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抗凋亡基因survivin促进细胞转化的作用机制 预览 被引量:61
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作者 朱红霞 刘爽 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期 338-340,共3页
目的:探讨抗凋亡基因survivin在细胞转化中的作用机制。方法:利用RT-PCR获得survivin编码区序列,双酶切后,将其定向克隆至原核和真核表达载体,生长曲线观察高达到survivin对细胞增殖的影响;软琼脂集落形成实验观察细胞的接触抑... 目的:探讨抗凋亡基因survivin在细胞转化中的作用机制。方法:利用RT-PCR获得survivin编码区序列,双酶切后,将其定向克隆至原核和真核表达载体,生长曲线观察高达到survivin对细胞增殖的影响;软琼脂集落形成实验观察细胞的接触抑制生长能力;WesternBlot检测survivin高表达引起的蛋白质分子改变。结果:通过分子克隆,构建survivin原核和真核表达载体,并可在大肠杆菌和真核细胞中表达。生长曲线表明,转染survivin的293细胞的增殖速度略快于对照细胞,尤其在细胞生长至高密度时;survivin可以明显提高293细胞的软琼脂集落形成能力;survivin的高表达可以引起癌基因cylinD1的蛋白表达水平增高。结论:抗凋亡基因survivin具有促进细胞转化的作用,这种作用可能依赖于cyclinD1和c-myc的功能。 展开更多
关键词 基因表达 细胞转化 肿瘤 抗凋亡基因 SURVIVIN
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抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达及其意义 预览 被引量:30
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作者 朱红霞 王益华 +5 位作者 周翠琦 张果 白瑾峰 全兰平 刘芝华 徐宁志 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期 22-24,共3页
目的 检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系.方法 27例新鲜的食管癌组织提取RNA,利用半定量RT-PCR方法,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平,与其相配对的正常组织进行比较分析.通过在食... 目的 检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系.方法 27例新鲜的食管癌组织提取RNA,利用半定量RT-PCR方法,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平,与其相配对的正常组织进行比较分析.通过在食管癌细胞系中转染survivin的显性负突变体(surT34A),观察食管癌细胞在软琼脂中的集落形成能力,并利用流式细胞仪分析食管癌细胞对抗凋亡能力.结果 27例食管癌组织中,有18例survivin的表达高于配对的正常组织,食管癌组织中survivin的表达水平(2.08±1.32)明显高于正常对照组织(1.22±1.09).在食管癌细胞系中也检测到survivin的表达.转染surT34A的EC9706细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于对照细胞.survivin过表达可以使得EC9706细胞在撤血清后凋亡减少,而surT34A则使EC9706细胞凋亡增多.结论 survivin异常高表达与食管癌具有密切相关性.SurT34A可以抑制食管癌细胞的软琼脂集落形成能力,并使其对抗凋亡能力减弱,部分抑制食管癌细胞的恶性表型. 展开更多
关键词 食管癌细胞 表达 抗凋亡基因 食管癌组织 正常组织 集落形成 抗凋亡能力 琼脂 突变体 转染
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