期刊文献+
共找到85篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
利用SMART技术构建猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库 被引量:2
1
作者 宋江伟 田宏 +3 位作者 吴锦艳 陈妍 尚佑军 刘湘涛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期865-868,共4页
本研究旨在建立猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库,进而为研究猪瘟病毒的基因功能及致病机理提供良好的试验体系。体外培养猪血管内皮细胞,提取细胞总RNA,并用Oligotex mRNA Mini Kit纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA... 本研究旨在建立猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库,进而为研究猪瘟病毒的基因功能及致病机理提供良好的试验体系。体外培养猪血管内皮细胞,提取细胞总RNA,并用Oligotex mRNA Mini Kit纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA)。经CHROMA SPINTM TE-400Column纯化后的dsDNA与线性化的pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞Y187中,以同源重组的方式在酵母细胞内构建猪血管内皮细胞cDNA文库。结果获得的文库容量在6×106 CFU/mL,随机挑选24个克隆进行PCR检测,插入的片段大小集中在400~2 000bp之间,平均插入长度为1 000bp左右,文库重组率为100%。本研究为从文库中高通量地筛选出与猪瘟病毒互作的重组子,即寻找与该病毒相互作用的受体蛋白奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 猪血管内皮细胞 CDNA文库 SMART技术
应用活体骨髓瘤细胞制备单克隆抗体 预览 被引量:4
2
作者 李永亮 田美娜 +2 位作者 卢曾军 杨苏珍 刘在新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期 63-66,共4页
目的:用活体骨髓瘤细胞SP2/0做融合提高融合率制备单克隆抗体,并与常规方法比较效果。方法:将SP2/0细胞打到8周龄的SPF级BALB/c小鼠皮下,待实体瘤生长到直径达2~3cm时无菌解剖取实体瘤,分离出骨髓瘤细胞进行融合。同时用培养... 目的:用活体骨髓瘤细胞SP2/0做融合提高融合率制备单克隆抗体,并与常规方法比较效果。方法:将SP2/0细胞打到8周龄的SPF级BALB/c小鼠皮下,待实体瘤生长到直径达2~3cm时无菌解剖取实体瘤,分离出骨髓瘤细胞进行融合。同时用培养基培养SP2/0细胞进行融合做比较,分两组进行。比较两种方法的融合率以及两种方法制备出来的单克隆抗体的相对亲和力。结果:做了6次融合,实体瘤融合组融合率为70.4%,常规法融合组44.6%,两种方法制备单抗的相对亲和力均达到1:100000以上。结论:利用活体实体瘤细胞进行融合能明显提高细胞融合率。 展开更多
关键词 单克隆抗体(MAb)SP2/0细胞 活体骨髓瘤细胞 融合
在线阅读 下载PDF
口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测 预览 被引量:6
3
作者 付元芳 卢曾军 +5 位作者 曹轶梅 郭建宏 张小丽 田美娜 刘在新 才学鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期 790-795,共6页
【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型... 【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性。【结论】该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)提供了所需的材料。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白 酶联免疫电转移印迹技术(EITB)
在线阅读 下载PDF
不同ELISA试剂盒检测感染猪口蹄疫病毒3ABC抗体效果比较 预览
4
作者 王文莉 刘华南 +6 位作者 卢炳州 赵俊皓 徐守兴 胡永浩 郑海学 张克山 刘湘涛 《动物医学进展》 北大核心 2019年第2期39-44,共6页
为更准确研究口蹄疫病毒(FMDV)感染猪非结构蛋白抗体变化规律,选取3种不同的试剂盒,分别检测接种O型口蹄疫病毒猪FMDV非结构蛋白3ABC抗体。试验数据表明,人工感染O型口蹄疫病毒猪最早在感染后第5天检测到非结构蛋白抗体,至第7天3ABC抗... 为更准确研究口蹄疫病毒(FMDV)感染猪非结构蛋白抗体变化规律,选取3种不同的试剂盒,分别检测接种O型口蹄疫病毒猪FMDV非结构蛋白3ABC抗体。试验数据表明,人工感染O型口蹄疫病毒猪最早在感染后第5天检测到非结构蛋白抗体,至第7天3ABC抗体全部转为阳性;3种试剂盒检测最早3ABC抗体与症状对应关系有差异,每两种商业试剂盒呈现不同程度的相关性。其中A试剂盒显示出最大的灵敏度,而B试剂盒显示最高的特异性,C试剂盒的敏感性依可疑样品的处理方式而变化,因此对3种试剂盒进行比较,发现A试剂盒更稳定,更适合于猪FMDV非结构蛋白抗体检测。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3ABC抗体 酶联免疫吸附试验
在线阅读 下载PDF
不同试剂盒检测接种FMDV的牛非结构蛋白抗体结果及分析
5
作者 王文莉 赵俊皓 +6 位作者 刘华南 卢炳州 魏南南 张学刚 郑海学 胡永浩 张克山 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第9期56-62,共7页
选取国内外3家不同的研发公司的甲、乙、丙3种试剂盒,利用ELISA方法分别检测了接种A型与O型口蹄疫病毒的牛口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3ABC抗体的变化规律。结果:接种A型与O型口蹄疫病毒的牛在感染后第3天发病,这与最早检测出阳性的... 选取国内外3家不同的研发公司的甲、乙、丙3种试剂盒,利用ELISA方法分别检测了接种A型与O型口蹄疫病毒的牛口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3ABC抗体的变化规律。结果:接种A型与O型口蹄疫病毒的牛在感染后第3天发病,这与最早检测出阳性的时间相一致,至第9天3ABC抗体全部为阳性;接种A型口蹄疫病毒的牛与接种O型口蹄疫病毒的牛3ABC非结构蛋白抗体应答有差异。选取的3种试剂盒检测显示,每2种试剂盒呈现不同程度的相关性,并且甲试剂盒显示出最大的灵敏度,而乙试剂盒显示最大的特异性,丙试剂盒的敏感性依可疑样品的处理方式而变化。因此,对3种试剂盒进行比较发现甲试剂盒更稳定,更适合于检测。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白 3ABC抗体
O型与A型口蹄疫重组标记疫苗病毒株的制备及鉴定 预览 被引量:2
6
作者 袁红 李平花 +11 位作者 马雪青 方先珍 白兴文 孙普 卢曾军 包慧芳 曹轶梅 李冬 付元芳 陈应理 张婧 刘在新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期96-100,共5页
为研制针对我国边境地区(尤其是西南边境)流行的A型口蹄疫(FMD)的标记疫苗储备病毒株,本研究通过化学合成东南亚地区流行的A型口蹄疫疫毒(FMDV)A/VN/03/2009株的P1基因,将其插入含FMDV编码非结构蛋白3A aa91-aa105位缺失的O/HN/9... 为研制针对我国边境地区(尤其是西南边境)流行的A型口蹄疫(FMD)的标记疫苗储备病毒株,本研究通过化学合成东南亚地区流行的A型口蹄疫疫毒(FMDV)A/VN/03/2009株的P1基因,将其插入含FMDV编码非结构蛋白3A aa91-aa105位缺失的O/HN/93病毒全长重组质粒p OFS/3A91-105中,构建FMDV A型和O型嵌合的全长重组质粒p O/3A91-105-AP1。该重组质粒经NotⅠ酶切线性化后转染于表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞中,拯救得到FMDV重组病毒。间接免疫荧光、RT-PCR和序列测定结果表明拯救的FMDV为正确的A型和O型间嵌合及3A aa91-aa105缺失的重组病毒。病毒蚀斑和一步生长曲线表明拯救病毒的感染性和复制能力稍低于其亲本病毒。该型间嵌合标记病毒的成功拯救为研制防控边境地区A型FMD的储备疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 型间嵌合 标记病毒
在线阅读 下载PDF
猪瘟病毒NS3蛋白在真核细胞中的表达与定位 预览
7
作者 宋江伟 田宏 +3 位作者 吴锦艳 陈妍 尚佑军 刘湘涛 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第8期16-19,共4页
为研究与猪瘟病毒NS3蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,采用PCR方法获得嬲,基因,将其定向克隆至pCMV—Myc真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定分析,将鉴定为阳性重组表达质粒命名为pMyc—NS3。采用脂质体介导法将pMyc—NS3转染至PK-15细... 为研究与猪瘟病毒NS3蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,采用PCR方法获得嬲,基因,将其定向克隆至pCMV—Myc真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定分析,将鉴定为阳性重组表达质粒命名为pMyc—NS3。采用脂质体介导法将pMyc—NS3转染至PK-15细胞和293T细胞,Westernblot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达。结果表明,成功构建重组表达质粒pMyc—NS3,Westernblot表明,NS3蛋白在PK15细胞和293T细胞中均得到表达,NS3在PK一15和293T细胞质中呈弥散性分布。说明,成功构建的猪瘟病毒悯基因与Myc融合表达质粒,为验证NS3蛋白与宿主细胞蛋白相互作用奠定基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 NS3蛋白 表达 定位
在线阅读 下载PDF
反向遗传学技术在新型疫苗研制中的应用 预览 被引量:3
8
作者 祁国财 李平花 刘在新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期841-844,共4页
随着分子生物学等学科的发展,出现了许多可以应用于疫苗研制的新方法和新技术,并在某些方面已经开始逐步取代传统的疫苗研制技术。其中,反向遗传学技术发展迅速,倍受国内外研究者关注。这项技术不仅为解析病毒蛋白在病毒复制周期和... 随着分子生物学等学科的发展,出现了许多可以应用于疫苗研制的新方法和新技术,并在某些方面已经开始逐步取代传统的疫苗研制技术。其中,反向遗传学技术发展迅速,倍受国内外研究者关注。这项技术不仅为解析病毒蛋白在病毒复制周期和致病性中的作用提供了有效的研究工具,而且为研发RNA病毒为载体疫苗提供了新的思路和策略。 展开更多
关键词 遗传学技术 载体疫苗 应用 分子生物学 RNA病毒 病毒复制 病毒蛋白 新技术
在线阅读 下载PDF
酶联免疫吸附试验在口蹄疫诊断中的研究进展 预览 被引量:5
9
作者 厍大亮 李冬 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第29期 27-32,共6页
防治口蹄疫的关键是做出及时、准确的诊断。酶联免疫吸附试验(ELISA)有诸多优点,因此不论在实验室还是在田间,都是常用的口蹄疫诊断方法。介绍了传统ELISA和新型ELISA方法的原理、特点及最新研究进展。传统ELISA包括液相阻断ELISA、间... 防治口蹄疫的关键是做出及时、准确的诊断。酶联免疫吸附试验(ELISA)有诸多优点,因此不论在实验室还是在田间,都是常用的口蹄疫诊断方法。介绍了传统ELISA和新型ELISA方法的原理、特点及最新研究进展。传统ELISA包括液相阻断ELISA、间接ELISA、固相竞争ELISA、间接夹心ELISA。新型ELISA包括单克隆抗体ELISA、PCR-ELISA、生物素-亲和素ELISA及Dot-ELISA。ELISA的发展方向应当是既灵敏稳定,又操作方便、易于实现自动化。随着技术的进步,ELISA在临床诊断和流行病学调查中将会有更加广泛的应用。 展开更多
关键词 口蹄疫 诊断方法 酶联免疫吸附试验
在线阅读 下载PDF
细胞凋亡信号传导通路的研究进展 预览 被引量:16
10
作者 刘萍 丛国正 +3 位作者 独军政 邵军军 林彤 常惠芸 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第3期 715-717,726,共4页
细胞凋亡是机体维持自身稳定的一种基本生理机制,是有许多基因产物及细胞因子参与的一种有序的细胞自我消亡形式。细胞凋亡发生过程的启动和进行受到精确调控,具有独特而复杂的信号系统。各种凋亡信号通过信号传导通路传至细胞内,激活... 细胞凋亡是机体维持自身稳定的一种基本生理机制,是有许多基因产物及细胞因子参与的一种有序的细胞自我消亡形式。细胞凋亡发生过程的启动和进行受到精确调控,具有独特而复杂的信号系统。各种凋亡信号通过信号传导通路传至细胞内,激活靶分子而产生细胞效应,引发细胞凋亡。一般认为,细胞凋亡存在3条主要通路:线粒体通路、内质网通路和死亡受体通路,各通路间互相联系,共同调节细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 信号传导 死亡受体 线粒体 内质网
在线阅读 下载PDF
羊蜱病综合防控措施 预览 被引量:2
11
作者 张克山 尚佑军 刘湘涛 《养殖与饲料》 2010年第12期 40-41,共2页
近期河南省信阳市商城县出现人被蜱叮咬致死的事件经媒体曝光后引起恐慌,河南省共监测发现此类综合征病例557例,死亡18例,重点集中在信阳市商城县、狮河区、光山县和平桥区。该事件发生后广大养殖户对蜱及蜱传病极为关注,本文就羊... 近期河南省信阳市商城县出现人被蜱叮咬致死的事件经媒体曝光后引起恐慌,河南省共监测发现此类综合征病例557例,死亡18例,重点集中在信阳市商城县、狮河区、光山县和平桥区。该事件发生后广大养殖户对蜱及蜱传病极为关注,本文就羊蜱病的危害及综合防控作如下简述,以期为同行提供参考。 展开更多
关键词 蜱病 防控措施 综合防控 商城县 信阳市 河南省 综合征
在线阅读 免费下载
不同饲养模式下肉羊疫病特点及综合防控 预览 被引量:4
12
作者 张克山 尚佑军 刘湘涛 《养殖与饲料》 2010年第6期 19-20,共2页
我国幅员辽阔,不同地域肉羊饲养方式差异很大。如在牧区以散养放牧为主,并实施嗣栏化和分区轮牧;半农半牧区采用放牧加舍饲相结合的饲养模式.在农区以舍饲为主建立规模化育肥基地,实施异地育肥。不同饲养模式下肉羊疫病种类和发病... 我国幅员辽阔,不同地域肉羊饲养方式差异很大。如在牧区以散养放牧为主,并实施嗣栏化和分区轮牧;半农半牧区采用放牧加舍饲相结合的饲养模式.在农区以舍饲为主建立规模化育肥基地,实施异地育肥。不同饲养模式下肉羊疫病种类和发病特点差异显著,本文就不同饲养模式下肉羊疫病特点及综合防控作如下简述.以期为同行提供参考。 展开更多
关键词 不同饲养模式 肉羊 疫病防控 特点 综合防控
在线阅读 免费下载
O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备和鉴定 预览 被引量:3
13
作者 宋帅 林彤 +4 位作者 邵军军 丛国正 独军政 高闪电 常惠芸 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期 325-328,共4页
利用O型口蹄疫病毒(FMDV)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞进行融合,经间接ELISA方法筛选和7次亚克隆后获得2株能稳定分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。经间接ELISA检测,2株杂交瘤细胞株(3El、7E6)的腹水效价分别为... 利用O型口蹄疫病毒(FMDV)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞进行融合,经间接ELISA方法筛选和7次亚克隆后获得2株能稳定分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。经间接ELISA检测,2株杂交瘤细胞株(3El、7E6)的腹水效价分别为1:25600、1:102400。间接免疫荧光试验和特异性试验表明2株McAb可与不同株的O型FMDV反应,而不与其他血清型的FMDV反应。Western blot和叠加试验袁明2株单抗可识别O型FMDV结构蛋白VP1上的同一个抗原表位。此特异性McAb的获得将为。型FMDV疫苗的研制和诊断方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 O型口蹄疫病毒 单克隆抗体 间接ELISA
在线阅读 下载PDF
环介导等温基因扩增技术及其在病毒检测中的应用 预览 被引量:12
14
作者 周广青 常惠芸 邵军军 《生物技术通讯》 CAS 2008年第2期 290-292,共3页
环介导等温扩增是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性高、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。简要综述了环介导等温扩... 环介导等温扩增是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性高、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。简要综述了环介导等温扩增技术的原理、特点,及其在病毒检测中的应用。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 病毒检测
在线阅读 免费下载
O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法的建立 预览 被引量:5
15
作者 林密 马军武 +3 位作者 祁淑芸 冯霞 张峰 殷宏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期 627-630,共4页
本研究建立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法,确立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法检测O型口蹄疫血清阴阳性判定标准:抗体效价大于或等于1:32时判为O型口蹄疫抗体阳性;1:16~1:32时判为O型口蹄疫抗体可疑。检... 本研究建立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法,确立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法检测O型口蹄疫血清阴阳性判定标准:抗体效价大于或等于1:32时判为O型口蹄疫抗体阳性;1:16~1:32时判为O型口蹄疫抗体可疑。检测131份阴性血清、口蹄疫亚洲1型阳性血清和A型阳性血清,固相竞争ELISA方法和液相阻断ELISA方法的特异性分别是95.5%,84.7%。固相竞争ELISA方法检测口蹄疫亚洲1型、口蹄疫A型阳性血清时,无交叉反应,O型口蹄疫病毒感染牛、免疫牛和感染猪血清的阳性检出率均为100%,免疫猪检出率为86.7%。 展开更多
关键词 口蹄疫 固相竞争ELISA 抗体效价 血清
在线阅读 下载PDF
猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体间接ELISA方法的建立 预览 被引量:23
16
作者 王光华 独军政 +5 位作者 丛国正 邵军军 林彤 薛慧文 常惠芸 谢庆阁 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期 961-966,共6页
将口蹄疫病毒(FMDV)的VP1基因,通过pPROex-HT表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得大小为31ku的融合蛋白,Westernblot检测证实表达的该蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原建立了猪FMDVVP1蛋白间接ELISA检测... 将口蹄疫病毒(FMDV)的VP1基因,通过pPROex-HT表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得大小为31ku的融合蛋白,Westernblot检测证实表达的该蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原建立了猪FMDVVP1蛋白间接ELISA检测方法。通过对80份田间血清样品的检测表明,该方法与FMDV液相阻断ELISA(国标试剂盒)的总符合率为96.25%,表明建立的VP1蛋白间接ELISA检测方法具有很好的特异性和敏感性。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒抗体 VP1蛋白 间接ELISA
在线阅读 下载PDF
口蹄疫病毒致病机理研究进展 预览 被引量:4
17
作者 周建华 丛国正 +1 位作者 高闪电 常惠芸 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第9期 71-74,共4页
利用经典的生物化学和物理分析手段来研究感染口蹄疫病毒(FMDV)的细胞能揭示FMDV各个蛋白的结构和功能,而通过对FMDV遗传差异的研究可知病毒蛋白的正确结构在病毒的复制和致病中起着重要作用。近年,利用基因工程的方法研究人员可直... 利用经典的生物化学和物理分析手段来研究感染口蹄疫病毒(FMDV)的细胞能揭示FMDV各个蛋白的结构和功能,而通过对FMDV遗传差异的研究可知病毒蛋白的正确结构在病毒的复制和致病中起着重要作用。近年,利用基因工程的方法研究人员可直接验证FMDVRNA结构、编码区和多聚蛋白在FMDV复制和致病的相关推测。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 致病机理 基因工程
在线阅读 下载PDF
用原位杂交技术对牛组织中FMDV RNA检测和定位 预览
18
作者 邵军军 常惠芸 +3 位作者 林彤 丛国正 独军政 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期 1341-1344,共4页
采用原位杂交技术对6头试验牛易感染组织中的FMDVRNA进行了检测和定位。结果显示,接毒后7~28d4头牛舌上皮组织、7~21d的喉咽部有强阳性染色;接毒后35d的牛及正常对照牛舌上皮没有阳性染色;接毒牛及对照牛的扁桃体、淋巴结和蹄叉等... 采用原位杂交技术对6头试验牛易感染组织中的FMDVRNA进行了检测和定位。结果显示,接毒后7~28d4头牛舌上皮组织、7~21d的喉咽部有强阳性染色;接毒后35d的牛及正常对照牛舌上皮没有阳性染色;接毒牛及对照牛的扁桃体、淋巴结和蹄叉等其他组织中均没有阳性染色,表明牛舌上皮和喉咽部上皮组织中感染了FMDV,本研究为进一步阐明FMDV在宿主体内的持续感染机理提供极有价值的线索。 展开更多
关键词 FMDV 原位杂交
在线阅读 免费下载
羊口疮病毒疫苗株和野毒株F1L基因的比较分析 预览
19
作者 王文莉 魏楠楠 +5 位作者 徐守兴 卢炳洲 张大俊 张克山 郑海学 刘湘涛 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第4期83-87,共5页
羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)引起的人兽共患传染病,ORFV F1L基因编码肝素结合蛋白。为比较分析ORFV疫苗株和野毒株编码的F1L基因的特征,本试验对疫苗株和野毒株的F1L基因进行PCR扩增、克隆及序列测定,并应用生物信息学... 羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)引起的人兽共患传染病,ORFV F1L基因编码肝素结合蛋白。为比较分析ORFV疫苗株和野毒株编码的F1L基因的特征,本试验对疫苗株和野毒株的F1L基因进行PCR扩增、克隆及序列测定,并应用生物信息学相关软件及方法,对两者的F1L基因在核酸水平和氨基酸水平的变异情况及其二、三级蛋白结构变化情况进行了比较分析。结果显示,此次测定的ORFV疫苗株与野毒株F1L基因核苷酸序列相似性为95.9%,氨基酸序列相似性为94.5%。本研究结果为揭示ORFV异源宿主致弱的机制积累了资料。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 疫苗株 野毒株 F1L基因
在线阅读 免费下载
塞内卡病毒A结构蛋白VP1诱导PK-15细胞凋亡 预览
20
作者 王咏 毛箬青 +2 位作者 张克山 郑海学 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期811-820,共10页
塞内卡病毒A(SVA)作为一种新发病病原,致病机制仍不清楚。通过显微镜观察发现,SVA感染PK-15细胞后能使细胞产生明显的细胞病变(CPE),同时伴随着严重的细胞凋亡。为了深入研究SVA诱导凋亡的情况,在验证SVA各蛋白真核质粒正常表达后,通过A... 塞内卡病毒A(SVA)作为一种新发病病原,致病机制仍不清楚。通过显微镜观察发现,SVA感染PK-15细胞后能使细胞产生明显的细胞病变(CPE),同时伴随着严重的细胞凋亡。为了深入研究SVA诱导凋亡的情况,在验证SVA各蛋白真核质粒正常表达后,通过AnnexinV-FITC/PI双染流式方法检测SVA各蛋白诱导凋亡的情况,AnnexinV-FITC/PI和Hoechst染色后显微镜观察磷脂酰丝氨酸和核凝聚程度,通过Westernblotting和RT-PCR技术分析SVA-VP1对凋亡通路中主要调控分子Caspase3、Caspase8和Bax蛋白质和mRNA水平的影响,发现SVA-VP1能够显著诱导细胞发生早期和晚期凋亡,并且能够促进凋亡蛋白Caspase3、Caspase8及Bax蛋白和mRNA水平的上调。本研究结果为深入研究SVA调控宿主细胞凋亡的分子机制和致病机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 塞内卡病毒A PK-15细胞 细胞凋亡 流式细胞术
在线阅读 免费下载
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈