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高果糖膳食对大鼠脂肪组织肾素-血管紧张素系统的影响 预览
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作者 张军霞 刁波 +2 位作者 袁紫林 林雪 徐锦秀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期156-162,共7页
目的:观察高果糖膳食对大鼠脂肪组织炎症及肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的影响,探讨Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)炎症信号通路在其中的作用。方法:16只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、高果糖组... 目的:观察高果糖膳食对大鼠脂肪组织炎症及肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的影响,探讨Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)炎症信号通路在其中的作用。方法:16只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、高果糖组、高果糖+siRNA阴性对照组及高果糖+TLR2-siRNA组,正常对照组以普通饲料喂养,高果糖组以含60%果糖饲料喂养,高果糖+TLR2-siRNA组和高果糖+siRNA阴性对照组大鼠另分别予以TLR2-siRNA和siRNA阴性对照转染。干预14周后,检测大鼠血尿酸水平,ELISA法检测血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的水平,称取腹部脂肪重量,免疫组化法检测脂肪组织巨噬细胞的浸润,real-time PCR法检测脂肪组织IL-6、TNF-α、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、AGT、血管紧张素转化酶1(angiotensin-converting enzyme 1,ACE1)、血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)和血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)mRNA表达,Western blot检测TLR2的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,高果糖组大鼠血尿酸明显升高,腹部脂肪重量明显增加,血清IL-6、TNF-α、AGT和AngⅡ水平明显升高,脂肪组织巨噬细胞浸润数量明显增多,脂肪组织IL-6、TNF-α、MCP-1、AGT、ACE1、AT1R和AT2R的mRNA水平明显升高(P<0.05);与高果糖组比较,高果糖+TLR2-siRNA组大鼠血尿酸及腹部脂肪重量无明显变化,TLR2蛋白表达显著减低,血清及脂肪组织炎症因子的mRNA水平显著降低,脂肪组织巨噬细胞浸润数量明显减少,血清AGT、AngⅡ及脂肪组织RAS信号通路相关因子的mRNA水平明显下调(P<0.05)。结论:高果糖膳食上调脂肪组织RAS,其机制可能与TLR2炎症信号通路激活相关。 展开更多
关键词 果糖 高尿酸血症 脂肪组织 TOLL样受体2 肾素-血管紧张素系统
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环磷酰胺诱导家兔卵巢早衰动物模型的建立和评价 预览 被引量:1
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作者 张娟 周月希 +5 位作者 刁波 王刚 岳钊平 解迪 王晶 王立群 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第1期38-43,共6页
目的比较不同注药方式下建立环磷酰胺诱导家兔卵巢早衰动物模型的方法,寻找最佳造模方式,为进一步研究卵巢早衰提供更为适用的实验模型。方法 21只家兔随机分四组,正常对照组3只,不作任何处理(A组);模型一组6只,50 mg/kg环磷酰胺溶液... 目的比较不同注药方式下建立环磷酰胺诱导家兔卵巢早衰动物模型的方法,寻找最佳造模方式,为进一步研究卵巢早衰提供更为适用的实验模型。方法 21只家兔随机分四组,正常对照组3只,不作任何处理(A组);模型一组6只,50 mg/kg环磷酰胺溶液注射1 d(B组);模型二组6只,50 mg/kg连续注射2 d(C组);模型三组6只,首日注射50 mg/kg,以后按照8 mg/kg连续注射14 d(D组)。称量各组家兔体重和卵巢重量,描述注药14 d内的体重变化,分析卵巢指数;HE染色观察卵泡形态,光镜下计算各级卵泡数;TUNEL法观察分析细胞凋亡情况;ELISA法分析血清雌二醇(E2)变化。结果体重:B、C组体重无明显变化(P〉0.05);D组家兔生长受限(P〈0.05),死亡率高。卵巢指数:C组卵巢指数明显小于A组(P〈0.05)。各级卵泡情况:B、C组原始卵泡和初级卵泡异常率均升高(P〈0.017),其中C组原始卵泡异常率升高更明显(P〈0.017),而两组初级卵泡异常率差异无显著性(P〉0.017)。A、B、C三组次级、窦状卵泡异常率差异无显著性(P〉0.05)。细胞凋亡率:细胞凋亡主要发生在卵泡中的颗粒细胞上,B、C组凋亡率均明显高于A组(P〈0.05),且C组凋亡率高于B组(P〈0.05)。血清E2值:B组第7天E2分泌达高峰,7 d后逐渐下降,E2分泌量第7天明显高于第35天(P〈0.05);C组E2值持续下降,第0天明显高于第35天(P〈0.05)。结论以50 mg/kg剂量连续注射2 d是建立环磷酰胺诱导家兔卵巢早衰模型的最佳造模方式。 展开更多
关键词 卵巢早衰 环磷酰胺 动物模型 家兔
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间充质干细胞源性外泌体提取鉴定方法研究 预览
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作者 杨前 甘国胜 +5 位作者 袁紫林 王刚 陈力 闫德祺 张宜 刁波 《数理医药学杂志》 2018年第7期958-960,共3页
目的:探讨间充质干细胞源性外泌体的成功提取方法。方法:应用试剂盒二次提取huc-MSCs外泌体,凝胶电泳法及BCA蛋白定量法检测两次提取外泌体蛋白纯度与含量的不同;电镜及流式细胞仪鉴定外泌体。结果:凝胶电泳法及BCA蛋白定量法证实二... 目的:探讨间充质干细胞源性外泌体的成功提取方法。方法:应用试剂盒二次提取huc-MSCs外泌体,凝胶电泳法及BCA蛋白定量法检测两次提取外泌体蛋白纯度与含量的不同;电镜及流式细胞仪鉴定外泌体。结果:凝胶电泳法及BCA蛋白定量法证实二次提取后外泌体蛋白纯度提高,形态特征明显,并高表达CD63及CD81蛋白。结论:间充质干细胞外泌体经过二次提取纯化后,纯度提高,可以更准确的开展后续实验。 展开更多
关键词 干细胞 外泌体 纯化
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多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞中DR5、DcR2的表达变化 预览
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作者 张娟 王立群 +3 位作者 周月希 刁波 周蓉 解迪 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第9期33-39,共7页
目的 观察DR5、DcR2在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞中的表达变化,探讨PCOS大鼠卵泡发育障碍的可能发生机制。方法 大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠,以构建PCOS模型,分别用免疫组织化学法、RT-qPCR分析... 目的 观察DR5、DcR2在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞中的表达变化,探讨PCOS大鼠卵泡发育障碍的可能发生机制。方法 大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠,以构建PCOS模型,分别用免疫组织化学法、RT-qPCR分析观察并比较DR5、DcR2在PCOS组和对照组大鼠卵巢颗粒细胞的表达情况。结果 免疫组织化学结果显示,在PCOS组大鼠卵巢各级卵泡颗粒细胞中,DR5的表达较对照组均显著增强(P<0.05),在PCOS组大鼠卵巢窦前卵泡和窦状卵泡颗粒细胞中,DcR2的表达较对照组同级别卵泡显著增强(P<0.05),在始基卵泡颗粒细胞的表达差异无显著性(P>0.05)。RT-qPCR分析显示,DR5 mRNA和DcR2 mRNA在两组中都有表达,且二者在PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞中的表达较正常对照组均明显增强(P<0.05)。结论DR5和DcR2在颗粒细胞中的异常表达可能对PCOS大鼠卵泡的异常发育起到了一定作用,它们可能是通过参与颗粒细胞凋亡过程而对卵泡的发育造成了一定影响。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 大鼠 颗粒细胞 DR5 DcR2
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艾拉莫德对系统性红斑狼疮模型小鼠的影响 预览 被引量:1
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作者 王丽平 陈利锋 +2 位作者 陈芳 刘琴 张宜 《医药导报》 CAS 北大核心 2018年第3期289-293,共5页
目的观察艾拉莫德对系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠的预防保护作用。方法将30只雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、艾拉莫德干预组,每组10只。模型对照组与艾拉莫德干预组同时制备SLE模型。艾拉莫德干预组造模1 d后灌服艾... 目的观察艾拉莫德对系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠的预防保护作用。方法将30只雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、艾拉莫德干预组,每组10只。模型对照组与艾拉莫德干预组同时制备SLE模型。艾拉莫德干预组造模1 d后灌服艾拉莫德6.5 mg·kg-1·d-1,空白对照组与模型对照组正常饲喂。7个月后检测3组小鼠血清自身抗体(抗核抗体、抗ds-DNA抗体、抗RNP/sm抗体)水平,检测尿蛋白量、血清尿素氮、血清肌酐水平及肾脏病理变化。结果艾拉莫德干预组血清抗核抗体、抗ds-DNA抗体、抗RNP/sm抗体水平、尿蛋白阳性率、血清尿素氮、血清肌酐水平均明显低于模型对照组(P〈0.05),艾拉莫德干预组肾脏病理变化不明显。结论艾拉莫德能抑制血清抗体产生,改善SLE模型小鼠尿蛋白量、血清尿素、血清肌酐水平,对SLE模型小鼠有预防和保护作用。 展开更多
关键词 艾拉莫德 系统性红斑狼疮 降植烷
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大鼠颅脑损伤后脑组织miR-122-5p含量变化及其对神经功能的影响 预览
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作者 刁波 杨前 +3 位作者 王刚 袁紫林 陈力 王方 《中国临床神经外科杂志》 2018年第4期250-253,共4页
目的探讨大鼠颅脑损伤后脑组织miR-122-5p含量变化及其对神经功能的影响。方法将40只成年SD大鼠随机分为假手术组,TBI模型组,乱序miRNA组,miR-122-5p模拟物组。采用Feeney法制备TBI大鼠模型;乱序miRNA组造模24 h后,立体定向注射乱序miRN... 目的探讨大鼠颅脑损伤后脑组织miR-122-5p含量变化及其对神经功能的影响。方法将40只成年SD大鼠随机分为假手术组,TBI模型组,乱序miRNA组,miR-122-5p模拟物组。采用Feeney法制备TBI大鼠模型;乱序miRNA组造模24 h后,立体定向注射乱序miRNA 5μl(20μmol/L);miR-122-5p模拟物组造模24 h后,立体定向注射miR-122-5p模拟物组5μl(20μmol/L)。qRT-PCR法检测大鼠脑组织miR-122-5p的表达变化;免疫印迹法法检测p53蛋白表达水平;水迷宫法检测学习记忆功能;TUNEL法检测脑组织细胞凋亡情况;流式细胞术检测脑细胞线粒体膜电位的变化。结果与假手术组大鼠比较,模型组和乱序miRNA组大鼠脑组织miR-122-5p表达明显减少,p53蛋白显著上调,脑组织细胞凋亡数明显增多,线粒体膜电位下降显著,水迷宫测试大鼠寻找隐形平台时间显著延长;与模型组大鼠比较,miR-122-5p模拟物组大鼠miR-122-5p表达明显增加,并伴随p53蛋白低表达,细胞凋亡水平下降,神经功能障碍得到明显逆转。结论颅脑损伤后miR-122-5p的表达下调可能导致p53蛋白的表达升高,促进神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 颅脑损伤 miR-122-5p P53蛋白 神经功能障碍 大鼠
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益气活血方对关节炎大鼠滑膜组织IL-8、NF-κB的影响 被引量:3
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作者 陈利锋 丰瑞兵 +6 位作者 王华松 陈芳 王丽平 刘琴 王俊伟 王庆伟 邓超 《湖北中医药大学学报》 2017年第2期4-8,共5页
目的 观察益气活血方对佐剂型关节炎大鼠滑膜组织IL-8、NF-κB的影响。方法 随机将60只Wistar大鼠分为空白组、模型组、益气活血方高剂量组(高剂量组)、益气活血方中剂量组(中剂量组)、益气活血方低剂量组(低剂量组)、雷公藤组。... 目的 观察益气活血方对佐剂型关节炎大鼠滑膜组织IL-8、NF-κB的影响。方法 随机将60只Wistar大鼠分为空白组、模型组、益气活血方高剂量组(高剂量组)、益气活血方中剂量组(中剂量组)、益气活血方低剂量组(低剂量组)、雷公藤组。除空白组外,其余大鼠通过弗氏完全佐剂诱导建立佐剂型关节炎模型。造模两周后给药,高、中、低剂量组分别给予浓度为2、1、0.5g/mL益气活血方汤剂,雷公藤组给予0.94mg/mL雷公藤多苷片水溶液,空白组和模型组给予蒸馏水10mL/kg,每日1次,持续3周。检测大鼠关节炎症指数、大鼠滑膜组织病理组织学改变及大鼠滑膜组织中IL-8、NF-κB的表达水平。结果 灌胃3周后,各给药组在以上各检测指标上较模型组均有显著改变(P〈0.01),益气活血方高剂量组的治疗作用优于低剂量组与雷公藤组(P〈0.05)。结论 益气活血方能改善佐剂型关节炎大鼠的关节炎症表现,其作用机制可能与抑制滑膜组织中IL-8、NF-ΚB的表达有关。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 滑膜组织 白细胞介素8 NF-ΚB
佐剂性关节炎模型兔成纤维样滑膜细胞的培养 预览 被引量:1
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作者 王丽平 刘琴 +2 位作者 陈芳 陈利锋 张宜 《中国组织工程研究》 北大核心 2017年第12期1872-1876,共5页
背景:目前研究者多采用酶消化法从类风湿性患者和佐剂性关节炎大鼠的滑膜组织中分离培养成纤维样滑膜细胞,采用组织块贴壁法体外培养佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞较少见.目的:建立佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞的培养方法并观察... 背景:目前研究者多采用酶消化法从类风湿性患者和佐剂性关节炎大鼠的滑膜组织中分离培养成纤维样滑膜细胞,采用组织块贴壁法体外培养佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞较少见.目的:建立佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞的培养方法并观察细胞的生物学特性.方法:采用多点多次注射佐剂的方法制备佐剂性关节炎兔动物模型,取膝关节滑膜组织,用组织块贴壁法分离培养成纤维样滑膜细胞,观察细胞形态特征.采用CCK-8法检测细胞增殖情况,并用免疫荧光法检测波形蛋白的表达.结果与结论:倒置显微镜观察原代培养的关节炎兔滑膜细胞形态均为长梭状纤维样,符合成纤维样滑膜细胞的生长特征,且表达波形蛋白的细胞达98%.说明采用组织块贴壁法成功分离培养了佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞. 展开更多
关键词 组织构建 组织工程 佐剂性关节炎 成纤维样滑膜细胞 组织块贴壁法
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脂氧素A4对Aβ25-35所致N2a细胞损伤的保护作用初探 预览 被引量:1
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作者 武强 吴乐 +4 位作者 濮捷 崔敏 徐志鹏 刘琴 陈芳 《神经损伤与功能重建》 2017年第4期283-285,289共4页
目的:初步探讨脂氧素A4(LXA4)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ(25-35))损伤N2a细胞的保护作用及其机制。方法:用不同浓度Aβ(25-35)处理N2a细胞,建立阿尔茨海默病(AD)细胞损伤模型,通过细胞形态学观察、CCK-8法和Hoechst 33258染... 目的:初步探讨脂氧素A4(LXA4)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ(25-35))损伤N2a细胞的保护作用及其机制。方法:用不同浓度Aβ(25-35)处理N2a细胞,建立阿尔茨海默病(AD)细胞损伤模型,通过细胞形态学观察、CCK-8法和Hoechst 33258染色来评价细胞模型是否构建成功。细胞分为对照组、模型组(20μmol/L Aβ(25-35))和LXA4保护组(50、100、200 nmol/L)。采用CCK-8法检测N2a细胞的活性;荧光酶标仪检测N2a细胞内活性氧(ROS)水平;ELISA法检测细胞培养上清中白介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:20μmol/L Aβ(25-35)处理N2a细胞24 h可建立细胞损伤模型。LXA4保护组的细胞存活率均较模型组显著升高。与模型组相比,200 nmol/L LXA4保护组细胞内ROS水平显著降低(P〈0.01);200 nmol/L LXA4保护组IL-10水平显著高于模型组(P〈0.01);200 nmol/L LXA4保护组的TNF-α水平显著低于模型组(P〈0.01)。结论:LXA4对Aβ(25-35)损伤N2a细胞具有保护作用,其机制可能是抑制ROS水平以及调节炎症因子的表达。 展开更多
关键词 脂氧素A4 N2A细胞 Β-淀粉样蛋白25-35 阿尔茨海默病
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影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素研究进展
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作者 刘琴 陈芳 +1 位作者 王丽平 张宜 《中国修复重建外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1390-1395,共6页
目的总结影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素,为脂肪干细胞成脂分化研究提供参考。方法广泛查阅近年来国内外有关影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素相关研究报道,并进行总结。结果影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素... 目的总结影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素,为脂肪干细胞成脂分化研究提供参考。方法广泛查阅近年来国内外有关影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素相关研究报道,并进行总结。结果影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素很多,其中有很多因素仍存在争议,如供体年龄、健康状态、脂肪组织取材部位等,有待进一步研究。结论需进一步深入研究影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素,明确存在争议的事项,为脂肪干细胞在脂肪组织工程中的应用奠定基础。 展开更多
关键词 脂肪组织工程 脂肪干细胞 成脂分化 供体因素 实验因素
脂肪干细胞成骨分化的研究进展 预览 被引量:1
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作者 刘琴 陈芳 +1 位作者 王丽平 张宜 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期581-586,共6页
随着骨组织工程研究取得较好的发展,涌现出各类种子细胞。脂肪干细胞,来自脂肪组织,具有诸多的优势,成为骨组织工程研究的热点种子细胞之一。本文综述了脂肪干细胞成骨分化的诱导方法、过程、验证方法、影响成骨分化的供体因素和实验因... 随着骨组织工程研究取得较好的发展,涌现出各类种子细胞。脂肪干细胞,来自脂肪组织,具有诸多的优势,成为骨组织工程研究的热点种子细胞之一。本文综述了脂肪干细胞成骨分化的诱导方法、过程、验证方法、影响成骨分化的供体因素和实验因素,并对其未来研究方向进行了展望。 展开更多
关键词 组织工程 脂肪干细胞 成骨分化
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悬浮组织块法分离培养SD大鼠脂肪干细胞的实验研究 预览 被引量:3
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作者 刘琴 王丽平 +3 位作者 陈芳 李晓明 朱以良 张宜 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期1197-1200,共4页
目的:建立SD大鼠脂肪干细胞悬浮组织块分离培养法。方法:取正常SD大鼠股沟处脂肪组织,用悬浮组织块法和组织块贴壁法分离培养SD大鼠脂肪干细胞,观察细胞的生长状况及形态特征。取第3代对数期细胞,CCK-8法绘制其生长曲线;免疫荧光法检... 目的:建立SD大鼠脂肪干细胞悬浮组织块分离培养法。方法:取正常SD大鼠股沟处脂肪组织,用悬浮组织块法和组织块贴壁法分离培养SD大鼠脂肪干细胞,观察细胞的生长状况及形态特征。取第3代对数期细胞,CCK-8法绘制其生长曲线;免疫荧光法检测其表面抗原CD29、CD44、CD45的表达情况;分别用成脂、成骨诱导培养液进行诱导分化,油红O、茜素红染色定性鉴定。结果:两种方法体外培养得到的SD大鼠脂肪干细胞形态为梭形纤维样,生长力旺盛,生长曲线为典型的“S”型;免疫荧光法检测显示第3代细胞强表达CD29、CD44,CD45表达阴性;细胞成脂诱导培养14 d后,油红O染色为阳性;成骨诱导培养14 d后,茜素红染色为阳性。结论:悬浮组织块法可以分离培养出SD大鼠脂肪干细胞,方法简便,为体外分离培养SD大鼠脂肪干细胞提供了一种新的方法。 展开更多
关键词 悬浮组织块法 SD大鼠脂肪干细胞 分离 培养
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JAK-STAT信号通路、IL-1β和IL-6在X射线辐照诱导PC12细胞损伤中的调控作用 预览 被引量:1
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作者 喻晶 张宜 刁波 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期174-178,共5页
目的:探究JAK-STAT信号通路及炎症因子IL-1β、IL-6是否参与X射线诱导的PC12细胞辐射损伤。方法:采用X射线分别以2、4和8 Gy剂量照射PC12细胞,照射后24 h通过酶联免疫法检测IL-1β和IL-6的表达水平;Western blot检测p-JAK1、p-JAK2、p... 目的:探究JAK-STAT信号通路及炎症因子IL-1β、IL-6是否参与X射线诱导的PC12细胞辐射损伤。方法:采用X射线分别以2、4和8 Gy剂量照射PC12细胞,照射后24 h通过酶联免疫法检测IL-1β和IL-6的表达水平;Western blot检测p-JAK1、p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3和p-STAT5的蛋白水平。结果:与正常对照组相比,细胞经不同剂量X射线照射24 h后,IL-1β和IL-6的表达水平均升高,且与辐照剂量呈剂量依赖性;p-JAK1、pJAK2、p-STAT1、p-STAT3和p-STAT5的蛋白水平均升高,且上调程度与辐照剂量呈剂量依赖性。结论:JAK-STAT信号通路、IL-1β和IL-6可能参与X射线照射诱导PC12细胞的损伤调控。 展开更多
关键词 X射线 PC12细胞 JAK-STAT信号通路 IL-1Β IL-6
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冻存SD大鼠脂肪组织中脂肪干细胞的分离培养和鉴定
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作者 刘琴 王丽平 +1 位作者 陈芳 张宜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期202-205,共4页
目的研究从冻存SD大鼠脂肪组织中分离培养脂肪干细胞(ADSC)的可行性。方法取健康SD大鼠股沟处脂肪组织,用100 m L/L二甲基亚砜联合900 m L/L胎牛血清(FBS)作为冻存剂,冻存于液氮中。3个月后复苏冻存的脂肪组织,进行ADSC的分离培养,... 目的研究从冻存SD大鼠脂肪组织中分离培养脂肪干细胞(ADSC)的可行性。方法取健康SD大鼠股沟处脂肪组织,用100 m L/L二甲基亚砜联合900 m L/L胎牛血清(FBS)作为冻存剂,冻存于液氮中。3个月后复苏冻存的脂肪组织,进行ADSC的分离培养,观察细胞的生长状况及形态特征。取第3代细胞,CCK-8法绘制其生长曲线,免疫荧光技术检测CD29、CD45、CD90的表达;分别用成脂、成骨诱导培养液进行诱导分化,油红O、茜素红染色鉴定细胞分化情况。结果从冻存SD大鼠脂肪组织中分离得到的ADSC形态为长梭形纤维样,具有较好的增殖能力,生长曲线为典型的"S"型;免疫荧光技术证实细胞强表达CD29、CD90,CD45阴性;分离的细胞经成脂诱导后油红O染色为阳性,经成骨诱导后茜素红染色为阳性。结论从冻存SD大鼠脂肪组织中能够分离出ADSC。 展开更多
关键词 SD大鼠 脂肪组织 冻存 脂肪干细胞(ADSC)
痛风模型动物的选择 被引量:1
15
作者 王丽平 朱以良 +2 位作者 陈芳 刘琴 张宜 《实验动物科学》 2017年第5期70-72,共3页
痛风病动物模型是生物医学研究中所建立的可模拟人类痛风病特征的动物实验对象和材料。通过对痛风病动物模型的研究,有利于更全面深刻地认识人类痛风病的发生、发展规律和制定防治措施。笔者就其造模动物的选择及高尿酸血症动物模型、... 痛风病动物模型是生物医学研究中所建立的可模拟人类痛风病特征的动物实验对象和材料。通过对痛风病动物模型的研究,有利于更全面深刻地认识人类痛风病的发生、发展规律和制定防治措施。笔者就其造模动物的选择及高尿酸血症动物模型、急性痛风关节炎动物模型两种痛风病动物模型的研究进展进行了系统的介绍和讨论,为认识痛风病的发病机制及防治提供借鉴。 展开更多
关键词 痛风 造模动物 研究进展
补肾毓麟汤对雷公藤多苷致伤大鼠睾丸生殖细胞的修复作用 预览 被引量:26
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作者 李德忠 李晓明 +1 位作者 周小煦 黄琼霞 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期 522-525,共4页
目的:探讨补肾毓麟汤对雷公藤多苷(GTW)所致雄性大鼠生精细胞的对抗作用和机制。方法:用GTW30mg/d灌喂SD雄性大鼠30d,然后用补肾毓麟汤及氯米芬分别治疗30d,在光、电镜下观察曲细精管中生精上皮的变化。结果:实验对照组的曲细... 目的:探讨补肾毓麟汤对雷公藤多苷(GTW)所致雄性大鼠生精细胞的对抗作用和机制。方法:用GTW30mg/d灌喂SD雄性大鼠30d,然后用补肾毓麟汤及氯米芬分别治疗30d,在光、电镜下观察曲细精管中生精上皮的变化。结果:实验对照组的曲细精管上皮中多数精母细胞变性、死亡,精子细胞不发育,无精子形成,管腔中无精子,支持细胞有明显病变。氯米芬组除生精上皮中有许多脂质球状体外,其余变化基本上同模型组。补肾毓麟汤组的生精上皮层次丰富,各级生精上皮细胞及精子细胞发育良好,与空白对照组相似或略优于空白对照组。结论:补肾毓麟汤具有显著的对抗雷公藤多苷时雄性大鼠生精细胞的毒性,对损伤的生精上皮修复有明显的促进作用。 展开更多
关键词 补肾毓鳞汤 雷公藤多苷 生精上皮
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叶酸联合成体神经干细胞治疗创伤性脑损伤大鼠的实验 预览 被引量:1
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作者 刁波 刘琴 +1 位作者 王丽萍 张宜 《中国比较医学杂志》 2012年第7期48-55,F0004共9页
目的观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用,探讨其可能作用机制。方法 120只Wistar大鼠随机分为6组,正常组,模型组,假手术组,叶酸注射组,成体神经干细胞移植组,成体神经干细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神... 目的观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用,探讨其可能作用机制。方法 120只Wistar大鼠随机分为6组,正常组,模型组,假手术组,叶酸注射组,成体神经干细胞移植组,成体神经干细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化;流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物CD105、CD45、CD44、CD29的表达;免疫荧光法检测神经元特异性烯醇酶(NSE成熟神经元的特异性标志)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP胶质细胞的标记物)的表达;平衡木实验检测大鼠运动协调与整和能力;Morris水迷宫实验测试各组大鼠的学习记忆能力;HE染色及Brdu免疫组化实验观察脑组织形态学变化;酶联免疫吸附试验检测大鼠脑组中脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织中凋亡相关蛋白BCL-2、Bax、Caspase-3的表达。结果分离所得细胞能在体外传代培养,流式细胞仪检测发现细胞阳性表达CD44、CD29,阴性表达CD105、CD45,细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE或GFAP阳性细胞。实验表明,叶酸与成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠模型后能显著改善其行为学变化,减轻脑组织的炎症反应,恢复受损神经细胞,增加脑组织内BDNF、NGF的含量,上调BCL-2的表达,下调Bax、Caspase-3的表达。结论叶酸联合成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠能显著改善中枢神经功能,对维持神经元微环境稳态具有重要的作用。 展开更多
关键词 叶酸 成体神经干细胞 创伤性脑损伤
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皮肤异色病样淀粉样变性免疫荧光及电镜观察 预览 被引量:1
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作者 晏洪波 罗颖 +1 位作者 梁文 李德忠 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期 413-416,共4页
报告1例皮肤异色病样淀粉样变性.患者男,40岁.四肢、躯干色素沉着和色素减退相间,伴苔藓样丘疹及毛细血管扩张20年,无自觉症状.全身皮损于夏季加重且可出现水疱.家族中无类似疾病史,父母系近亲结婚(表兄妹).皮损组织病理检查示真皮乳... 报告1例皮肤异色病样淀粉样变性.患者男,40岁.四肢、躯干色素沉着和色素减退相间,伴苔藓样丘疹及毛细血管扩张20年,无自觉症状.全身皮损于夏季加重且可出现水疱.家族中无类似疾病史,父母系近亲结婚(表兄妹).皮损组织病理检查示真皮乳头内有红色团块样均质性物质,结晶紫染色阳性.直接免疫荧光(DIF)检查:表皮基膜带及表皮细胞间IgG、IgM、IgA、C3均阴性,真皮乳头及真皮浅层可见大量团块状物质沉积,其中IgG标记可见较强荧光.电镜检查:真皮乳头及真皮浅层可见大量团块状物质沉积与基膜带及基底细胞关系密切. 展开更多
关键词 淀粉样变性 皮肤异色病 水疱 免疫荧光 电镜
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丁酸钠诱导COL0205结肠癌细胞凋亡及其对caspase-3的调控 预览 被引量:2
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作者 刁波 唐瑛 +1 位作者 文哗 王晓昆 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第15期1558-1560,共3页
目的:观察丁酸钠对COL0205结肠癌细胞株caspase一3的调控,并探讨其诱导COL0205N胞株凋亡的机制.方法:1、2、4mmol/LT酸钠与结肠癌细胞共同培养48h;MTT法测定细胞活性;免疫组织化学法检测细胞caspase一3的蛋白表达;流式细胞仪检... 目的:观察丁酸钠对COL0205结肠癌细胞株caspase一3的调控,并探讨其诱导COL0205N胞株凋亡的机制.方法:1、2、4mmol/LT酸钠与结肠癌细胞共同培养48h;MTT法测定细胞活性;免疫组织化学法检测细胞caspase一3的蛋白表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:与阴性对照组比较,1、2、4mmol/L丁酸钠组细胞活性下降(0.47±O.09,0.40±0.03,0.37±0.02VS0.55±0.09,P〈O.05或O.01):丁酸能显著促进caspase一3蛋白的阳性表达(31.9±1.15,40.6±1.04,51.7±1.17VS29.4±1.02。P〈0.05或0.01),增加COL0205细胞的凋亡率(8.27%±0.42%。15.1%±0.72%,21.6%±0.95%vs7.0%±0.33%,P〈0.05或0.011.结论:丁酸钠能通过上调caspase-3基因的表达并诱导COL0205细胞凋亡. 展开更多
关键词 丁酸钠 结肠癌 细胞凋亡 CASPASE-3
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武汉地区高血压合并肥胖与瘦素受体基因GIN223Arg变异的关系 预览 被引量:1
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作者 赵林双 向光大 +5 位作者 唐瑛 杨李 孙慧伶 乐岭 侯洁 左娟 《中国慢性病预防与控制》 CAS 2007年第2期 91-94,共4页
目的研究武汉地区高血压合并肥胖与瘦素受体基因GIN223Arg变异的关系。方法运用聚合酶链反应.限制性片段长度多态性(PCR—RELP)方法测定具有完整临床资料的644例武汉地区居民的瘦素受体基因Gin223Arg变异的基因型,其中包括高血压合... 目的研究武汉地区高血压合并肥胖与瘦素受体基因GIN223Arg变异的关系。方法运用聚合酶链反应.限制性片段长度多态性(PCR—RELP)方法测定具有完整临床资料的644例武汉地区居民的瘦素受体基因Gin223Arg变异的基因型,其中包括高血压合并肥胖256例,高血压非肥胖136例及对照者252例。结果瘦素受体基因Gin223Arg变异与男性高血压合并肥胖相关,A等位基因与男性患者的体质指数、收缩压及舒张压相关,P值分别为0.031,0.023,0.036。Logistic回归分析显示,携带A等位基因的男性高血压合并肥胖患者比值比(OR)为2.513(95%可信限为1.216-5.129)。结论瘦素受体基因Gin223Arg变异与男性高血压合并肥胖者体质指数、收缩压和舒张压均相关,是男性高血压合并肥胖的独立危险因素。 展开更多
关键词 高血压合并肥胖 瘦素受体 基因变异
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