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凝血因子Ⅻ诱导外周血单核细胞分化为卵巢癌腹膜内肿瘤相关巨噬细胞的实验研究 被引量:1
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作者 王睿黎 张婷 +5 位作者 马政文 王颖 马庆良 徐红 程忠平 汪希鹏 《现代妇产科进展》 北大核心 2010年第4期270-273,277共5页
目的:探讨凝血因子Ⅻ能否诱导外周血单核细胞(MO)分化为卵巢癌(EOC)腹膜微环境中的肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。方法:分离正常女性外周血MO,在体外经Ⅻ因子刺激,流式荧光激活细胞分选技术(FACS)检测刺激后CD14、CD68和CD163表达... 目的:探讨凝血因子Ⅻ能否诱导外周血单核细胞(MO)分化为卵巢癌(EOC)腹膜微环境中的肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。方法:分离正常女性外周血MO,在体外经Ⅻ因子刺激,流式荧光激活细胞分选技术(FACS)检测刺激后CD14、CD68和CD163表达的比例;ELISA检测TNF-α、IL-4、IL-8、TGF-β、IL-10、MMP2等因子的表达;Real-timePCR检测IL-10、IL-8、CCL18、CCR2、TGF-β、CXCR1及CXCR2等细胞因子及相关受体mRNA的表达,添加Ⅻ因子抑制物-C1酯酶抑制剂(C1-INH)后检测相应mRNA转录变化。结果:经Ⅻ因子刺激后,MO表面CD14,CD163表达比例上调[CD14:(57.025±11.135)%,CD163:(1.09±0.21)%],与阴性对照组[CD14:(45.2±5.24)%,CD163:(0.7±0.08)%]相比有统计学差异(P〈0.05);经Ⅻ因子刺激后MO分泌IL-8,IL-10及TGF-β分泌表现出时间依赖性,IL-8及TGF-β于刺激后12h分泌达到高峰,IL-10分泌高峰为刺激后3h;刺激后IL-8,IL-10,CXCR2,CCR2以及CCL18mRNA的表达上调,添加C1-INH后,相应mRNA的转录水平下调。结论:凝血因子Ⅻ能诱导外周血MO分化成表型为CD14highCD163highIL-10highCCL18highIL-8high的单核巨噬细胞,类似TAM特征的巨噬细胞亚型,Ⅻ因子可能参与EOC腹膜微环境中浸润的MO分化,从而调控EOC的腹膜转移。 展开更多
关键词 凝血因子Ⅻ 单核细胞 肿瘤相关巨噬细胞 卵巢肿瘤
凝血酶刺激单核/巨噬细胞产生IL-8增强卵巢癌细胞侵袭力的实验研究 被引量:2
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作者 张婷 王睿黎 +7 位作者 马政文 王颖 狄文 程忠平 徐红 马庆良 李卫平 汪希鹏 《现代妇产科进展》 北大核心 2009年第10期734-738,共5页
目的:研究凝血酶刺激正常人外周血来源单核/巨噬细胞(MO/MA)后对卵巢癌细胞侵袭力的影响。方法:分离正常女性外周血单核细胞后,用印度墨汁吞噬试验检测凝血酶刺激MO/MA后吞噬功能的变化;以凝血酶刺激MO/MA后的上清为趋化物,检测对... 目的:研究凝血酶刺激正常人外周血来源单核/巨噬细胞(MO/MA)后对卵巢癌细胞侵袭力的影响。方法:分离正常女性外周血单核细胞后,用印度墨汁吞噬试验检测凝血酶刺激MO/MA后吞噬功能的变化;以凝血酶刺激MO/MA后的上清为趋化物,检测对卵巢癌细胞系(ES-2,SKOV-3,HO-8910)体外侵袭力的影响;阻断侵袭实验中加入IL-8单克隆中和抗体。转录因子试剂盒AP1、STAT、Inflammation 1、Oncogene 3家族筛选凝血酶通过何种细胞信号转导途径激活MO/MA。结果:(1)凝血酶未显著提高MO/MA的吞噬能力;(2)基质胶体侵袭实验表明,上皮性卵巢癌细胞系ES-2在MO/MA+凝血酶刺激组上清作用下,侵袭力增强(161.9±11.18,n=6),其侵袭细胞数目与卵巢癌腹水刺激组(157.5±14.86,n=4)类似,但显著高于阴性对照组普通培养基(47.25±12.45,P〈0.05),添加水蛭素(凝血酶抑制剂)后能显著降低其侵袭力(73.5±17.3,P〈0.01);抗IL-8单克隆抗体对ES-2细胞侵袭的阻断作用呈浓度依赖性,相同体外侵袭实验在SKOV-3细胞系(n=2)及HO-8910细胞系(n=2)中得到类似结果;(3)转录因子检测表明,In-flammation 1及Oncogene 3家族中几乎所有涉及炎症的转录因子包括c-Fos,c-Rel,NF-κbp50,NF-κb p65,c/EBPa,Egr-1,HIF-1,OctⅠ,OctⅡ在凝血酶刺激巨噬细胞后活性增加(n=4)。结论:凝血酶刺激MO/MA通过上调IL-8产生,显著增强卵巢癌细胞的侵袭力,表明卵巢癌腹膜内凝血酶可能通过教育和诱导MO/MA向TAM样细胞分化后,加速肿瘤细胞腹膜内转移。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 巨噬细胞 肿瘤相关巨噬细胞 侵袭 肿瘤 白细胞介素-8
凝血因子Ⅱ可诱导单核细胞和巨噬细胞分化为卵巢癌腹膜内肿瘤相关巨噬细胞 被引量:8
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作者 张婷 马政文 +5 位作者 王颖 汪希鹏 王睿黎 狄文 程忠平 李卫平 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期265-268,共4页
目的探讨激活的凝血因子Ⅱ(Ⅱ因子)能否诱导外周血单核细胞分化为卵巢上皮性癌(EOC)腹膜微环境肿瘤相关巨噬细胞。方法分离正常女性外周血单核细胞和巨噬细胞(MO/MA)以及EOC腹水内肿瘤相关巨噬细胞(TAM);凝血因子Ⅱ刺激后,检... 目的探讨激活的凝血因子Ⅱ(Ⅱ因子)能否诱导外周血单核细胞分化为卵巢上皮性癌(EOC)腹膜微环境肿瘤相关巨噬细胞。方法分离正常女性外周血单核细胞和巨噬细胞(MO/MA)以及EOC腹水内肿瘤相关巨噬细胞(TAM);凝血因子Ⅱ刺激后,检测MO/MA和TAM表面Ⅱ因子受体PAR1、3、4表达,分析MO/MA在Ⅱ因子或(Ⅱ因子+水蛭素)刺激后CD14、CD68和CD163表达比例,ELISA检测Ⅱ因子刺激后巨噬细胞表达的细胞因子。Real—time PCR检测细胞因子、趋化因子mRNA表达。结果MO/MA及TAM细胞表面上均有Ⅱ因子受体PAR1、3、4表达;Ⅱ因子刺激后,MO/MA高表达CD14[(50.23±4.34)%]及CD163[(3.82±1.93)%],与Ⅱ因子+水蛭素刺激组[CD14(32.37±6.24)%,CD163(0.56±0.28)%]及培养液对照组[CD14(40.06±8.06)%,CD163(1.02±0.38)%]相比差异有统计学意义(P〈0.05);ELISA结果示Ⅱ因子刺激后IL-8、IL—10及TGF—β分泌表现出时间依耐性特征,刺激后3h表达量达高峰;Real—time PCR显示IL-8、IL-10、IL-12、CXCR2、CCR2、CCL18 mRNA表达上调,CXCR1和TGF—β表达下降。结论激活的凝血因子Ⅱ能诱导外周血MO/MA分化为CD163^high IL-10^high IL-12^highCCL18^high IL-8^high,具有类似肿瘤相关巨噬细胞特征的M2型巨噬细胞亚型;Ⅱ因子可能参与了EOC腹膜微环境浸润的TAM的分化和极化作用。 展开更多
关键词 凝血因子 巨噬细胞 肿瘤相关巨噬细胞 卵巢肿瘤
原因不明复发性流产患者母-胎界面T淋巴细胞受体β链可变区基因的表达水平和频率
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作者 汪希鹏 林其德 +2 位作者 马政文 洪艳 陆佩华 《中华妇产科杂志》 CAS 北大核心 2008年第10期751-756,共6页
目的通过分析母一胎界面T淋巴细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因的表达水平和频率,探索T淋巴细胞参与原因不明复发性流产(RSA)发生的作用机制。方法采集18例原因不明RSA患者(研究组)和41例正常早孕人工流产妇女(对照组)的蜕... 目的通过分析母一胎界面T淋巴细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因的表达水平和频率,探索T淋巴细胞参与原因不明复发性流产(RSA)发生的作用机制。方法采集18例原因不明RSA患者(研究组)和41例正常早孕人工流产妇女(对照组)的蜕膜组织,基因组扫描方法检测两组患者蜕膜内TCRBV基因的表达,分析TCRBV基因表达水平和频率的分布与原因不明RSA的关系。结果(1)研究组患者蜕膜组织中TCRBV基因的表达水平,BV19为0.029±0.031,高于对照组(0.013±0.010),而BV5.2的表达水平(0.040±0.035)低于对照组(0.067±0.052),两组间分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。其余各家族的表达水平两组问比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。(2)研究组TCRBV家族中表达频率最高的前4位为BV2、BV6、BV7和BV3,其表达频率分别为66.7%、66.7%、66.7%和61.1%,均超过了50%。研究组中,BV15、BV19和BV20的表达频率分别为33.3%、38.9%和33.3%,均高于对照组(分别为7.3%、14.6%和7.3%);BV4和BV7的表达频率分别为33.3%和66.7%,均低于对照组(分别为65.9%和92.7%),两组间分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。其余各家族的表达频率两组间比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论原因不明RSA患者蜕膜组织内的TCRBV家族表达存在差异,表达频率变化显著的TCRBV家族可能导致免疫有关的流产发生的易感性。 展开更多
关键词 流产 自然 基因 T细胞受体β 互补决定区 疾病易感性
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