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“一带一路”国家渔业科技合作现状及前景分析 预览
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作者 钱妤 张溢卓 +4 位作者 蒋科技 韦慧 陈欣然 静莹 马卓君 《世界农业》 CSSCI 2019年第6期4-11,118共9页
中国是世界最大、最重要的渔业国家之一,渔业的发展为全球食物供给起到至关重要的作用。“一带一路”国家与中国在渔业资源和产业等方面具有明显的互补性和广阔的合作空间。通过推进区域间渔业科技与产业合作,将促使中国渔业产业充分利... 中国是世界最大、最重要的渔业国家之一,渔业的发展为全球食物供给起到至关重要的作用。“一带一路”国家与中国在渔业资源和产业等方面具有明显的互补性和广阔的合作空间。通过推进区域间渔业科技与产业合作,将促使中国渔业产业充分利用国际渔业自然资源和技术资源,提高水产品和渔业装备、技术的国际竞争力,实现国内渔业资源优化配置和产业模式升级。本研究对在“一带一路”国家开展国际合作的32家渔业科研院所、企事业单位进行了调研,结果显示,中国“一带一路”渔业国际科技合作对象以研究院所为主体,与泰国合作的机构数量最多,其他依次为俄罗斯和新加坡,合作形式以共建研究平台、开展国际合作项目、技术引进和援外培训为主。“一带一路”国家对中国技术转移的政策基本持比较积极的态度,合作难度适中,取得的技术水平较好。与东盟国家的合作最为成熟,在种质、水产养殖技术、资源等领域具有稳定的合作项目支持并取得了一些成果。种质资源、水产健康养殖和渔业装备是今后5年内亟须进行“一带一路”国际科技合作的研究领域。本研究结果为新形势下如何通过国际合作,进一步提升“一带一路”国家渔业科技合作提供参考建议。 展开更多
关键词 “一带一路”倡议 渔业 国际合作
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黄颡鱼体表溃烂症初步研究 预览
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作者 杨移斌 姜兰 +3 位作者 宋怿 董靖 胥宁 艾晓辉 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第5期51-55,共5页
实验从患病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)病灶分离纯化病原菌,经ITS序列分析对其进行鉴定,开展人工感染试验,并利用纸片扩散法进行药物筛选。结果显示,分离菌株HSZJ01为本次引发黄颡鱼病害的致病菌,菌株HSZJ01的ITS序列与不规则毛霉(... 实验从患病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)病灶分离纯化病原菌,经ITS序列分析对其进行鉴定,开展人工感染试验,并利用纸片扩散法进行药物筛选。结果显示,分离菌株HSZJ01为本次引发黄颡鱼病害的致病菌,菌株HSZJ01的ITS序列与不规则毛霉(Mucor irregularis)同源性最高。结果显示,抗生素中两性霉素对HSZJ01抑菌效果最好,而消毒剂中硫酸铜抑菌效果最佳。菌株HSZJ01是黄颡鱼病原菌,养殖时可选用两性霉素及硫酸铜等药物进行防控。 展开更多
关键词 黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco) 不规则毛霉(Mucor irregularis) 分离鉴定 药物筛选
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维氏气单胞菌灭活疫苗对草鱼免疫相关基因表达的影响及其保护效果
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作者 任燕 时云朵 +5 位作者 曾伟伟 王英英 李莹莹 常藕琴 尹纪元 石存斌 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第7期726-731,共6页
目的探讨维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,Av)灭活疫苗对草鱼免疫相关基因表达的影响及保护效果。方法采用GZ09007菌株制备Av灭活疫苗,分别通过浸泡和注射两种途径免疫草鱼,同时设对照组(未免疫),于免疫后2、4、7、11、14和21d,经实时... 目的探讨维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,Av)灭活疫苗对草鱼免疫相关基因表达的影响及保护效果。方法采用GZ09007菌株制备Av灭活疫苗,分别通过浸泡和注射两种途径免疫草鱼,同时设对照组(未免疫),于免疫后2、4、7、11、14和21d,经实时荧光定量PCR法检测草鱼脾脏、头肾、鳃组织中IgM、IL-1β、C3、C-凝集素及溶菌酶的m RNA表达量;于免疫30 d后用同源菌株进行攻毒,连续观察14d,计算各免疫组的相对保护率(relative percent survival,RPS)。结果 2个免疫组的5个免疫相关基因mRNA表达量均显著高于对照组(P <0. 001),且注射组表达量普遍高于浸泡组,注射组IgM基因较浸泡组更早表达,C3、C-凝集素及溶菌酶基因表达量更高或表达持续时间更长。脾脏中IL-1β和溶菌酶基因表达量达最高值为免疫后14~21d,头肾和鳃组织中5个基因表达量达最高值均为免疫后2~4d,各基因表达量最高值为对照组的1.81~37. 52倍。腹腔注射攻毒14 d后,注射组及浸泡组的RPS分别为66.7%和36.7%。结论Av灭活疫苗免疫草鱼后,可增强脾脏、头肾和鳃组织中IgM、IL-1β、C3、C-凝集素及溶菌酶基因mRNA表达,提高草鱼抗Av感染的能力。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 灭活疫苗 实时荧光定量PCR 免疫相关基因 免疫保护
水生动物源嗜芳香环弧菌的鉴定及耐药性分析 预览
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作者 赵姝 姜兰 +2 位作者 周俊芳 王元 房文红 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1369-1377,共9页
本研究从患病的半滑舌鳎分离得到5株弧菌,对其进行种属鉴定,并研究其耐药性及分子水平耐药机制。采用生化检测方法和分子生物学方法(基因16S rRNA、HSP60和mreB)进行鉴定,结果显示,5株弧菌均为嗜芳香环弧菌。通过肉汤稀释法检测菌株对... 本研究从患病的半滑舌鳎分离得到5株弧菌,对其进行种属鉴定,并研究其耐药性及分子水平耐药机制。采用生化检测方法和分子生物学方法(基因16S rRNA、HSP60和mreB)进行鉴定,结果显示,5株弧菌均为嗜芳香环弧菌。通过肉汤稀释法检测菌株对抗菌药物的耐药性,通过PCR扩增和测序技术检测菌株中耐药基因和4类整合子并对其携带基因盒进行分析。结果显示,5株嗜芳香环弧菌均对环丙沙星、链霉素、红霉素、氟苯尼考、氨苄西林、磺胺甲恶唑、复方新诺明和利福平耐药,且均携带qnr VC、blaCARB-17、strA、strB和sul耐药基因。此外,菌株JS291和JS295携带Ⅰ类整合子、qacEΔ1和sul1耐药基因;可变区携带基因盒分别为dfr16-aadA2和arr-3-dfrA27。5株嗜芳香环弧菌为多重耐药菌株,且多重耐药表型与耐药基因密切相关。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 嗜芳香环弧菌 耐药性 整合子
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黄颡鱼溶血性腹水病初探 预览
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作者 杨移斌 艾晓辉 +3 位作者 宋怿 董靖 胥宁 姜兰 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期1239-1248,共10页
从濒死黄颡鱼腹水中分离到一株细菌HS01,对分离株理化特性及DNA序列进行检测,根据理化特性、16S rRNA和gyrB基因序列比对,分离株HS01为嗜水气单胞菌。人工感染该菌后发病鱼出现与自然发病类似症状,并表现强毒力,对黄颡鱼的半致死剂量为2... 从濒死黄颡鱼腹水中分离到一株细菌HS01,对分离株理化特性及DNA序列进行检测,根据理化特性、16S rRNA和gyrB基因序列比对,分离株HS01为嗜水气单胞菌。人工感染该菌后发病鱼出现与自然发病类似症状,并表现强毒力,对黄颡鱼的半致死剂量为2.51×10^5 CFU·g^-1,且从病灶中分离到与感染菌一致菌株,因此确定嗜水气单胞菌是此次黄颡鱼溶血性腹水病的病原。分离株对头孢唑肟、头孢噻肟、奈替米星及氟苯尼考等10种抗生素高度敏感;对头孢拉定、链霉素、新霉素及卡那霉素等6种抗生素中度敏感;对阿莫西林、青霉素、妥布霉素及红霉素这4种抗生素耐药。本研究为黄颡鱼溶血性腹水病防控提供了理论依据。 展开更多
关键词 黄颡鱼 嗜水气单胞菌 分离鉴定 病理 高通量测序
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珠江中上游水环境状况分析与评价 预览
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作者 刘乾甫 杜浩 +2 位作者 赖子尼 帅方敏 郭霞 《中国渔业质量与标准》 2019年第4期36-47,共12页
为了解珠江中上游水环境现状、水体的污染状况和主要污染因素,本研究分别于2016年3月(平水期)、6月(丰水期)和9月(枯水前期)对广东省肇庆市以上的珠江中上游江段水体环境进行采样与测定,选取透明度(SD)、pH、溶解氧(DO)、非离子氨(NH 3... 为了解珠江中上游水环境现状、水体的污染状况和主要污染因素,本研究分别于2016年3月(平水期)、6月(丰水期)和9月(枯水前期)对广东省肇庆市以上的珠江中上游江段水体环境进行采样与测定,选取透明度(SD)、pH、溶解氧(DO)、非离子氨(NH 3)、氨氮(NH + 4-N)、硝酸盐氮(NO - 3-N)、亚硝酸盐氮(NO - 2-N)、总氮(TN)、总磷(TP)和叶绿素a (Chla)等10项指标,采用限定值、单项污染指数和综合污染指数法进行水质评价和污染因素分析。结果显示:水体污染主要为氮源污染,17个采样点的TN和NO - 3-N含量在3个采样期的超标率均在90%以上,最大超标倍数分别达到 2.72 倍(2016年9月,鲁布革)和2.13倍(2016年9月,八渡);水体中还存在NH 3、SD、TP和Chla等因子超标情况,前3者污染状况主要受珠江流域水情期影响,Chla主要于上游筑坝库区鲁布革站位平水期和枯水前期检出超标;水体磷污染主要以“点源污染”为主。基于水体综合污染指数 P j ,各采样点水体环境可分为3类:第I类,采样点水体流速快且远离居民区, P j 均值处于1~2之间,呈“轻污染”、“轻度超警戒水平”状况;第II类,采样点全年水体TN和NO - 3-N含量较高, P j 均值处于2~3之间,呈“中污染”等级、“中度超警戒水平”状况;第III类,包括石龙和藤县两个样点,3个时期 P j 变化较大,丰水期 P j 都大于3,呈“重污染”、“严重超警戒水平”状况,而在其他时期呈“轻-中污染”、“轻度-中度超警戒水平”状况。根据本研究结果,建议在降雨量较少时期,对于上游库区进行生态调控,增加水体的流动性,以减少“藻华”的发生;5~8月主要降雨期,要减少临河区域的林木砍伐、土地拓垦和田地施肥量及加强城镇生活垃圾的清理等,以防泥沙和营养物质等被带入河流,加重水体污染。本研究可为珠江中上游水体环境保护与管理提供数据支持。 展开更多
关键词 珠江中上游 水体环境 污染指数 水质评价 污染因素 总氮
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基于高通量测序的杂交鳢转录组数据分析 预览
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作者 黄勇 龚望宝 +1 位作者 陈海刚 孙西红 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期529-535,共7页
运用高通量技术对杂交鳢进行转录本测序和数据分析,经拼接与组装,最终获得52 065条unigenes,长度范围201~12 407 bp,序列平均长度为710 bp。从长度分布、GC含量和基因表达量等方面对unigenes进行评估,数据显示测序质量较好。进一步的数... 运用高通量技术对杂交鳢进行转录本测序和数据分析,经拼接与组装,最终获得52 065条unigenes,长度范围201~12 407 bp,序列平均长度为710 bp。从长度分布、GC含量和基因表达量等方面对unigenes进行评估,数据显示测序质量较好。进一步的数据分析,共鉴定出20 535个CDS,37 324个SNP位点和7 830个微卫星。用6大数据库Swiss–Prot、Nr、Pfam、KEGG、KOG和GO注释杂交鳢转录组unigenes,分别对应有20 955、28 938、19 339、14 052、19 358和18 635条unigenes获得注释。根据GO数据库的注释,可将这些unigenes分为生物过程、细胞组分和分子功能3大类共50亚类。KEGG代谢通路分析表明,这些unigenes参与了5大类30亚类共268个代谢通路,其中,参与信号转导通路的unigenes数量最多,有1 716条。 展开更多
关键词 杂交鳢 转录组 unigenes 基因注释
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基于CO I和Cyt b DNA条形码在鲌属鱼类物种鉴定中的应用 预览
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作者 王利华 罗相忠 +4 位作者 王丹 李伟 李忠 邹桂伟 梁宏伟 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第4期22-28,共7页
为探究线粒体CO I和Cyt b基因作为DNA条形码在鲌属鱼类鉴定中的可行性,分别扩增达氏鲌(Culter dabryi)、海南鲌(C.recurviceps)、尖头鲌(C.oxycephalus)、蒙古鲌(C.mongolicus)、拟尖头鲌(C.oxycephaloides)和翘嘴鲌(C.alburnus)六种鲌... 为探究线粒体CO I和Cyt b基因作为DNA条形码在鲌属鱼类鉴定中的可行性,分别扩增达氏鲌(Culter dabryi)、海南鲌(C.recurviceps)、尖头鲌(C.oxycephalus)、蒙古鲌(C.mongolicus)、拟尖头鲌(C.oxycephaloides)和翘嘴鲌(C.alburnus)六种鲌属鱼类线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(Cytochrome C oxidase subunit I,CO I)和细胞色素b(Cytochrome b,Cyt b)的基因片段,并对六种鲌属鱼类同源序列的碱基组成、种内与种间遗传距离以及系统进化分别进行分析。结果表明:长度为645 bp的CO I基因片段中,A、T、G、C4种碱基平均含量分别为25.65%、28.18%、18.33%和27.84%;长度为970 bp的Cyt b序列片段中,A、T、G、C碱基平均含量分别为27.97%、27.93%、14.53%和29.57%。基于CO I基因序列的种间平均遗传距离为3.54%,种内平均遗传距离为0.17%,种间遗传距离为种内遗传距离的20.82倍;基于Cyt b基因序列的种间平均遗传距离为5.92%,种内平均遗传距离为0.18%,种间遗传距离为种内遗传距离的32.89倍。基于CO I基因的系统进化关系显示除尖头鲌与拟尖头鲌外,其余4种鲌均形成独立分支,而基于Cyt b基因的系统发育关系显示六种鲌属均能独立形成分支,鲌属六种鱼能够进行有效区分,将CO I和Cyt b作为DNA条形码进行鲌属鱼类的物种鉴定是可行的,联合使用可以获得更好的鉴定效果。 展开更多
关键词 鲌属 COI CYTB 物种鉴定 系统进化
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大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗生产工艺条件的优化
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作者 孙承文 李杰 +4 位作者 赖迎迢 江小燕 莫照兰 黄志斌 陶家发 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期328-332,共5页
目的优化大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗的生产工艺条件。方法通过对大菱鲆鳗弧菌VAM003株培养基(TSB和LB)、培养基盐度(1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、3. 5%NaCl)、接种量(5%、10%、15%)、发酵时间(6~12 h)进行筛选,采用最适发酵条件制... 目的优化大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗的生产工艺条件。方法通过对大菱鲆鳗弧菌VAM003株培养基(TSB和LB)、培养基盐度(1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、3. 5%NaCl)、接种量(5%、10%、15%)、发酵时间(6~12 h)进行筛选,采用最适发酵条件制备大菱鲆鳗弧菌VAM003株发酵菌液,分别加入不同终浓度的甲醛(0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%)灭活24、48、72 h,确定最适灭活条件。采用最适生产工艺制备2批大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗,并进行安全性及效力试验。结果大菱鲆鳗弧菌VAM003株最适发酵培养条件为:用含2. 5%NaCl的TSB培养基,在接种量10%条件下发酵培养10~12 h,活菌量达5×109 CFU/m L以上;最适灭活条件为:甲醛终浓度0. 2%灭活24 h。大菱鲆注射灭活疫苗后,全部健活,未出现临床症状,摄食、游姿及体色均正常,注射部位无红肿,内脏器官无病变;疫苗的免疫保护率达90%以上。结论成功优化了大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗规模化生产工艺条件,制备的灭活疫苗具有良好的安全性及效力,可用于大菱鲆鳗弧菌病的预防。 展开更多
关键词 大菱鲆 鳗弧菌 灭活疫苗 安全性 效力
基于RNA-Seq高通量测序技术的大口黑鲈转录组分析 预览
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作者 黄勇 龚望宝 +2 位作者 陈海刚 熊建利 孙西红 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期106-112,共7页
文章以大口黑鲈(Micropterus salmoides)组织作为研究对象,利用 RNA-seq技术进行转录本测序和数据分析,经拼接组装,最终获得 35659条 unigenes,序列平均长度 738bp,序列长度中位数(N50)为1052bp。另外从长度分布与 GC含量等方面对 unige... 文章以大口黑鲈(Micropterus salmoides)组织作为研究对象,利用 RNA-seq技术进行转录本测序和数据分析,经拼接组装,最终获得 35659条 unigenes,序列平均长度 738bp,序列长度中位数(N50)为1052bp。另外从长度分布与 GC含量等方面对 unigenes进行评估,数据显示测序质量好、可信度高。使用 6大数据库(KOG、Nr、Pfam、Swiss-Prot、GO和KEGG)注释大口黑鲈转录组unigenes,分别对应有15832、21279、14524、16973、15024和 11185条 unigenes获得注释。其中,5617条 unigenes在以上所有数据库中同时注释成功,17253条unigenes至少被一个数据库注释。KEGG分析结果显示,获得注释的 11185条 unigenes被划分到 267个代谢通路中,参与信号转导通路的 unigenes数量最多,共有 1349条(12.06%)。另外还检测到 4030个微卫星(SSR)位点。通过对大口黑鲈转录组测序,获得了大量的转录组信息,为大口黑鲈的功能基因克隆、基因组学、遗传多样性分析、分子标记开发及遗传改良等研究奠定了基础. 展开更多
关键词 大口黑鲈 转录组 unigenes 基因注释
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两株草鱼源维氏气单胞菌菌株的主要表型特征及致病力比较 预览
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作者 任燕 高彩霞 +6 位作者 曾伟伟 王庆 王英英 李莹莹 尹纪元 常藕琴 石存斌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期145-150,共6页
维氏气单胞菌(A.veronii)是严重危害草鱼的一种病原。本研究从电镜观察、Biolog微生物自动分析仪鉴定、细菌游动能力、胞外产物活性、细胞黏附性、对草鱼致病力和毒力基因等方面,比较草鱼源A.veronii菌株GZ09007和FS12001的表型特征和... 维氏气单胞菌(A.veronii)是严重危害草鱼的一种病原。本研究从电镜观察、Biolog微生物自动分析仪鉴定、细菌游动能力、胞外产物活性、细胞黏附性、对草鱼致病力和毒力基因等方面,比较草鱼源A.veronii菌株GZ09007和FS12001的表型特征和致病性差异。结果显示,两株细菌菌体均呈短杆状或弧形、两端钝圆,在透射电镜下可见单鞭毛。Biolog微生物自动分析仪鉴定结果显示菌株均为A.veronii,两株细菌均具有游动能力,胞外产物具有溶血活性、溶蛋白活性和脂肪酶活性,但GZ09007的游动能力、溶血活性、蛋白酶活性均显著强于FS12001 (p<0.05)。GZ09007对EPC、CIK细胞黏附性弱,FS12001的细胞黏附性强,两株细菌的细胞黏附性差异显著(p<0.05)。菌株GZ09007具有aerA、act、lip、ser、exu、fla毒力基因,但未检测到ast、alt、gcaT、ahyB等毒力基因;菌株FS12001具有aerA、act、alt、ast、lip、ser、ahyB、exu毒力基因,但未检测到gcaT、fla毒力基因。两株细菌均可以造成草鱼发病死亡,GZ09007对草鱼的LD50为5.6×106cfu,而FS12001的LD50则高于1.5×108cfu。表明GZ09007为强毒株,FS12001为弱毒株。推测A.veronii胞外产物的溶血活性和溶蛋白活性在其感染和致死草鱼过程中起到了关键作用。本研究结果为进一步探究A.veronii菌株的致病机理提供依据。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 毒力 表型 致病性
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舒伯特气单胞菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 预览
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作者 刘礼辉 胡蕾 +6 位作者 杨圆圆 方伟 林强 付小哲 梁红茹 赵永亮 李宁求 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第8期17-24,共8页
【目的】建立一种快速、灵敏的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)检测方法。【方法】以舒伯特气单胞菌rpoD(RNA polymerase sigma-70 factor)为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立舒伯特气单胞菌的TagMan实时荧光定量PCR检... 【目的】建立一种快速、灵敏的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)检测方法。【方法】以舒伯特气单胞菌rpoD(RNA polymerase sigma-70 factor)为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立舒伯特气单胞菌的TagMan实时荧光定量PCR检测方法,同时验证该方法的特异性、灵敏度、重复性,并用该方法对50份临床样品进行检测,验证其应用效果。【结果】含舒伯特气单胞菌rpoD基因的质粒拷贝数与循环阈值(Ct)的标准曲线相关系数为1.000,扩增效率为94.705%。实时荧光定量PCR检测方法只对舒伯特气单胞菌的靶基因检测结果呈阳性,对嗜水气单胞菌(Aeromanas hydrophila)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、诺卡氏菌(Nocardia seriolae)等其他14种致病菌的检测结果均为阴性,具有高度特异性;对舒伯特气单胞菌重组质粒和纯培养细菌的检出灵敏度分别为4.76拷贝/μL和15 CFU/mL;批内和批间重复性试验变异系数分别为0.95%和1.05%。50份临床样品检测结果显示,该方法阳性样品检出率为22%,高于传统细菌分离方法(10%)的检出率。【结论】建立的舒伯特气单胞菌实时荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适用于舒伯特气单胞菌的快速诊断检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 舒伯特气单胞菌 rpoD基因 实时荧光定量PCR
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罗非鱼源无乳链球菌肠道拮抗芽孢杆菌的筛选及其生物学特性 被引量:2
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作者 高艳侠 张德锋 +5 位作者 可小丽 刘志刚 衣萌萌 王淼 韩雪晴 卢迈新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期926-938,共13页
【目的】从健康尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)肠道中筛选一株对罗非鱼源无乳链球菌等病原菌具有拮抗功能的益生菌。【方法】取健康尼罗罗非鱼肠道,匀浆后进行10倍系列梯度稀释,然后涂布BHI平板,培养1–2d,挑取单克隆菌落。采用点... 【目的】从健康尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)肠道中筛选一株对罗非鱼源无乳链球菌等病原菌具有拮抗功能的益生菌。【方法】取健康尼罗罗非鱼肠道,匀浆后进行10倍系列梯度稀释,然后涂布BHI平板,培养1–2d,挑取单克隆菌落。采用点种法初步筛选对罗非鱼源无乳链球菌有拮抗作用的菌株,选取其中一株拮抗效果较好的菌株LF01,通过形态学、生理生化特征以及分子生物学分析,对LF01菌株进行鉴定。然后对LF01菌株的生长特性、水解淀粉和酪蛋白能力、药物敏感特性、抗菌谱和生物安全性进行测定和分析。【结果】根据菌落形态和生长时间的差异,从健康尼罗罗非鱼肠道中筛选出64株细菌,通过拮抗试验筛选出6株具有明显拮抗效果的菌株,其中LF01菌株的拮抗效果最好。根据LF01的形态、生理生化特征和gyr A基因的进化分析,确定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。LF01菌株的最适生长温度为30°C,最适p H值为7,最适盐度为5‰,而且该菌株具有水解淀粉和酪蛋白的功能。药敏试验结果显示,LF01菌株对多数抗生素敏感,仅对杆菌肽耐药。拮抗试验结果显示LF01株对无乳链球菌、海豚链球菌、迟缓爱德华氏菌、鮰爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、舒氏气单胞菌、维氏气单胞菌、简氏气单胞菌、鰤鱼诺卡氏菌等病原菌均具有拮抗作用,其中对鰤鱼诺卡氏菌的拮抗作用最强,平均抑菌圈直径达28.3 mm。生物安全试验表明,LF01菌株对尼罗罗非鱼、斑马鱼(Danio rerio)和乌鳢(Channa argus)等3种鱼均无致病性,具有良好的安全性。【结论】本研究筛选了一株贝莱斯芽孢杆菌LF01株,该菌的生物安全性良好,而且可拮抗常见的水产病原菌,具有防控多种水产经济动物疾病的潜力,应用前景十分广阔。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌 无乳链球菌 点种法 抑菌 药敏试验
驯食配合饲料的大口黑鲈3个选育世代的遗传多样性分析 预览
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作者 樊佳佳 白俊杰 +2 位作者 李胜杰 马冬梅 姜鹏 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2019年第4期57-64,共8页
为了检测驯食配合饲料的大口黑鲈(Micropterus salmoides) 3个选育世代群体遗传多样性水平变化,利用微卫星标记技术对驯食配合饲料大口黑鲈选育基础群体(Sp0)和第二、三和四代选育群体(Sp2、Sp3和Sp4)共240尾样品进行检测。结果显示,18... 为了检测驯食配合饲料的大口黑鲈(Micropterus salmoides) 3个选育世代群体遗传多样性水平变化,利用微卫星标记技术对驯食配合饲料大口黑鲈选育基础群体(Sp0)和第二、三和四代选育群体(Sp2、Sp3和Sp4)共240尾样品进行检测。结果显示,18个微卫星位点共获得44个等位基因。Sp0、Sp2、Sp3和Sp4的平均观测杂合度(Ho)分别为0.4895、0.4802、0.4579和0.4206,平均期望杂合度(He)分别为0.4615、0.4454、0.4621和0.3916,平均多态信息含量(PIC)分别为0.3791、0.3659、0.3764和0.3257。4个群体间的配对比较群体间遗传分化指数(Fst)值在0.01612~0.16162之间、遗传距离(Da)在0.0249~0.1434之间。遗传变异来源(AMOVA)分析显示,只有8.38%的变异来自于群体间,其余遗传变异均来自于个体间。研究表明,经连续多代选育之后,易驯食配合饲料的快长大口黑鲈选育群体具有中度遗传多样性,具备选育潜力,可继续进行选育。 展开更多
关键词 大口黑鲈 配合饲料 选育群体 微卫星 遗传多样性
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泰国渔业发展状况及中泰渔业合作潜力探讨 预览
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作者 宿鑫 蔡晓丹 +4 位作者 马卓君 林明辉 张丹丹 颜曦 魏泰莉 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第1期107-112,共6页
渔业合作是我国构建“一带一路”的战略举措,泰国是连通“一带”和“一路”的交汇点,在我国与东盟合作中有着重要的战略支点作用。泰国渔业产业格局由最初的以海洋捕捞业为主逐渐发展为水产养殖与捕捞并驾齐驱的态势。其国内渔业和水产... 渔业合作是我国构建“一带一路”的战略举措,泰国是连通“一带”和“一路”的交汇点,在我国与东盟合作中有着重要的战略支点作用。泰国渔业产业格局由最初的以海洋捕捞业为主逐渐发展为水产养殖与捕捞并驾齐驱的态势。其国内渔业和水产养殖由渔业局(DOF)负责管理,渔业科技水平较高,渔业技术服务推广体系较为完善。现行渔业管理体制包括《渔业法案》和危害分析与关键控制点(HACCP)检验项目,对虾养殖须遵守《优质对虾生产行为守则》(CoC)及《良好水产养殖操作行为守则》(GAP)。根据中泰渔业发展趋势及发展需求,提出加强政府部门顶层设计、构建“项目-人才-平台-基地”科技合作模式及人才支撑体系及构建中泰渔业科技合作项目等建议,旨在为中泰渔业合作政策制定提供参考依据。 展开更多
关键词 泰国 渔业 水产养殖 合作
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中华鳖GHSR基因SNPs的筛选及生长性状的关联分析
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作者 李纯 陈辰 +3 位作者 赵建 洪孝友 李伟 朱新平 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期14-18,共5页
为探究GHSR基因多态性对中华鳖(Pelodiscus sinensis)生长相关性状的影响,采用直接测序法在GHSR基因5’侧翼和3’侧翼上筛选SNPs位点,共检测到5个单核苷酸多态性位点:A335T、G397T、A527G、A13482C和T13526A。随机选取同批繁殖的1冬龄20... 为探究GHSR基因多态性对中华鳖(Pelodiscus sinensis)生长相关性状的影响,采用直接测序法在GHSR基因5’侧翼和3’侧翼上筛选SNPs位点,共检测到5个单核苷酸多态性位点:A335T、G397T、A527G、A13482C和T13526A。随机选取同批繁殖的1冬龄200只中华鳖用直接测序法进行SNPs位点的分型,并分析与生长性状的相关性。检测结果显示,所有SNP位点均符合Hardy-Weinberg平衡状态(p>0.05)。方差分析显示,A336T位点的AT、TT基因型的体重、背甲长、背甲宽和裙边宽4项生长数据均显著高于AA基因型。A13482C位点的AC基因型的体重、背甲长、背甲宽和裙边宽4项数据均显著高于AA基因型(p<0.05)。研究表明,本实验在GHSR基因上获得的这些SNP位点可能影响着中华鳖的生长性状或与之紧密连锁,可为中华鳖分子辅助育种提供助力与参考。 展开更多
关键词 中华鳖 GHSR SNP 生长相关
尼罗罗非鱼TRAF4基因的克隆、表达及功能分析
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作者 韩雪晴 高风英 +5 位作者 卢迈新 刘志刚 曹建萌 王淼 衣萌萌 张德锋 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期381-392,共12页
肿瘤坏死因子受体相关因子4 (tumor necrosis factor receptor associated factors 4, TRAF4)是TRAFs家族中比较特殊的一员,生物学功能较多且较复杂。为了明确TRAF4基因在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫过程中的作用,本研究首... 肿瘤坏死因子受体相关因子4 (tumor necrosis factor receptor associated factors 4, TRAF4)是TRAFs家族中比较特殊的一员,生物学功能较多且较复杂。为了明确TRAF4基因在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫过程中的作用,本研究首先通过反转录PCR和分段扩增获得尼罗罗非鱼TRAF4基因c DNA (GenBank No. MH986338)及基因组序列,并进行基因和蛋白质结构等生物信息学分析;然后利用qRT-PCR技术检测该基因在健康个体中的组织表达、受精后不同发育阶段的表达以及人工感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)后的表达特征;最后构建重组真核表达载体,分析TRAF4在人胚肾细胞293T中的亚细胞定位及其在Nuclear factorκB (NF-κB)通路中的作用。结果显示,TRAF4基因的cDNA序列为4 483 bp,开放阅读框为1 413 bp,可编码470个氨基酸。基因组序列分析发现,TRAF4基因含7个外显子和6个内含子。氨基酸序列分析发现,TRAF4存在1个环指(RING-finger)结构域、3个TRAF类型的锌指(zinc-finger)结构域、1个甲基多巴和TRAF同源物(meprin and TRAF-homology, MATH)结构域。组织分析表明,TRAF4基因在所检测的11个组织/器官中均有表达,脑中表达最高,脾中表达最低;该基因在受精后不同发育阶段均有表达。人工感染无乳链球菌后,尼罗罗非鱼TRAF4基因在肠、鳃、脾、肾和血液中的表达量均发生不同程度的变化,在鳃和血液中显著升高,在肠和肾中的表达量均低于对照组(0 h组)。亚细胞定位和双荧光素酶报告分析显示,TRAF4在293T细胞中主要定位于细胞质,可增强NF-κB活性。综上所述,TRAF4基因在尼罗罗非鱼的免疫应答中发挥重要作用,本研究为深入探讨TRAF4基因在罗非鱼抗感染免疫中的作用机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子4基因(TRAF4) 尼罗罗非鱼 基因表达 转染
不同密度生态基系统内细菌群落组成与草鱼生长的关系 预览
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作者 张军旺 王广军 +5 位作者 谢骏 王金林 郁二蒙 余德光 李志斐 张凯 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期988-996,共9页
为了研究生态基系统中细菌群落组成与草鱼生长的关系,实验按生态基表面积占养殖水体表面积的比值50%、100%、150%(S-50、S-100、S-150),设置3个不同密度的生态基养殖系统。首先测量处理组和对照组的草鱼生长性状,进而利用高通量测序技... 为了研究生态基系统中细菌群落组成与草鱼生长的关系,实验按生态基表面积占养殖水体表面积的比值50%、100%、150%(S-50、S-100、S-150),设置3个不同密度的生态基养殖系统。首先测量处理组和对照组的草鱼生长性状,进而利用高通量测序技术分析水体中和生态基上的细菌群落组成,探索生态基系统内细菌群落与草鱼生长的关系。结果显示,S-100和S-150组的草鱼增重率与特定生长率均显著高于S-50和对照组;S-100组的存活率显著高于其他组;S-100和S-150组的饲料转换率均显著低于对照组。细菌群落分析发现:①与水体相比,生态基上γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)比例增加,且该菌在S-100组中显著高于其他组;②水体中细菌主要以黄杆菌属(Flavobacterium)、红细菌属(Rhodobacte)、鲸杆菌属(Cetobacterium)和浮霉状菌属(Planctomyces)为主,生态基上不动杆菌属(Acinetobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)和金黄杆菌属(Chryseobacterium)占较高比例,并且后3种细菌在S-100组中比例显著高于其他组;③在可鉴定的种水平上,生态基上的细菌主要以产碱假单胞菌(P.alcaligene)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereu)为主,其中产碱假单胞菌在S-100和S-150组最高。综合草鱼生长性状、细菌群落组成及生态基生产成本分析发现,生态基比表面积为100%时效果最佳,即细菌多样性和潜在益生菌比例高,饵料系数最低,草鱼的存活率和增重率最高。 展开更多
关键词 草鱼 生态基 细菌群落组成 有益菌
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一株异养硝化巨大芽胞杆菌的分离鉴定及其脱氮性能研究
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作者 李忠徽 王淼 +3 位作者 衣萌萌 王瑞宁 陈文伟 卢迈新 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1331-1340,共10页
生物法脱氮处理养殖废水是目前最经济有效的方法之一。硝化菌在生物法脱氮过程中起着重要作用。为筛选具有高效脱氮能力的异养硝化细菌,本研究通过富集培养及平板分离纯化,从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)循环水养殖车间用水中筛选... 生物法脱氮处理养殖废水是目前最经济有效的方法之一。硝化菌在生物法脱氮过程中起着重要作用。为筛选具有高效脱氮能力的异养硝化细菌,本研究通过富集培养及平板分离纯化,从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)循环水养殖车间用水中筛选出1株异养硝化细菌P5-2。通过对其进行形态观察、生理生化反应鉴定及16S r RNA基因序列分析,确定该菌株为巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)。革兰氏染色结果表明该菌株为革兰氏阳性菌;胞外酶性能测定表明该菌株可以有效利用淀粉及酪蛋白;生长特性研究结果表明,当培养温度为30℃、盐度为10‰、pH为7时菌株生长最快,最先进入指数生长期及稳定期。硝化特性实验结果显示,碳源、碳氮比、溶氧量等环境因素均可以影响菌株对氨氮的去除效果;当以柠檬酸钠为碳源、碳氮比为15、pH为7、转速为180 r/min时菌株去除氨氮的效果最佳,24 h的氨氮去除率达99.07%。本研究筛选获得1株高效异养硝化细菌P5-2,并进行了硝化性能研究,为其在处理养殖废水的实际应用提供了基础资料。 展开更多
关键词 异养硝化 芽胞杆菌 氨氮 硝化作用
杂交鳢舒伯特气单胞菌弱毒疫苗候选株筛选及其免疫效果评价 预览
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作者 胡蕾 刘礼辉 +6 位作者 杨圆圆 方伟 林强 付小哲 梁红茹 刘山桂 李宁求 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第5期74-79,共6页
为获得一种安全、高效的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候选株,通过鱼体攻毒实验筛选天然弱毒株,用筛选的弱毒株制备弱毒疫苗,对杂交鳢进行免疫后,采用荧光定量RT-PCR方法评价免疫相关基因表达情况,同时采用强毒株攻毒... 为获得一种安全、高效的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候选株,通过鱼体攻毒实验筛选天然弱毒株,用筛选的弱毒株制备弱毒疫苗,对杂交鳢进行免疫后,采用荧光定量RT-PCR方法评价免疫相关基因表达情况,同时采用强毒株攻毒免疫的杂交鳢测定相对免疫保护率(relative percentage survival,RPS),综合评价弱毒株作为活疫苗侯选株的潜力。结果显示:筛选到一株舒伯特气单胞菌天然弱毒株OM170701,其对靶动物杂交鳢与非靶动物大口黑鲈均无明显致病性;该弱毒疫苗候选株能诱导杂交鳢肝脏中IL-8、IL-1β、补体C3表达量上调,免疫后72 h相对表达量达到最高,分别是对照组的相对表达量的4.95倍、5.57倍、3.94倍;免疫组IgM的相对表达量显著高于对照组,其中第28天时免疫组IgM相对表达量是对照组的17.26倍;攻毒后免疫组成活率显著高于对照组,其RPS为65%。结果表明,该弱毒株通过注射免疫能引发杂交鳢非特异性和特异性免疫应答,并提供良好的免疫保护。 展开更多
关键词 杂交鳢 舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii) 弱毒疫苗 免疫基因 相对免疫保护率
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