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HOTAIRM1调节OCT4表达维持胶质瘤干细胞的自我更新 预览
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作者 王珊珊 彭小忠 韩为 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第6期792-797,共6页
目的探究粒细胞特异表达的HOXA转录本反义RNA1(HOTAIRM1)在胶质瘤干细胞中发挥的功能及分子机制。方法Real-timePCR检测HOTAIRM1在胶质瘤干细胞中的表达谱;肿瘤球形成实验和有限稀释实验检测过表达或敲低HOTAIRM1后胶质瘤干细胞自我更... 目的探究粒细胞特异表达的HOXA转录本反义RNA1(HOTAIRM1)在胶质瘤干细胞中发挥的功能及分子机制。方法Real-timePCR检测HOTAIRM1在胶质瘤干细胞中的表达谱;肿瘤球形成实验和有限稀释实验检测过表达或敲低HOTAIRM1后胶质瘤干细胞自我更新能力;real-timePCR和Westernblot检测干性标志物的表达;双荧光素酶报告基因实验检测OCT4启动子活性。全反式维甲酸(ATRA)处理NB4急性早幼粒细胞白血病细胞和胶质瘤干细胞GSC2后检测HOTAIRM1表达。结果与对照组相比,过表达HOTAIRM1的胶质瘤干细胞自我更新能力呈显著上升(P<0.05);干性标志物NESTIN、OCT4及SOX2表达增加(P<0.05)。敲低HOTAIRM1则结果相反。过表达HOTAIRM1可促进OCT4启动子转录活性(P<0.05)。ATRA处理GSC2后HOTAIRM1表达下调(P<0.01)。结论HOTAIRM1通过调节OCT4表达维持胶质瘤干细胞的自我更新。 展开更多
关键词 胶质瘤干细胞 HOTAIRM1 OCT4 自我更新
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恒河猴增龄过程中miR-16-5p及靶基因在外周血白细胞中的表达变化 预览
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作者 胡婧雯 李艳艳 +6 位作者 刘伟 焦丽 杨晶 杨云 和占龙 彭小忠 鲁帅尧 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第7期995-1000,共6页
目的明确衰老相关microRNA与恒河猴增龄的相关性。方法将猴群参照人类增龄划分为幼年、成年、老年和长寿,提取外周血白细胞的总RNA;用real-time PCR检测外周血白细胞中的microRNA及VEGFA、GHR、TBP、INSR、CLOCK、IKBKB、PIK3R1、LRP2、... 目的明确衰老相关microRNA与恒河猴增龄的相关性。方法将猴群参照人类增龄划分为幼年、成年、老年和长寿,提取外周血白细胞的总RNA;用real-time PCR检测外周血白细胞中的microRNA及VEGFA、GHR、TBP、INSR、CLOCK、IKBKB、PIK3R1、LRP2、SSTR3、IGF1R、BCL2、PPM1D、IRS1、MAPK8、ADCY5、APP、NFE2L1、BDNF和PEX5的表达;利用microRNA靶基因预测网站miRwalk、TargetSan、miRecords、miRDB预测miR-16-5p的靶基因,并与人类衰老基因库(http://genomics.senescence.info/)对接。结果在增龄过程中,恒河猴外周血白细胞中miR-16-5p的表达量随年龄增长而增加(P<0.001);多个网站对miR-16-5p靶基因预测得到539个潜在的靶基因,与人类衰老基因组库对接后有19个基因重合;有10个基因的mRNA在恒河猴增龄过程中存在差异表达,其中,IKBKB、PIK3R1、IRS1的表达随着年龄的增加逐渐下降。结论在自然衰老恒河猴的外周血白细胞中,miR-16-5p及其靶基因IKBKB、PIK3R1、IRS1能作为外周血衰老候选标志物。 展开更多
关键词 衰老 恒河猴 miR-16-5p 标志物
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二磷酸氯喹对THP-1细胞增殖及凋亡的影响
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作者 洪珊 杨佳佳 +3 位作者 文送娇 林垚 叶超 孙强明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期386-389,共4页
目的探讨不同浓度二磷酸氯喹对急性单核细胞性白血病细胞THP-1增殖及凋亡的影响。方法分别用10、20、40、80、100μmol/L氯喹处理THP-1细胞,分别于处理12、24、48和72 h收集细胞,MTS法检测细胞增殖情况,同时采用Hoechst33342荧光染色法... 目的探讨不同浓度二磷酸氯喹对急性单核细胞性白血病细胞THP-1增殖及凋亡的影响。方法分别用10、20、40、80、100μmol/L氯喹处理THP-1细胞,分别于处理12、24、48和72 h收集细胞,MTS法检测细胞增殖情况,同时采用Hoechst33342荧光染色法及流式细胞仪检测二磷酸氯喹对THP-1细胞凋亡的影响。结果处理细胞12、24 h时,10、20、40、80、100μmol/L二磷酸氯喹对细胞增殖无明显影响,各组间差异无统计学意义(P>0.05);处理细胞48、72 h时,各浓度二磷酸氯喹对细胞增殖均有抑制作用,细胞活力均明显下降,各组间差异有统计学意义(P<0.01),并具有剂量依赖性。不同浓度二磷酸氯喹对THP-1细胞凋亡均具有诱导作用,且随着浓度的增加,细胞凋亡愈加明显。结论二磷酸氯喹在体外可抑制THP-1细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,其作用具有剂量依赖性。 展开更多
关键词 二磷酸氯喹 THP-1细胞 细胞增殖 细胞凋亡
疫苗用氢氧化铝佐剂质量标准的初步建立
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作者 肖詹蓉 张娜 +7 位作者 潘殊男 杨溢尧 艾绪露 李彦涵 许文婷 孙宏亮 吴永林 杨明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第7期721-725,731共6页
目的建立疫苗用氢氧化铝佐剂的质量标准。方法参照《欧洲药典》8.0和《中国药典》四部(2015版),选择5个实验室对6个厂家12批氢氧化铝佐剂样品同时进行17个理化项目的检测及分析,建立适合国内氢氧化铝佐剂的质量标准。结果初步建立了疫... 目的建立疫苗用氢氧化铝佐剂的质量标准。方法参照《欧洲药典》8.0和《中国药典》四部(2015版),选择5个实验室对6个厂家12批氢氧化铝佐剂样品同时进行17个理化项目的检测及分析,建立适合国内氢氧化铝佐剂的质量标准。结果初步建立了疫苗用氢氧化铝佐剂17项质量标准。经5个实验室检测,12批样品外观、溶解性能、鉴别试验、无菌、吸附率、硫酸盐含量、硝酸盐含量、铵盐含量、砷盐含量、铁盐含量、重金属含量、氯化钠含量、氯化物含量及细菌内毒素的结果均符合《欧洲药典》8. 0和《中国药典》四部(2015版)相关质量标准;而p H值、铝含量、沉降率检测结果不同厂家之间差异较大。结论建立了适合国内氢氧化铝佐剂的质量评价体系,为氢氧化铝佐剂的质量标准进入2015版《中国药典》增补版提供了方法细则和标准制定依据。 展开更多
关键词 疫苗 氢氧化铝 佐剂 质量标准
基于α-突触核蛋白原纤维的帕金森氏疾病模型的研究进展 预览
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作者 罗海玉 吴正存 马开利 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期103-108,共6页
帕金森氏病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,主要病理学标志为中脑黑质致密部可见部分的一种球状包涵体,称为路易小体(Lewy bodies,LBs)。LBs的主要成分为部分中空的放射状淀粉样纤维,而该淀粉样纤维的主要成... 帕金森氏病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,主要病理学标志为中脑黑质致密部可见部分的一种球状包涵体,称为路易小体(Lewy bodies,LBs)。LBs的主要成分为部分中空的放射状淀粉样纤维,而该淀粉样纤维的主要成分为α-突触核蛋白(α-synuclein,AS)。AS与PD的发生有着密切的关系,是PD致病机制研究中的关键蛋白。AS的原纤维具有独特的传播特性,且能诱发产生与PD病理相类似的一系列特征,因此其可以作为建立PD模型的全新材料。本文就基于AS原纤维的PD模型的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 帕金森氏病 Α-突触核蛋白 原纤维 疾病模型
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CA16感染树鼩肺成纤维细胞模型的建立及其受体SCARB2的表达 预览
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作者 王文广 匡德宣 +5 位作者 李娜 陆彩霞 罕园园 仝品芬 孙晓梅 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期479-484,共6页
目的 探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法 用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB... 目的 探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法 用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB2蛋白的表达情况,探针法实时荧光定量PCR检测病毒载量,以β-Actin作内参染料法实时荧光定量PCR检测受体SCARB2基因的相对表达量,结合基因序列比对,分析其与感染的相关性。结果 CA16感染TSLF,可引起明显的细胞病变,免疫荧光实验可见病毒和受体SCARB2蛋白,以100TCID50/10^5 cells的比例感染TSLF可在48 h左右病毒载量达到最高,SCARB2基因有与感染相关的高表达,而其基因序列也与人有较高同源性。结论 CA16可感染TSLF,树鼩SCARB2可参与感染。 展开更多
关键词 CA16 树鼩肺成纤维细胞 感染 SCARB2
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树鼩原代小胶质细胞的分离培养、纯化与鉴定
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作者 黎晓慧 李明学 +3 位作者 黄鑫 张志成 袁圆 代解杰 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期445-450,共6页
本文旨在建立树鼩(Tupaia belangeri)小胶质细胞原代培养及纯化的方法,为利用新型实验动物树鼩进行相关研究工作提供实验材料。将新生树鼩大脑皮质机械分离,皮质组织块用胰蛋白酶消化后制成细胞悬液;培养9~10 d后,分别采用直立手拍法、... 本文旨在建立树鼩(Tupaia belangeri)小胶质细胞原代培养及纯化的方法,为利用新型实验动物树鼩进行相关研究工作提供实验材料。将新生树鼩大脑皮质机械分离,皮质组织块用胰蛋白酶消化后制成细胞悬液;培养9~10 d后,分别采用直立手拍法、温和胰酶消化法以及恒温振荡法分离纯化树鼩小胶质细胞,通过差速贴壁进一步纯化。荧光显微镜下,利用小胶质细胞的特异性标记物CD11b抗体进行鉴定。结果显示,小胶质细胞分离培养第3天时呈静息状态,表现为梭形、杆状、分支状等不规则形态。细胞免疫荧光CD11b呈阳性。不同纯化方法细胞免疫荧光并计数显示,直立手拍法所获得的细胞产量明显高于恒温振荡法(P <0.05),细胞阳性率(> 96%)明显高于温和胰酶消化法(> 90%,P <0.05)。直立手拍法可获得产量及纯度高的树鼩原代小胶质细胞。 展开更多
关键词 树鼩 原代小胶质细胞 直立手拍法 温和胰酶消化法 恒温振荡法
抗树鼩CD4单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定
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作者 吴忠香 张雪梅 +6 位作者 徐婧雯 宋杰 李慧 朱文兵 蒋曦 李卫宇 董少忠 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第10期1097-1101,1107,共6页
目的制备鼠抗树鼩CD4单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法将重组质粒pGEX-5X-1-CD4和pET30a(+)-CD4分别转化感受态E.coli BL21和BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并通过Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析柱纯化重组蛋白GST-CD... 目的制备鼠抗树鼩CD4单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法将重组质粒pGEX-5X-1-CD4和pET30a(+)-CD4分别转化感受态E.coli BL21和BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并通过Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析柱纯化重组蛋白GST-CD4和His-CD4。以His-CD4蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术筛选出能分泌抗树鼩CD4的杂交瘤细胞株,制备小鼠腹水单克隆抗体,间接ELISA法检测效价,并通过Protein A亲和层析柱纯化获得鼠抗树鼩CD4单克隆抗体,Western blot及FACS法分析其生物学特性。结果筛选出3株能稳定分泌抗树鼩CD4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为37D2、38E1、39F2,腹水单克隆抗体效价分别为1∶204800、1∶204800、1∶3200。经HRP标记的38E1单克隆抗体可与树鼩PBMC总蛋白发生特异性结合,经PECy5.5标记的38E1单克隆抗体能特异性识别树鼩PBMC。结论成功制备了鼠抗树鼩CD4的单克隆抗体,为进一步对树鼩作为动物模型的研究及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 树鼩 CD4 单克隆抗体 生物学特性
MPTP诱导树鼩帕金森疾病模型行为学检测方法研究 预览
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作者 张志成 宋庆凯 +6 位作者 黎晓慧 李娜 黄鑫 袁圆 王璇 李明学 代解杰 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第1期9-14,共6页
目的建立树鼩急性帕金森疾病(PD)模型,对Catwalk、FPA检测系统作为评价PD行为学的方法进行研究。方法选取14只成年、健康的普通级滇缅树鼩,随机分为模型组(n=10)和对照组(n=4),1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)药物腹腔注射建立急... 目的建立树鼩急性帕金森疾病(PD)模型,对Catwalk、FPA检测系统作为评价PD行为学的方法进行研究。方法选取14只成年、健康的普通级滇缅树鼩,随机分为模型组(n=10)和对照组(n=4),1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)药物腹腔注射建立急性PD模型,对照组注射等体积0.9%氯化钠溶液。结果成功建立树鼩急性PD模型。建模1d后,与对照组树鼩相比,模型组树鼩空间利用指数下降、低运动性出现次数(BLM)指数显著升高(P均<0.001),表明模型组空间利用能力受损、活动度下降;模型组右前爪(RF)、左前爪(LF)最大接触面积减少,RF、LF和右后爪(RH)爪印最大接触面积平均压力,以及RF、RH、LF爪印平均压力及四肢平均力量均下降(P均<0.05),反映了树副肌肉僵硬度升高,可以作为PD步态分析的定量指标;0~15 Hz(TI1)震颤显著增强(P<0.01),能较好模拟PD患者静止性震颤的临床表现。结论MPTP致树鼩急性PD模型能较好模拟PD早期的临床表现。Catwalk、FDA检测系统可提供系统、客观、可靠的PD行为学数据。 展开更多
关键词 帕金森疾病 树鼩 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶(MPTP) 动物模型 行为学 Catwalk步态分析系统 FPA分析系统
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树鼩脊髓星形胶质细胞的分离鉴定 预览
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作者 王璇 王文广 +3 位作者 李娜 袁园 张志成 孙晓梅 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第1期15-20,共6页
目的建立树鼩脊髓来源的星形胶质细胞的体外分离、鉴定方法以及原代培养技术。为体外利用树鼩星形胶质细胞开展相关研究提供实验材料。方法给新生树鼩实施安死术后采集脊髓组织,于解剖显微镜下去除脊髓膜和血管,减少成纤维细胞、血管内... 目的建立树鼩脊髓来源的星形胶质细胞的体外分离、鉴定方法以及原代培养技术。为体外利用树鼩星形胶质细胞开展相关研究提供实验材料。方法给新生树鼩实施安死术后采集脊髓组织,于解剖显微镜下去除脊髓膜和血管,减少成纤维细胞、血管内皮细胞和红细胞的影响,然后使用胰蛋白酶和DNaseⅠ联合消化眷髓组织,分离培养。根据星形胶质细胞和成纤维细胞、小胶质细胞的贴壁时间差异,使用差速贴壁法去除成纤维细胞;然后在细胞铺满后,使用恒温摇床振荡的方式去除少突胶质细胞;通过连续3次纯化,去除神经元。对所培养的细胞进行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)细胞免疫荧光染色鉴定。结果采用胰蛋白酶和DNaseⅠ联合消化后差速贴壁培养,能够分离获得星形胶质细胞。细胞具有典型的原浆型和纤维型特征,原浆型呈多角状,突起少而粗壮;纤维型突起丰富且向外铺展开;细胞免疫荧光结果显示GFAP表达阳性,且纯度可达到95%。结论成功建立了树鼩的脊髓星形胶质细胞的体外分离纯化培养方法。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 脊髓 分离鉴定 树鼩
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基于16S rRNA测序对树鼩肠道菌群特征与高级别肉瘤的相关性分析 预览
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作者 黄鑫 古文鹏 +4 位作者 黎晓慧 李娜 贾杰 李明学 代解杰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期11-16,49共7页
目的检测高级别肉瘤的树鼩肠道微生物菌群结构,为探讨肠道微生物菌群结构的改变与肿瘤发生的相关性提供科学依据。方法选取3例患有恶性高级别肉瘤树鼩粪便为CA组,6例健康树鼩粪便为对照NO组。通过16SV3+4区引物进行细菌多样性的鉴定,通... 目的检测高级别肉瘤的树鼩肠道微生物菌群结构,为探讨肠道微生物菌群结构的改变与肿瘤发生的相关性提供科学依据。方法选取3例患有恶性高级别肉瘤树鼩粪便为CA组,6例健康树鼩粪便为对照NO组。通过16SV3+4区引物进行细菌多样性的鉴定,通过对Reads剪切过滤,OTUs聚类,并进行物种注释及丰度分析,得出两组树鼩肠道微生物结构、丰度以及多样性。结果比较CA组和NO组树鼩肠道微生物结构,多样性指数Chao1指数值、ACE指数值、Shannon指数值差异无统计学意义(P>0.05)。NO组的树鼩肠道菌群OTUs为640种,而CA组为494种,健康树鼩肠道菌群结构呈多样性。在门水平上比较,其中CA组中螺旋体门(Spirochaetes)丰度为0.03%,低于NO组(丰度为0.12%),且差异有统计学意义(P<0.05);CA组厚壁菌门(Firmicutes)丰度为77.79%高于NO组(47.65%),但差异无统计学意义;CA组的拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度为0.75%低于NO组(8.31%),但差异无统计学意义。CA组中的乳杆菌属(lactobacillus)是具有统计学意义的生物标识。结论患有高级别肉瘤树鼩的肠道菌群结构丰度和多样性低于健康树鼩,肠道菌群的结构改变及厚壁菌门含量增加可能增加恶性肿瘤的发生。 展开更多
关键词 肠道菌群 高级别肉瘤 16srRNA测序 树鼩
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树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养 预览
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作者 王文广 匡德宣 +5 位作者 陆彩霞 罕园园 李娜 仝品芬 孙晓梅 代解杰 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第2期105-110,共6页
目的建立适用于树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养方法。方法分别采用组织块贴壁培养法和胰酶消化法,分离培养新生树鼩肺成纤维细胞,通过倒置显微镜观察细胞生长情况,用波形蛋白(Vimentin)对分离的成纤维细胞进行免疫荧光鉴定;传... 目的建立适用于树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养方法。方法分别采用组织块贴壁培养法和胰酶消化法,分离培养新生树鼩肺成纤维细胞,通过倒置显微镜观察细胞生长情况,用波形蛋白(Vimentin)对分离的成纤维细胞进行免疫荧光鉴定;传代培养并开展冻存复苏实验,采用MTS法绘制细胞生长曲线,以人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB-17)作对照。结果通过组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可获取树鼩肺成纤维细胞,细胞主要呈现梭形,波形蛋白免疫荧光鉴定普遍呈阳性,与KMB-17一致。树鼩肺成纤维细胞可连续传代4~5次,经冻存复苏后细胞仍能保持活力,以5×10^4细胞/mL的密度传代,细胞可在3 d左右进入对数生长期。结论组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可有效获取树鼩的肺成纤维细胞,可为肺部相关疾病的体外研究提供实验材料。 展开更多
关键词 树鼩 肺成纤维细胞 鉴定 传代培养
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树鼩Mfsd2a基因的克隆分析和不同组织表达量的检测 预览
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作者 王文广 匡德宣 +5 位作者 李娜 陆彩霞 罕园园 仝品芬 孙晓梅 代解杰 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第3期178-186,共9页
目的对树鼩主要促进因子超家族成员2a(Mfsd2a)基因进行克隆、测序和生物信息学分析,并定量检测其组织表达量。方法从树鼩脑和脊髓中提取总RNA,RT-PCR扩增Mfsd2a基因片段,测序后利用生物信息学软件对其序列特征、系统进化、编码蛋白的结... 目的对树鼩主要促进因子超家族成员2a(Mfsd2a)基因进行克隆、测序和生物信息学分析,并定量检测其组织表达量。方法从树鼩脑和脊髓中提取总RNA,RT-PCR扩增Mfsd2a基因片段,测序后利用生物信息学软件对其序列特征、系统进化、编码蛋白的结构和理化性质进行分析;以树鼩β-actin为内参,qPCR检测树鼩Mfsd2a基因在不同组织中的表达情况。结果克隆获得Mfsd2a基因片段全长1 796 bp,与NCBI上公布的树鼩Mfsd2a基因预测序列高度一致,比对显示其与MFS转运蛋白超家族同源。其编码区全长1 464 bp,编码488个氨基酸。预测结果显示树鼩Mfsd2a蛋白具有明显的疏水性区域,无信号肽,二级结构元件由α螺旋、β折叠、无规卷曲和延伸链组成。OCTOPUS分析发现Mfsd2a存在12个跨膜结构,修饰结构预测发现Mfsd2a蛋白存在两处N糖基化位点,亚细胞定位发现其可能主要分布于细胞膜和内质网。qPCR检测树鼩不同组织的Mfsd2a表达,结果显示各组织均有表达,在大脑、脊髓中的表达水平相对较高。结论成功克隆了树鼩Mfsd2a基因,建立了该基因表达定量检测方法,为今后利用树鼩神经系统疾病模型深入开展Mfsd2a基因功能研究提供了理论和技术支持。 展开更多
关键词 树鼩 主要促进因子超家族成员2a(Mfsd2a) 克隆 分析 表达
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恶性疟原虫动物模型及基因编辑研究进展 预览
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作者 匡德宣 王文广 +1 位作者 孙晓梅 代解杰 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第1期65-71,共7页
恶性疟原虫是人体疟疾的病原体,恶性疟原虫动物模型是研究人疟原虫感染、慢性致病机制、药物评价和人疟原虫疫苗研制的重要实验材料。迄今为至,恶性疟原虫动物模型研究主要涉及非人灵长类、免疫缺陷小鼠、转基因技术以及CRISPR/Cas9系... 恶性疟原虫是人体疟疾的病原体,恶性疟原虫动物模型是研究人疟原虫感染、慢性致病机制、药物评价和人疟原虫疫苗研制的重要实验材料。迄今为至,恶性疟原虫动物模型研究主要涉及非人灵长类、免疫缺陷小鼠、转基因技术以及CRISPR/Cas9系统等领域。本文对恶性疟原虫体内外感染动物模型及基因编辑研究做总结分析,为今后恶性疟原虫动物模型建立及基因编辑研究提供参考。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 体外感染 体内感染 基因编辑
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诺如病毒感染模型的研究进展 预览
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作者 吴琼雯(综述) 刘龙丁(审校) 《微生物学免疫学进展》 2019年第4期75-79,共5页
诺如病毒(noroviruses, NoVs)为单股正链RNA病毒,属于杯状病毒科(Caliciviridae)诺如病毒属(Norovirus),是引起人类非细菌性急性胃肠炎的主要病原体。每年约有1亿人由于NoVs感染而发病,儿童、老年人以及免疫功能异常者均为易感人群,可... 诺如病毒(noroviruses, NoVs)为单股正链RNA病毒,属于杯状病毒科(Caliciviridae)诺如病毒属(Norovirus),是引起人类非细菌性急性胃肠炎的主要病原体。每年约有1亿人由于NoVs感染而发病,儿童、老年人以及免疫功能异常者均为易感人群,可导致患者产生腹泻、呕吐等症状,严重者甚至死亡。由于NoVs的快速变异,无法在体外培养人诺如病毒及缺乏用于口腔感染的小动物模型,这就限制了对NoVs生物学特性的进一步研究。现就NoVs的病原学、病毒受体、细胞模型、动物模型等的研究作一概述。 展开更多
关键词 诺如病毒 受体 体外培养系统 动物模型 肠道菌群 疫苗
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单纯疱疹病毒Ⅱ型经不同途径感染BALB/c小鼠的病理学研究
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作者 曾洁媛 李琦涵 +7 位作者 范胜涛 廖芸 冯敏 徐兴丽 沈冬 王建斌 程继帅 张莹 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期485-491,共7页
目的观察并比较分析单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)经不同途径感染小鼠后的致病情况。方法将6周龄雌性BALB/c小鼠分为实验组和对照组。实验组小鼠分别经滴鼻、生殖道途径感染HSV-2(每只104CCID50/20 μl),对照组... 目的观察并比较分析单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)经不同途径感染小鼠后的致病情况。方法将6周龄雌性BALB/c小鼠分为实验组和对照组。实验组小鼠分别经滴鼻、生殖道途径感染HSV-2(每只104CCID50/20 μl),对照组小鼠经上述两种途径注射PBS。感染后不同时间点,分别取肺、神经系统、生殖系统组织进行病理学观察及病毒载量检测。通过原位杂交对小鼠三叉和骶神经节中lat基因的表达进行定位,同时对组织中病毒进行重激活检测。结果两种途径感染HSV-2的小鼠体重在6 d后均呈下降趋势,且均能观察到组织病理损伤。鼻腔感染以肺泡壁充血、脑血管袖套、淋巴细胞浸润等肺部、中枢神经系统病理损伤为主;而生殖道感染组主要出现是骶神经节坏死、阴道和子宫嗜酸性粒细胞增多、卵巢充血等生殖道病理现象。经两种途径感染的小鼠组织器官中病毒载量的情况也印证了上述病理结果,即鼻腔感染组小鼠的神经、肺组织中病毒载量明显高于生殖道组,而生殖道感染组小鼠的生殖道和骶神经节中病毒增殖则明显高于鼻腔感染组。感染后28 d,在处于潜伏感染小鼠的三叉和骶神经节中均能检测到HSV-2 lat基因mRNA的阳性信号,并且采集的组织碎块均能在与Vero细胞共培养时使细胞病变,且生殖道感染组的lat基因阳性信号及重激活后病毒增殖趋势相对高于鼻腔感染组。结论HSV-2通过鼻腔和生殖道两种途径感染BALB/c小鼠均能引起组织病理损伤,且病理损伤空间特异性与感染途径密切相关。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅱ型 生殖道感染 鼻腔感染 病理学分析
CD133基因3-UTR区域变异位点与云南汉族人群宫颈癌的相关性 预览
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作者 周紫云 姚宇峰 +5 位作者 张新文 杨龙雨 陈珺 戴书颖 史荔 严志凌 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第1期31-34,58共5页
目的:研究CD133基因3-UTR区域的(rs2240688和rs3130)单核苷酸多态性位点(SNPs)与云南汉族人群宫颈癌的相关性。方法:选取云南汉族宫颈癌患者428例作为病例组,455例云南汉族健康个体作为对照组;采用TaqMan探针基因分型方法对2组受试者CD... 目的:研究CD133基因3-UTR区域的(rs2240688和rs3130)单核苷酸多态性位点(SNPs)与云南汉族人群宫颈癌的相关性。方法:选取云南汉族宫颈癌患者428例作为病例组,455例云南汉族健康个体作为对照组;采用TaqMan探针基因分型方法对2组受试者CD133基因中rs2240688和rs3130位点进行基因分型,并采用χ^2检验分析上述两SNPs位点等位基因、基因型及构建的单倍型分布频率在病例组与对照组中的差异。结果:rs2240688位点等位基因和基因型分布频率在病例组和对照组比较,差异具有统计学意义(P=0.019、0.040),该位点等位基因G是宫颈癌的风险性因素(OR=1.292,95%CI为1.042~1.601);而rs3130位点等位基因和基因型分布频率在病例组和对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);单倍型分析结果显示,单倍型rs2240688G-rs3130C是宫颈癌发生的风险性因素(P=0.023,OR=1.300,95%CI为1.037~1.630)。结论:CD133基因3-UTR区域的SNP位点rs2240688与云南汉族人群宫颈癌的发病风险相关,该位点等位基因G可能是宫颈癌发生的风险性因素。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 基因 CD133 3-UTR 多态性 单核苷酸 云南 汉族
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人乳头瘤病毒16型E4基因突变与宫颈癌发生发展的相关性研究
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作者 赵雨笛 姚月婷 +6 位作者 周紫云 戴书颖 严志凌 杨龙雨 李传印 史荔 姚宇峰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期584-591,共8页
人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus type 16,HPV16)是宫颈癌病例中最常见的类型之一。有研究表明E4基因核酸序列变异可能会影响HPV16的致癌性[1]。在我们前期对HPV16 E2基因的研究中也发现E2基因变异与宫颈癌发生相关。为进一步了... 人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus type 16,HPV16)是宫颈癌病例中最常见的类型之一。有研究表明E4基因核酸序列变异可能会影响HPV16的致癌性[1]。在我们前期对HPV16 E2基因的研究中也发现E2基因变异与宫颈癌发生相关。为进一步了解HPV16 E4基因变异与宫颈癌发生发展的相关性,本研究检测了118例HPV16阳性宫颈癌标本及151例HPV16阳性无症状者宫颈标本的E4基因变异,根据获得的E4基因序列,采用Neighborjoining法构建系统发育进化树。结果显示:HPV16变异型在对照组和病例组之间的分布差异具有统计学意义(P=0.015),其中亚美型(AA)与宫颈癌的发生可能具有相关性。序列分析结果显示有8个变异在病例组和对照组之间的分布差异具有统计学意义(P <0.05),且均来自亚美型(AA)。在欧洲型(EUR)中,C3384T(L18L)、A3449G(P39P)两个突变与宫颈癌发生发展有相关性。本研究结果提示,HPV16型E4基因变异可能与宫颈癌的发生发展具有相关性。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒16型(HPV16) E4基因 突变 相关性研究
CD44基因多态性与宫颈癌及非小细胞肺癌的相关性 预览
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作者 赵雨笛 谭芳 +7 位作者 严志凌 李盈甫 戴书颖 周紫云 张新文 刘舒媛 史荔 姚宇峰 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期277-283,共7页
背景与目的:CD44分子是众多肿瘤细胞的标志分子,其表达水平与肿瘤细胞的恶性程度有关。该研究探讨CD44基因中的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与云南汉族人群宫颈癌和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer... 背景与目的:CD44分子是众多肿瘤细胞的标志分子,其表达水平与肿瘤细胞的恶性程度有关。该研究探讨CD44基因中的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与云南汉族人群宫颈癌和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)易感性的相关性。方法:选取了CD44基因中的两个SNP位点rs13347和rs8193,采用TagMan基因分型的方法,分析这两个多态性位点在497例宫颈癌患者和500例健康对照个体以及483例NSCLC患者和471例健康对照个体中的分布特征,并分析CD44基因中的多态性位点与云南汉族人群宫颈癌和NSCLC的相关性。结果:rs13347和rs8193位点等位基因和基因型在宫颈癌组和对照组中的分布频率的差异无统计学意义(P>0.05)。而在NSCLC组和对照组的比较中:rs13347和rs8193位点等位基因在NSCLC组和对照组中的分布频率的差异有统计学意义(P=0.020和P=0.004);这两个位点基因型在NSCLC组和对照组中分布频率的差异有统计学意义(P=0.027和P=0.020);其中rs13347位点等位基因C在NSCLC组中的分布频率显著高于对照组,可能是NSCLC发生的风险因素(OR=1.250,95%CI:1.035~1.509),rs8193位点等位基因C在对照组中的分布频率显著高于NSCLC组,可能是NSCLC发生的保护性因素(OR=0.768,95%CI:0.641~0.921)。单倍型分析结果显示,rs13347C-rs8193T和rs13347T-rs8193C在NSCLC组和对照组中的分布频率差异有统计学意义(P=0.003和0.022);该结果说明单倍型rs13347C-rs8193T可能是云南汉族人群NSCLC发生的风险性因素(OR=1.316,95%CI:1.096~1.579)。结论:CD44基因中的两个SNP位点rs13347和rs8193可能与云南汉族人群宫颈癌发病风险无关,而可能与云南汉族人群NSCLC具有相关性。 展开更多
关键词 宫颈癌 非小细胞肺癌 恶性肿瘤 CD44 单核苷酸多态性 遗传易感性 云南汉族人群
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RT-qPCR检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因转录水平方法的建立
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作者 王陈芸 李哲丽 +4 位作者 叶尤松 蔡发晶 肖涵 谢季平 唐东红 《实验动物科学》 2019年第1期26-30,共5页
目的建立实时荧光定量(RT-qPCR)检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因转录水平的方法,以在转录水平上对XDH/XO基因进行定量检测。方法提取Wistar大鼠肝脏组织中总RNA,经逆转录得到cDNA,以10倍为稀释因子稀释为5个浓度梯度,使... 目的建立实时荧光定量(RT-qPCR)检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因转录水平的方法,以在转录水平上对XDH/XO基因进行定量检测。方法提取Wistar大鼠肝脏组织中总RNA,经逆转录得到cDNA,以10倍为稀释因子稀释为5个浓度梯度,使用设计的引物序列和内参基因进行RT-qPCR检测,得到XDH/XO基因表达的标准曲线。进而检测Wistar大鼠高尿酸血症动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。结果 RT-qPCR法检测得到的XDH/XO基因标准曲线溶解峰单一,R^2接近1,能检测出高尿酸动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。结论 RT-qPCR检测Wistar大鼠XDH/XO基因转录水平的方法具有定量准确,重复性好的特点,可应用于高尿酸血症的发病机理、新药研究等方面。 展开更多
关键词 实时荧光定量(RT-qPCR) 嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO) WISTAR大鼠 肝脏 mRNA
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