含量研究 预览
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作者 万涛 黄颖 +2 位作者 周挺 黄海波 叶会生 《湖南电力》 2019年第3期5-8,共4页
矿物绝缘油中二苄基二硫醚(DBDS)是最易引起铜线圈腐蚀的物质之一,因此准确检测油中微量DBDS含量具有重要意义。本文比较了异辛烷溶解、乙醇萃取、甲醇萃取和乙腈萃取四种样品前处理方法用于气相色谱质谱联用法(GC-MS)测定矿物绝缘油中... 矿物绝缘油中二苄基二硫醚(DBDS)是最易引起铜线圈腐蚀的物质之一,因此准确检测油中微量DBDS含量具有重要意义。本文比较了异辛烷溶解、乙醇萃取、甲醇萃取和乙腈萃取四种样品前处理方法用于气相色谱质谱联用法(GC-MS)测定矿物绝缘油中的DBDS含量的效果差异,发现甲醇和乙腈萃取法杂质峰显著减少,检测结果更准确。进一步比较了甲醇和乙腈作为萃取剂的回收率和相对标准偏差(RSD),试验结果表明,乙腈用于DBDS检测效果最好。 展开更多
关键词 萃取 腐蚀性硫 气相色谱质谱联用法 二苄基二硫醚 定量检测
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微滴式数字聚合酶链式反应定量检测水产品中溶藻弧菌
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作者 李丹 马丹 +9 位作者 李碧鹰 徐蕾蕊 魏咏新 魏海燕 汪琦 赵晓娟 刘莉 张西萌 付溥博 曾静 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期345-350,共6页
目的建立水产品中溶藻弧菌微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)快速定量检测方法。方法采用SN/T 1870—2016《出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法》中溶藻弧菌的引物探针,建立优化ddPCR反应体系,梯度稀释溶藻弧菌纯培养液,确定dd... 目的建立水产品中溶藻弧菌微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)快速定量检测方法。方法采用SN/T 1870—2016《出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法》中溶藻弧菌的引物探针,建立优化ddPCR反应体系,梯度稀释溶藻弧菌纯培养液,确定ddPCR方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ);通过人工添加试验,比较ddPCR与实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法定量的准确性,以验证ddPCR方法用于检测水产品中溶藻弧菌的可行性。结果所建立的水产品中溶藻弧菌ddPCR检测方法经过溶藻弧菌标准菌株、分离菌株以及其他近源菌株验证,具有良好的特异性;纯培养的LOD和LOQ一致,均为2.2拷贝/反应,相当于110 CFU/ml纯菌液,定值结果与传统平板计数方法相差0.04个对数值。在人工污染模拟试验中ddPCR的定量结果较qPCR更接近理论添加值,检测重复性以及对低浓度样品的检出情况也均优于qPCR。ddPCR对人工污染样品的LOQ可达120拷贝/g。结论溶藻弧菌ddPCR定量检测方法特异性好、灵敏度高、结果准确,可为快速定量检测溶藻弧菌提供参考。 展开更多
关键词 微滴式数字聚合酶链式反应 溶藻弧菌 定量检测
大鼠C6胶质瘤能谱CT多参数量化检测 预览
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作者 刘建莉 李昇霖 +1 位作者 黄晓宇 周俊林 《医学影像学杂志》 2019年第1期127-131,共5页
目的探讨能谱CT多参数分析检测大鼠C6胶质瘤肿瘤细胞增殖活性及邻近脑组织侵袭范围的准确性,为恶性胶质瘤手术导航提供新的动态检测方法。方法15只雄性Wista大鼠右侧基底节区种植C6胶质瘤细胞后观察并记录体征及饮食状况。荷瘤术后第12... 目的探讨能谱CT多参数分析检测大鼠C6胶质瘤肿瘤细胞增殖活性及邻近脑组织侵袭范围的准确性,为恶性胶质瘤手术导航提供新的动态检测方法。方法15只雄性Wista大鼠右侧基底节区种植C6胶质瘤细胞后观察并记录体征及饮食状况。荷瘤术后第12天能谱CT扫描后心脏灌注取脑固定制作病理切片进行HE及ki67染色。在GE公司AW4.6工作站对肿瘤中心层面薄层图像数据后处理分析,测量肿瘤中心、外周及邻近脑组织单能量CT值、能谱曲线斜率及碘含量。应用SPSS 17.0统计学分析软件分析肿瘤不同区域能谱CT各参数检查值与ki67的差异的相关性。结果15只荷瘤鼠1只死亡,1只荷瘤失败,其余13只纳入本研究。能谱CT结果显示瘤体与邻近脑组织在65KeV可获得最佳对比噪声比,肿瘤液化坏死区、实性区、周边区及正常脑组织单能量X线衰减曲线存在显著差异,曲线斜率分别是0.24±0.46、1.81±1.09、0.8±0.43、0.11±0.27(P﹤0.01),65KeV CT值分别是27.2±4.51、103.18±35.48、65.19±13.72、38.07±7.36(P﹤0.01),碘浓度分别是2.41±3.86、32.67±63.27、6.76±3.66、1.06±2.35(P﹤0.05),ki67阳性细胞百分比与曲线斜率、65KeV CT值(P﹤0.01)及碘浓度(P﹤0.05)具有相关性。结论能谱CT单能量图、能谱曲线及碘基图有助于大鼠C6胶质瘤邻近脑组织受侵袭范围的确定;单能量CT值、能谱曲线及碘含量斜率与ki67阳性细胞百分比具有相关性,可反映肿瘤细胞的增殖活性。 展开更多
关键词 能谱CT 大鼠C6胶质瘤 多参数 量化检测 体层摄影术 X线计算机
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