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马抗中东呼吸综合征冠状病毒特异性F(ab’)2的制备
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作者 邱泊宁 胡星星 +8 位作者 闫飞虎 王翀 崔健男 盖微微 曹增国 王化磊 赵永坤 杨松涛 夏咸柱 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期173-180,共8页
目的采用免疫亲和层析技术纯化制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)特异性IgG与F(ab’)2。方法以经MERS-Co V病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高... 目的采用免疫亲和层析技术纯化制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)特异性IgG与F(ab’)2。方法以经MERS-Co V病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,原核表达的MERS-CoV刺突蛋白S受体结合域(S-receptor binding domain,S-RBD)为抗原蛋白制备免疫亲和柱,提取制备抗原特异性IgG或F(ab’)2。间接ELISA法检测各样品的活性,MERS假病毒中和试验检测样品的中和活性,BCA法测定样品的浓度,并计算收率。结果所制备的特异性IgG与特异性F(ab’)2的纯度分别为90. 1%和92. 8%,收率分别为8. 7%和3. 07%;在相同的浓度下,所制备的特异性IgG或F(ab’)2的活性和中和活性均高于对照组中的血清总Ig G或总F(ab’)2。结论成功制备了马抗MERS-CoV特异性IgG或F(ab’)2,为建立更加安全与高效的抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab’)2制备工艺奠定了基础。 展开更多
关键词 中东呼吸综合征 冠状病毒 病毒样颗粒 免疫亲和层析 免疫球蛋白 F(ab’)2
广西地区猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型基因型监测及遗传进化分析
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作者 李金凤 哈卓 +7 位作者 辛佳亮 李卓昕 张涵 郭影成 郑敏 那少龙 鲁会军 金宁一 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期10-15,22共7页
为了明确猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV-2)和猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type3,PCV-3)在广西地区的分子流行病学情况,试验通过PCR方法对2017年来自广西不同地区的80份猪肺脏样品进行PCV-2和PCV-3核酸检测,并对PCV-... 为了明确猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV-2)和猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type3,PCV-3)在广西地区的分子流行病学情况,试验通过PCR方法对2017年来自广西不同地区的80份猪肺脏样品进行PCV-2和PCV-3核酸检测,并对PCV-2和PCV-3的阳性样品进行ORF2基因的扩增和测序,同时利用生物信息学软件DNAStar和MEGA6.06对PCV-2和PCV-3的ORF2基因进行同源性分析和构建遗传进化树。结果表明:2017年广西地区PCV-2和PCV-3的总感染率分别为43.8%(35/80)和33.8%(27/80),PCV-2和PCV-3的共感染率为16.3%(13/80)。试验获得的19个PCV-2ORF2基因序列之间的核昔酸同源性为93.6%-99.9%,对应氨基酸同源性为93.1%~100%;19个PCV-2ORF2基因序列与国内外参考毒株ORF2基因序列的核昔酸同源性为82.8%-99.9%,对应氨基酸同源性为83.3%-99.6%。试验获得的2个PCV-3ORF2基因序列之间的核昔酸同源性为99.8%,对应氨基酸同源性为100%;2个PCV-3ORF2基因序列与国内外参考毒株ORF2基因序列的核昔酸同源性为97.7%-99.8%,对应氨基酸同源性为96.2%~100%。获得的19个PCV-2ORF-2基因序列中,12个为PCV-2b亚型,7个为PCV-2d亚型;获得的2个PCV-3ORF2基因序列为PCV-3a亚型,与丹麦和中国湖南分离得到的PCV-3亲缘关系较近。说明PCV-2和PCV-3在广西地区猪群中感染率很高,PCV-2感染主要以PCV-2b亚型为主.PCV-3之间高度保守,分布无地域性规律。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪圆环病毒3型 ORF2基因 遗传进化分析 同源性分析 分子流行病学
长春狐狸、貉和家兔养殖场十二指肠贾第虫基因型分析 预览
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作者 于利利 李显赫 +4 位作者 李建华 宫鹏涛 杨举 李巍 张西臣 《动物医学进展》 北大核心 2019年第2期84-86,共3页
为了解长春地区狐狸、貉和家兔养殖场的十二指肠贾第虫感染情况,基于十二指肠贾第虫GDH基因位点分别设计2对引物,对养殖场的120份狐狸粪便样品、60份貉粪便样品和148份家兔粪便样品十二指肠贾第虫进行检测和基因型分析。结果表明,在来... 为了解长春地区狐狸、貉和家兔养殖场的十二指肠贾第虫感染情况,基于十二指肠贾第虫GDH基因位点分别设计2对引物,对养殖场的120份狐狸粪便样品、60份貉粪便样品和148份家兔粪便样品十二指肠贾第虫进行检测和基因型分析。结果表明,在来自狐狸的粪便中检测出阳性样品44份,阳性率为36.7%,基因型均为基因亚型AI;6份貉阳性样品,阳性率为10.0%,基因型均为集聚体D;41份家兔阳性样品,阳性率为27.7%,其中4份是集聚体B,其他是集聚体A中的基因亚型AI。结果发现在长春地区貉感染贾第虫集聚体D,长春地区的狐狸感染人兽共患型的集聚体A,家兔感染人兽共患型的集聚体A和B。研究结果为该地区十二指肠贾第虫病的防控提供了参考。 展开更多
关键词 狐狸 家兔 十二指肠贾第虫 基因型
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辽宁地区猪常见传染病流行病学调查及遗传进化分析 预览
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作者 关淼 顾贵波 +4 位作者 杨本勇 赵培 闫明 刘耀川 魏萍 《山东农业大学学报:自然科学版》 北大核心 2019年第2期308-314,共7页
为研究猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)、猪伪狂犬(Porcine pseudorabies,PR)、猪圆环病毒病(Porcine circovirusvirus disease,PCVD)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Highly pathogenic-Porcine reproductive and respiratory syndrome,... 为研究猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)、猪伪狂犬(Porcine pseudorabies,PR)、猪圆环病毒病(Porcine circovirusvirus disease,PCVD)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Highly pathogenic-Porcine reproductive and respiratory syndrome,HP-PRRS)在辽宁省内的发病情况及致病毒株变异情况,本研究对辽宁地区自2012年至2016年五年内4种猪常见流行病进行流行病学调查,并对扩增阳性样品的主要致病基因进行遗传进化分析。在9600份样品中,CSFV(ClassicalSwine Fever virus)阳性18例、PRV阳性12例、PCV2阳性10例、HP-PRRSV阳性5例。选取CSFV代表毒株命名为LN01,LN02,LN03;PRV代表毒株LN04,LN05;PCV代表毒株LN06,LN07;HP-PRRSV代表毒株LN08,分别对其进行遗传进化分析。结果表明,CSFV代表株中,LN01与LN02的同源性较高,二者与GD株亲缘关系最近,同源性为99%以上;LN03株与HD株同源性较高为99.5%;PRV代表株中LN04与PV株的亲缘关系最近,同源率为99.4%;LN05与PD株亲缘关系最近,同源率为98.5%;PCV2代表株中LN06与GD株的亲缘关系最近,同源率为99.5%,与HQ 395021亲缘关系最远,同源率为88.4%,LN07与BF株的亲缘关系最近,同源率99.1%;HP-PRRSV代表毒株LN08与参考株GD-SS株的亲缘关系最近,同源率为99.8%。 展开更多
关键词 CSF PR PCVD HP-PRRS 流行病学调查 遗传进化分析
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H5N1禽流感病毒感染雏鸭免疫器官TGF-β1 mRNA转录及病理损伤的变化
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作者 赵晨辉 陈威 +5 位作者 刘超男 高雪丽 吕晓萍 赵良友 姜南 郑世民 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期99-105,共7页
为了探索鹅源H5N1禽流感病毒(AIV)感染对雏鸭胸腺、脾脏、法氏囊的病理损伤及对TGF-β1 mRNA转录的影响,将120只21日龄雏鸭随机分为AIV感染组(I)和对照组(C),应用RT-PCR和免疫组织化学技术结合病理学检测方法,对上述免疫器官的细胞凋亡... 为了探索鹅源H5N1禽流感病毒(AIV)感染对雏鸭胸腺、脾脏、法氏囊的病理损伤及对TGF-β1 mRNA转录的影响,将120只21日龄雏鸭随机分为AIV感染组(I)和对照组(C),应用RT-PCR和免疫组织化学技术结合病理学检测方法,对上述免疫器官的细胞凋亡数量、病理形态变化以及TGF-β1 mRNA转录进行了系统研究。结果显示,雏鸭感染AIV后第3~5天,免疫器官的病理损伤最为明显,脾脏、胸腺和法氏囊细胞凋亡数量分别在病毒感染后第1~5天、第3~5天显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于对照雏鸭。TGF-β1 mRNA转录均在病毒感染后第1~5天较对照雏鸭明显(P<0.05)升高。上述研究结果表明,鹅源H5N1亚型AIV感染雏鸭后的初期,不但免疫器官第的淋巴细胞凋亡明显,而且TGF-β1 mRNA转录也明显升高;鹅源H5N1亚型AIV既是引起感染雏鸭免疫功能下降、呈现免疫抑制的主要因素,也是导致病毒感染雏鸭死亡的主要原因之一。 展开更多
关键词 雏鸭 鹅源H5N1禽流感病毒 免疫器官 细胞凋亡 转化生长因子-β1 MRNA转录
鹅源H5N1禽流感病毒感染对雏鸭红细胞免疫功能的影响 预览
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作者 郑世民 葛依阳 +3 位作者 马宏伟 高雪丽 刘超男 吕晓萍 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期45-51,共7页
将100只21日龄雏鸭随机分为AIV感染组(I)和对照组(C),应用免疫学和细胞培养及MTT等方法动态检测AIV感染雏鸭血液红细胞免疫黏附能力、红细胞免疫自身调控能力以及红细胞促外周血淋巴细胞增殖能力。结果表明,雏鸭感染AIV后1~14d,红细胞C3... 将100只21日龄雏鸭随机分为AIV感染组(I)和对照组(C),应用免疫学和细胞培养及MTT等方法动态检测AIV感染雏鸭血液红细胞免疫黏附能力、红细胞免疫自身调控能力以及红细胞促外周血淋巴细胞增殖能力。结果表明,雏鸭感染AIV后1~14d,红细胞C3b受体花环(E-CRR)率明显低于对照组,而红细胞免疫复合物花环(E-ICR)率明显高于对照组;AIV感染雏鸭后3~21d,红细胞C3b受体花环促进率(RFER)显著低于对照组,且红细胞C3b受体花环抑制(RFIR)率显著高于对照组;AIV感染雏鸭的红细胞对血液T、B淋巴细胞增殖促进能力明显低于对照组。表明AIV感染引起的雏鸭红细胞免疫黏附功能、自身调控能力和T、B淋巴细胞增殖能力下降,与AIV感染导致雏鸭外周血免疫功能降低密切相关。 展开更多
关键词 禽流感病毒 雏鸭 红细胞免疫 免疫黏附
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中蜂囊状幼虫病毒结构蛋白VP2杆状病毒表达与间接ELISA方法建立
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作者 李明 张琳 +1 位作者 马鸣潇 侯振中 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期264-269,共6页
为了检测中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)抗体水平,用Bac‐to‐Bac 杆状病毒表达系统,构建含有CSBV VP2 的重组杆状病毒rBac‐VP2,并在昆虫细胞中获得表达。用经过纯化的重组VP2 蛋白作为包被抗原,建立CSBV 抗体的... 为了检测中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)抗体水平,用Bac‐to‐Bac 杆状病毒表达系统,构建含有CSBV VP2 的重组杆状病毒rBac‐VP2,并在昆虫细胞中获得表达。用经过纯化的重组VP2 蛋白作为包被抗原,建立CSBV 抗体的间接酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。结果表明成功的表达了VP2 蛋白。优化反应条件后,建立的ELISA 检测方法仅与CSBV 阳性IgY 发生特异性反应,与其它蜜蜂病毒的阳性IgY 不发生交叉反应,且检测阳性IgY 的灵敏度达到了1∶6 400,证明其具有良好的特异性和敏感性。批内重复与批间重复变异系数均小于10%。与CSBV 全病毒包被进行比较,检测结果差异不显著,说明该方法适用于抗CSBV 抗体检测。 展开更多
关键词 中蜂囊状幼虫病毒(CSBV) 结构蛋白VP2 Bac‐to‐Bac杆状病毒表达 间接ELISA
杨树花总黄酮的提取工艺优化与抗炎活性研究
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作者 刁磊 陈惠杰 +1 位作者 盛尊来 李广兴 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期522-530,共9页
采用闪式提取法提取杨树花总黄酮,并通过单因素试验和响应面优化试验,获得最佳提取工艺。同时,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测杨树花提取物对蓖麻油诱导腹泻小鼠肠黏膜各种促炎因子相对表达量的影响,对杨树花提取物抗蓖麻油诱导小鼠腹... 采用闪式提取法提取杨树花总黄酮,并通过单因素试验和响应面优化试验,获得最佳提取工艺。同时,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测杨树花提取物对蓖麻油诱导腹泻小鼠肠黏膜各种促炎因子相对表达量的影响,对杨树花提取物抗蓖麻油诱导小鼠腹泻作用进行了研究。结果显示,杨树花总黄酮的最佳提取工艺条件为:提取电压为113 V,乙醇体积分数为53.8%,提取时间为85 s,液料比为42.2∶1。在此条件下,总黄酮得率达到54.21 mg/g,与模型预测值54.59 mg/g相近。结果表明,此方法稳定可靠,提取率高,适用于杨树花总黄酮的提取。杨树花提取物对蓖麻油诱导腹泻小鼠具有较好的抗腹泻作用,可以明显降低小鼠肠黏膜促炎因子TNF-α、IL-6以及IL-1β的相对表达量,表明杨树花抗腹泻作用可能与降低促炎因子有关,为杨树花的综合开发利用提供了理论依据。 展开更多
关键词 杨树花 总黄酮 闪式提取 促炎因子 抗腹泻
四时阴阳与猪呼吸系统疾病防控的关系
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作者 李德军 周晓玲 +2 位作者 迟新宇 刘运枫 李艳华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第4期76-77,82共3页
猪呼吸系统疾病是猪场发病率和死亡率较高的疾病之一。四时阴阳是万物的根本,顺应四时阴阳的变化对猪体进行整体调节,将有利于猪场对呼吸系统疾病的防控。笔者从四时阴阳与猪呼吸系统疾病的关系及治未病的角度出发,探讨在生产实践中如... 猪呼吸系统疾病是猪场发病率和死亡率较高的疾病之一。四时阴阳是万物的根本,顺应四时阴阳的变化对猪体进行整体调节,将有利于猪场对呼吸系统疾病的防控。笔者从四时阴阳与猪呼吸系统疾病的关系及治未病的角度出发,探讨在生产实践中如何顺应四时气候的变化,应用中药方剂对猪呼吸系统疾病进行防控:春季扶正祛邪,解表理气;夏季清热泻火,抗菌消炎;秋季润肺止咳、化痰止喘;冬季帮助猪体御寒。 展开更多
关键词 四时 阴阳 治未病 呼吸系统疾病
复方诃子口服液抗犊牛大肠杆菌性腹泻的药理作用研究 预览
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作者 韩玉文 李子佳 +3 位作者 于文会 王娜 姜晓文 郝敬友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期305-312,共8页
试验旨在研究抗犊牛大肠杆菌性腹泻的复方诃子口服液的药理作用,采用中和毒素试验、抗渗出试验、解热试验、镇痛试验、肠蠕动试验及免疫调节试验的方法,验证复方诃子口服液的药理作用。结果显示,抗毒素中和试验中,复方诃子口服液组与阴... 试验旨在研究抗犊牛大肠杆菌性腹泻的复方诃子口服液的药理作用,采用中和毒素试验、抗渗出试验、解热试验、镇痛试验、肠蠕动试验及免疫调节试验的方法,验证复方诃子口服液的药理作用。结果显示,抗毒素中和试验中,复方诃子口服液组与阴性对照组差异极显著(P<0.01)。抗渗出试验中,各药物组均能不同程度地减少伊文思蓝的渗出,阿司匹林组及复方诃子口服液高、中、低剂量组的抑制率分别为58.1%、42.8%、31.6%和14.9%,其中复方诃子口服液低剂量组与空白组相比差异显著(P<0.05),其余各组与空白组相比均差异极显著(P<0.01);复方诃子口服液各剂量组与阿司匹林组相比,高剂量组差异不显著(P>0.05),中、低剂量组差异极显著(P<0.01)。解热试验中,复方诃子口服液高剂量组给药后1h快速抑制体温升高,中剂量组给药后2h抑制体温升高;给药后3h,与模型组相比,复方诃子口服液高、中剂量组体温均明显降低,低剂量组与模型组差异不明显。镇痛试验中,与空白组相比,阿司匹林组、复方诃子口服液高、中剂量组镇痛效果差异极显著(P<0.01),扭体抑制率分别为64.55%、52.73%和32.73%,疼痛潜伏期分别为9.59、6.33和5.74min;而复方诃子口服液低剂量组差异不显著(P>0.05)。肠蠕动试验中,与空白组相比,硫酸阿托品组及复方诃子口服液高剂量组对肠蠕动抑制作用差异极显著(P<0.01),推进率分别为44.18%和52.55%,复方诃子口服液中剂量组差异显著(P<0.05),低剂量组差异不显著(P>0.05)。免疫调节试验中,与空白组相比,模型组白细胞数、脾脏指数及胸腺指数均显著降低(P<0.05);而与模型组相比,第14天复方诃子口服液组白细胞数、脾脏指数及胸腺指数均显著提高(P<0.05)。综上所述,复方诃子口服液对犊牛大肠杆菌性腹泻具有抑制肠蠕动、解热、抗疼痛和组织液渗出、中和肠毒素及增强免疫功能等药� 展开更多
关键词 复方诃子口服液 大肠杆菌 腹泻 药理作用
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模拟教学在动物医学临床教学中的应用
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作者 赵树臣 高利 +2 位作者 刘克祥 吕占军 侯振中 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期166-169,共4页
动物医学模拟教学是通过各种模型和虚拟系统创建模拟某一疾病状态和临床诊治条件,从而培养学生实践动手能力和掌握临床基本诊疗技能的一种教学方法。笔者从目前动物医学教学现状、模拟教学在动物医学教学的必然发展趋势和优势、模拟教... 动物医学模拟教学是通过各种模型和虚拟系统创建模拟某一疾病状态和临床诊治条件,从而培养学生实践动手能力和掌握临床基本诊疗技能的一种教学方法。笔者从目前动物医学教学现状、模拟教学在动物医学教学的必然发展趋势和优势、模拟教学应用中的教学用途和考核、模拟教学模型的研发及模拟教学中存在的不足和相应对策等方面进行了全面分析,以期为动物医学专业开设和发展模拟教学提供理论支持。 展开更多
关键词 动物医学 模拟教学 模型 虚拟系统 临床技能
佐剂对两种旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂免疫影响的研究 预览
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作者 刘照琨 关靖喆 +4 位作者 路丽群 于鹏成 刘明旭 吴丽佳 路义鑫 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期11-14,19共5页
在寄生虫感染过程中,丝氨酸蛋白酶抑制剂在虫体与宿主相互作用间发挥着重要作用。在免疫过程中,不同佐剂的促免疫应答能力和提高免疫保护能力均不同。为了比较不同佐剂对两种丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsAdSPI和TsKaSPI)免疫保护性的影响,通... 在寄生虫感染过程中,丝氨酸蛋白酶抑制剂在虫体与宿主相互作用间发挥着重要作用。在免疫过程中,不同佐剂的促免疫应答能力和提高免疫保护能力均不同。为了比较不同佐剂对两种丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsAdSPI和TsKaSPI)免疫保护性的影响,通过对免疫剂量进行优化,应用间接ELISA的方法分析两种SPIs抗体应答,分别在肌肉虫攻击感染后第1天、第3天、第7天、第10天剖杀小鼠取成虫并计数,计算成虫减虫率。结果显示,用3种不同剂量(20、50μg和100μg)的重组蛋白免疫小鼠,50μg与100μg蛋白剂量免疫组诱导产生类似的抗体水平,且均高于20μg组;免疫组弗氏佐剂、ISA 206佐剂和铝佐剂分别与重组蛋白乳化后免疫,可诱导相似的免疫应答及成虫减虫率,其中佐剂ISA 206和氢氧化铝的保护效果更好。 展开更多
关键词 旋毛虫 丝氨酸蛋白酶抑制剂 剂量 佐剂 保护性
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鸡传染性法氏囊病活疫苗(NF8株)生产工艺的参数优化 预览
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作者 滕颖 葛俊伟 《现代畜牧科技》 2019年第5期11-11,13共2页
鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒引起的、主要侵害幼龄鸡的一种急性、高度接触性传染病。用于防治IBD的疫苗有活疫苗、灭活疫苗和其他疫苗。我国已经批准新兽药注册和进口注册的IBD活疫苗很多,包括低毒力株活疫苗、中等毒... 鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒引起的、主要侵害幼龄鸡的一种急性、高度接触性传染病。用于防治IBD的疫苗有活疫苗、灭活疫苗和其他疫苗。我国已经批准新兽药注册和进口注册的IBD活疫苗很多,包括低毒力株活疫苗、中等毒力株活疫苗和中等偏强毒力株活疫苗。中等毒力株活疫苗NF8株既具有一定毒力,可突破一定水平的母源抗体,又不引起法氏囊不可逆的损伤。在制苗用毒液的制备工艺环节中,由于毒种不同的稀释倍数、鸡胚不同的培养时间,对鸡胚死亡的高峰时间、收获单产结果都不同。为了得到更稳定的产品质量,适应大规模生产还需要进一步优化疫苗的生产工艺参数。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病活疫苗(NF8株) 鸡胚接种日龄 毒种稀释倍数 培养时间
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牛细小病毒DPO-PCR检测方法的建立
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作者 王孟孟 李振雪 +6 位作者 汤婷婷 王瑞翀 王丽 徐义刚 唐丽杰 李一经 乔薪瑗 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期269-273,共5页
为建立牛细小病毒的快速检测方法,以牛细小病毒VP2基因为靶基因,设计了1对双启动寡核苷酸(dual-priming oligonucleotide,DPO)引物,建立了牛细小病毒DPO-PCR快速检测方法。退火温度不敏感试验、特异性试验和灵敏度试验的结果显示,与常规... 为建立牛细小病毒的快速检测方法,以牛细小病毒VP2基因为靶基因,设计了1对双启动寡核苷酸(dual-priming oligonucleotide,DPO)引物,建立了牛细小病毒DPO-PCR快速检测方法。退火温度不敏感试验、特异性试验和灵敏度试验的结果显示,与常规PCR方法相比,DPO-PCR方法在41~65℃退火温度范围内均能够高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感;该方法的最低检出量为3.94×10^3copies/uL;通过对牛细小病毒、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒进行检测,只有牛细小病毒的检测结果为阳性,且无非特异性扩增。结果表明,建立的DPO-PCR方法同传统PCR方法相比,特异性强、灵敏度高,为牛细小病毒的快速检测提供了一种新方法。 展开更多
关键词 牛细小病毒 DPO-PCR 快速检测
猪流行性腹泻病毒细胞适应毒LJB-03株在三种Vero细胞上增殖效果的比较
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作者 郭卫龙 解伟纯 +9 位作者 侯星宇 李智力 姜艳平 崔文 王丽 乔薪瑗 周晗 徐义刚 李一经 唐丽杰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期301-308,共8页
为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)细胞适应毒LJB-03株在3种Vero细胞上的增殖特性,分别以正常Vero细胞、适应无血清培养基的Vero细胞和稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero/TMPRSS2细胞(繁殖PEDV时无须添加胰酶)为宿主细胞,繁殖PEDV L... 为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)细胞适应毒LJB-03株在3种Vero细胞上的增殖特性,分别以正常Vero细胞、适应无血清培养基的Vero细胞和稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero/TMPRSS2细胞(繁殖PEDV时无须添加胰酶)为宿主细胞,繁殖PEDV LJB-03株,观察这3种细胞接毒后的病变特点和病变时间,利用空斑法比较其增殖特性,并以间接免疫荧光和电镜技术鉴定病毒的增殖。结果表明,PEDV LJB-03株在正常Vero细胞和适应无血清培养基的Vero细胞上增殖时需添加的胰酶最佳质量浓度为7ug/m L;在这3种细胞上增殖时的最佳感染复数均为0.01;PEDV LJB-03株在3种细胞上效价达到峰值的时间均为36 h,其中在正常Vero细胞上病毒效价最高为7.17×10^7PFU/m L,在Vero/TMPRSS2细胞上病毒效价为3.33×10^7PFU/m L,在无血清Vero细胞上的病毒效价为2.85×10^7PFU/m L。综上所述,正常Vero细胞上PEDV LJB-03株的病毒效价可达其他2种细胞的2倍以上,但在培养病毒时正常Vero细胞需添加胰酶和血清,因此,适应无血清培养基的Vero细胞与Vero/TMPRSS2细胞在培养PEDV LJB-03株时更具有潜力。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 细胞适应毒 VERO细胞 增殖
植物乳杆菌噬菌体Lpla的分离鉴定及抗噬菌体菌株的筛选 预览
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作者 齐蕊名 于美玲 +7 位作者 姜艳平 崔文 张希 王丽 徐义刚 唐丽杰 李一经 乔薪瑗 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期194-201,共8页
从泡菜中分离得到1?株以植物乳杆菌WCFS1为宿主菌的烈性噬菌体,命名为Lpla。一步生长曲线结果表明Lpla的潜伏期为15 min,裂解期为180 min,裂解量为43 PFU/cell。根据透射电镜观察的形态将其归为长尾病毒科,B1类。噬菌体的理化性质结果表... 从泡菜中分离得到1?株以植物乳杆菌WCFS1为宿主菌的烈性噬菌体,命名为Lpla。一步生长曲线结果表明Lpla的潜伏期为15 min,裂解期为180 min,裂解量为43 PFU/cell。根据透射电镜观察的形态将其归为长尾病毒科,B1类。噬菌体的理化性质结果表明,Lpla对酸、碱的耐受性较强,对乙醇、温度和紫外射线的耐受性较低。吸附实验结果显示,Lpla在4℃时吸附率最大。Ca2+、Mg2+均可促进Lpla对宿主菌的吸附,热灭活宿主菌可使Lpla的吸附率下降20%。本研究筛选出6株对噬菌体Lpla具有稳定抗性的植物乳杆菌,为制定出有效的噬菌体防治策略提供理论依据,并为进一步将抗性菌株应用于生产实践奠定基础。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 烈性噬菌体 生物学特性 抗噬菌体菌株
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猫华支睾吸虫病的诊断报告 预览
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作者 李新 王雯 +1 位作者 姜岩 魏成威 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期100-101,I0004共3页
华支睾吸虫病是后睾科(Opisthorchiidae)、支睾属(Clonochis)的华支睾吸虫(Clonorchissinensis)寄生于肝脏、胆囊和胆管中引起的一种寄生虫病,又称肝吸虫病。华支睾吸虫可感染人、犬、猫、猪及虎、水獭、海豹等野生动物,并寄生在动物的... 华支睾吸虫病是后睾科(Opisthorchiidae)、支睾属(Clonochis)的华支睾吸虫(Clonorchissinensis)寄生于肝脏、胆囊和胆管中引起的一种寄生虫病,又称肝吸虫病。华支睾吸虫可感染人、犬、猫、猪及虎、水獭、海豹等野生动物,并寄生在动物的肝胆管内,引起以肝胆病变为主的危害人类健康的人兽共患病。本病对动物体危害极大,不仅可诱发急慢性肝炎、胆囊炎、胆管炎、阻塞性黄疸等疾病,严重者可引起肝硬化、肝癌、胆管癌等. 展开更多
关键词 华支睾吸虫病 诊断报告 寄生虫病 野生动物 人兽共患病 肝吸虫病 人类健康
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术瑞吉对预防术后腹腔粘连的效果观察 预览
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作者 王久成 于世明 +1 位作者 乔茂强 范宏刚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期101-103,I0006共4页
随着人们生活需求的改变,越来越多的伴侣动物走进了人们的生活,伴侣动物的诊疗行业也得到了快速的发展,但是在伴侣动物手术过程中快速有效止血和防止术后粘连一直都是急需解决的问题,特别是没有明显出血点的大面积组织广泛的渗血和腹腔... 随着人们生活需求的改变,越来越多的伴侣动物走进了人们的生活,伴侣动物的诊疗行业也得到了快速的发展,但是在伴侣动物手术过程中快速有效止血和防止术后粘连一直都是急需解决的问题,特别是没有明显出血点的大面积组织广泛的渗血和腹腔术后导致的腹腔粘连。市面上常见的止血材料和防粘连材料包括沸石、壳聚糖、胶原蛋白和纤维素基等,都是应用于人。 展开更多
关键词 术后粘连 腹腔 预防 伴侣动物 止血材料 生活需求 手术过程 纤维素基
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中东呼吸综合征冠状病毒量子点免疫层析试纸的制备
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作者 黄培 韩秋雪 +9 位作者 胡星星 金宏丽 曹增国 迟航 赵永坤 冯娜 高玉伟 王化磊 杨松涛 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期557-561,共5页
目的制备一种能快速检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的量子点免疫层析试纸,以期用于MERSCoV感染检测。方法采用EDC偶联法将羧基化CdTe/ZnSe量子点与抗MERS-CoV RBD的单克隆抗体(mAb/MERS-CoV)共价偶联,通过斑点免疫印迹检验... 目的制备一种能快速检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的量子点免疫层析试纸,以期用于MERSCoV感染检测。方法采用EDC偶联法将羧基化CdTe/ZnSe量子点与抗MERS-CoV RBD的单克隆抗体(mAb/MERS-CoV)共价偶联,通过斑点免疫印迹检验偶联物的活性。以CdTe/ZnSe量子点标记的mAb/MERS-CoV作为荧光标记物,采用免疫层析技术制备量子点免疫层析试纸,用于MERS-CoV检测。并对该方法进行特异性、敏感性评价。结果 CdTe/ZnSe量子点可偶联mAb/MERS-CoV,且偶联物具有良好的生物活性。以其作为荧光标记物建立的量子点免疫层析试纸可特异性检测MERS-CoV假病毒,最低检测限为2×53 TCID50/ml,其他对照病毒检测均阴性。结论制备的MERS-CoV量子点免疫层析试纸具有简便、快速、特异等优点,可用于MERS-CoV感染快速诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 中东呼吸综合征冠状病毒 量子点 免疫层析试纸
猴D型反转录病毒Ⅰ型抗体免疫梳检测方法的建立及应用
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作者 李丹丹 安微 +5 位作者 陈平亚 张体银 杨俊兴 邱索平 徐义刚 高慎阳 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1300-1306,共7页
为建立猴D型反转录病毒Ⅰ型抗体(SRVl)的快速检测方法,本试验采用基因工程技术制备SRV1的SRV1—30基因原核表达产物重组SRV1—30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法用于特异性检测实验猴血清中抗SRV1的抗体IgG。结果显示,最佳抗... 为建立猴D型反转录病毒Ⅰ型抗体(SRVl)的快速检测方法,本试验采用基因工程技术制备SRV1的SRV1—30基因原核表达产物重组SRV1—30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法用于特异性检测实验猴血清中抗SRV1的抗体IgG。结果显示,最佳抗原包被量为100mg/L;制备好的免疫梳均能够特异性检测到相应的猴SRV1病毒阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SRV130蛋白能够敏感地检测到1:200倍稀释的SRVl阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对12份可疑猴血清样品进行检测,免疫梳方法与ELISA检测结果一致率为100.0%,Kappa-1.000。该检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 猴D型反转录病毒Ⅰ型 SRV1-30蛋白 免疫梳 快速检测方法 抗体
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