期刊文献+
共找到1,451篇文章
< 1 2 73 >
每页显示 20 50 100
WT1基因在骨髓增生异常综合征患者外同血中的表达及临床意义 预览
1
作者 聂泽强 李晓云 +2 位作者 马爻芳 方敏 鲍杰 《陕西医学杂志》 CAS 2019年第8期977-980,共4页
目的:探讨WT1基因在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的表达情况及WT1基因与MDS发病及病情进展的关系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应检测48例MDS患者,4例MDS-AL患者和10例正常人外周血中WT1基因的表达,并进行分析。结果:①4例MDS-AL患者... 目的:探讨WT1基因在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的表达情况及WT1基因与MDS发病及病情进展的关系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应检测48例MDS患者,4例MDS-AL患者和10例正常人外周血中WT1基因的表达,并进行分析。结果:①4例MDS-AL患者的WT1阳性率100%,10例正常人的WT1阳性率0%,48例MDS患者WT1阳性率为27.1%。MDS组、MDS-AL组、对照组两两相比有统计学差异(P<0.05)。②将MDS按IPSS分组,WT1mRNA的表达水平在高危与中危及低危组之间差异均有统计学意义(P<0.05),中危与低危组、中危Ⅰ组与中危Ⅱ组之间无统计学差异(P>0.05)。WT1基因表达水平与IPSS评分值有相关性(r=0.74,P<0.05)。③WT1基因表达水平与原始细胞百分数密切相关(r=0.66,P<0.05)。④动态随访2例MDS患者,随着疾病进展,WT1的表达水平逐渐升高。结论:WT1基因在各类型MDS均高表达。WT1基因的表达与疾病的进展呈正相关,WT1基因表达情况与原始细胞百分比及IPSS评分均有明显相关性。其可作为临床上对MDS病情的高危评估,预测病情变化和动态监测治疗效果及判断预后的重要指标之一。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 急性白血病 国际预后评分系统 WT1基因 逆转录-聚合酶链反应 相关性
在线阅读 免费下载
肿瘤抑制因子候选基因1在肝癌组织的表达及其临床意义 被引量:1
2
作者 陈皓 曹胜利 +6 位作者 张嘉凯 王智慧 唐红卫 陶晓坤 王纳 钱慧宇 张增梅 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期1102-1104,共3页
目的探讨肿瘤抑制因子候选基因1(TUSC1)在肝细胞肝癌患者中的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测TUSC1在58例肝细胞肝癌患者中的表达,分析其表达与患者临床生物学特征的关系。结果TUSC1 m... 目的探讨肿瘤抑制因子候选基因1(TUSC1)在肝细胞肝癌患者中的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测TUSC1在58例肝细胞肝癌患者中的表达,分析其表达与患者临床生物学特征的关系。结果TUSC1 mRNA表达水平在肝癌中低于相应的癌旁组织表达量(0.31±0.02比0.98±0.03,P=0.002),并且TUSC1 mRNA的表达量与患者的分化程度、肝内转移及门静脉癌栓(PVTT)等病理因素差异有统计学意义(χ^2=17.030、15.730、18.770,P=0.002、0.001、0.001)。而Western blot结果显示,TUSC1在癌组织中蛋白表达量显著低于癌旁组织(120.21±12.35比1 000.31±30.12,P=0.001),其表达水平与患者的病理分化程度、肝内转移和门静脉癌栓明显相关(χ^2=4.613、4.650、6.470,P=0.032、0.031、0.011)。TUSC1 mRNA的表达与其蛋白表达具有明显的相关性(χ^2=10.084, P=0.001)。结论TUSC1在肝癌中表达降低,与患者病理分化程度、肝内转移和门静脉癌栓相关。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤抑制因子候选基因 反转录-聚合酶链反应 蛋白免疫印迹
Zika病毒感染的实验室诊断 预览 被引量:3
3
作者 宋志刚 王蔚 胡芸文 《微生物与感染》 2016年第3期137-143,共7页
Zika病毒是一种新现虫媒黄病毒,近期在美洲暴发流行,并有向全球扩散的趋势,已成为国际关注的突发公共卫生事件。Zika病毒感染的临床诊断主要依据实验室检测结果。本文就Zika病毒的核酸检测、抗原和抗体检测、病毒分离鉴定等方面进行综述。
关键词 Zika病毒 实验室检测 反转录-聚合酶链反应
在线阅读 下载PDF
细胞角蛋白20、基质金属蛋白酶-7、-9在中低位直肠癌下切缘微转移的表达及相关性 被引量:7
4
作者 蒋松松 陈刚 +2 位作者 郑黎明 陈浩 祁旺 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1993-1996,共4页
目的检测中低位直肠癌下切缘细胞角蛋白20(CK20)、基质金属蛋白酶(MMP)-7、MMP-9mRNA的表达,探讨下切缘微转移与临床病理特征的相关性及安全的下切缘距离。方法选取行全直肠系膜切除术的中低位直肠癌患者共50例,采用反转录-聚合... 目的检测中低位直肠癌下切缘细胞角蛋白20(CK20)、基质金属蛋白酶(MMP)-7、MMP-9mRNA的表达,探讨下切缘微转移与临床病理特征的相关性及安全的下切缘距离。方法选取行全直肠系膜切除术的中低位直肠癌患者共50例,采用反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测直肠癌标本下切缘CK20、MMP-7、MMP-9mRNA的表达。收集相关临床资料,随访肿瘤复发情况及时间。结果下切缘微转移组下切缘距肿瘤下缘的距离为(1.47±0.40)cm,下切缘无微转移组下切缘距肿瘤下缘的距离为(2.86±1.20)cm,差异有统计学意义(P〈0.05)。距离超过2.2cm的下切缘未见微转移。下切缘微转移组肿瘤的TNM分期、淋巴脉管侵犯、神经侵犯、淋巴结转移率及环周切缘(CRM)阳性率较无微转移组更高(P〈0.05),肿块直径更大(P〈0.05);两组之间KRAS、NRAS基因突变及微卫星DNA不稳定性差异无统计学意义(P〉0.05)。结论直肠癌下切缘的微转移是术后复发的重要因素,中低位直肠癌患者的安全下切缘距离至少应为2.5cm。临床上对于分期较晚、病灶较大的患者,下切缘应该保证更安全的切缘距离。 展开更多
关键词 直肠癌 微转移 反转录-聚合酶链反应
F框/WD-40域蛋白7在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量:1
5
作者 余海 凌亭生 +3 位作者 施瑞华 束庆文 李杨 檀祝利 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期347-351,共5页
目的检测F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)组织中的表达及临床意义,初步探讨其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7蛋白在90例食管鳞癌和20例相应的癌旁正常组织及40例食... 目的检测F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)组织中的表达及临床意义,初步探讨其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7蛋白在90例食管鳞癌和20例相应的癌旁正常组织及40例食管上皮内瘤变组织中的表达情况,采用Western blot法及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中FBXW7蛋白和mRNA表达水平,分析FBXW7表达与食管鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。结果在食管鳞癌组织、癌旁正常组织、食管低级别上皮内瘤变组织和高级别上皮内瘤变组织中,FBXW7蛋白的阳性表达率分别为40.0%(36/90)、85.0%(17/20)、77.3%(17/22)和33.3%(6/18),差异有统计学意义(P〈0.001)。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中,FBXW7蛋白表达水平分别为0.283±0.055和0.657±0.091,差异有统计学意义(P〈0.001)。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中,FBXW7 mRNA相对表达水平分别为0.863±0.962和1.813±0.512,差异有统计学意义(P〈0.05)。单因素分析显示,FBXW7蛋白表达与肿瘤TNM分期、分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关(均P〈0.05)。Cox多因素分析显示,仅淋巴结转移为食管鳞癌患者的独立预后因素(P〈0.05)。90例患者中,FBXW7蛋白阳性表达和阴性表达患者的5年生存率分别为67.6%和39.3%,差异有统计学意义(P=0.01)。结论FBXW7mRNA及其蛋白在食管鳞癌组织和食管高级别上皮内瘤变组织中的表达显著减低,且其低表达与食管鳞癌患者的不良预后密切相关。作为一种肿瘤抑制基因,FBXW7可能对食管鳞癌的发生、发展和转移起重要作用,有可能成为反映食管鳞癌患者病情严重程度及判断其预后的重要分子生物学标志物。 展开更多
关键词 食管肿瘤 F框/WD-40域蛋白7 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应 预后
中东呼吸综合征冠状病毒的实验室检测技术 预览 被引量:1
6
作者 王蔚 田棣 胡芸文 《微生物与感染》 2015年第4期215-220,共6页
中东呼吸综合征(MERS)是一种由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染所致的急性呼吸道传染病,其临床诊断需依据实验室病原学检测结果。本文就MERS-CoV的核酸检测、抗原和抗体检测、病毒分离鉴定及基因变异监测等方面的最新研究进... 中东呼吸综合征(MERS)是一种由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染所致的急性呼吸道传染病,其临床诊断需依据实验室病原学检测结果。本文就MERS-CoV的核酸检测、抗原和抗体检测、病毒分离鉴定及基因变异监测等方面的最新研究进展作一综述。 展开更多
关键词 中东呼吸综合征冠状病毒 实验室诊断 反转录.聚合酶链反应
在线阅读 下载PDF
SFRP4和DKK1在宫颈鳞癌中的表达及临床病理意义 预览 被引量:2
7
作者 李秀芬 侯安丽 +3 位作者 李振环 方淑芹 张雅丽 徐亚威 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1063-1067,共5页
目的:研究分泌型卷曲相关蛋白(SFRP4)及Wnt信号通路抑制因子DKK1(Dickkopf-1)在宫颈鳞癌中的表达及临床病理意义。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测66例宫颈鳞癌组织中及26例正常宫颈组织中DKK1和SFRP4 mRNA的表达水平... 目的:研究分泌型卷曲相关蛋白(SFRP4)及Wnt信号通路抑制因子DKK1(Dickkopf-1)在宫颈鳞癌中的表达及临床病理意义。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测66例宫颈鳞癌组织中及26例正常宫颈组织中DKK1和SFRP4 mRNA的表达水平;采用免疫组织化学法检测66例宫颈鳞癌组织中及26例正常宫颈组织中DKK1和SFRP4蛋白的表达水平。应用SPSS17.0统计学软件进行统计学分析,研究DKK1和SFRP4的表达与宫颈鳞癌患者主要临床病理指标的关系。结果宫颈鳞癌SFRP4表达高于正常宫颈(P〈0.01)。宫颈鳞癌DKK1表达低于正常宫颈(P〈0.05)。DKK1和SFRP4在宫颈鳞癌中的表达与临床病理分期、组织分化程度、有无淋巴转移及浸润深度有关(P均〈0.05)。DKK1与SFRP4在宫颈鳞癌中的表达呈负相关(P〈0.01)。结论 Wnt信号通路上游因子SFRP4和DKK1在宫颈鳞癌发生中起关键作用,并且与宫颈鳞癌的临床病理指标密切相关。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 DKK1 SFRP4 免疫组织化学法 逆转录聚合酶链式反应
在线阅读 免费下载
二氧化碳浓度对A549细胞活性和肺泡表面活性蛋白C表达的影响 被引量:1
8
作者 彭丹晖 黄英明 +4 位作者 老启芳 覃韬 谢显龙 黄冰 黎阳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2761-2763,共3页
目的 观察CO2培养浓度对A549细胞活性,合成和分泌肺泡表面活性蛋白C(SP-C)的影响.方法 A549细胞按CO2培养浓度分为:A组(5%CO2);B组(10% CO2);C组(18% CO2).各组在CO2培养24、36、48 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;反... 目的 观察CO2培养浓度对A549细胞活性,合成和分泌肺泡表面活性蛋白C(SP-C)的影响.方法 A549细胞按CO2培养浓度分为:A组(5%CO2);B组(10% CO2);C组(18% CO2).各组在CO2培养24、36、48 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SP-C mRNA表达;酶联免疫吸附法检测细胞培养液中SP-C浓度.结果 (1)与A组比较,B组G1峰和凋亡率在24、36、48 h,差异无统计学意义(P>0.05);C组与B组比在24h(68.0±6.2比55.0±3.8,P<0.01)、36 h(71.0±2.0比63.0±1.3)出现G1峰升高(P<0.05),并于36 h(10.0±1.2比6.9±1.9)、48 h(12.8 ±2.6比7.3±2.0)凋亡增加(P<0.05).(2)3组SP-C mRNA表达在24h比较差异无统计学意义(P>0.05);与A组比较,B组在36 h(0.32±0.02比0.24±0.02)(P<0.01)、48 h(0.24±0.03比0.16±0.03)SP-C mRNA表达升高(P<0.05),而C组均降低(0.17 ±0.04、0.10 ±0.02) (P <0.05).(3) SP-C 3组浓度在24h比较差异无统计学意义(P>0.05);与A组比较,B组SP-C浓度在36 h(31.00±2.00比21.00±0.85)(P<0.01),48 h(42.00±1.02比26.00±0.97)升高(P<0.05);C组SP-C浓度在48 h(20.00±0.51比26.00±0.97)降低(P<0.05),24、36 h比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 A549细胞活性和SP-C的表达受CO2培养浓度的影响;随着CO2浓度的升高,其作用由上调转为抑制. 展开更多
关键词 A549 反转录-聚合酶链反应 肺泡表面活性蛋白C
Pokemon在胃癌组织中的表达及其临床意义 预览 被引量:1
9
作者 霍华 陈红星 王萍 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期418-422,共5页
目的检测Pokemon基因在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的表达水平,并分析其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学Eli Vision法检测75例胃癌组织和35例癌旁正常胃黏膜组织中Pokemon蛋白的表达。应用反转录-聚合酶链反应(RT-... 目的检测Pokemon基因在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的表达水平,并分析其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学Eli Vision法检测75例胃癌组织和35例癌旁正常胃黏膜组织中Pokemon蛋白的表达。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测30例新鲜胃癌组织及相应癌旁正常胃黏膜组织中Pokemon mRNA的表达。结果免疫组织化学分析结果显示,在胃癌和癌旁正常胃黏膜组织中,Pokemon蛋白的阳性表达率分别为78.7%(59/75)和34.3%(12/35),差异具有统计学意义(P〈0.05);RT-PCR结果显示,30例新鲜胃癌组织中Pokemon mRNA的表达水平显著高于相应癌旁正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P〈0.05);胃癌组织中Pokemon的表达与浸润深度、临床分期和淋巴结转移有关(P〈0.05)。结论 Pokemon在胃癌的发生、发展和侵袭转移中具有重要作用,可能成为胃癌治疗的有效靶点。 展开更多
关键词 POKEMON 胃癌 反转录-聚合酶链反应 免疫组织化学
在线阅读 下载PDF
PTTG 基因在非霍奇金淋巴瘤患者中表达的研究 预览 被引量:1
10
作者 董华丽 李大启 +2 位作者 陈萍 邵建华 赵红玉 《辽宁医学院学报》 CAS 2014年第2期6-8,I0003共4页
目的:研究垂体瘤转化基因( pituitary tumor-transforming gene, PTTG)在淋巴瘤患者中的表达,探讨其与淋巴瘤发生的关系及临床意义。方法采用RT-PCR方法检测32例非霍奇金淋巴瘤( non-Hodgkin's Lymphoma, NHL)及10例慢性淋巴... 目的:研究垂体瘤转化基因( pituitary tumor-transforming gene, PTTG)在淋巴瘤患者中的表达,探讨其与淋巴瘤发生的关系及临床意义。方法采用RT-PCR方法检测32例非霍奇金淋巴瘤( non-Hodgkin's Lymphoma, NHL)及10例慢性淋巴结炎患者骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell, BMMNC)中PTTG 基因的表达。结果32例NHL患者有18例(56.3%)存在PTTG基因的表达,其中外周T细胞淋巴瘤有55.6%(5/9例)、弥漫大B细胞淋巴瘤有56.5%(13/23例)。 NHL患者PTTG基因的表达水平明显高于慢性淋巴结炎患者(P<0.05),外周T细胞淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤患者PTTG基因的表达水平差异无统计学意义( P>0.05)。结论 PTTG基因的过度表达可能和淋巴瘤的发生发展有关。 展开更多
关键词 淋巴瘤 非霍奇金 垂体瘤转化基因 逆转录聚合酶链反应 基因表达
在线阅读 下载PDF
去整合素-金属蛋白酶17mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
11
作者 刘宏斌 杨其昌 +3 位作者 沈屹 朱燕 张晓娟 陈浩 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期361-365,共5页
目的探讨去整合素,金属蛋白酶17(ADAMl7)mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达,及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例食管鳞癌组织及其对应的正常食管黏膜组织中ADAMl7mRNA的表达... 目的探讨去整合素,金属蛋白酶17(ADAMl7)mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达,及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例食管鳞癌组织及其对应的正常食管黏膜组织中ADAMl7mRNA的表达量,采用免疫组化SP法检测80例食管鳞癌及其对应的正常食管黏膜组织中ADAMl7蛋白的表达水平,采用Logrank检验和Cox比例风险模型进行预后生存分析。结果ADAMl7mRNA在食管鳞癌及其对应的正常食管黏膜组织中的表达量分别为0.937±0.241和0.225±0.077,差异有统计学意义(P〈0.01)。ADAMl7蛋白在食管鳞癌及其对应的正常食管黏膜组织中的阳性表达率分别为66.2%(53/80)和6.2%(5/80),差异有统计学意义(P〈0.01)。ADAMl7mRNA和蛋白表达与食管鳞癌淋巴结转移和TNM分期有关(P〈0.05),与患者性别、年龄和组织学分级无关(P〉0.05)。ADAMl7蛋白表达与表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达呈正相关(P〈0.01)。淋巴结转移、TNM分期、ADAMl7和EGFR蛋白表达可作为影响食管鳞癌患者预后的独立指标(均P〈0.05)。结论ADAMl7mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中高表达,其在食管鳞癌发生和侵袭转移中有重要作用,对预测食管鳞癌患者的预后有一定价值。 展开更多
关键词 食管肿瘤 去整合素-金属蛋白酶17 逆转录聚合酶链反应 预后
陕西省健康儿童肠道病毒的分离与定型 被引量:2
12
作者 关蓉晖 李平 +5 位作者 刘西珍 司源 赵汉民 王发强 李鹂 陈立 《中国疫苗和免疫》 CAS 2013年第3期214-216,共3页
目的对陕西省健康儿童肠道病毒(Enterovirus,EV)感染情况进行分析,为EV所引起疾病的预防与控制提供参考。方法按世界卫生组织《脊髓灰质炎实验室操作手册》规程进行病毒分离,用逆转录-聚合酶链反应扩增分离到的病毒VP1编码区基因片段... 目的对陕西省健康儿童肠道病毒(Enterovirus,EV)感染情况进行分析,为EV所引起疾病的预防与控制提供参考。方法按世界卫生组织《脊髓灰质炎实验室操作手册》规程进行病毒分离,用逆转录-聚合酶链反应扩增分离到的病毒VP1编码区基因片段,并进行核苷酸序列测定和分析,以鉴定EV的型别。结果对健康儿童159份粪便标本进行病毒分离,其中34份病毒分离阳性,阳性率21.38%。在阳性标本中,埃柯病毒(Enteric Cytopathogenic Human Orphan Virus,ECHO;引起细胞病变的人肠道孤儿病毒)7型(ECHO7)11份,占32.35%;柯萨奇病毒(Coxsackie Virus,CV)B组5型(CVB5)5份,占14.71%;ECHO14、CVB3各3份,各占8.82%;CVA92份,占5.88%;ECHO30、ECHO13各1份,各占2.94%;另外8株病毒未能确定型别。结论陕西省健康儿童中ECHO7感染率最高,且不同地区所分离的EV型别不同,增加了对EV所引起的疾病进行预防与控制的难度。 展开更多
关键词 肠道病毒 病毒分离 逆转录-聚合酶链反应
兜兰DEFICIENS(DEF)-和GLOBOSA(GLO)-like基因的克隆及表达分析 预览 被引量:6
13
作者 李冬梅 吕复兵 +3 位作者 朱根发 操君喜 李伟锋 孙映波 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 215-224,共10页
以‘同色兜兰’品种为材料,采用RT-PCR和RACE技术获得了DEFjcIENs(DEF)-和GLDBosA(GLO)-like基因的cDNA全长,命名为PcDEF和PcGLO,并用半定量RT-PCR和实时PCR研究了PfDEF和PcGL0在花芽发育过程和不同组织部位的表达特性。结果表明... 以‘同色兜兰’品种为材料,采用RT-PCR和RACE技术获得了DEFjcIENs(DEF)-和GLDBosA(GLO)-like基因的cDNA全长,命名为PcDEF和PcGLO,并用半定量RT-PCR和实时PCR研究了PfDEF和PcGL0在花芽发育过程和不同组织部位的表达特性。结果表明,PcDEF和PcGL0的全长eDNA分别为1039bp和934bp,分别编码224和210个氨基酸;蛋白比对表明,PcDEF和PcGL0蛋白都具有典型MADS-box蛋白的MADS和K结构域;蛋白同源性分析显示,PeDEF和PcGLO与已登录的其它兰科植物的DEF/AP3和GLO/PI蛋白的相似性分别在75%-96%和87%-98%;系统进化树分析表明,PeDEF和PeGLO分别属于B类MADS-box蛋白家族的AP3和PI亚家族。表达分析显示,PcDEF和PcGLO在花芽发育中均有表达,PcDEF在成熟花、唇瓣和花瓣中的表达量高,在蕊柱、萼片、苞叶和根中次之,在花茎和叶中较低,在子房中几乎不表达;PcGLo在各组织中均有不同丰度的表达。 展开更多
关键词 兜兰 MADS-BOX基因 DEFICIENS基因 GLOBOSA基因 RACE 进化分析 RT-PCR
在线阅读 下载PDF
惠州马铃薯卷叶病毒病原分子鉴定及序列分析 被引量:2
14
作者 陈兆贵 施招婉 陈静敏 《作物杂志》 CSCD 北大核心 2012年第4期45-48,共4页
对广东省惠州市疑似感染马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)的病株毒源进行分子生物学鉴定,为广东省马铃薯卷叶病的防治提供参考。依据CP基因设计的一对特异引物,以马铃薯总RNA为模板,应用RT-PCR技术,成功扩增出336bp的DNA... 对广东省惠州市疑似感染马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)的病株毒源进行分子生物学鉴定,为广东省马铃薯卷叶病的防治提供参考。依据CP基因设计的一对特异引物,以马铃薯总RNA为模板,应用RT-PCR技术,成功扩增出336bp的DNA片段。用BLAST对序列进行同源性分析,用Clustal X构建PLRV的聚类图。结果表明:4个惠州PLRV不同分离物的DNA序列和氨基酸结构具有高度同源性,惠州PLRV分离物与国内外13个PLRV分离物具有高度同源性。广东省惠州市的疑似病株确定为感染PLRV的马铃薯病株。 展开更多
关键词 马铃薯 卷叶病毒 RT-PCR
兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因的克隆及其表达特性 预览 被引量:1
15
作者 李冬梅 操君喜 +3 位作者 朱根发 吕复兵 孙映波 王真 《中国农学通报》 CSCD 2012年第28期203-210,共8页
克隆同色兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因DFR,分析其序列特征,了解其在不同组织部位的表达情况。采用RT-PCR和RACE技术从花中克隆DFR的全长cDNA,用生物信息学方法分析序列特征,并用半定量RT-PCR研究其在不同组织的表达。分离到DFR,该cDN... 克隆同色兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因DFR,分析其序列特征,了解其在不同组织部位的表达情况。采用RT-PCR和RACE技术从花中克隆DFR的全长cDNA,用生物信息学方法分析序列特征,并用半定量RT-PCR研究其在不同组织的表达。分离到DFR,该cDNA全长1267bp,具有1个1074bp的完整开放阅读框,编码357个氨基酸。序列分析表明,该DFR蛋白含有1个NADB_Rossmann superfamily保守结构域,1个NADP(H)结合域和1个底物特异性结合域,其与文心兰、石斛兰和大花蕙兰等的DFR同源性在75%~80%。系统进化树显示,该DFR蛋白与兰科植物的DFR蛋白亲缘关系比较近。半定量RT-PCR表明,该DFR在成熟花和营养叶中的表达量最高,在子房、苞叶、萼片和花瓣中的表达量相当,在唇瓣中的表达量次之,在蕊柱中的表达量较唇瓣中的低,在花茎中的表达量最低,在根中几乎检测不到。原核表达结果表明,该DFR在大肠杆菌中获得表达。从兜兰中克隆到花色代谢途径中的关键酶基因DFR,该基因可能参与调控花色素的合成。 展开更多
关键词 兜兰 二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因 RT-PCR 基因克隆 表达分析
在线阅读 下载PDF
pcDNA3.1/Cx43真核表达质粒的构建及其在人神经胶质瘤U251细胞中的稳定过表达 预览 被引量:1
16
作者 李嘉杰 闻海兵 +2 位作者 邹树峰 严剑 洪涛 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期 884-887,共4页
目的建立稳定过表达pcDNA3.1/连接蛋白43(Cx43)重组质粒的人神经胶质瘤U251细胞系。方法设计人Cx43的引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从低表达Cx43的U251细胞中扩增出目的片段,双酶切后定向连入pcDNA3.1载体,构建pcDNA3.1/Cx4... 目的建立稳定过表达pcDNA3.1/连接蛋白43(Cx43)重组质粒的人神经胶质瘤U251细胞系。方法设计人Cx43的引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从低表达Cx43的U251细胞中扩增出目的片段,双酶切后定向连入pcDNA3.1载体,构建pcDNA3.1/Cx43真核表达质粒,经酶切、PCR、测序检测构建的正确性。采用脂质体转染法将重组质粒转入U251细胞,G418筛选出稳定转染的细胞系,采用RT-PCR、Western blot分别检测稳定转染pcDNA3.1/Cx43重组质粒的U251细胞中Cx43基因、蛋白的表达水平。结果酶切、PCR及测序表明pcDNA3.1/Cx43重组质粒构建成功,筛选获得稳定过表达Cx43的U251细胞。结论构建了pcDNA3.1/Cx43真核表达质粒及稳定过表达Cx43的U251细胞株,为下一步以Cx43为靶标进行人神经胶质瘤的基因治疗研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 转染 质粒 连接蛋白43 逆转录聚合酶链反应
在线阅读 下载PDF
Influence of all-trans retinoic acid(ATRA) on the expression of NANOG in Glioma cell lines 预览
17
作者 Liu Weixian Yi Fuxin 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期 625-629,F0002,共6页
Objective To investigate the effects of all-trans retinoic acid(ATRA) on the expression of NANOG in glioma cell lines.Methods Each cell line was divided into the experimental group which was treated with ATRA for 5 da... Objective To investigate the effects of all-trans retinoic acid(ATRA) on the expression of NANOG in glioma cell lines.Methods Each cell line was divided into the experimental group which was treated with ATRA for 5 days,and the control group which was cultured normally without ATRA treatment.Immunocytochemistry and RT-PCR were adopted to detect the expression of NANOG at protein and mRNA level among the three kinds of cell lines.Results Positive rates of NANOG protein in glioma cell lines SHG-44,U87 MG and U251 in control groups were(65.5±3.0)%,(64.8±8.0)% and(64.5±1.2)%,respectively,and the difference was not statistically significant(F=0.190,P=0.829).NANOG mRNA of the three cell lines in the relative content were 0.636 8±0.039 9,0.642 1±0.063 7,0.651 6±0.044 4,and the difference was not statistically significant(F=0.427,P=0.662).However,5 days after application of ATRA-induced NANOG protein in the three cell lines,the positive rates of NANOG protein of experimental groups were(36.5±7.3)%,(35.5±7.9)%,(35.2±6.1)%,respectively,compared with the control groups,the differences were statistically significant(FSHG-44=259.1,FU87=129.5,FU251= 431.8,PSHG-44=0.0,PU87=0.0,PU251=0.0),and the relative level of NANOG mRNA in these groups were 0.458 3±0.079 1,0.255 1±0.079 3 and 0.333 1±0.054 0,respectively,compared with the control groups,the difference was significant(FSHG-44=77.8,FU87=277.9,FU251=398.1,PSHG-44=0.0,PU87=0.0,PU251=0.0).Conclusion NANOG which highly expressed in glioma cell line SHG-44,U87 MG and U251 can be reduced by ATRA. 展开更多
关键词 《重庆医学》 期刊 编辑部 编辑工作
在线阅读 下载PDF
一株鸡新城疫强毒株的分离及生物学特性鉴定 预览
18
作者 马亚珍 兰玲 王涛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期68-70,共3页
本试验应用一步法RT-PCR和荧光RT-PCR方法分离到一株新城疫病毒,并对此毒株F基因进行了克隆、测序和分析,发现F蛋白裂解位点氨基酸序列为112Arg-Arg-Gln-Lys-Arg-Phe117,与新城疫病毒强毒株特征相符,从分子水平上证明了本试验所分离毒... 本试验应用一步法RT-PCR和荧光RT-PCR方法分离到一株新城疫病毒,并对此毒株F基因进行了克隆、测序和分析,发现F蛋白裂解位点氨基酸序列为112Arg-Arg-Gln-Lys-Arg-Phe117,与新城疫病毒强毒株特征相符,从分子水平上证明了本试验所分离毒株为新城疫强毒株。结合GenBank中其他新城疫参考株F基因序列进行比较发现,本试验所分离毒株与目前流行的强毒株Taiwan/95、SKY/03、SGM/01的F基因裂解位点氨基酸序列完全一致,而与传统疫苗毒La Sota株的裂解位点则不同。 展开更多
关键词 新城疫 反转录聚合酶链式反应 融合蛋白 强毒株
在线阅读 下载PDF
ATP-结合相关基因mRNA在耐药性癫痫患者脑组织中的表达 被引量:3
19
作者 韩璞 王学峰 王亮 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第33期2314-2318,共5页
目的研究耐药性癫痫患者脑组织中ATP-结合相关基因mRNA的表达,了解其生物学意义。方法按照病理随机法,从我们已建立的耐药性癫痫术后脑组织库(患者来自2003年6月至2004年12月期间重庆医科大学附属第一医院及广州三九脑科医院神经外... 目的研究耐药性癫痫患者脑组织中ATP-结合相关基因mRNA的表达,了解其生物学意义。方法按照病理随机法,从我们已建立的耐药性癫痫术后脑组织库(患者来自2003年6月至2004年12月期间重庆医科大学附属第一医院及广州三九脑科医院神经外科手术病人)中抽取40例脑组织标本组成试验组,对照组8例,6例来自重庆市2003年12月至2004年12月因交通事故意外死亡及其他非自然死亡后按有关法律规定需进行尸解的自然人,2例为脑出血微创手术中所取标本。在基因芯片扫描获预期结果基础上,运用RT—PCR检测ATP.结合相关的CDC2L5、ROCK1、STCH、OXSR1、ABCB6基因在耐药性癫痫患者及对照组脑组织中的表达。结果基因芯片扫描显示与ATP-结合相关的5个基因CDC2L5、ROCKI、STCH、OXSR1、ABCB6在耐药性癫痫患者脑组织中表达较对照组明显增加(CyS/Cy3比值分别为CDC2152.159,ROCK12.538,STCH2.106,OXSRI3.791,ABCB62.583),RT-PCR检测获得相同的结果。结论脑细胞中ATP一结合相关基因表达增强提示患者脑部存在能量代谢异常,其所导致的突触可塑性改变和神经元凋亡在耐药性癫痫的发生及发展中可能起着重要作用。 展开更多
关键词 寡核苷酸序列分析 逆转录聚合酶链反应 癫痫 能量代谢
RT-PCR法检测尿脱落细胞中XIAP的表达在膀胱癌诊断中的价值 预览
20
作者 杨光天 赵海岩 +3 位作者 温峰 杨晋 刘毅 方毅 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第12期 2477-2479,共3页
目的:比较膀胱癌患者尿液脱落细胞中XIAP表达的RT-PCR检测法和常规尿脱落细胞病理学检测在膀胱癌诊断中的临床价值。方法:采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测51例膀胱尿路上皮癌患者尿液脱落细胞中XIAP-mRNA的表达,同时行常规... 目的:比较膀胱癌患者尿液脱落细胞中XIAP表达的RT-PCR检测法和常规尿脱落细胞病理学检测在膀胱癌诊断中的临床价值。方法:采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测51例膀胱尿路上皮癌患者尿液脱落细胞中XIAP-mRNA的表达,同时行常规尿脱落细胞病理学检测,20例非肿瘤人员作为对照组。结果:实验组51例尿脱落细胞XIAP-mRNA RT-PCR检测阳性27例(53%),尿脱落细胞学病理学检测阳性12例(24%),对照组20例尿脱落细胞XIAP-mRNA检测阳性1例(5.0%),对照组尿脱落细胞病理学检测阳性0例(0%)。实验组RT-PCR检测膀胱尿路上皮癌患者尿脱落细胞中XIAP表达的敏感性高于尿脱落细胞病理学检测,差异有极显著统计学意义(P〈0.01),实验组RT-PCR检测膀胱尿路上皮癌患者尿中XIAP表达的敏感性显著高于非肿瘤对照组,差异有极显著统计学意义(P〈0.01)。结论:膀胱尿路上皮癌患者尿脱落细胞中XIAP表达的RT-PCR检测法较常规尿脱落细胞病理学检测更敏感,临床上作为膀胱癌的筛选方法,有一定的临床价值。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 XIAP 诊断 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 73 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈