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我国蓝舌病病毒血清24型毒株的分离与遗传特征分析
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作者 杨恒 王金萍 +8 位作者 李乐 肖雷 孟锦昕 寇美玲 廖德芳 何于雯 高林 李占鸿 李华春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期31-37,共7页
掌握云南省蓝舌病病毒(BTV)的活动情况与流行毒株的遗传特征。2012—2015年,在云南省的师宗县、江城县与芒市分别设立3个监控点,进行BTV的分离。自监控动物采集的BTV核酸阳性血液通过'鸡胚-C6/36细胞-BHK细胞'接种的方式进行病... 掌握云南省蓝舌病病毒(BTV)的活动情况与流行毒株的遗传特征。2012—2015年,在云南省的师宗县、江城县与芒市分别设立3个监控点,进行BTV的分离。自监控动物采集的BTV核酸阳性血液通过'鸡胚-C6/36细胞-BHK细胞'接种的方式进行病毒分离;采用RT-PCR与中和试验进行分离病毒的血清型鉴定;设计特异性引物对分离病毒的Seg-2、Seg-3、Seg-7与Seg-6基因节段进行RT-PCR扩增与克隆测序。2012—2015年,从云南省的师宗县、江城县与芒市分别分离获得3株BTV-24型毒株。分离病毒的Seg-2、Seg-3、Seg-7与Seg-6序列系统发育分析显示:我国毒株的Seg-2与BTV-24型参考毒株聚为一簇,而Seg-6与BTV-10型毒株聚为一簇;我国毒株的Seg-3在系统发生树上划分为'东方型'地域型,Seg-7在系统发生树上形成一个独立于其他地域型的分支。本试验报道了我国BTV-24型毒株的分离与Seg-2、Seg-3、Seg-6与Seg-7序列特征,结果表明,我国BTV-24型毒株的Seg-6基因节段与BTV-10型毒株发生了基因重配;Seg-7具有独特的遗传特征,形成了一个新的Seg-7地域型,暂定为'Chinese topotype'。本试验为进一步开展BTV-24型的流行病学、感染特性与疫苗的研究奠定基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 蓝舌病病毒血清24型 病毒分离 基因重配 地域型
一株牛副流感病毒3型的分离鉴定及系统进化树分析
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作者 崔一龙 杨达汉 +3 位作者 石芸 尹有勤 薛江东 马德慧 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期25-28,共4页
目的分离鉴定一株疑似为牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的毒株,并分析系统进化树。方法从内蒙古某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离一株疑似为BPIV3的毒株,将分离毒株在MDBK细胞上进行增殖,并通过血凝试... 目的分离鉴定一株疑似为牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的毒株,并分析系统进化树。方法从内蒙古某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离一株疑似为BPIV3的毒株,将分离毒株在MDBK细胞上进行增殖,并通过血凝试验及RT-PCR鉴定,同时对其N基因序列进行测定及分析,建立亲缘关系进化树。结果该分离病毒可在MDBK细胞上增殖,且可产生特异性细胞病变,第6代细胞的毒力为10^7.1 TCID50/100μL,与GenBank中已发表的BPIV3毒株N基因片段的同源性为99.9%,与序列号为D84095.1的BPIV3等亲缘性最近。结论本研究获得的分离株为BPIV3,与日本分离株(D84095.1)同源性较高。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型 病毒分离 血凝试验 RT-PCR 系统进化树
Exosomes Released from Rabies Virus-Infected Cells May be Involved in the Infection Process
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作者 Jingyu Wang Fan Wu +8 位作者 Chuntian Liu Wenwen Dai Yawei Teng Weiheng Su Wei Kong Feng Gao Linjun Cai Ali Hou Chunlai Jiang 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2019年第1期59-65,共7页
Exosomes are cell-derived vesicles that are secreted by many eukaryotic cells. It has recently attracted attention as vehicles of intercellular communication. Virus-infected cells release exosomes, which contain viral... Exosomes are cell-derived vesicles that are secreted by many eukaryotic cells. It has recently attracted attention as vehicles of intercellular communication. Virus-infected cells release exosomes, which contain viral proteins, RNA, and pathogenic molecules. However, the role of exosomes in virus infection process remains unclear and needs to be further investigated.In this study, we aimed to evaluate the effects of exosomes on rabies virus infection. OptiPrepTM density gradient centrifugation was used to isolate exosomes from rabies virus-infected cell culture supernatants. A rabies virus G protein enzyme-linked immunosorbent assay and acetylcholinesterase activity assays were performed to verify the centrifugation fractions. Exosomes were then characterized using transmission electron microscopy and Western blotting. Our results showed that rabies virus infection increased the release of exosomes. Treatment with GW4869 and si-Rab27 a, two exosomal secretion inhibitors, inhibited exosome release. Furthermore, the inhibitors reduced the levels of extracellular and intracellular viral RNA. These data indicated that exosomes may participate in the viral infection process. Moreover, our results establish a basis for future research into the roles of exosomes in rabies virus infection and as potential targets for developing new antiviral strategies. 展开更多
关键词 EXOSOMES RABIES VIRUS Isolation VIRUS INFECTION
上海市定点监测猪群伪狂犬病病原学调查与病毒分离鉴定 预览
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作者 鞠厚斌 杨德全 +7 位作者 葛菲菲 刘健 李鑫 杨显超 齐新永 邓波 王建 周锦萍 《中国动物检疫》 CAS 2019年第4期9-13,共5页
为了解上海市定点监测猪群伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,对2014-2015年来自兽医疾病诊断中心、种猪场、屠宰场和规模场的1 863份样品进行PRV荧光定量PCR检测。结果显示,共检出48份PRV核酸阳性,总阳性率为2.6%(48/1 863),其中2014年为4.3%(... 为了解上海市定点监测猪群伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,对2014-2015年来自兽医疾病诊断中心、种猪场、屠宰场和规模场的1 863份样品进行PRV荧光定量PCR检测。结果显示,共检出48份PRV核酸阳性,总阳性率为2.6%(48/1 863),其中2014年为4.3%(39/898),2015年为0.9%(9/965),呈现大幅下降趋势,表明上海市通过加强PR免疫,淘汰散养和中小型养殖场,加强种猪场PR净化等措施,使本市猪群的PRV感染得到了有效控制。对部分阳性样品用BHK-21细胞进行PRV分离鉴定,共获得12株病毒,并对其中1株毒株进行了病毒毒价测定,获得了稳定的毒价,这为下一步的动物试验奠定了良好基础。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 病原学调查 病毒分离 毒价测定
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流感病毒检测方法研究进展
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作者 朱汝南 钱渊 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期102-106,共5页
流感是人类呼吸道感染中常见且流行范围最广的疾病之一。流感不仅对易感和高危人群造成严重威胁,同时也对公共卫生造成重要影响。流感病毒感染的快速、准确诊断对于及时给予特异的抗病毒治疗、有效控制疫情、降低季节性流行和大流行期... 流感是人类呼吸道感染中常见且流行范围最广的疾病之一。流感不仅对易感和高危人群造成严重威胁,同时也对公共卫生造成重要影响。流感病毒感染的快速、准确诊断对于及时给予特异的抗病毒治疗、有效控制疫情、降低季节性流行和大流行期间与流感病毒感染有关的发病率和病死率至关重要。现对目前可用于人类流感病毒感染的诊断方法(包括病毒分离、抗原检测、核酸扩增等)及为了克服一些传统检测方法的局限性而正在研发的新的诊断方法进行综述,以供临床医师参考。 展开更多
关键词 流感病毒 诊断 病毒分离 抗原检测 核酸扩增 快速诊断
蓝舌病病毒血清9型毒株在我国的首次分离
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作者 李占鸿 王金萍 +5 位作者 杨恒 廖德芳 宋建领 高林 何于雯 李华春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期354-363,共10页
旨在分离流行于我国云南省的蓝舌病病毒(BTV),掌握分离BTV的遗传特征与感染特性。采用"鸡胚-C6/36细胞-BHK-21细胞"接种的方式,采集哨兵牛的BTV阳性血液进行病毒分离;采用血清中和试验以及Segment2与Segment6ORF区的克隆测序... 旨在分离流行于我国云南省的蓝舌病病毒(BTV),掌握分离BTV的遗传特征与感染特性。采用"鸡胚-C6/36细胞-BHK-21细胞"接种的方式,采集哨兵牛的BTV阳性血液进行病毒分离;采用血清中和试验以及Segment2与Segment6ORF区的克隆测序确定分离病毒的血清型;通过病毒噬斑形成和增殖曲线的测定,分析病毒在BHK-21细胞的增殖特性;通过qRT-PCR与血清中和试验分析BTV感染动物血液中病毒含量与中和抗体动态变化情况。结果显示:2013年8月,在云南芒市设定的哨兵牛中分离出一株BTV(毒株号V013/YN/2013),血清中和试验显示V013/YN/2013为BTV-9型病毒,Segment2与Segment6序列分析表明分离的病毒属BTV-9Eastern型,与日本毒株和澳大利亚BTV-9型毒株具有最近的亲缘关系。病毒噬斑与增殖曲线测定结果显示V013/YN/2013在BHK-21细胞上增殖能力明显强于BTV-9型参考毒株。自然感染V013/YN/2013的牛在连续5个月的监控期内未出现临床症状,感染动物虽产生了特异性中和抗体,但血液中始终能持续检测到病毒核酸。本研究首次报道了BTV-9Eastern型毒株V013/YN/2013在我国的分离,为进一步开展中国BTV-9型病毒的全基因组测序、诊断方法的建立、流行病学调查与致病性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 病毒分离 血清型 序列分析 感染特性
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乌鲁木齐市手足口病病毒分离技术的研究
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作者 相然 樊旭成 +4 位作者 韩志国 薛娜 蒲玉娇 杨建东 芮宝玲 《医学动物防制》 2019年第1期1-4,共4页
目的探索乌鲁木齐市手足口病病毒分离培养的最适细胞系和最优培养条件,为手足口病的防治提供技术支持。方法采集适当的临床标本,对标本进行核酸提取和鉴定,根据不同的手足口病病毒分离方法,随机选取相应的阳性标本接种于横纹肌肉瘤传代... 目的探索乌鲁木齐市手足口病病毒分离培养的最适细胞系和最优培养条件,为手足口病的防治提供技术支持。方法采集适当的临床标本,对标本进行核酸提取和鉴定,根据不同的手足口病病毒分离方法,随机选取相应的阳性标本接种于横纹肌肉瘤传代细胞(RD),观察结细胞病变效应(CPE),有4+病变的培养液进行RT-PCR鉴定其效果。结果 2013-2015年共检测手足口病病例标本2 267份,肠道病毒总阳性率为79.31%,在病原体进行病毒分离时最佳细胞系是RD细胞,最优培养温度条件是35℃,血清浓度为2%,接种量为300μl,接种方式为直接接种,样本采集以粪便标本最佳。结论合理的细胞系和培养条件可以明显提高病毒的分离培养效率。 展开更多
关键词 手足口病 病毒分离 病原学 流行病学
山东省某地区牛、羊肠道病毒感染的流行病学调查
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作者 李欣 胡俊英 +5 位作者 林倩 王旭 郑博伟 张泽财 胡莉萍 王新平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期223-227,共5页
牛、羊肠道病毒感染为国内新近报道的动物传染病,其流行病学本底在国内缺乏。为了解牛、羊肠道病毒感染的情况,本研究应用双抗体夹心ELISA方法对采集于山东省某地区的奶牛、肉牛、绵羊和山羊粪便样品进行了肠道病毒的检测。同时对ELISA... 牛、羊肠道病毒感染为国内新近报道的动物传染病,其流行病学本底在国内缺乏。为了解牛、羊肠道病毒感染的情况,本研究应用双抗体夹心ELISA方法对采集于山东省某地区的奶牛、肉牛、绵羊和山羊粪便样品进行了肠道病毒的检测。同时对ELISA检测为阳性的部分样品进行了病毒分离,并以免疫过氧化物酶单层试验对分离毒株进行了鉴定。结果发现,奶牛的肠道病毒感染率为25.0%,肉牛群的感染率为7.6%,绵羊的肠道病毒感染率58.6%,山羊的肠道病毒感染率为48.5%,该结果为肠道病毒感染的防制提供流行病学的理论依据。 展开更多
关键词 牛肠道病毒 羊肠道病毒 流行病学调查 病毒分离 免疫过氧化物酶单层试验
图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱中SFTS病毒监测分析
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作者 李基旭 SHIN-Hyeong Cho +4 位作者 朴文 金光俊 宋振海 全圣焕 朴光明 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-205,共5页
目的 掌握图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱分布特征,了解该地区长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)病毒情况,分离病毒,分析其基因特征。方法 2017年4月~9月,在吉林省图们江流域... 目的 掌握图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱分布特征,了解该地区长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)病毒情况,分离病毒,分析其基因特征。方法 2017年4月~9月,在吉林省图们江流域中朝俄边境地区珲春市、图们市、和龙市、龙井市采集蜱虫进行形态学分类,选择新鲜长角血蜱对其进行分组,采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应方法检测SFTS病毒。对阳性样品,利用绿猴肾细胞进行病毒分离,并扩增S、M、L基因片段,比对同源性,建立系统进化树,分析其基因特征。结果 长角血蜱主要分布在图们江下游珲春市和图们市,为该两县优势种,分别达到71. 85%和87. 62%。在珲春市长角血蜱中分离到一株病毒,命名为YBHC-TICK2-2017/CHINA。该病毒S片段(1 746 bp)、M片段(3 336bp)、L片段(6 376 bp)基因序列与美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI) DNA序列数据库中记录的中国和韩国SFTS病毒分离株基因序列同源性为98. 00%~99. 00%。系统进化树分析,该病毒株S片段基因序列与中国吉林株(KT890282)分为一簇,M片段和L片段基因序列与中国江苏株(KR230781)分为一簇。结论 长角血蜱在图们江下游中朝俄边境地区具有广泛的分布。该研究首次在该地区长角血蜱中分离到SFTS病毒,提示该地区为SFTS防控重点区域。 展开更多
关键词 SFTS 病毒分离 传播媒介 长角血蜱
马鞍山市2016-2017年流感病原学监测结果分析
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作者 张云霞 江良梁 赵志荣 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期194-198,共5页
目的分析2016-2017马鞍山市流感病毒病原学监测结果,为流感防制提供科学依据。方法收集、分析马鞍山市2016-2017年流感样病例(influenza-like illness,ILI)监测数据,同时采集部分ILI咽拭子标本,采用RT-PCR法检测流感病毒核酸,对病原学... 目的分析2016-2017马鞍山市流感病毒病原学监测结果,为流感防制提供科学依据。方法收集、分析马鞍山市2016-2017年流感样病例(influenza-like illness,ILI)监测数据,同时采集部分ILI咽拭子标本,采用RT-PCR法检测流感病毒核酸,对病原学检测数据进行统计分析。结果 2016年共检测ILI咽拭子标本2 772份,流感病毒核酸检测阳性383例,总阳性率为13.82%。其中新甲型H1N1亚型59例(占15.40%),H3N2亚型111例(占28.98%),B-Yamagata亚型11例(占2.87%),B-Victoria亚型202例(占52.74%);2017年共检测ILI咽拭子标本2 170份,流感病毒核酸检测阳性614例,总阳性率为28.29%,其中新甲型H1N1亚型38例(占52.74%),H3N2亚型309例(占50.33%),B-Yamagata亚型178例(占28.99%),B-Victoria亚型89例(占14.50%)。不同月份阳性检出率比较差异有统计学意义(年X20162=450.876,X20172=240.002,P均<0.05)。核酸检测阳性率性别差异无统计学意义(X20162=0.171,X20172=0.174,P均>0.05)。不同年龄组间阳性率比较差异有统计学(X20162=160.030,X20172=132.901,P均<0.05)。2016、2017年MDCK细胞培养法分离流感病毒221株和98株,分离率分别为57.70%和15.96%;2016、2017年鸡胚培养法分离流感病毒26株和8株,分离率分别为6.79%和1.30%。两种方法比较有统计学差异(X2=74.815,P<0.05)。结论 2016年马鞍山市流感呈现冬春季两个发病高峰,主要流行株为B-Victoria型;2017年出现夏、冬、春季3个发病高峰,主要流行株为H3N2型。流行株发病高峰的变化可为当地流感防控提供参考,流感监测应进一步加强。 展开更多
关键词 流感病毒 亚型 分离培养 监测
2013年-2017年陕西省猪伪狂犬病病毒分子流行病学调查与gE基因序列变异分析 预览
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作者 朱小甫 吴旭锦 《动物医学进展》 北大核心 2019年第2期22-27,共6页
调查2013年-2017年间陕西省猪伪狂犬病流行情况,并对流行毒株gE基因进行测序分析,为猪伪狂犬病防控提供参考。采用套式PCR,检测了陕西9个地市、556个存在繁殖障碍现象猪场的1 390份样品中PRV感染情况,通过Vero细胞传代分离到11个PRV地... 调查2013年-2017年间陕西省猪伪狂犬病流行情况,并对流行毒株gE基因进行测序分析,为猪伪狂犬病防控提供参考。采用套式PCR,检测了陕西9个地市、556个存在繁殖障碍现象猪场的1 390份样品中PRV感染情况,通过Vero细胞传代分离到11个PRV地方流行毒株,并进行了gE基因片段克隆与序列分析。2013年-2017年间陕西存在繁殖障碍的猪场中PRV感染阳性率38.1%~83.3%,样品阳性率46.5%~85.3%。11株PRV核苷酸同源性为99.2%~100%,氨基酸同源性为98.3%~100%,提示这11个PRV流行毒株高度同源。在测定的118个氨基酸位点中,有6个位点与参考序列存在一定差异,分别是T/I31→S31、Q33→L33、Q52→R52、L/R67→A67、A68→D68和T115→R/P/S115。基因进化树分析显示,11株PRV亲缘关系很近,集中分布在一个小的分支上,与我国福建流行毒株Min-A关系密切,与欧美毒株亲缘关系较远。陕西省采样猪场表现出PRV感染率高、感染强度大的特点,gE基因出现多个点突变,且变异趋势相同,形成了一个独立的进化分支。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 分子流行病学 GE基因 变异 病毒分离
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2016年1~4月乌兰察布市流感病毒分离鉴定结果分析
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作者 李瑞丽 《河南预防医学杂志》 2019年第3期228-230,共3页
目的分析2016年乌兰察布市流感病原学分离鉴定结果,进一步加强本市流感监测工作,探索流感病毒的流行与变异情况,为本市未来的流感防控工作提供准确的理论依据。方法 2016年1月~4月哨点医院送检的流感样病例(ILI)患者咽拭子标本,接种MDC... 目的分析2016年乌兰察布市流感病原学分离鉴定结果,进一步加强本市流感监测工作,探索流感病毒的流行与变异情况,为本市未来的流感防控工作提供准确的理论依据。方法 2016年1月~4月哨点医院送检的流感样病例(ILI)患者咽拭子标本,接种MDCK细胞分离培养,采用血凝抑制方法(HAI),鉴定流感病毒的型别和亚型。结果共检测ILI咽拭子标本294份,分离出32株流感病毒,阳性率为10.88%,其中A型H3N2亚型2株,新甲H1N1型4株,B型Yamagata系6株,B型Victoria系20株。结论 2016年1月~4月乌兰察布市流感病毒不同毒株型交替出现,优势毒株为B型Victoria系。这也是乌兰察布市首次利用细胞培养技术成功分离出流感病毒毒株,为本市传染病防控工作提供了新的技术支撑。 展开更多
关键词 流感样病例 MDCK细胞 病毒分离
吉林某牛场牛病毒性腹泻流行病学调查及分析 预览
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作者 刘泽余 李健友 +3 位作者 刘占悝 李智杰 王超 郭利 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期247-255,共9页
为全面了解吉林省某规模化牛场牛病毒性腹泻(BVD)的流行情况,试验采集临床血清样品157份,粪便样品18份,肝脏、精液等组织样品17份,应用BVDV抗体检测试剂盒进行血清抗体检测,利用BVDV1型引物,采用纳米PCR方法对血清及临床样品进行BVDV抗... 为全面了解吉林省某规模化牛场牛病毒性腹泻(BVD)的流行情况,试验采集临床血清样品157份,粪便样品18份,肝脏、精液等组织样品17份,应用BVDV抗体检测试剂盒进行血清抗体检测,利用BVDV1型引物,采用纳米PCR方法对血清及临床样品进行BVDV抗原检测,对抗原阳性样品进行测序分析;将抗原阳性样品经研磨、稀释后用0.22μm滤膜过滤除菌,接入牛肾细胞(MDBK)进行病毒分离培养,盲传3代后再次进行抗原检测;采用免疫荧光技术检测病毒对MDBK细胞的侵染作用;利用Mega软件绘制系统进化树并进行同源性比对分析。结果显示,该牛场临床血清BVDV抗体阳性率为77.1%,血清抗原阳性率为12.1%,临床粪便等样品抗原阳性率为74.3%;病料接入细胞未观察到细胞病变,分离毒株PCR产物测序分析结果与样品抗原检测结果一致;免疫荧光检测结果显示,分离株毒液正常吸附于MDBK细胞中,有明显荧光反应;抗原测序分析显示,该牛场BVD主要流行毒株与BVDV JL-1株同源性高达99.0%,且均为BVDV 1型毒株。本研究对该牛场BVDV流行情况进行了全面调查,为开展净化工作奠定了基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻(BVD) 流行病学调查 病毒分离
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中国蓝舌病病毒血清5型毒株的分离与鉴定
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作者 李占鸿 肖雷 +6 位作者 孟锦昕 寇美玲 宋建领 廖德芳 高林 杨恒 李华春 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期36-43,共8页
为掌握我国云南省蓝舌病病毒(BTV)的流行情况,笔者在云南省师宗县设定哨兵动物,定期从哨兵动物上采集血液进行BTV分离。2012年笔者通过“鸡胚-C6/36细胞-BHK细胞”接种的方式从哨兵牛上分离出1株BTV(毒株号:V084/YN/2012),电镜观察显示... 为掌握我国云南省蓝舌病病毒(BTV)的流行情况,笔者在云南省师宗县设定哨兵动物,定期从哨兵动物上采集血液进行BTV分离。2012年笔者通过“鸡胚-C6/36细胞-BHK细胞”接种的方式从哨兵牛上分离出1株BTV(毒株号:V084/YN/2012),电镜观察显示,病毒粒子无囊膜,直径约80 nm,表面分布有纤突。血清中和试验表明,分离的病毒为蓝舌病病毒血清5型(BTV-5),使用抗BTV-5型的多克隆抗体为一抗进行间接免疫荧光染色,进一步证实分离毒株为BTV-5型。设计特异性引物对V084/YN/2012毒株的Segment 2 (Seg-2)与Segment 3 (Seg-3)的ORF区进行RT-PCR扩增与克隆测序,序列分析结果显示,V084/YN/2012与BTV-5型参考毒株(RSArrrr/05)的Seg-2核酸序列相似度为95.4%,在系统发育树上聚为一簇,属Seg-2基因E型;Seg-3在系统发生树上属Eastern topotype型,与中国BTV-4型YTS4毒株聚为一簇,核酸序列相似度高达97.5%。病毒蚀斑与增殖曲线测定试验表明,V084/YN/2012与实验室保存的BTV-5型参考毒株(RSArrrr/05)在BHK21细胞上可形成形态大小相近的病毒蚀斑,二者在BHK21细胞上的增殖特性也基本一致。本研究确认了BTV-5型V084/YN/2012毒株在我国的分离,掌握了病毒Seg-2与Seg-3基因的遗传特征以及病毒在BHK21细胞上的增殖特性。研究结果为进一步开展中国BTV-5型的基因组测序、流行病学调查与致病性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 血清5型 分离 鉴定 序列分析 生物特性
江苏省急性弛缓性麻痹病例流行病学特征分析
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作者 许燕 冷红英 +3 位作者 吴昀 陈强 汪志国 汤奋扬 《中国热带医学》 CAS 2019年第1期77-80,共4页
目的了解江苏省2012-2017年急性弛缓性麻痹病例(acute flaccidparalysis,AFP)流行病学特征,为制定其预防控制策略提供科学依据。方法采用描述性方法对江苏省2012-2017年报告的AFP病例进行流行病学分析。结果 2012-2017年江苏省共报告AF... 目的了解江苏省2012-2017年急性弛缓性麻痹病例(acute flaccidparalysis,AFP)流行病学特征,为制定其预防控制策略提供科学依据。方法采用描述性方法对江苏省2012-2017年报告的AFP病例进行流行病学分析。结果 2012-2017年江苏省共报告AFP病例1 635例,年均发病率为2.56/10万。发病率居前三位的是常州市、镇江市和泰州市,分别为4.65/10万、4.16/10万和3.81/10万;发病高峰出现在3月、6月和9-11月;男女性别比为1.69∶1,5岁以下儿童发病居多,共1 033例,占病例总数的66.18%;1 558例免疫史≥3剂次,17例免疫史不详,21例因未到接种年龄不能及时接种相应剂次疫苗,39例因生病或其他原因不能及时接种疫苗。肠道病毒分离率为3.32%,14.19%的病例60~75d随访仍存在一定的残留麻痹。结论江苏省AFP病例以低年龄儿童发病为主,男性多于女性,春季、夏秋季高发,大部分预后良好,部分儿童仍存在残留麻痹,应采取措施降低致残危险。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹 流行特征 病毒分离 疾病谱
2012—2016年中国南方地区帕利亚姆血清群病毒的分离与序列特征分析 被引量:1
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作者 杨恒 肖雷 +7 位作者 李占鸿 孟锦昕 杨振兴 吕敏娜 林栩慧 廖德芳 牛保生 李华春 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期761-770,共10页
旨在从牛、羊监控动物群中,对流行于我国的帕利亚姆血清群病毒(PALV)进行分离、鉴定与序列特征分析,明确我国流行毒株与国外毒株之间的关系。自监控动物采集的PALV阳性血液接种BHK-21细胞进行病毒分离;对所分离PALV毒株的Seg-7与Seg-... 旨在从牛、羊监控动物群中,对流行于我国的帕利亚姆血清群病毒(PALV)进行分离、鉴定与序列特征分析,明确我国流行毒株与国外毒株之间的关系。自监控动物采集的PALV阳性血液接种BHK-21细胞进行病毒分离;对所分离PALV毒株的Seg-7与Seg-2基因节段进行扩增、测序与序列分析;通过高分辨率琼脂糖凝胶电泳分析不同血清型PALV代表毒株基因组的"电泳带型"特征;通过免疫荧光与中和试验分析不同血清型PALV的阳性血清之间的交叉反应特性与中和活性。试验结果如下:2012—2016年,在云南、广西、广东共计分离出19株PALV;Seg-2与Seg-7测序与系统发育分析显示,分离毒株分属Chuzan virus(CHUV)、D’Aguilar virus(DAV)与Bunyip Creek virus(BCV)三种血清型,不同血清型毒株均与日本毒株具有最近的亲缘关系,而与澳洲、非洲毒株亲缘关系较远。病毒基因组电泳结果显示PALV基因组呈现"3-3-4"的电泳带型特征。免疫荧光结果显示针对CHUV的多克隆抗体可使感染CHUV、DAV与BCV的BHK-21细胞呈现特异性荧光。血清学中和试验显示,CHUV、DAV与BCV三种病毒的阳性血清之间无交叉中和保护作用。本研究报道了2012—2016年中国PALV的分离与Seg-2、Seg-7序列特征,并首次报道了PALV的DAV与BCV两种血清型病毒在我国的分离,研究结果将有助于掌握我国PALV的分布与遗传特征,为诊断试剂的开发、流行病学调查与致病性研究提供科学依据。 展开更多
关键词 帕利亚姆血清群病毒 病毒分离 病毒鉴定 血清型 序列分析 交叉中和保护
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基孔肯雅病毒感染实验室诊断研究进展
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作者 刘江涌 任瑞文 陈月 《热带医学杂志》 CAS 2018年第10期1398-1400,F0003共4页
基孔肯雅病毒(CHIKV)是一种披膜病毒科甲病毒属病毒,主要传播媒介为伊蚊,无特异性的治疗方法和疫苗。我国人群对CHIKV普遍易感,近年来屡有输入性病例报道,是一种潜在严重威胁我国南方地区公共安全的虫媒病毒。当前CHIKV感染实验室诊... 基孔肯雅病毒(CHIKV)是一种披膜病毒科甲病毒属病毒,主要传播媒介为伊蚊,无特异性的治疗方法和疫苗。我国人群对CHIKV普遍易感,近年来屡有输入性病例报道,是一种潜在严重威胁我国南方地区公共安全的虫媒病毒。当前CHIKV感染实验室诊断主要包括病毒分离、核酸检测和抗体检测等,本文就基孔肯亚病毒实验室诊断研究进展作一综述。 展开更多
关键词 基孔肯雅病毒 病毒分离 核酸检测 抗体检测
阳江地区某猪场塞内卡病毒抗原和抗体的检测与分析 预览
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作者 黄元 刘涛 +5 位作者 陈锦良 王晓虎 陈晶 梁培新 黄武 向华 《广东农业科学》 CAS 2018年第12期107-111,共5页
塞内卡病毒是新发现的一种小RNA病毒,能使猪产生类似水疱样病变,并引起仔猪死亡。塞内卡病毒作为外来病原,近几年呈现蔓延趋势。从广东阳江地区某猪场采集病变组织和血清进行检测分析,针对塞内卡病毒VP1-2A基因进行RT-PCR扩增,得到特异... 塞内卡病毒是新发现的一种小RNA病毒,能使猪产生类似水疱样病变,并引起仔猪死亡。塞内卡病毒作为外来病原,近几年呈现蔓延趋势。从广东阳江地区某猪场采集病变组织和血清进行检测分析,针对塞内卡病毒VP1-2A基因进行RT-PCR扩增,得到特异性的单一条带。对PCR产物序列分析表明,与2015年美国毒株USA/GBI29/2015的同源性最高、为99.2%,而与我国2017年毒株CH-HN-2017的同源性为97.1%。将水泡皮处理后接种PK-15细胞,盲传4代产生显著病变,滴度可达107TCID50/0.1mL。对采集的16份血清进行抗体中和试验表明,发病种猪的抗体效价最高达到1︰4096,9头种猪全部感染SVA,发病率为66.7%,总感染率为68.8%。 展开更多
关键词 塞内卡病毒 病毒分离 序列分析 抗体中和试验
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应用人胚肺成纤维细胞MRC-5培养分离寨卡病毒研究
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作者 李幸乐 李懿 +5 位作者 王若琳 苏佳 康锴 郭大城 许汴利 黄学勇 《疾病监测》 CAS 2018年第9期715-717,共3页
目的应用人胚肺成纤维细胞MRC-5培养并分离鉴定寨卡病毒。方法收集寨卡病毒病确诊病例的精液样本并在MRC-5细胞中进行培养,观察致细胞病变效应(CPE)。采用实时荧光PCR(real-time PCR)方法鉴定培养,同时对培养物进行序列测定和比对... 目的应用人胚肺成纤维细胞MRC-5培养并分离鉴定寨卡病毒。方法收集寨卡病毒病确诊病例的精液样本并在MRC-5细胞中进行培养,观察致细胞病变效应(CPE)。采用实时荧光PCR(real-time PCR)方法鉴定培养,同时对培养物进行序列测定和比对分析。结果病例精液样本经MRC-5细胞盲传3代,未观察到明显的特异性致CPE,MRC-5细胞3代培养物寨卡病毒经real-time PCR检测结果呈阳性。毒株命名为Henan/001/2016,GenBank编号为MF593625,属于亚洲基因簇系。Henan/001/2016与Natal RGN株的亲缘关系最为接近,在E基因区段的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.7%和100%。结论 MRC-5细胞适用于寨卡病毒的分离、培养和鉴定。 展开更多
关键词 寨卡病毒 MRC-5细胞 病毒分离 进化分析
2016-2017年广东省猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因遗传变异分析
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作者 王艳午 覃燕灵 +5 位作者 董建国 于林洋 刘燕玲 张乐宜 吴志君 宋长绪 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第23期96-101,共6页
为了深入了解2016—2017年广东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NSP2基因的遗传变异情况,试验采用RT-PCR法对从广东省规模化猪场采集的106份疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的肺脏病料进行鉴定,并对分离的PRRSV毒株NSP2基因构建遗传进化... 为了深入了解2016—2017年广东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NSP2基因的遗传变异情况,试验采用RT-PCR法对从广东省规模化猪场采集的106份疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的肺脏病料进行鉴定,并对分离的PRRSV毒株NSP2基因构建遗传进化树,以及进行同源性分析和氨基酸序列比对。结果表明:经RT-PCR法检测有12份病料为阳性,阳性率为11.32%;分离毒株均为美洲型毒株,有11株毒株与高致病性猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(Highly-pathogenicPRRSV,HP-PRRSV)毒株在同一分支上,1株毒株与以NADC30为代表的毒株在同一分支上;同源性分析显示,PRRSVNSP2基因序列与VR-2332的同源性为53.0%~76.7%,与CH-1a的同源性为51.9%~92.5%,与HuN4的同源性为51.3%~98.2%,与JXA1的同源性为51.6%~98.3%,与NADC30的同源性为51.5%~92.2%,与JXA1-P80的同源性为50.9%~98.3%;氨基酸序列比对结果显示,与美洲型代表株VR-2332和低致病性毒株CH-1a相比,除GDth毒株外其余11株PRRSV毒株在高变区均有多处氨基酸位点发生突变。说明2016—2017年广东地区PRRSV流行株以高致病性毒株为主,并且出现NADC30样毒株。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 肺脏 高致病性 病毒分离 非结构蛋白2(NSP2) 流行病学分析
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