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拟南芥AtTERT基因特性分析及其对盐与过氧化氢胁迫的响应
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作者 王杨 孙玉萍 +5 位作者 董琦 杨颖 刘颖 于婷乔 吴晓飞 卢存福 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期581-592,共12页
端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase, TERT)是真核细胞中具有逆转录酶活性的核糖核蛋白复合物-端粒酶(telomerase)的主要组成成分。拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtTERT是第1个被克隆的植物端粒酶逆转录酶基因。为了明确A... 端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase, TERT)是真核细胞中具有逆转录酶活性的核糖核蛋白复合物-端粒酶(telomerase)的主要组成成分。拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtTERT是第1个被克隆的植物端粒酶逆转录酶基因。为了明确AtTERT的结构和功能特点,本研究利用生物信息学和软件对AtTERT的理化性质和蛋白质结构等进行了系统分析,探讨了不同物种间TERT的亲缘关系;同时对盐和氧化胁迫下端粒酶活性和AtTERT基因表达模式进行分析。结果表明:AtTERT属于不具有信号肽的亲水性蛋白,未发现明显的跨膜结构域。AtTERT磷酸化位点有125个,其中丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸位点分别为87、28和10个。无规则卷曲和α-螺旋是AtTERT二级结构的主要结构元件。保守结构域为端粒酶RNA结合功能域(telomerase RNA binding motif, TRBD)和逆转录酶功能域(telomerase reverse transcriptase motifs, RT)。端粒酶活性变化与AtTERT表达对盐与过氧化氢胁迫反应一致,均呈现先升高后降低的趋势。该研究结果为研究植物TERT的结构功能积累了新的资料。 展开更多
关键词 拟南芥 端粒酶逆转录酶(TERT) 生物信息学 非生物胁迫 端粒酶活性
长期负性情绪积累肝气郁结对轻度认知功能障碍患者端粒酶活性的影响
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作者 李宁 詹向红 +1 位作者 刘永 侯俊林 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1671-1674,共4页
目的:探讨长期负性情绪积累肝气郁结与外周血单核细胞(PBMC)端粒酶活性的关系及在轻度认知功能障碍(MCI)形成过程中的影响。方法:采用问卷调查法筛选40~65岁肝气郁结型MCI患者,按照同性别、同年龄段、相同文化程度进行1∶1匹配;采用蒙... 目的:探讨长期负性情绪积累肝气郁结与外周血单核细胞(PBMC)端粒酶活性的关系及在轻度认知功能障碍(MCI)形成过程中的影响。方法:采用问卷调查法筛选40~65岁肝气郁结型MCI患者,按照同性别、同年龄段、相同文化程度进行1∶1匹配;采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)等评估两组认知功能,采用艾森克人格问卷(EPQ)N维度量表评估两组被试情绪稳定性倾向,采用酶联免疫吸附法检测两组被试的PBMC端粒酶活性。结果:与正常组比较,MCI组MoCA量表总分及视空间与执行、注意、语言、抽象、延迟回忆得分均显著降低(P<0.05),EPQ量表N维度得分显著升高(P<0.05),PBMC端粒酶活性显著降低(P<0.01)。结论:长期负性情绪肝气郁结可造成人体端粒酶活性降低,这可能是引发患者认知功能下降的机制之一。 展开更多
关键词 肝气郁结 蒙特利尔认知评估量表 艾森克人格问卷 端粒酶活性
基于阳离子共轭聚合物荧光共振能量转移结合杂交链式反应信号扩增检测端粒酶活性 预览
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作者 周晓毓 赵建伟 +1 位作者 马贵敏 贾红霞 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1006-1013,共8页
检测端粒酶活性对肿瘤、癌症的早期诊断,以及开发以端粒酶为靶标分子的抗肿瘤、抗癌药物具有重要意义。本研究基于阳离子共轭聚合物Poly[(9,9-bis(6'-N,N,N-trimethylammonium)hexyl)fluorenylene phenylene(PFP)与荧光染料SYBRGree... 检测端粒酶活性对肿瘤、癌症的早期诊断,以及开发以端粒酶为靶标分子的抗肿瘤、抗癌药物具有重要意义。本研究基于阳离子共轭聚合物Poly[(9,9-bis(6'-N,N,N-trimethylammonium)hexyl)fluorenylene phenylene(PFP)与荧光染料SYBRGreenI(SG)之间的荧光共振能量转移,建立了一种简单快速的端粒酶活性检测方法。当端粒酶存在时,引物探针被延伸,生成具有-(GGTTAG)n重复序列的DNA。然后通过链霉亲合素与生物素的特异性作用将端粒酶延伸产物连接在磁性微球上。加入与端粒酶延伸产物匹配的探针-(CTAACC)2。端粒酶延伸产物形成双链结构之后加入SG,SG能够特异性的嵌入到DNA双链结构中。最后,加入PFP。PFP是一种带有正电荷的水溶性共轭阳离子聚合物,可以通过静电作用与双链DNA发生吸附。PFP与嵌入在双链结构中的SG发生荧光共振能量转移(FRET)。根据FRET的效率可以实现对端粒酶活性的定量检测。本方法可以检测到3.0×10^5个Hela细胞中提取的端粒酶活性。将本方法与杂交链式反应(HCR)反应结合,可实现检测信号的放大,提高检测的灵敏度,可以检测到6.0×10^4个Hela细胞中的端粒酶活性,灵敏度提高了一个数量级。本方法简单、快速,无需标记、扩增过程,无酶参与,检测成本低,灵敏度高。 展开更多
关键词 端粒酶 活性 阳离子共轭聚合物 荧光共振能量转移 杂交链式反应 无酶信号放大
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雄激素对再生障碍性贫血患者端粒酶活性的影响 预览
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作者 张慧敏 李晓云 +7 位作者 张少飞 袁丽倩 史奎竹 高习华 王荣孝 谢清清 张玉娜 陶朝欣 《临床内科杂志》 CAS 2019年第7期447-450,共4页
目的探讨雄激素对再生障碍性贫血(AA)患者端粒酶活性的影响及端粒在AA发病机制中的作用。方法纳入2016年1月~2017年3月于我院就诊的初诊为AA的患者30例作为试验组,采用随机分组方法将其分为环孢素A(CsA)+雄激素组和CsA组,每组各15例。... 目的探讨雄激素对再生障碍性贫血(AA)患者端粒酶活性的影响及端粒在AA发病机制中的作用。方法纳入2016年1月~2017年3月于我院就诊的初诊为AA的患者30例作为试验组,采用随机分组方法将其分为环孢素A(CsA)+雄激素组和CsA组,每组各15例。采用酶联免疫吸附试验(EUSA)双抗体夹心法检测患者治疗前后端粒酶活性。选取同期于我院体检的15例健康者作为对照组,检测其端粒酶活性并与试验组进行比较。结果试验组患者基线端粒酶活性(OD,0.30±0.16)明显高于对照组(0.11±0.06,P<0.001)。CsA+雄激素组端粒酶活性(OD值)在治疗后第3个月、第6个月逐渐降低,而第9个月、第12个月明显升高,治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05),但与CsA组比较差异无统计学意义(P<0.05)。CsA+雄激素组血液学改善率优于CsA组,两组比较差异有统计学意义(P=0.03)。结论雄激素可调节AA患者端粒酶活性,雄激素治疗后端粒酶活性升高以修复损耗的端粒,从而使骨髓造血功能得到恢复。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 雄激素 端粒 端粒酶活性
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雌二醇对萘处理去势雌性大鼠晶状体上皮细胞端粒酶活性与凋亡的作用 预览
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作者 李茂娇 康刚劲 +6 位作者 王杰 康海军 徐曼华 王妍茜 罗波 邱煜焱 彭正虹 《眼科新进展》 北大核心 2018年第6期533-537,共5页
目的探讨不同浓度雌二醇对晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)端粒酶活性与凋亡的作用及其机制。方法将50只健康成年雌性SD大鼠随机分为5组:去势组、雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组和假手术组,除假手术组外,其余4组均行卵... 目的探讨不同浓度雌二醇对晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)端粒酶活性与凋亡的作用及其机制。方法将50只健康成年雌性SD大鼠随机分为5组:去势组、雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组和假手术组,除假手术组外,其余4组均行卵巢切除术,术后2周,5组均用萘混悬液灌胃,同时,雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组每天分别给予戊酸雌二醇0.21 mg·kg-1、0.42 mg·kg-1、0.84 mg·kg-1灌胃,去势组及假手术组每天均给予9 g·L-1氯化钠溶液按0.42 mg·kg-1灌胃。每周观察各组大鼠晶状体混浊情况。灌胃12周后处死大鼠,采用放射免疫法检测大鼠血清中雌二醇浓度,采用RT-q PCR法检测LEC中端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)mRNA的水平,TUNEL法检测LEC的凋亡率。结果 12周时去势组的晶状体混浊情况同雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组及假手术组差异均有统计学意义(均为P〈0.05)。去势组血清雌二醇浓度为(8.19±1.45)ng·L-1,显著低于雌二醇各组,差异均有统计学意义(均为P〈0.05)。去势组大鼠LEC TERT mRNA相对表达量(0.371 2±0.056 4)显著低于雌二醇各组;去势组LEC凋亡率(0.602 1±0.010 8)明显高于雌二醇各组,差异均有统计学意义(均为P〈0.05),并且LEC TERT mRNA相对表达量和LEC凋亡率均与雌二醇浓度呈剂量依赖性变化。Pearson相关分析结果显示,LEC TERT mRNA相对表达量与LEC凋亡率间呈明显负相关(r=-0.859,P〈0.05)。结论雌二醇能上调萘处理去势雌性大鼠LEC TERT mRNA表达,增加端粒酶活性,且呈剂量依赖性。雌二醇可抑制萘处理去势雌性大鼠LEC凋亡,其机制可能与细胞中端粒酶活性增加有关。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 雌二醇 端粒酶 端粒酶逆转录酶 端粒酶活性
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芦荟大黄素对人肝癌HepG2细胞端粒酶活性的影响及机制探讨 预览 被引量:1
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作者 黎雅静 洪雪 《山东医药》 2018年第34期29-32,共4页
目的 观察芦荟大黄素(AE)对人肝癌Hep G2细胞端粒酶活性的影响,并探讨其可能的分子机制。方法取对数生长期的Hep G2细胞,分别以终浓度为0、10、30、50μmol/L的AE作用24 h;收集Hep G2细胞,采用端粒重复序列扩增技术(TRAP)测定Hep G... 目的 观察芦荟大黄素(AE)对人肝癌Hep G2细胞端粒酶活性的影响,并探讨其可能的分子机制。方法取对数生长期的Hep G2细胞,分别以终浓度为0、10、30、50μmol/L的AE作用24 h;收集Hep G2细胞,采用端粒重复序列扩增技术(TRAP)测定Hep G2细胞端粒酶活性,分别以Western blotting、PCR法检测Hep G2细胞中的h TERT、c-myc蛋白和基因表达水平。结果 以终浓度为0、10、30、50μmol/L的AE作用Hep G2细胞24 h,其端粒酶活性分别为0.707±0.001、0.546±0.008、0.338±0.001、0.214±0.009;随着AE浓度升高,Hep G2细胞的端粒酶活性下降,且30、50μmol/L与0μmol/L AE作用的Hep G2细胞端粒酶活性差异有统计学意义(P均〈0.05)。随着AE浓度升高,Hep G2细胞h TERT、c-myc mRNA和蛋白表达水平均下降;其中,h TERT、c-myc mRNA和蛋白在50μmol/L,h TERT mRNA在30μmol/L,与0μmol/L差异有统计学意义(P均〈0.05)。结论 AE可通过下调cmyc和h TERT表达从而抑制Hep G2细胞端粒酶活性。 展开更多
关键词 肝细胞癌 HepG2细胞 芦荟大黄素 端粒酶活性 C-MYC基因 人端粒酶催化亚单位
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激动素对盐胁迫下老芒麦幼苗端粒酶活性及生理特性的影响 预览
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作者 孙守江 师尚礼 +3 位作者 吴召林 何丽娟 金鑫 祁娟 《草业学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期87-94,共8页
以2015年采自青藏高原高寒草地野生老芒麦为对象,研究了不同程度NaCl盐胁迫下激动素对老芒麦幼苗端粒酶活性及生理特性的影响,为土壤盐渍化地区的农业生产以及老芒麦人工草地改良提供科学依据。采用营养液砂培法,待幼苗生长至第3片叶抽... 以2015年采自青藏高原高寒草地野生老芒麦为对象,研究了不同程度NaCl盐胁迫下激动素对老芒麦幼苗端粒酶活性及生理特性的影响,为土壤盐渍化地区的农业生产以及老芒麦人工草地改良提供科学依据。采用营养液砂培法,待幼苗生长至第3片叶抽出并刚展开时,对老芒麦幼苗进行不同浓度(0、50、100、150、200mmol·L-1)的NaCl盐胁迫处理168h,随后用不同浓度(0、5、10、20、30mg·L-1)的激动素叶面喷施处理240h并测定幼苗的端粒酶活性以及生理指标:叶绿素、游离脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、可溶性糖(SS)、可溶性蛋白(SP)含量。结果表明,随着盐胁迫的增强,端粒酶活性呈现出先上升后下降的趋势,在50mmol·L-1的NaCl处理下,端粒酶活性达到最大值。当处理浓度大于50mmol·L-1时,随着盐胁迫的进一步增强,端粒酶活性逐步减小,渗透调节物质游离脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量均上升。可溶性糖在250mmol·L-1盐浓度下增加量最显著(P<0.05),与对照相比增加了101.5%。0mmol·L-1盐胁迫下经10mg·L-1的激动素处理后,MDA含量下降64.9%。较高浓度激动素对盐胁迫的缓解效果显著(P<0.05),250mmol·L-1盐胁迫下经20mg·L-1激动素处理的植株,叶绿素含量较对照增加了17.3%,可溶性糖在100mmol·L-1盐胁迫下经20mg·L-1激动素处理,其含量较对照增加了165.6%。结果表明外源激动素对盐胁迫具有一定的缓解作用,适宜浓度的盐胁迫诱导了细胞端粒酶活性,高浓度盐胁迫可能造成了老芒麦细胞的氧化损伤,最终导致端粒酶活性下降。 展开更多
关键词 老芒麦 端粒酶活性 盐胁迫 生理特性
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蟾蜍灵通过抑制端粒酶活性诱导人脑胶质瘤细胞死亡 预览 被引量:1
8
作者 张滢 张烨 +2 位作者 孙佩欣 姚冰 朴浩哲 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第3期332-335,共4页
目的:探讨蟾蜍灵对人脑胶质瘤的作用。方法:将不同浓度的蟾蜍灵作用于胶质瘤细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,克隆形成实验检测细胞法检测增殖抑制,Western-blot测定人端粒酶逆转录酶(hTERT)的蛋白表达,Real time-PCR检测hT... 目的:探讨蟾蜍灵对人脑胶质瘤的作用。方法:将不同浓度的蟾蜍灵作用于胶质瘤细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,克隆形成实验检测细胞法检测增殖抑制,Western-blot测定人端粒酶逆转录酶(hTERT)的蛋白表达,Real time-PCR检测hTERT基因表达水平,CCK-8法检测蟾蜍灵对人原代胶质瘤细胞的杀伤作用。结果:蟾蜍灵对胶质瘤细胞株细胞U251、U87增殖具有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,并且能够有效抑制U251及U87细胞的克隆形成。Western-blot结果显示hTERT蛋白表达随药物浓度增加而递减,Real time-PCR结果证实蟾蜍灵降低了hTERT基因表达。同时体外实验证明,蟾蜍灵对人原代胶质瘤细胞具有明显杀伤作用。结论:蟾蜍灵能够抑制胶质瘤细胞系细胞及人原代胶质瘤细胞增殖,同时通过抑制hTERT表达降低端粒酶活性以发挥其抗肿瘤的作用。 展开更多
关键词 胶质瘤 端粒酶活性 HTERT 蟾蜍灵
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端粒酶活性检测研究进展 预览
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作者 郑婷婷 冯恩铎 田阳 《应用技术学报》 2018年第1期1-13,共13页
端粒酶是细胞内常见的一种逆转录酶,其功能在于维持细胞内染色体末端端粒的长度。端粒酶活性的异常升高通常与肿瘤细胞的产生以及生长相关。端粒酶的活性已经成为了癌症诊疗领域中非常重要的生物标志物。因此,对于端粒酶活性准确且高效... 端粒酶是细胞内常见的一种逆转录酶,其功能在于维持细胞内染色体末端端粒的长度。端粒酶活性的异常升高通常与肿瘤细胞的产生以及生长相关。端粒酶的活性已经成为了癌症诊疗领域中非常重要的生物标志物。因此,对于端粒酶活性准确且高效的定量分析检测方案是当今分析科学,临床医学等相关学科领域研究的重点之一。随着分析测试技术的发展,提出了一系列具有超高性能的端粒酶活性检测方案。总结了近5年来端粒酶活性检测方案的发展全貌并且预估了端粒酶活性检测的未来发展方向。 展开更多
关键词 端粒酶 活性检测 电化学分析 荧光分析 拉曼分析 在体分析 研究进展
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长春瑞滨诱导人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3凋亡及降低端粒酶活性 预览
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作者 申丽媛 徐冬梅 +2 位作者 刘潇涵 杨玫 文亚玲 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第1期87-90,共4页
目的探讨长春瑞滨对人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3细胞凋亡、端粒酶活性及亚单位人端粒酶反转酶mRNA(hTERT mRNA)表达的影响。方法将不同浓度的长春瑞滨作用于SKOV3细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞计量术检测细胞凋亡;端粒重复序... 目的探讨长春瑞滨对人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3细胞凋亡、端粒酶活性及亚单位人端粒酶反转酶mRNA(hTERT mRNA)表达的影响。方法将不同浓度的长春瑞滨作用于SKOV3细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞计量术检测细胞凋亡;端粒重复序列扩增酶联免疫吸附试验(TRAP-ELISA)检测端粒酶活性;RT-PCR检测细胞中hTERT mRNA表达。结果长春瑞滨可抑制SKOV3细胞增殖,诱导细胞凋亡(P〈0.01),降低SKOV3细胞中端粒酶活性及hTERT mRNA的表达(P〈0.01),且存在浓度-时间依赖关系。结论检测端粒酶的活性及hTERT mRNA表达,可能有助于判定长春瑞滨诱导上皮性卵巢癌细胞凋亡的敏感性。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 长春瑞滨 凋亡 端粒酶活性
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小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构早期端粒酶活性的测定
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作者 刘宇 张日欣 李钟淑 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期586-590,共5页
采用端粒酶重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)-银染法,对小鼠卵母细胞、体内受精胚胎及重构胚的各阶段端粒酶活性进行测定,对PCR产物的电泳条带进行灰度值分析,计算端粒酶总产品总量。结果表明:(1)体内... 采用端粒酶重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)-银染法,对小鼠卵母细胞、体内受精胚胎及重构胚的各阶段端粒酶活性进行测定,对PCR产物的电泳条带进行灰度值分析,计算端粒酶总产品总量。结果表明:(1)体内受精胚胎及核移植重构胚各阶段的端粒酶活性随胚胎分裂呈上升趋势,囊胚期最高(P〈0.05);(2)体内受精胚胎的端粒酶活性高于体细胞核移植重构胚端粒酶活性。同时进行囊胚计数并测定单卵裂球相对端粒酶活性,结果表明:单卵裂球的端粒酶活性呈下降趋势,囊胚期端粒酶活性最低(P〈0.05)。以上结果说明小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构胚端粒酶活性变化与细胞发育水平及细胞发育全能性有关。 展开更多
关键词 核移植重构胚 端粒酶活性 TRAP-银染法
放射抗拒的肺腺癌A549细胞端粒酶活性与放射敏感性的关系 预览
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作者 邢帆 邢丽娜 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2017年第3期214-217,共4页
目的 检测经过不同剂量的射线照射后人肺腺癌A549细胞存活后代的生长特性以及端粒酶的活性,探讨端粒酶与放射敏感性的关系。方法 将同源的人肺腺癌A549细胞分为5组,分别给予0Gy、2 Gy、4 Gy、8 Gy、12 Gy的X射线照射,建立不同剂量的放... 目的 检测经过不同剂量的射线照射后人肺腺癌A549细胞存活后代的生长特性以及端粒酶的活性,探讨端粒酶与放射敏感性的关系。方法 将同源的人肺腺癌A549细胞分为5组,分别给予0Gy、2 Gy、4 Gy、8 Gy、12 Gy的X射线照射,建立不同剂量的放射耐受模型,用TRAP-ELISA试剂盒检测A549组、A549-2组、A549-4组、A549-8组、A549-12组的端粒酶活性,用RT-PCR检测其端粒酶逆转录酶的相对表达含量,克隆形成实验检测其放射敏感性。结果 经过不同剂量照射后的A549组,A549-2组,A549-4组,A549-8组的端粒酶活性分别为1.130±0.023,1.303±0.048,1.620±0.026,1.953±0.063,4组间的差异具有统计学意义(P〈0.05),但A549-12组的端粒酶活性明显降低,为0.970±0.042,与以上4组的端粒酶活性差异具有统计学意义(P〈0.05)。A549组、A549-2组、A549-4组、A549-8组的h TERT mRNA的相对表达含量分别为0.41±0.02,0.56±0.04,0.69±0.03,0.82±0.05,表达含量明显升高,且4组间的差异具有统计学意义(P〈0.05);但A549-12组的h TERT mRNA的相对表达含量明显降低,为0.23±0.02,与以上4组h TERT mRNA的相对表达含量具有统计学意义(P〈0.01)。5组细胞的放射敏感性随着放射剂量的增高而逐渐降低。A549组、A549-2组、A549-4组、A549-8组的端粒酶活性与其放射敏感性呈负相关(P〈0.01),以上4组h TERT mRNA的相对表达含量与放射敏感性呈负相关(P〈0.01)。结论 在一定的剂量范围内,经过不同剂量的射线照射后形成的放射抗拒的人肺腺癌A549细胞系,其端粒酶活性、h TERT mRNA的相对表达含量与放射敏感性存在一定的相关性。 展开更多
关键词 端粒酶活性 人端粒酶逆转录酶 肺腺癌 放射敏感性
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端粒酶抑制剂研究进展 被引量:2
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作者 解静蕾 侯卜 +2 位作者 张超 邵鹏柱 胡春 《沈阳药科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期817-824,共8页
目的综述端粒酶抑制剂的研究进展。方法查阅近几年来国内外相关文献33篇,对其进行归纳、总结和分析。结果端粒酶是一种DNA逆转录酶,具有催化端粒DNA合成的功能,在85%~90%的肿瘤细胞中特异性表达。近几年来,人们发现的端粒酶抑制剂包括... 目的综述端粒酶抑制剂的研究进展。方法查阅近几年来国内外相关文献33篇,对其进行归纳、总结和分析。结果端粒酶是一种DNA逆转录酶,具有催化端粒DNA合成的功能,在85%~90%的肿瘤细胞中特异性表达。近几年来,人们发现的端粒酶抑制剂包括杨梅酮衍生物、南蛇藤醇衍生物、小檗碱类化合物、波尔定碱、虫草素等天然小分子及其类似物,以及伊美司他、噁二唑类化合物、吡唑类化合物、芳基乙烯类化合物、苯亚甲基-腙类化合物、咔唑类化合物和蒽醌类化合物等合成小分子类化合物。个别化合物已经进入了临床研究阶段。结论端粒酶抑制剂作为一类潜在的高选择性抗癌药物,为恶性肿瘤的诊断和治疗提供新的希望。 展开更多
关键词 端粒酶 抑制剂 抗癌活性
端粒及端粒酶活性检测方法研究进展 预览 被引量:1
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作者 张晓娜 杨镒峰 许保增 《特产研究》 2017年第4期40-46,共7页
缩短的端粒是细胞老化的信号,检测端粒酶活性可间接测定细胞状态。端粒酶通过p66Shc信号通路对胚胎发育永久性停滞产生影响。本文对哺乳动物卵母细胞或胚胎永久性停育与端粒酶活性水平变化的关系、端粒酶活性检测方法研究进展及各种方... 缩短的端粒是细胞老化的信号,检测端粒酶活性可间接测定细胞状态。端粒酶通过p66Shc信号通路对胚胎发育永久性停滞产生影响。本文对哺乳动物卵母细胞或胚胎永久性停育与端粒酶活性水平变化的关系、端粒酶活性检测方法研究进展及各种方法的优缺点进行综述,包括端粒重复扩增法(TRAP)、TRAP-酶联免疫吸附(ELISA)法、TRAP-银染法、杂交链式信号放大反应结合磁分离技术法和亚甲蓝MB作为G-四联体结合探针法、H-GNs比色法、依赖无标记分子信标的级联放大DNA机制法。 展开更多
关键词 端粒 端粒酶 永久性胚胎发育阻滞 活性检测
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5-Aza-C对人鼻咽癌细胞hTERT基因表达及端粒酶活性的影响 预览 被引量:1
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作者 王燕 张自雄 +3 位作者 戴梦源 陶泽璋 肖伯奎 陈始明 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期6-10,共5页
目的研究去甲基化药物5-氮杂胞嘧啶核苷(5-Azacytidine,5-Aza-C)对鼻咽癌细胞亚端粒区D4Z4甲基化状态、h TERT基因表达及端粒酶活性的影响。方法常规培养鼻咽癌CNE,CNE1,CNE2及5-8F细胞系。5-Aza-C处理鼻咽癌细胞后,甲基化测序聚合酶... 目的研究去甲基化药物5-氮杂胞嘧啶核苷(5-Azacytidine,5-Aza-C)对鼻咽癌细胞亚端粒区D4Z4甲基化状态、h TERT基因表达及端粒酶活性的影响。方法常规培养鼻咽癌CNE,CNE1,CNE2及5-8F细胞系。5-Aza-C处理鼻咽癌细胞后,甲基化测序聚合酶链反应(MSP)法检测亚端粒区D4Z4甲基化;RT-PCR检测h TERT m RNA水平;端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplifi cation protocol,TRAP)法检测端粒酶活性。结果 5-Aza-C处理后,四种鼻咽癌细胞系的亚端粒区D4Z4序列的甲基化水平较处理前明显下降。2.5μmol/L 5-Aza-C处理后,四种鼻咽癌细胞h TERT m RNA的表达明显下调,端粒酶活性显著抑制。结论在鼻咽癌的发生中,亚端粒区的DNA甲基化水平紊乱起了一定的作用,去甲基化药物5-Aza-C能下调h TERT表达,抑制端粒酶活性。探讨鼻咽癌细胞中h TERT表达与亚端粒区Cp G岛甲基化状态之间的关系,可能为亚端粒区染色体结构异常在鼻咽癌发生中的作用提供深刻见解。 展开更多
关键词 鼻咽癌 5-Aza-C 人端粒酶反转录酶 端粒酶活性
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冬凌草甲素对胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响 预览 被引量:1
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作者 丁明勇 王卫星 《广西医学》 CAS 2016年第3期308-312,共5页
目的探讨冬凌草甲素对胆管癌细胞系QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响。方法采用不同浓度冬凌草甲素(0、10、20、40、80、100μmol/L)处理QBC939细胞24、48、72h,MTT法测定QBC939细胞活力并计算增殖抑制率;不同浓度冬凌草甲... 目的探讨冬凌草甲素对胆管癌细胞系QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响。方法采用不同浓度冬凌草甲素(0、10、20、40、80、100μmol/L)处理QBC939细胞24、48、72h,MTT法测定QBC939细胞活力并计算增殖抑制率;不同浓度冬凌草甲素(0;20、40、80txmol/L)处理QBC939细胞48h后,分别采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,Western Blot法检测QBC939细胞B淋巴细胞瘤.2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,端粒酶重复序列扩增法检测QBC939细胞的端粒酶活性。结果QBC939细胞增殖抑制率随冬凌草甲素的药物浓度升高、作用时间延长而升高;与0μmoL/L冬凌草甲素组相比,其他浓度冬凌草甲素组的S期细胞比例降低;0、20、40、80μmol/L冬凌草甲素组QBC939细胞的凋亡率分别为0.5%、14.8%、25.8%及37.7%;Western Blot结果显示随着药物浓度的升高,QBC939细胞的Bax表达量逐渐升高,Bcl-2表达量逐渐降低;其他浓度冬凌草甲素组QBC939的端粒酶活性均低于0μmol/L冬凌草甲素组,且QBC939细胞的端粒酶活性随冬凌草甲素浓度的升高而降低(P〈0.05)。结论冬凌草甲素可抑制QBC939细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制Bcl-2表达以降低端粒酶活性有关。 展开更多
关键词 胆管癌 冬凌草甲素 QBC939细胞 增殖 凋亡 端粒酶活性 B淋巴细胞瘤-2蛋白
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艾迪注射液对膀胱癌细胞端粒酶活性的影响 被引量:1
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作者 李昊 龚小芳 姚启盛 《湖北中医药大学学报》 2016年第3期30-32,共3页
目的探讨分析艾迪注射液对膀胱癌细胞端粒酶活性的变化,进而研究艾迪注射液的治疗机理。方法选取60例膀胱癌患者,随机分为3组,分别用艾迪注射液、沙培林、丝裂霉素进行膀胱灌注。结果艾迪灌注组注射后的端粒酶活性明显低于其他两组注射... 目的探讨分析艾迪注射液对膀胱癌细胞端粒酶活性的变化,进而研究艾迪注射液的治疗机理。方法选取60例膀胱癌患者,随机分为3组,分别用艾迪注射液、沙培林、丝裂霉素进行膀胱灌注。结果艾迪灌注组注射后的端粒酶活性明显低于其他两组注射后的活性,且注射后与注射前相比,差异有统计学意义(P〈0.05);端粒酶的活性按照A、B、C、D 4个等级划分,强度A、C、D的例数明显减少,数据有统计学意义(P〈0.05);在采用艾迪注射液前,患者膀胱癌细胞活性的阳性率为87.1%,而注射后细胞活性的阳性率为40.3%,两者之间比较差异显著(P〈0.05)。结论用艾迪注射液治疗膀胱癌可以有效抑制细胞端粒酶活性,避免了癌细胞的快速生长,此方法值得借鉴推广。 展开更多
关键词 艾迪注射液 细胞端粒酶 膀胱癌 活性
端粒酶和CEA联合检测对良恶性腹腔积液的诊断价值 预览 被引量:1
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作者 李卓 吴敏慧 +3 位作者 李建华 王永锋 康炜 杨超 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第9期850-852,共3页
目的探讨腹水端粒酶活性(telomerase activity,TA)和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)检测对鉴别良、恶性腹腔积液的价值。方法采用聚合酶链反应酶联免疫吸附测定(PCR-ELISA)法和化学发光微粒子免疫分析技术分别测定65例... 目的探讨腹水端粒酶活性(telomerase activity,TA)和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)检测对鉴别良、恶性腹腔积液的价值。方法采用聚合酶链反应酶联免疫吸附测定(PCR-ELISA)法和化学发光微粒子免疫分析技术分别测定65例恶性腹腔积液和52例良性腹腔积液中TA和CEA表达水平。结果腹腔积液中TA和CEA的阳性率在恶性腹腔积液组分别为76.9%(50/65)和61.5%(40/65),在良性腹腔积液组分别为7.7%(4/52)和23.1%(12/52),两组比较差异有统计学意义(χ~2=62.921,17.925,P〈0.05)。TA测定诊断恶性腹腔积液的敏感性为76.9%(50/65),特异性为92.3%(48/52);CEA诊断的敏感性61.5%(40/65),特异性76.9%(40/52),两组比较差异有统计学意义(χ~2=4.113,5.216,P〈0.05)。两者联合检测的敏感性为92.3%(60/65),特异性为96.2%(50/52),联合检测的敏感性显著高于TA和CEA单项检测(χ~2=4.582,19.231,P〈0.05)。结论检测腹腔积液TA、CEA表达水平有助于积液性质的良恶性鉴别;联合检测能提高恶性腹腔积液诊断的准确度。 展开更多
关键词 腹腔积液 端粒酶 癌胚抗原
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基于杂交链式反应信号放大和磁分离技术荧光检测端粒酶活性 被引量:4
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作者 张佳玉 周晓毓 +1 位作者 周曼 贾红霞 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第6期513-517,共5页
端粒酶是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶,它一般在癌细胞中被激活.它与端粒DNA的不断复制以及癌细胞的不断增殖密切相关.所以检测端粒酶的活性对癌症的早期诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的开发具有重要意义.利用杂交链式... 端粒酶是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶,它一般在癌细胞中被激活.它与端粒DNA的不断复制以及癌细胞的不断增殖密切相关.所以检测端粒酶的活性对癌症的早期诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的开发具有重要意义.利用杂交链式反应(HCR)无酶放大检测信号,建立了一种简单、快速的端粒酶活性检测方法.端粒酶延伸产物是一条末端具有(ggttag)_n重复序列的DNA.在实验过程中,通过链霉亲合素与生物素的特异性作用将端粒酶延伸产物连接在磁性微球上.设计一条端粒酶延伸产物特异性的DNA探针I作为杂交链式反应的引发探针.DNA探针I的3′-端与端粒酶延伸产物的重复序列匹配,通过杂交,DNA探针I被固定在磁球上;DNA探针I的5′-端引发DNA探针II和探针III发生杂交链式反应.DNA探针II和探针III上都标记有荧光基团,可以利用荧光直接进行信号检测.在反应过程中,通过磁分离去除多余未反应的三种DNA探针.在优化条件下,可以检测到1.0×10~5个Hela细胞中的端粒酶活性.该方法简单、快速、检测成本低,分析全程无酶参与,在肿瘤或癌症的临床诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的筛选上具有广阔的应用前景. 展开更多
关键词 端粒酶活性 杂交链式反应 无酶信号放大 荧光检测 磁分离
基于恒温指数扩增反应高灵敏度检测端粒酶活性 预览
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作者 周晓毓 张佳玉 +1 位作者 周曼 贾红霞 《河北大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2016年第2期155-161,共7页
端粒酶延伸产物是具有(ggttag)n重复序列的DNA.设计1条与2个重复序列相匹配的特异性的DNA探针-(ctaacc)2使其与端粒酶延伸产物杂交,形成双链DNA.过量的DNA探针被磁性石墨烯吸附,通过磁分离去除.利用恒温指数扩增反应(IEXPAR)对端... 端粒酶延伸产物是具有(ggttag)n重复序列的DNA.设计1条与2个重复序列相匹配的特异性的DNA探针-(ctaacc)2使其与端粒酶延伸产物杂交,形成双链DNA.过量的DNA探针被磁性石墨烯吸附,通过磁分离去除.利用恒温指数扩增反应(IEXPAR)对端粒酶延伸产物捕捉的DNA探针进行快速的扩增.用与双链DNA特异性结合的SYBR Green I染料对扩增产物进行实时荧光检测.在优化条件下,可以检测到低至50个癌细胞中的端粒酶活性.实现了恒温扩增条件下端粒酶活性的高灵敏度检测. 展开更多
关键词 端粒酶活性 恒温指数扩增反应 磁性石墨烯 实时荧光检测
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