期刊文献+
共找到463篇文章
< 1 2 24 >
每页显示 20 50 100
野葛特异性PCR检测方法的建立与应用研究 预览
1
作者 张丽 刘良科 +3 位作者 郑丽平 刘秤利 刘虹 覃瑞 《中南民族大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第2期204-209,共6页
一个物种特有的DNA序列可以开发成能够识别该物种及其加工产品的标记.为寻找野葛(Pueraria lobata)特有的DNA序列,建立野葛特异性PCR检测方法,通过对GenBank中野葛基因信息的检索分析,筛选出了同源序列少特异性强的野葛查耳酮合成酶基... 一个物种特有的DNA序列可以开发成能够识别该物种及其加工产品的标记.为寻找野葛(Pueraria lobata)特有的DNA序列,建立野葛特异性PCR检测方法,通过对GenBank中野葛基因信息的检索分析,筛选出了同源序列少特异性强的野葛查耳酮合成酶基因作为研究对象.对该基因的特定区域设计引物,建立了野葛特异性定性PCR检测方法.利用该方法对野葛14个不同居群的DNA进行PCR扩增,均能扩增出226 bp的片段.而用相同引物分别对20种其他植物的DNA进行扩增均未出现特异性扩增产物.PCR灵敏度实验结果表明该方法的检测灵敏度达到0.02 ng基因组DNA,对市场上的葛根产品进行检测结果表明该方法可以有效鉴定葛根产品中是否含有野葛成分.该野葛特异性PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于野葛成分的检测与鉴定. 展开更多
关键词 野葛 特异性PCR 查尔酮合成酶基因 成分鉴定
在线阅读 免费下载
基于ITS2序列位点特异性PCR鉴别广藿香及其混伪品
2
作者 吴文如 安鑫 +2 位作者 来慧丽 杨璐 付菲 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期897-900,共4页
目的建立一种简便、准确鉴别广藿香及其混伪品的方法。方法通过对GenBank数据库收录的广藿香及其混伪品的ITS2序列进行对比分析,根据差异位点设计位点特异性鉴别引物,并优化PCR条件,对广藿香新鲜植物、干燥药材、含广藿香中成药及其混... 目的建立一种简便、准确鉴别广藿香及其混伪品的方法。方法通过对GenBank数据库收录的广藿香及其混伪品的ITS2序列进行对比分析,根据差异位点设计位点特异性鉴别引物,并优化PCR条件,对广藿香新鲜植物、干燥药材、含广藿香中成药及其混伪品进行扩增和检测。结果广藿香新鲜植物、干燥药材及含广藿香中成药均扩增出162 bp条带,而广藿香的混伪品均无条带,且该方法灵敏度高,检出限可达0.3 g·L^-1。结论所建立的位点特异性PCR方法可实现广藿香的准确鉴别,具有操作简便、稳定可靠、应用范围广的优点。 展开更多
关键词 广藿香 ITS2 位点特异性PCR 分子鉴定
龟甲的特异性PCR及高分辨率熔解曲线技术鉴别方法研究 预览
3
作者 张雪艳 袁媛 +2 位作者 胡启跳 蒋超 方成武 《中国现代中药》 CAS 2019年第9期1215-1220,共6页
目的:建立高效、稳定的龟甲Testudinis Carapax et Plastrum DNA鉴别方法。方法:利用龟甲的特异性聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)鉴别方法和高分辨率熔解曲线(HRM)鉴别方法,根据龟甲及其混伪品COI序列差异,寻找特异性... 目的:建立高效、稳定的龟甲Testudinis Carapax et Plastrum DNA鉴别方法。方法:利用龟甲的特异性聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)鉴别方法和高分辨率熔解曲线(HRM)鉴别方法,根据龟甲及其混伪品COI序列差异,寻找特异性单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点设计鉴别引物,并对PCR反应条件进行优化;并使用通用引物扩增COI区域,产物直接进行HRM分析。结果:当退火温度为60 ℃,循环次数为35,使用设计的龟甲特异性鉴别引物GJ-360.F/R进行PCR扩增,经扩增均获得约360 bp特异性鉴别条带,混伪品皆无条带;使用通用引物RonM-tl和Vl-tl进行PCR扩增,产物使用HRM分析,龟甲药材在模板DNA质量浓度为3.5~87.9 ng ·μL^-1 、引物浓度为0.2 μmol · L ^-1 、镁离子浓度为2.0 mmol · L ^-1 的条件下,龟甲药材标准熔解曲线为双峰,其 T m均值分别为(83.15±0.76)、(87.53±0.69 )℃。结论:特异性PCR和HRM均可作为一种快速准确鉴别龟甲正伪品的鉴定方法。 展开更多
关键词 龟甲 特异性聚合酶链式反应 分子鉴定 高分辨率熔解曲线
在线阅读 下载PDF
羚羊角塞特异性PCR鉴别方法研究 预览
4
作者 蒋超 金艳 +2 位作者 袁媛 黄璐琦 赵玉洋 《世界中医药》 CAS 2018年第2期252-255,共4页
目的:为解决中药羚羊角塞与羚羊角相比因失去"通天眼"等传统鉴别特征而鉴别困难的问题,建立准确鉴别鉴定羚羊角塞的方法。方法:通过比对羚羊角塞基原动物赛加羚羊与其7种常见混伪品的细胞色素C氧化酶亚基I(Cytochrome coxidase I,... 目的:为解决中药羚羊角塞与羚羊角相比因失去"通天眼"等传统鉴别特征而鉴别困难的问题,建立准确鉴别鉴定羚羊角塞的方法。方法:通过比对羚羊角塞基原动物赛加羚羊与其7种常见混伪品的细胞色素C氧化酶亚基I(Cytochrome coxidase I,COI)序列,根据差异位点设计出仅扩增赛加羚羊DNA的特异性鉴别引物。结果:进行PCR时,当退火温度为64℃,循环数为33个时,仅羚羊角塞正品扩增获得约300 bp大小的条带,混伪品无条带。结论:该方法可作为准确有效检测待检样品是否来源于赛加羚羊的方法,用于羚羊角类样品的DNA鉴别。 展开更多
关键词 特异性PCR 分子鉴定 羚羊角塞 中药鉴定
在线阅读 下载PDF
粪肠球菌Enterococcus faecalis EC-12的万古霉素耐药基因检测 预览
5
作者 刘洋 张欣 +4 位作者 陈建国 梁寒峭 程池 伊地知哲生 大盛達也 《食品与发酵工业》 CSCD 北大核心 2018年第3期226-229,共4页
对粪肠球菌Enterococcus faecalis EC-12的万古霉素耐药基因进行了筛查。通过PCR方法,以7种典型肠球菌万古霉素耐药基因(vanA、vanB、vanC1、vanC2/C3、vanD、vanE和vanG)进行特异性扩增,结果均为阴性。采用PCR方法检测万古霉素耐药... 对粪肠球菌Enterococcus faecalis EC-12的万古霉素耐药基因进行了筛查。通过PCR方法,以7种典型肠球菌万古霉素耐药基因(vanA、vanB、vanC1、vanC2/C3、vanD、vanE和vanG)进行特异性扩增,结果均为阴性。采用PCR方法检测万古霉素耐药肠球菌简便、高效、准确。 展开更多
关键词 粪肠球菌 万古霉素 耐药基因 PCR
在线阅读 免费下载
特异性PCR方法鉴别鳖甲药材和饮片 被引量:1
6
作者 程素倩 袁媛 +3 位作者 刘富艳 蒋超 金艳 赵玉洋 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第23期4569-4574,共6页
鳖甲为临床常用的动物药材,炮制加工后鳖甲药材及饮片形态特征丢失,难以鉴别。为建立高效稳定的鳖甲DNA鉴别方法,该研究将SDS法与柱纯化相结合,使用通用引物进行PCR扩增和测序,并根据鳖甲及其混伪品序列差异,寻找特异性SNP位点设计了鉴... 鳖甲为临床常用的动物药材,炮制加工后鳖甲药材及饮片形态特征丢失,难以鉴别。为建立高效稳定的鳖甲DNA鉴别方法,该研究将SDS法与柱纯化相结合,使用通用引物进行PCR扩增和测序,并根据鳖甲及其混伪品序列差异,寻找特异性SNP位点设计了鉴别引物,对PCR反应条件进行优化,并进行适用性及准确性考察。当退火温度为62℃,循环次数为35,使用设计的鳖甲特异性鉴别引物Biejia-272.F/R进行PCR扩增,鳖甲药材、饮片及醋鳖甲均扩增获得约300 bp的特异性鉴别条带,混伪品无条带。该方法可作为一种快速准确鉴别鳖甲正伪品的鉴定方法。 展开更多
关键词 鳖甲 醋鳖甲 特异性PCR 分子鉴定
光慈菇药材的特异性PCR鉴定
7
作者 赵群 刘枫 +4 位作者 宋向文 袁媛 黄璐琦 赵玉洋 韩邦兴 《中药材》 北大核心 2017年第7期1540-1546,共7页
目的:研究光慈菇基原植物老鸦瓣及其混伪品特异性PCR鉴定的可行性。方法:基于ITS序列构建光慈菇及其混伪品的系统发育树,并在对ITS序列分析的基础上,为光慈菇设计了一对特异性PCR引物LYB-CP2s/LYB-CP2a,优选扩增条件,用于区别光慈菇... 目的:研究光慈菇基原植物老鸦瓣及其混伪品特异性PCR鉴定的可行性。方法:基于ITS序列构建光慈菇及其混伪品的系统发育树,并在对ITS序列分析的基础上,为光慈菇设计了一对特异性PCR引物LYB-CP2s/LYB-CP2a,优选扩增条件,用于区别光慈菇及其混伪品。结果:在系统发育树中光慈菇聚类为一个单系。通过对PCR反应的退火温度、循环次数和DNA模板用量进行优化,并对不同型号的PCR仪和Taq酶进行考察,分别获得光慈菇的特异性PCR反应程序。在PCR产物中,正品出现目的条带,而混淆品不出现条带。结论:特异性PCR鉴别方法稳定性高,能够有效地区别光慈菇与其混伪品。 展开更多
关键词 老鸦瓣 ITS 特异性PCR 鉴定
PCR联用HPLC快速筛选野生冠菌素生产菌
8
作者 王春燕 胡堂路 +3 位作者 姜峰 谭伟明 李召虎 段留生 《农业生物技术学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期1870-1877,共8页
冠菌素(coronatine,COR)是由丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)某些致病变种产生的一种新型植物生长调节剂。建立冠菌素生产野生菌快速检测方法对于丰富其菌种资源、推进冠菌素的研究和应用具有重要意义。本研究根据冠菌素合成相... 冠菌素(coronatine,COR)是由丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)某些致病变种产生的一种新型植物生长调节剂。建立冠菌素生产野生菌快速检测方法对于丰富其菌种资源、推进冠菌素的研究和应用具有重要意义。本研究根据冠菌素合成相关功能基因cor S、cor R设计2对特异性引物,利用PCR技术及高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)法从32株野生菌中筛选冠菌素产素菌。结果表明,设计的特异性引物在以冠菌素产生菌模式菌为模板时能特异性扩增出目的片段,分别为850bp(cor S)和450 bp(cor R),以非产素参考菌株为模板时不能扩出此片段,具有较好的特异性;用该PCR方法成功从32株野生菌中筛选获得3株冠菌素产素候选菌,经HPLC复筛后,其中2株发酵产物检出冠菌素,其产量分别为6.5和2.1 mg/L。与传统鉴定方法相比,特异PCR与HPLC联用的方法在野生冠菌素产素菌的检测筛选中更快捷、更高效,可用于大批量野生菌的快速筛选,发现产率更高的菌种资源并进行进一步的工程菌构建,为生物调节剂冠菌素的工业化生产和规模化的农业应用提供支持。 展开更多
关键词 冠菌素生产菌 特异PCR 高效液相色谱(HPLC) 快速筛选
基于ITS序列位点特异性PCR的酸枣仁及其混伪品的鉴别 预览 被引量:2
9
作者 李桂林 宋雅迪 +3 位作者 吕振晖 刘春晖 李佳 张夏楠 《中国现代中药》 CAS 2016年第12期1566-1570,共5页
目的:基于ITS序列建立酸枣仁及其市场混伪品的分子鉴定方法。方法:收集酸枣仁及其常见混伪品理枣仁、枳椇子、紫荆子、兵豆,提取总DNA,基于ITS序列设计引物并进行PCR扩增,对扩增产物进行测序,用Bio Edit分析软件进行序列比对,针对变... 目的:基于ITS序列建立酸枣仁及其市场混伪品的分子鉴定方法。方法:收集酸枣仁及其常见混伪品理枣仁、枳椇子、紫荆子、兵豆,提取总DNA,基于ITS序列设计引物并进行PCR扩增,对扩增产物进行测序,用Bio Edit分析软件进行序列比对,针对变异位点用Primer Premier 5.0设计特异性鉴别引物,进行PCR反应并考察反应条件。结果:ITS序列可以用于酸枣仁及其易混淆品种的鉴别研究,在位点特异性PCR反应条件考察中,DNA模板用量范围应为0.7-2.1 ng·μL^-1,退火温度在59℃时特异性最佳,实验建立的方法对不同Taq酶和PCR仪具有普遍适应性。结论:研究设计的位点特异性引物在一定条件下的PCR反应中,酸枣仁能扩增出66 bp的条带,而其他混伪品不能扩增出条带,从而实现了酸枣仁与其混伪品的快速、准确鉴别。 展开更多
关键词 酸枣仁 ITS 特异性PCR 分子鉴定
在线阅读 下载PDF
PCR方法快速鉴别绞股蓝与乌蔹莓 预览 被引量:2
10
作者 魏艺聪 陈建雄 +2 位作者 黄泽豪 车苏容 梁一池 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2016年第3期265-267,共3页
建立绞股蓝与乌蔹莓2种中药相互鉴别的特异性PCR方法,利用SYBR Green I染料法建立对绞股蓝与乌蔹莓的快速鉴别方法。采集不同产地的绞股蓝与乌蔹莓各9份,通过对其叶绿体DNA中trnL-F片段进行扩增、测序,进行多重序列比对后,根据其变异位... 建立绞股蓝与乌蔹莓2种中药相互鉴别的特异性PCR方法,利用SYBR Green I染料法建立对绞股蓝与乌蔹莓的快速鉴别方法。采集不同产地的绞股蓝与乌蔹莓各9份,通过对其叶绿体DNA中trnL-F片段进行扩增、测序,进行多重序列比对后,根据其变异位点设计相互鉴别的特异性引物,建立特异PCR鉴别方法,并通过加入SYBR Green I染料法建立对2种中药进行快速检测方法,本研究建立了对绞股蓝与乌蔹莓2种中药进行分子鉴别方法,并建立了荧光快速检测方法。 展开更多
关键词 绞股蓝 乌蔹莓 特异性PCR 荧光检测
在线阅读 免费下载
一株新型家兔肠炎沙门氏菌的分离鉴定及防治 预览 被引量:2
11
作者 范志宇 魏后军 +7 位作者 仇汝龙 胡波 宋艳华 陈萌萌 徐为中 王辉 薛家宾 王芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期1367-1371,共5页
针对山东省某兔场发生以仔兔脾脏肿大、母兔流产为特征的传染病,本研究对发病濒死兔进行细菌分离,利用16S rRNA基因扩增技术、特异性PCR技术和生化试验对致病细菌进行鉴定,并进行了药敏试验和自制疫苗效力试验。分离菌株16S rRNA基因序... 针对山东省某兔场发生以仔兔脾脏肿大、母兔流产为特征的传染病,本研究对发病濒死兔进行细菌分离,利用16S rRNA基因扩增技术、特异性PCR技术和生化试验对致病细菌进行鉴定,并进行了药敏试验和自制疫苗效力试验。分离菌株16S rRNA基因序列与肠炎沙门氏菌相似度大于99.0%,培养特性和生化特性符合肠炎沙门氏菌特性。分离菌株特异性PCR产物序列与肠炎沙门氏菌sef A基因的同源性为99.3%~100.0%,因此将其命名为Salmonella SD/2016。动物回归试验成功复制出该病并分离到目的细菌。自制疫苗安全性良好,对断奶幼兔能提供免疫保护。 展开更多
关键词 肠炎沙门氏菌 16S rRNA基因扩增技术 特异性PCR
在线阅读 下载PDF
基于特异性PCR和荧光检测技术快速鉴定艾纳香 预览 被引量:1
12
作者 赵丹 周涛 +3 位作者 袁媛 肖承鸿 江维克 康传志 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期952-956,共5页
为建立快速准确的艾纳香分子鉴定方法。采取筛选艾纳香及其混伪品基因组DNA的提取方法,针对艾纳香特异性位点设计引物,优化PCR扩增条件,荧光检测扩增产物。结果表明碱裂解法更适于艾纳香基因组DNA的提取;叶绿体基因(tDNA)特异引... 为建立快速准确的艾纳香分子鉴定方法。采取筛选艾纳香及其混伪品基因组DNA的提取方法,针对艾纳香特异性位点设计引物,优化PCR扩增条件,荧光检测扩增产物。结果表明碱裂解法更适于艾纳香基因组DNA的提取;叶绿体基因(tDNA)特异引物能特异性扩增艾纳香DNA,其扩增产物荧光检测呈绿色,混伪品无反应发生。试验结果显示该法简化了分子鉴定过程,省时节力,且结果准确可靠,可作为艾纳香植物和药材的鉴定方法。 展开更多
关键词 艾纳香 特异性PCR 荧光检测
在线阅读 免费下载
基于ITS2序列SNP位点鉴定白及药材及其混伪品 被引量:6
13
作者 赵丹 周涛 +2 位作者 江维克 肖承鸿 康传志 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期3573-3578,共6页
为建立白及药材的分子标记鉴定方法,该文提取白及及其混伪品药材的基因组DNA,利用PCR技术扩增r DNA ITS2片段,片段经双向测序、排序、比对,构建邻接树,查找SNP位点。结果显示,ITS2序列不仅能够有效地区分白及与其混伪品,而且存在可用作... 为建立白及药材的分子标记鉴定方法,该文提取白及及其混伪品药材的基因组DNA,利用PCR技术扩增r DNA ITS2片段,片段经双向测序、排序、比对,构建邻接树,查找SNP位点。结果显示,ITS2序列不仅能够有效地区分白及与其混伪品,而且存在可用作白及、黄花白及与其混伪药材鉴别的SNP位点。针对标记白及药材的SNP位点设计引物,通过筛选引物和优化特异性扩增条件后,获取引物BJ59-412F,BJ59-412R,HHBJ-225R在同一扩增条件下,可有效扩增白及、黄花白及,其产物长度分别约为350,520 bp,而混伪品则无PCR条带产生。该文所述引物和建立的反应条件可成功将白及、黄花白及与其混伪品药材进行同步鉴定,操作快速、简捷,结果可靠,可作为白及药材的快速分子鉴定方法。 展开更多
关键词 白及药材 RDNA ITS2 SNP位点 特异性PCR
应用特异PCR快速鉴定微生物肥料中4种乳酸菌 被引量:3
14
作者 杨小红 曹凤明 +5 位作者 关大伟 冯瑞华 陈慧君 李俊 沈德龙 马鸣超 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期674-680,共7页
【目的】植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)和德氏乳杆菌(L.delbrueckii)是微生物肥料生产中常用的乳酸菌,它们表型特征相似,若采用传统方法鉴定则费时费力,... 【目的】植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)和德氏乳杆菌(L.delbrueckii)是微生物肥料生产中常用的乳酸菌,它们表型特征相似,若采用传统方法鉴定则费时费力,为准确、快速地鉴定这些种,建立种特异PCR方法。【方法】利用NCBI中Primer—BLAST(引物设计和特异性检验工具),以GenBank数据库中上述菌种的recA和gyrB为靶基因,设计和筛选种特异性引物从而建立相应特异PCR鉴定方法。【结果】经过乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、片球菌属(Pediococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、短芽孢杆菌属(Brevibacillus)和假单胞菌属(Pseudomonas)7个属24个种共40株标准菌株的实验验证,4个目标种分别扩增出唯一的目的产物,而其他种均无目的扩增产物。采用建立的4种特异PCR方法对产品中分离的16株乳杆菌进行鉴定,结果与16S rDNA序列分析、Biolog鉴定结果一致。【结论】建立的特异PCR鉴定方法均具有较高的种内通用性和种间特异性,可快速、准确的用于微生物制剂中植物乳杆菌、德氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌的检测和鉴定,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 特异PCR 特异引物 乳酸菌 鉴定 微生物肥料
中间型高温放线菌特异PCR快速鉴别方法的应用 预览
15
作者 张明娟 姚粟 +4 位作者 李辉 刘洋 信春晖 许玲 程池 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期60-63,共4页
根据中间型高温放线菌的gyrB基因设计了中间型高温放线菌的特异性引物,建立了快速筛选中间型高温放线菌菌种的特异PCR方法,并将其应用于芝麻香型白酒高温大曲中的中间型高温放线菌筛选。结果表明,所设计的特异性引物对中间型高温放... 根据中间型高温放线菌的gyrB基因设计了中间型高温放线菌的特异性引物,建立了快速筛选中间型高温放线菌菌种的特异PCR方法,并将其应用于芝麻香型白酒高温大曲中的中间型高温放线菌筛选。结果表明,所设计的特异性引物对中间型高温放线菌具有较高的特异性,可以快速鉴别中间型高温放线菌菌种,并成功从芝麻香型白酒高温大曲中快速筛选获得中间型高温放线菌,与传统的菌种鉴定方法相比,具有高效、灵敏、便捷及成本低廉等显著优点。 展开更多
关键词 特异PCR 中间型高温放线菌 快速鉴别
在线阅读 免费下载
一种快速鉴别普通高温放线菌的特异PCR方法 预览
16
作者 张明娟 姚粟 +4 位作者 李辉 刘洋 信春晖 许玲 程池 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期64-66,共3页
普通高温放线菌(Thermoactinomyces vulgaris)具有产生多种耐热酶的能力,在淀粉深加工、皮革制造、高温堆肥生产以及分子生物学等领域中均有重要应用,应用常规技术鉴别费时费力,无法满足普通高温放线菌筛选及其应用研究的要求,有必要... 普通高温放线菌(Thermoactinomyces vulgaris)具有产生多种耐热酶的能力,在淀粉深加工、皮革制造、高温堆肥生产以及分子生物学等领域中均有重要应用,应用常规技术鉴别费时费力,无法满足普通高温放线菌筛选及其应用研究的要求,有必要建立一套快速、准确的鉴别方法。该研究根据普通高温放线菌的gyr B基因分别设计了普通高温放线菌的特异性引物,建立了快速筛选普通高温放线菌的特异PCR方法。实验结果表明所设计的特异性引物对普通高温放线菌具有较高的特异性,可以快速鉴别普通高温放线菌,与传统的菌种鉴定方法相比,具有高效、灵敏、便捷及成本低廉等显著优点。 展开更多
关键词 特异PCR 普通高温放线菌 快速鉴别
在线阅读 免费下载
太子参药材的快速分子鉴定 被引量:9
17
作者 赵丹 周涛 +3 位作者 江维克 袁媛 肖承鸿 郑伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期3689-3694,共6页
为建立一种简便快捷的太子参分子鉴定方法,对太子参药材及其混伪品的rDNA—ITS片段进行比对分析,找出特异性片段,设计太子参鉴别引物,并优选扩增条件,扩增产物经100×SYBR GreenI染色后紫外光下观察。结果显示,PCR扩增反应液... 为建立一种简便快捷的太子参分子鉴定方法,对太子参药材及其混伪品的rDNA—ITS片段进行比对分析,找出特异性片段,设计太子参鉴别引物,并优选扩增条件,扩增产物经100×SYBR GreenI染色后紫外光下观察。结果显示,PCR扩增反应液(包括DNATaq聚合酶预混液5.5μ,Tzs-2F,Tzs-2R各10pmol,DNA模板20~80ng,双重灭菌蒸馏水加至25μL)经95℃预变性1min,95℃变性5s,56℃退火延伸15s,30个循环,72℃后延伸30s后,在扩增产物中加入l曲100×SYBRGreenI混匀后于紫外光下呈绿色荧光的为太子参,混伪品无绿色荧光出现。40min内即可完成DNA提取、扩增等整个鉴定过程。该方法能特异性扩增太子参DNA,紫外光下肉眼观察即可鉴定药材的真伪,且操作简捷、结果准确、利于推广,可为快速鉴定中药材的真伪提供参考。 展开更多
关键词 太子参 分子鉴定 特异性PCR SYBR Green I
浙贝母特异性PCR鉴定方法研究 被引量:10
18
作者 李敏 黄龙妹 +1 位作者 赵欣 陈强 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1754-1757,共4页
目的利用特异性引物对浙贝母Fritillaria thunbergii进行特异性PCR鉴定。方法回收RAPD扩增筛选到的浙贝母分子标记ZB1基因,将其连接进入T-载体克隆并测序。根据测序结果设计一对特异性引物P2/P3,以贝母基因组DNA为模板进行特异性PCR扩... 目的利用特异性引物对浙贝母Fritillaria thunbergii进行特异性PCR鉴定。方法回收RAPD扩增筛选到的浙贝母分子标记ZB1基因,将其连接进入T-载体克隆并测序。根据测序结果设计一对特异性引物P2/P3,以贝母基因组DNA为模板进行特异性PCR扩增。结果特异性PCR鉴定结果为浙贝母在约750 bp处出现特异性条带,其他贝母品种则未出现条带。结论浙贝母特异性PCR鉴定方法操作简单,准确、灵敏、重复性好,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 浙贝母 RAPD 分子鉴定 特异性PCR 分子标记
发酵谷物中产L-赖氨酸益生菌的筛选与鉴定 预览 被引量:5
19
作者 骆超超 高学军 +4 位作者 王青竹 于微 刘晓飞 卢志勇 乔彬 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期232-235,共4页
为了扩展高产L-赖氨酸菌种在食品、饲料中的应用与提高微生物发酵生产L-赖氨酸的安全性,从面包、麻花、馒头、发面饼、大列巴、黏豆包发酵谷物的生面团及米酒、白酒曲中分离培养出66株产L-赖氨酸益生菌菌株。将这些菌株进行培养、发酵,... 为了扩展高产L-赖氨酸菌种在食品、饲料中的应用与提高微生物发酵生产L-赖氨酸的安全性,从面包、麻花、馒头、发面饼、大列巴、黏豆包发酵谷物的生面团及米酒、白酒曲中分离培养出66株产L-赖氨酸益生菌菌株。将这些菌株进行培养、发酵,并利用高效液相色谱技术检测其发酵液中L-赖氨酸的含量,筛选出发酵液富含L-赖氨酸的菌种两株。最后利用16S rDNA分析及Blast分析、特异性引物PCR技术鉴定出这两株菌为肠膜明串球菌ATCC8293和德氏乳杆菌ATCC BAA-365。其发酵液中L-赖氨酸含量分别为52.33、46.09g/L,较其他菌种相对较高。 展开更多
关键词 发酵谷物 L-赖氨酸 益生菌 高效液相色谱 16S RDNA PCR
在线阅读 下载PDF
犬源环孢子虫PCR检测方法的建立
20
作者 岳彩玲 李国清 +4 位作者 程家林 高振永 刘霞 朱海波 张萍 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1128-1131,共4页
为了建立犬源环孢子虫的PCR检测方法,根据该环孢子虫18SrDNA基因序列,设计1对特异性引物;通过阳性参照摸索出该检测方法的最佳反应条件,进行了特异性和敏感性试验;并对临床样品进行了检测。结果显示,该PCR检测方法能特异性地扩增出犬源... 为了建立犬源环孢子虫的PCR检测方法,根据该环孢子虫18SrDNA基因序列,设计1对特异性引物;通过阳性参照摸索出该检测方法的最佳反应条件,进行了特异性和敏感性试验;并对临床样品进行了检测。结果显示,该PCR检测方法能特异性地扩增出犬源环孢子虫18SrDNA中379bp的片段,与牛源环孢子虫、柔嫩艾美耳球虫、人隐孢子虫、蓝氏贾第虫、刚第弓形虫、毛首线虫、大片吸虫、犬弓首蛔虫等8种虫体基因组DNA无交叉反应;最低能检测到84fg的阳性参照DNA,检测的157份临床样品中8份为阳性,比传统镜检方法多出3份。结果表明,建立的PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可用于犬环孢子虫的临床检测。 展开更多
关键词 环孢子虫 特异PCR
上一页 1 2 24 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈