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东北林蛙与黑龙江林蛙输卵管蛋白质翻译后修饰差异的分析
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作者 金媛媛 张怡 +3 位作者 林喆 李宜平 邱智东 刘达 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期352-356,共5页
对东北林蛙(Rana dybowskii Guenther)和黑龙江林蛙(Rana amurensis Boulenger)2个野生种的林蛙油进行蛋白质翻译后修饰的差异性分析,并与市售林蛙油进行对比。运用Western blot方法检测3种林蛙油蛋白的赖氨酸乙酰化、赖氨酸巴豆酰化和... 对东北林蛙(Rana dybowskii Guenther)和黑龙江林蛙(Rana amurensis Boulenger)2个野生种的林蛙油进行蛋白质翻译后修饰的差异性分析,并与市售林蛙油进行对比。运用Western blot方法检测3种林蛙油蛋白的赖氨酸乙酰化、赖氨酸巴豆酰化和酪氨酸磷酸化修饰水平,进一步分析其被修饰的蛋白质的差异性。结果表明:从3种林蛙油蛋白的Western印迹均可得到可分析的蛋白质条带,发现3种林蛙油蛋白被不同的修饰方法修饰后,三者的条带信号强弱均有差异,同种修饰方式在2个不同野生种之间存在差异。 展开更多
关键词 林蛙油 蛋白质印迹法 赖氨酸乙酰化 赖氨酸巴豆酰化 酪氨酸磷酸化
去甲肾上腺素及血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌细胞胰岛素受体及胰岛素受体底物1酪氨酸磷酸化的综合效应 预览 被引量:1
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作者 刘扬 李竹琴 张志刚 《蚌埠医学院学报》 CAS 2018年第2期146-149,共4页
目的:初步探讨去甲肾上腺素(NE)与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠心肌细胞胰岛素受体β亚基(Ins-Rβ)及胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的综合效应,以及心肌胰岛素抵抗的机制。方法:培养新生大鼠心肌细胞。按照浓度梯度,将相... 目的:初步探讨去甲肾上腺素(NE)与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠心肌细胞胰岛素受体β亚基(Ins-Rβ)及胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的综合效应,以及心肌胰岛素抵抗的机制。方法:培养新生大鼠心肌细胞。按照浓度梯度,将相同浓度的NE与AngⅡ的混合液加入培养基中,培养72 h后,采用Western blotting法检测胰岛素信号分子蛋白表达水平。另于每个实验组中加入AngⅡ受体阻断剂氯沙坦,分别观察NE与AngⅡ的独立效应。结果:相同浓度的NE与AngⅡ混合液可引起心肌细胞Ins-R、IRS-1及葡萄糖转运体4(GLUT4)等蛋白表达减少,Ins-Rβ亚基酪氨酸磷酸化等蛋白表达减少,IRS-1酪氨酸磷酸化蛋白表达增加(P〈0.05)。1μmol/L氯沙坦对Ins-Rβ亚基酪氨酸磷酸化蛋白表达无显著影响(P〉0.05),可减少IRS-1酪氨酸磷酸化蛋白表达(P〈0.05)。结论:相同浓度的NE与AngⅡ的共同作用可降低大鼠心肌细胞Ins-Rβ酪氨酸磷酸化水平,升高IRS-1酪氨酸磷酸化水平。NE为引起Ins-Rβ酪氨酸磷酸化水平降低的主要原因,AngⅡ升高为IRS-1酪氨酸磷酸化水平升高的主要原因。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 去甲肾上腺素 血管紧张素Ⅱ 酪氨酸磷酸化
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Phyllanthus emblica叶提取物对慢性应激大鼠睾丸损伤有改善作用
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作者 Supatcharee ARUN Jaturon BURAWAT +3 位作者 Supataechasit YANNASITHINON Wannisa SUKHORUM Akgpol LIMPONGSA Sitthichai IAMSAARD 《浙江大学学报:B卷英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第12期948-959,共12页
目的:探讨Phyllanthus emblica L.(PE)叶提取物对慢,性应激大鼠睾丸损伤和相关蛋白标志物变化的影响。方法:将成年雄性大鼠分成四组:对照组、慢性应激(CS)组和两组PE提取物治疗组(50或100mg/kg体重(BW))。对各组的精子质量、睾丸和尾附... 目的:探讨Phyllanthus emblica L.(PE)叶提取物对慢,性应激大鼠睾丸损伤和相关蛋白标志物变化的影响。方法:将成年雄性大鼠分成四组:对照组、慢性应激(CS)组和两组PE提取物治疗组(50或100mg/kg体重(BW))。对各组的精子质量、睾丸和尾附睾的组织学特征、以及血清皮质酮、睾酮和丙二醛(MDA)的水平进行分析比较。并使用免疫印迹分析研究睾丸类固醇合成快速调节蛋白(STAR)和酪氨酸磷酸化蛋白的表达。结论:结果显示,50mg/kg BW的PE能显着增加精子浓度和睾酮水平,同时降低CS大鼠中皮质酮水平、MDA水平、以及精子头异常和顶体反应精子的比例。此外,两种剂量的PE都能缓解CS大鼠的睾丸组织病理学特征。同时我们还发现,50mg/kgBW的PE可以显著提高StAR蛋白的表达,并改变睾丸中部分酪氨酸磷酸化蛋白的强度。总之,50mg/kg BW的PE叶提取物可以预防CS大鼠的睾丸损伤。 展开更多
关键词 Phyllanthusemblica L.叶提取物 慢性应激 睾丸损伤 酪氨酸磷酸化
酪氨酸磷酸化在精子获能过程中的作用 预览
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作者 陈璇 金一 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第9期2486-2491,共6页
在精子细胞发生顶体反应并使卵母细胞受精之前,获能是一个重要的生理先决条件。获能是精子在雌性生殖道中进一步成熟的复杂现象,其赋予精子以增强活性的能力,使精子能够与卵母细胞透明带(ZP)相互作用,进行顶体反应并与卵母细胞质膜融合... 在精子细胞发生顶体反应并使卵母细胞受精之前,获能是一个重要的生理先决条件。获能是精子在雌性生殖道中进一步成熟的复杂现象,其赋予精子以增强活性的能力,使精子能够与卵母细胞透明带(ZP)相互作用,进行顶体反应并与卵母细胞质膜融合,进而完成受精过程。然而精子获能的分子机制十分复杂,目前还未完全明确,但获能后的精子会有诸多结构及生化方面的变化,如蛋白酪氨酸磷酸化、精子膜胆固醇外流、活性氧的产生及精子膜超极化。蛋白质通过磷酸化或去磷酸化调节精子获能和顶体反应等一些重要的现象,这是精子到达、结合、穿透和融合卵母细胞所必需的过程。因此蛋白磷酸化是获能的一个非常重要的过程,尤其是在酪氨酸残基处的磷酸化是获能过程中发生的最重要的事件之一,且酪氨酸磷酸化可能是细胞中信号转导途径的主要甚至是唯一的指标。作者主要针对蛋白磷酸化、精子中酪氨酸磷酸化的发现、作用和定位,以及影响获能过程中酪氨酸磷酸化的几个因素进行阐述。 展开更多
关键词 精子获能 分子机制 酪氨酸磷酸化
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含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1在肝脏疾病中的研究现状
5
作者 雷淑娟 文良志 +1 位作者 张新 谢渭芬 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1128-1133,共6页
蛋白酪氨酸磷酸化修饰广泛存在于真核细胞内,作为一种基础调节机制参与调节细胞的增殖、凋亡、分化、迁移等多个生命过程。蛋白酪氨酸磷酸化改变可影响肝脏炎症、肝纤维化、肝癌等多种肝脏疾病。含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP-1... 蛋白酪氨酸磷酸化修饰广泛存在于真核细胞内,作为一种基础调节机制参与调节细胞的增殖、凋亡、分化、迁移等多个生命过程。蛋白酪氨酸磷酸化改变可影响肝脏炎症、肝纤维化、肝癌等多种肝脏疾病。含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)属于非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶,是维持体内蛋白酪氨酸磷酸化水平的关键因子。近年来SHP-1在肝脏疾病中的研究取得了重大进展,本文主要就SHP-1在肝脏疾病中的研究现状作一综述。 展开更多
关键词 含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶类 酪氨酸磷酸化 肝脏疾病
Bisphenol A accelerates capacitation-associated protein tyrosine phosphorylation of rat sperm by activating protein kinase A
6
作者 Xiaofeng Wan Yanfei Ru +5 位作者 Chen Chu Zimei Ni Yuchuan Zhou Shoulin Wang Zuomin Zhou Yonglian Zhang 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期573-580,共8页
Bisphenol A (BPA ) 是合成雌激素模仿化学药品。影响许多繁殖端点被显示了。然而,成熟精子和它的行动的机制上的 BPA 的效果还不是清楚的。这里,我们的在里面 vitro 研究显示 BPA 能加速精子在 time-dependentmanners 和 dose-depend... Bisphenol A (BPA ) 是合成雌激素模仿化学药品。影响许多繁殖端点被显示了。然而,成熟精子和它的行动的机制上的 BPA 的效果还不是清楚的。这里,我们的在里面 vitro 研究显示 BPA 能加速精子在 time-dependentmanners 和 dose-dependentmanners 的联系 capacitation 的蛋白质酷氨酸 phosphorylation。在 vivo,暴露于 BPA 的高剂量的成年雄的老鼠能导致精子活动的重要增加。进一步的 investigationdemonstrated 就算精子是缺乏 BSA, HCO <sub>3</sub><sup>-</sup>, 和 Ca <sup>2+</sup> 的 incubatedin 媒介,那 BPA 能加速联系 capacitation 的蛋白质酷氨酸 phosphorylation。然而, BPA 刺激的这个行动能被 H89 堵住,蛋白质 kinase A (PKA ) 的高度选择的 blocker,由 KH7 的 butnot, adenylyl cyclase 的一个特定的禁止者。这些数据建议 BPA 可以激活 PKA 影响精子 functionsand 男性富饶。 展开更多
关键词 蛋白酪氨酸磷酸化 精子获能 蛋白激酶A 相关蛋白 雄性大鼠 双酚A 激活 BPA
伊马替尼对慢性髓性白血病酪氨酸磷酸化的影响 预览 被引量:2
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作者 薛爱玲 王凤玉 张晓岳 《中国医刊》 CAS 2016年第6期73-76,共4页
目的研究伊马替尼对慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)患者骨髓细胞酪氨酸磷酸化(tyrosine phosphorylation,p-Tyr)水平的影响。方法对2011年1月至2014年12月于本院就诊的47例CML患者(其中24例接受伊马替尼治疗)... 目的研究伊马替尼对慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)患者骨髓细胞酪氨酸磷酸化(tyrosine phosphorylation,p-Tyr)水平的影响。方法对2011年1月至2014年12月于本院就诊的47例CML患者(其中24例接受伊马替尼治疗)及6例健康对照者的骨髓细胞进行胞膜CD45和胞质内p-Tyr(PY99)荧光标记,应用流式细胞计量术(flow cytometry,FCM)分析不同病期CML患者的各群细胞p-Tyr水平。结果未经伊马替尼治疗的慢性期(chronic phase,CP)和加速期(accelerated phase,AP)患者的骨髓各群细胞p-Tyr水平均高于对照组,除CP患者的(偏)成熟粒细胞群较对照组的增高差异无显著性(P〉0.05)外,其余差异均具有显著性(P〈0.05)。应用伊马替尼治疗时间≥12个月的CP患者其骨髓细胞p-Tyr水平低于用药时间〈12个月者;用药时间≥12个月的AP患者其幼稚细胞群p-Tyr水平亦低于用药时间〈12个月者。结论 CML患者各病期细胞的p-Tyr水平均较高,伊马替尼对CML细胞p-Tyr水平的降低程度随用药时间延长而增强。 展开更多
关键词 伊马替尼 慢性髓性白血病 酪氨酸磷酸化水平 流式细胞计量术
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灯盏花素对胰岛素抵抗大鼠的影响及其机制研究 预览 被引量:1
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作者 赵栋梁 武莉 +2 位作者 李锦平 张馨媛 冯吉波 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期820-824,共5页
目的探讨灯盏花素对胰岛素抵抗(IR)大鼠的影响及其可能的作用机制。方法 50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=10)和IR模型组(n=40)。NC组喂以普通饲料,IR模型组大鼠经高脂高糖饲料喂养12周建立IR模型。筛选30只成模的IR大鼠... 目的探讨灯盏花素对胰岛素抵抗(IR)大鼠的影响及其可能的作用机制。方法 50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=10)和IR模型组(n=40)。NC组喂以普通饲料,IR模型组大鼠经高脂高糖饲料喂养12周建立IR模型。筛选30只成模的IR大鼠,随机均分为空白对照模型组(HFD组)、灯盏花素高剂量组(High组)和灯盏花素低剂量组(Low组),每组10只。测定大鼠血清空腹胰岛素(FINS)和空腹血糖值(FBG),计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);免疫组织化学法及Western blotting检测灯盏花素治疗后IR大鼠肝脏组织中核糖体S6激酶1(S6K1)蛋白及胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化水平。结果与NC组相比,HFD组大鼠HOMA-IR明显增高(P=0.000);与HFD组相比,High组和Low组大鼠HOMA-IR明显降低(均P=0.000);免疫组织化学法及Western blotting检测结果显示与HFD组相比,High组和Low组大鼠肝脏组织中S6K1蛋白的表达量均明显下调(均P〈0.01),IRS-1酪氨酸磷酸化水平均增高(P〈0.01,P〈0.05)。结论灯盏花素显著改善IR大鼠的IR状态,其作用可能与大鼠肝脏组织中S6K1的表达下调以及IRS-1酪氨酸磷酸化水平增高有关。 展开更多
关键词 灯盏花素 胰岛素抵抗 核糖体S6激酶1 胰岛素受体底物1 酪氨酸磷酸化
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钙离子对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化及活力影响 预览 被引量:2
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作者 赵娜 甄林青 +2 位作者 姜红菊 严国祥 李新红 《上海交通大学学报:农业科学版》 2015年第2期66-72,共7页
研究主要探究钙离子(Ca^2+)对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化及活力的作用。利用计算机辅助精子活力分析仪(CASA)检测、蛋白免疫印迹测定不同Ca^2+浓度对精子活力指标及蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响,并对精子样品的酪氨酸磷酸化蛋白的分... 研究主要探究钙离子(Ca^2+)对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化及活力的作用。利用计算机辅助精子活力分析仪(CASA)检测、蛋白免疫印迹测定不同Ca^2+浓度对精子活力指标及蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响,并对精子样品的酪氨酸磷酸化蛋白的分布情况进行观察。结果显示,当Ca^2+浓度≤1.0mmol/L时,精子活力和蛋白酪氨酸磷酸化水平增高;然而,当Ca^2+浓度≥3.0mmol/L时,则明显抑制精子活力和蛋白酪氨酸磷酸化水平,尤其分子量约为27和34kDa的高丰度蛋白磷酸化程度明显降低(P〈0.05)。高浓度Ca^2+(4.0mmol/L)明显抑制鞭毛处蛋白酪氨酸磷酸化。因此,细胞外钙离子对猪精子活力和蛋白磷酸化起到重要调节作用,低浓度Ca^2+促进精子活力及蛋白酪氨酸磷酸化,高浓度Ca^2+(≥3.0mmol/L)抑制精子活力及蛋白酪氨酸磷酸化。本研究初步明确了Ca^2+浓度对猪精子蛋白磷酸化及精子活力的影响,为进一步研究精子获能提供参考。 展开更多
关键词 CA^2+ 精子活力 酪氨酸磷酸化
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胰岛素增敏剂对PCOS大鼠子宫内膜胰岛素受体底物表达的影响 被引量:3
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作者 王玮 常康 +1 位作者 李晓冬 郝桂敏 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2014年第12期24-29,共6页
目的 探讨胰岛素增敏剂二甲双胍对多囊卵巢综合症(PCOS)大鼠子宫内膜胰岛素受体底物(IRS)1、2蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的影响。方法 Poretsky法建立PCOS大鼠模型,随机分为二甲双胍组和模型对照组,每组20只。空白对照组清洁SD大... 目的 探讨胰岛素增敏剂二甲双胍对多囊卵巢综合症(PCOS)大鼠子宫内膜胰岛素受体底物(IRS)1、2蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的影响。方法 Poretsky法建立PCOS大鼠模型,随机分为二甲双胍组和模型对照组,每组20只。空白对照组清洁SD大鼠10只。采用免疫组织化学方法测定IRS-1和IRS-2蛋白在子宫内膜的表达及酪氨酸磷酸化程度。结果 3组大鼠子宫内膜腺上皮细胞均见IRS-1、IRS-2及酪氨酸磷酸化的表达。模型对照组子宫内膜腺上皮IRS-1、IRS-2、P-tyr(IRS-1)、P-tyr(IRS-2)表达水平明显低于空白对照组(P<0.01),二甲双胍组IRS-1、IRS-2、P-tyr(IRS-1)、P-tyr(IRS-2)表达水平显著高于模型对照组(P<0.01),低于空白对照组(P<0.05)。结论 IRS-1和IRS-2蛋白在PCOS大鼠子宫内膜表达及酪氨酸磷酸化异常与胰岛素抵抗有关;胰岛素增敏剂二甲双胍可通过增加IRS-1和IRS-2蛋白的表达水平,提高其酪氨酸磷酸化程度,部分改善PCOS大鼠子宫内膜胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征大鼠模型 胰岛素受体底物 酪氨酸磷酸化 胰岛素增敏剂 胰岛素抵抗
短期胰岛素刺激对HIT-T15细胞胰岛素原基因表达的影响 预览
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作者 张君 荣曦 +1 位作者 吴宇娟 刘红 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第4期289-292,共4页
目的:探讨短期外源性胰岛素刺激对HIT-T15胰岛β细胞胰岛素原(PI)基因表达的影响及机制。方法 HIT-T15仓鼠胰岛瘤细胞随机分为4组:含1.4 mmol/L葡萄糖完全培养基组作为空白对照(LG组),为抑制内源性胰岛素释放干扰以低糖联合硝苯... 目的:探讨短期外源性胰岛素刺激对HIT-T15胰岛β细胞胰岛素原(PI)基因表达的影响及机制。方法 HIT-T15仓鼠胰岛瘤细胞随机分为4组:含1.4 mmol/L葡萄糖完全培养基组作为空白对照(LG组),为抑制内源性胰岛素释放干扰以低糖联合硝苯地平作为条件对照(LGC组),在LGC基础上分别加0.5 U/L或5 U/L的外源性胰岛素作为实验组(分别为LINS组和HINS组),分别在刺激后0、30、60、90、120 min以荧光定量PCR检测各组PI mRNA,免疫组化检测各组细胞胰岛素受体底物1(IRS1)酪氨酸磷酸化水平。结果(1)LINS组、HINS组细胞PI mRNA表达均上调,在刺激后60 min PI mRNA表达量达高峰。(2)实验组在刺激后30 min IRS1酪氨酸磷酸化水平较对照组明显增高,高、低浓度胰岛素组细胞酪氨酸磷酸化达高峰时间不同。(3)LG组和LGC组间PI mRNA表达及IRS1酪氨酸磷酸化水平无明显差异。结论短期外源性胰岛素能上调胰岛β细胞PI基因的表达,且高浓度的胰岛素较低浓度胰岛素作用强。PI表达调控与IRS1信号传导有关。 展开更多
关键词 胰岛素原 胰岛素分泌细胞 硝苯地平 胰岛素受体底物1 酪氨酸磷酸化 HIT—T15细胞
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精子蛋白32的表达及酪氨酸磷酸化调控猪精子顶体蛋白的活化 预览
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作者 孙培亮 崔明勋 +2 位作者 姜园园 曹立朋 金一 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1229-1235,共7页
为了探究猪精子蛋白32(Sperm protein,sp32)表达及酪氨酸磷酸化调控猪精子顶体蛋白活化的关系,本研究对不同处理(鲜精、冷冻-解冻、获能、顶体反应)的猪精子顶体膜蛋白进行分离,通过考马斯亮蓝染色、SDS-PAGE电泳和Western blot检... 为了探究猪精子蛋白32(Sperm protein,sp32)表达及酪氨酸磷酸化调控猪精子顶体蛋白活化的关系,本研究对不同处理(鲜精、冷冻-解冻、获能、顶体反应)的猪精子顶体膜蛋白进行分离,通过考马斯亮蓝染色、SDS-PAGE电泳和Western blot检测和分析。结果表明,猪精子经过获能处理、冷冻-解冻处理以及顶体反应处理后,前顶体蛋白(Proacrosin)和顶体蛋白(Acrosin)在转化过程中,sp32表达有所差异,获能和顶体反应处理的sp32的表达量略高于冷冻-解冻处理组,而显著高于鲜精处理组。与其他处理组相比,冷冻-解冻精子处理组sp32酪氨酸磷酸化水平产生显著的差异。但在SDS-PAGE电泳中,猪鲜精处理组在蛋白质分子质量38~170ku区间的蛋白表达条带较其他对比组明显,这表明猪精子在受精前所必需经历的获能和顶体反应过程中,顶体膜蛋白伴随着大分子的蛋白质修饰和降解。结论:sp32作为一种前顶体蛋白结合蛋白,在前顶体蛋白活化过程中它的表达水平及酪氨酸磷酸化水平上调。 展开更多
关键词 sp32 前顶体蛋白 顶体蛋白 活化 酪氨酸磷酸化
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肝组织胰岛素受体底物1表达及其酪氨酸磷酸化与慢性乙型肝炎病毒感染者胰岛素抵抗的关系 预览
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作者 戴福宏 曾维琼 江萃英 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第29期66-70,共5页
目的研究慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者肝脏组织中胰岛素受体底物1(insulinreceptor substste-1,IRS-1)表达及其酪氨酸磷酸化与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的关系。方法共收集36例肝组织,其中来源于健康... 目的研究慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者肝脏组织中胰岛素受体底物1(insulinreceptor substste-1,IRS-1)表达及其酪氨酸磷酸化与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的关系。方法共收集36例肝组织,其中来源于健康对照受试者12例,轻度慢性乙型肝炎(mild chronic hepatitis B,MCHB)未合并IR受试者12例,MCHB合并IR受试者12例。测量受试者的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹血胰岛素(fasting blood insulin,FINS)水平、HBV DNA及乙肝病毒标记物。根据稳态模型计算的胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment,HOMA-IR)界定IR。当HOMA-IR值〉2.7定义为IR。采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测各组IRS-1蛋白表达及酪氨酸磷酸化水平。结果①MCHB伴IR组FINS、FBG、HOMA-IR、HBV DNA及HBeAg阳性率分别为(19.48±7.97)μU/mL、(5.20±0.62)mmol/L、(4.37±1.34)%、(5.01±1.33)%和75.00%;MCHB未伴IR组FINS、FBG、HOMA-IR、HBV DNA及HBeAg阳性率分别为(8.49±2.78)μU/mL、(5.05±0.54)mmol/L、(1.86±0.58)%、(4.89±1.52)%和58.33%;正常对照组FINS、FBG及HOMA-IR分别为(7.21±2.71)μU/mL、(4.98±0.36)mmol/L和(1.60±0.63)%。MCHB伴IR组的FINS水平和HOMA-IR值显著高于MCHB未伴IR组和正常对照组,差异有统计学意义(P〈0.01);HBeAg阳性率及HBV DNA载量差异无统计学意义(P〉0.05)。②MCHB伴IR组肝组织IRS-1蛋白表达水平为(0.33±0.03),明显低于正常对照组(0.68±0.03)和MCHB未伴IR组(0.64±0.01),差异具有统计学意义(P〈0.01)。③MCHB伴IR组肝组织IRS-1蛋白酪氨酸磷酸化程度为(0.17±0.02),明显低于正常对照组(0.56±0.03)和MCHB未伴IR组(0.53±0.01),差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论 HBV在胰岛素抵抗中的作用尚未明确。肝脏组织中IRS-1蛋白表达及其酪氨酸磷酸化程度降低,可能是HBV感染者发生胰岛素抵抗的分子机制之� 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 胰岛素抵抗 胰岛素受体底物1 酪氨酸磷酸化
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大鼠皮质神经元缺氧缺糖/再灌注诱导NMDA受体亚基NR2A酪氨酸磷酸化 预览
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作者 颜景芝 刘永 +1 位作者 纵艳艳 张光毅 《徐州医学院学报》 CAS 2011年第11期 713-717,共5页
目的 研究大鼠皮质神经元缺氧缺糖(OGD)/再灌注诱导N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR2A酪氨酸磷酸化水平升高的可能分子机制.方法 以培养的大鼠皮质神经元OGD为模型,通过免疫沉淀(IP)及免疫印迹(IB)的方法 研究NR2A酪氨酸磷酸化.... 目的 研究大鼠皮质神经元缺氧缺糖(OGD)/再灌注诱导N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR2A酪氨酸磷酸化水平升高的可能分子机制.方法 以培养的大鼠皮质神经元OGD为模型,通过免疫沉淀(IP)及免疫印迹(IB)的方法 研究NR2A酪氨酸磷酸化.结果 OGD/再灌注后NR2A酪氨酸磷酸化水平快速并持续升高,至18 h达高峰(约为sham组的4.9倍);于OGD前加入乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)、地(艹卓)西平(MK-801)、尼莫地平(nimodipine)、染料木黄酮(genistein)和KN-62等,对NR2A酪氨酸磷酸化的升高均有明显的抑制作用.结论 OGD/再灌注诱导NR2A酪氨酸磷酸化水平的升高可能与胞外Ca2+内流有关,并与NMDA受体通道和L-型电压门控钙通道(L-VGCC)的开放有关;而且,NMDA受体通道可以进行自身调控,L-VGCC对NMDA受体也有一定的调控作用. 展开更多
关键词 缺氧缺糖 NR2A 酪氨酸磷酸化 L-型电压门控钙通道
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酪氨酸的磷酸化及去磷酸化对心脏钾离子通道的调控
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作者 郑方芳 孙一帆 林吉进 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2011年第3期共6页
心脏钾离子通道是人体内广泛存在的、种类最多、作用最复杂的一类离子通道,并在人类心肌细胞动作电位的各个时程中发挥着重要的作用。近年来由于新兴技术如膜片钳技术、基因突变技术、分子克隆技术等诸多技术的运用和发展,人们对钾离子... 心脏钾离子通道是人体内广泛存在的、种类最多、作用最复杂的一类离子通道,并在人类心肌细胞动作电位的各个时程中发挥着重要的作用。近年来由于新兴技术如膜片钳技术、基因突变技术、分子克隆技术等诸多技术的运用和发展,人们对钾离子通道的基因表达、分子结构、生理病理作用及调控机制等方面都有了很深的认识,然而对蛋白磷酸化与去磷酸化对心脏钾离子通道的调控尤其是酪氨酸磷酸化和去磷酸化调控方面的研究却比较少,为此做一简单综述。 展开更多
关键词 钾离子通道 HERG钾通道 酪氨酸磷酸化 去磷酸化
酪氨酸磷酸化多肽的化学选择性富集 预览
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作者 胡良海 陶纬国 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期 869-875,共7页
酪氨酸激酶在生物分子的信号转导中起着非常重要的作用,目前除抗体技术外尚无有效的化学方法能够实现酪氨酸磷酸化蛋白质或多肽的选择性富集。然而抗体通常成本较高,而且往往会有模体序列的选择性识别。因此,本文发展了一种基于化学反... 酪氨酸激酶在生物分子的信号转导中起着非常重要的作用,目前除抗体技术外尚无有效的化学方法能够实现酪氨酸磷酸化蛋白质或多肽的选择性富集。然而抗体通常成本较高,而且往往会有模体序列的选择性识别。因此,本文发展了一种基于化学反应的酪氨酸磷酸化肽段的选择性富集方法。该方法利用了β-消除反应只能发生在丝氨酸和苏氨酸磷酸化多肽的特性,通过反相选择实现对酪氨酸磷酸化肽段的选择性富集。以标准多肽对其反应效率和回收率进行了考察,20 min内丝氨酸磷酸化多肽的β-消除反应效率可达99%以上,而同时酪氨酸磷酸化肽段可保持70%的回收率。进一步以6种标准蛋白质混合物的酶解产物对其进行考察,经β-消除反应和亲和富集之后,只有酪氨酸磷酸化多肽可以被检测出来。该方法为蛋白质酪氨酸磷酸化的分析提供了一种新的手段。 展开更多
关键词 酪氨酸磷酸化 β-消除 磷酸化蛋白质组学 质谱
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运动对胰岛素抵抗大鼠丝氨酸/酪氨酸磷酸化通路干预效应的研究 被引量:2
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作者 关丽娜 都健 +5 位作者 王慧敏 裴丽娜 王娟 吴峰 刘向阳 林志楠 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期330-333,共4页
目的 观察运动对高脂膳食诱导胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌胰岛素受体底物1(IRS-1)丝氨酸307(Ser307)磷酸化和酪氨酸(Tyr)磷酸化通路的影响.方法 Wistar大鼠75只,分为正常对照(NC)组、高脂膳食(HF)组.10周后再将HF组分为高脂... 目的 观察运动对高脂膳食诱导胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌胰岛素受体底物1(IRS-1)丝氨酸307(Ser307)磷酸化和酪氨酸(Tyr)磷酸化通路的影响.方法 Wistar大鼠75只,分为正常对照(NC)组、高脂膳食(HF)组.10周后再将HF组分为高脂膳食运动(HFE)组和高脂膳食非运动(HFNE)组.以钳夹技术观察各组大鼠胰岛素敏感性(IS)变化,Western Blot法检测大鼠骨骼肌IRS-1 Ser307磷酸化和Tyr磷酸化水平.结果 (1) 10周后HF组葡萄糖输注率(GIR60~120)明显低于NC组;与NC组比较,HF组IRS-1 Tyr磷酸化水平降低,IRS-1 Ser307磷酸化水平升高(P均<0.01).(2) 14周后HFE组GIR60~120明显高于HFNE组;与HFNE组比较,HFE组IRS-1 Tyr磷酸化水平升高,IRS-1 Ser307磷酸化水平降低(P均<0.01).结论 运动干预改善IR大鼠IS,其机制可能与改善IRS-1 Ser307/Tyr异常磷酸化有关. 展开更多
关键词 运动 胰岛素抵抗 大鼠 丝氨酸磷酸化 酪氨酸磷酸化
慢性乙型肝炎患者肝组织胰岛素受体底物2的表达及其酪氨酸磷酸化的研究 被引量:3
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作者 朱其荣 秦波 +1 位作者 黄涛 刘汉屈 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期24-27,共4页
目的观察慢性乙型肝炎(cHB)患者肝组织胰岛素受体底物2(IRS-2)的mRNA和蛋白表达及其酪氨酸磷酸化程度,探讨IRS-2在CHB患者胰岛素抵抗(IR)发生中的作用。方法选择6例肝功能正常者(对照组)及18例CHB患者,CHB患者再按HOMA模型计... 目的观察慢性乙型肝炎(cHB)患者肝组织胰岛素受体底物2(IRS-2)的mRNA和蛋白表达及其酪氨酸磷酸化程度,探讨IRS-2在CHB患者胰岛素抵抗(IR)发生中的作用。方法选择6例肝功能正常者(对照组)及18例CHB患者,CHB患者再按HOMA模型计算的胰岛素抵抗指数分为CHB非IR(〈2.69)组(10例)和CHB合并IR(〉2.69)组(8例)。所有患者于术中及肝穿刺后留取肝组织,采用逆转录-聚合酶链反应检测IRS-2mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹法检测IRS-2蛋白表达;采用免疫沉淀及增强化学发光法检测IRS-2酪氨酸磷酸化程度。结果CHB非IR组肝组织IRS-2 mRNA(0.38士0.06)、蛋白(0.94±0.18)表达及酪氨酸磷酸化程度(0.78±0.09)较对照组(分别为0.45±0.11、0.99±0.20、1.00±0.23)有所降低,但差异无统计学意义(t0P〉0.05);CHB合并IR组IRS-2 mRNA(0.26±0.08)、蛋白(0.67±0.11)表达及酪氨酸磷酸化程度(0.63±0.14)均较对照组明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论CHB合并IR患者肝组织IRS-2的mRNA和蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的降低可能是产生IR的机制之一。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 受体 胰岛素 胰岛素受体底物2 胰岛素抵抗 酪氨酸磷酸化
酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能猪精子上的分布 被引量:1
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作者 张旭成 袁慧敏 金一 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第9期共4页
为研究猪精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布。结... 为研究猪精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布。结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前35%增至获能1.5 h时的88%,酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段。 展开更多
关键词 精子获能 酪氨酸磷酸化
多囊卵巢综合征瘦素抵抗的分子机制 被引量:1
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作者 游爱平 刘义 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2010年第36期5479-5482,共4页
目的:研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者脂肪组织瘦素受体后信号转导分子——JAK2和STAT3蛋白的表达及酪氨酸磷酸化程度以及JAK2激酶活性变化,探讨PCOS瘦素抵抗的分子机制。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PCOS合并胰岛素抵抗(I... 目的:研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者脂肪组织瘦素受体后信号转导分子——JAK2和STAT3蛋白的表达及酪氨酸磷酸化程度以及JAK2激酶活性变化,探讨PCOS瘦素抵抗的分子机制。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PCOS合并胰岛素抵抗(IR)患者23例(PCOSIR组)、PCOS非IR患者18例(PCOS非IR组)及单纯子宫肌瘤患者23例(对照组)的血清瘦素水平;采用放射免疫法检测各组空腹血清胰岛素(FIN)水平,利用稳态模型(HOMA)计算IR指数(HO-MA-IR);采用免疫印迹法检测脂肪组织JAK2和STAT3蛋白表达及磷酸化程度;应用免疫沉淀、薄层层析及γ液闪计数方法检测脂肪组织JAK2激酶活性,并进行分析比较。结果:①PCOSIR组血清瘦素水平为(19.63±4.16)μg/L,明显高于PCOS非IR组的(15.54±4.26)μg/L和对照组的(15.29±2.56)μg/L,差异均有统计学意义(P〈0.01);PCOS非IR组与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05);②PCOSIR组JAK2和STAT3的蛋白表达分别为1.42±0.26和2.33±0.47,PCOS非IR组分别为1.36±0.18和2.10±0.24,对照组分别为1.29±0.11和2.45±0.36,3组比较差异均无统计学意义(P〉0.05);③PCOSIR组JAK2和STAT3蛋白酪氨酸磷酸化程度分别为1.87±0.16和3.32±0.17,均明显低于PCOS非IR组的4.12±0.68和5.96±0.44及对照组的4.27±0.34和6.15±0.64,差异均有统计学意义(P〈0.01);PCOS非IR组与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05);④PCOSIR组JAK2激酶活性较PCOS非IR组和对照组均明显下降,差异均有统计学意义(P〈0.01),PCOS非IR组与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:PCOSIR患者同时存在瘦素抵抗,其原因可能为瘦素受体后信号转导分子JAK2酪氨酸磷酸化受损,使JAK2活性降低,导致STAT3酪氨酸磷酸化异常和瘦素受体后信号转导障碍。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 瘦素抵抗 JAK2/STAT3 酪氨酸磷酸化
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