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GIS技术在国境口岸卫生检疫工作中的应用前景探索 预览
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作者 韩鹏宇 毕秀欣 陈津津 《口岸卫生控制》 2019年第1期3-5,9共4页
近年来,世界范围内不断爆发新的传染病疫情,地域政治经济差异、气候变化、战争、恐怖主义日渐成为影响传染病扩散传播的重要因素。地理信息系统(Geographic Information Systems,以下简称GIS)具有强大的统计分析、地图分析和数学模型分... 近年来,世界范围内不断爆发新的传染病疫情,地域政治经济差异、气候变化、战争、恐怖主义日渐成为影响传染病扩散传播的重要因素。地理信息系统(Geographic Information Systems,以下简称GIS)具有强大的统计分析、地图分析和数学模型分析功能,可以综合分析地理、人文、气候等多方面因素对传染病流行的影响,为口岸疫情风险评估提供科学依据。本文结合海关卫生检疫业务,综合探讨GIS在口岸传染病风险预警、媒介生物监测、突发公共卫生事件处置等方面的应用前景。 展开更多
关键词 地理信息系统 口岸 卫生检疫
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γ射线终末辐照对同种异体肌腱病毒灭活效果及生物力学性能影响的研究
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作者 赵彦涛 刘思扬 +5 位作者 尹惠琼 白玉龙 韩丽伟 胡先同 朱加亮 衷鸿宾 《中国骨与关节杂志》 CAS 2018年第5期389-393,共5页
目的研究γ射线终末辐照灭菌对同种异体肌腱病毒灭活的效果及对肌腱生物力学性能的影响。方法采用细胞培养法,检测γ射线辐照(照射剂量25 kGy)灭活PRV、VSV、PPV、EMCV、HIV-1病毒的效果。取正常供体手部肌腱12根,直径4~5 mm,随机分... 目的研究γ射线终末辐照灭菌对同种异体肌腱病毒灭活的效果及对肌腱生物力学性能的影响。方法采用细胞培养法,检测γ射线辐照(照射剂量25 kGy)灭活PRV、VSV、PPV、EMCV、HIV-1病毒的效果。取正常供体手部肌腱12根,直径4~5 mm,随机分为实验组(辐照组)和对照组(新鲜不处理),进行病毒滴度检测,MTS力学试验机检测两组极限拉伸载荷。结果经过γ射线辐照可使污染在同种异体肌腱上的病毒滴度下降超过4 Log值,且盲传3代无病毒检出。辐照前后,同种异体肌腱极限拉伸载荷和组织结构差异无统计学意义(P〉0.05)。结论终末辐照灭菌(照射剂量25 kGy)是同种异体肌腱病毒灭活的有效方法,可避免引入其它化学试剂,且该工艺不会影响肌腱的极限拉伸载荷和组织结构。 展开更多
关键词 同种异体移植物 病毒灭活 灭菌 生物力学现象
大肠杆菌hfq和rne-710基因的双质粒无痕敲除技术
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作者 王净 吕瑞辰 +1 位作者 韩延平 杨瑞馥 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期602-612,共11页
基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段。以大肠杆菌K-12 MG1655基因组hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δrne-710∷Spe菌株,通过融合PCR方法分别构建缺失hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)的融... 基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段。以大肠杆菌K-12 MG1655基因组hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δrne-710∷Spe菌株,通过融合PCR方法分别构建缺失hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)的融合片段并连接至辅助质粒,缺失hfq和rne-710的片段经重组分别替换壮观霉素抗性盒,得到无痕敲除株Δhfq和Δrne-710。双质粒无痕敲除和融合PCR方法相结合为大片段基因缺失开辟了新的途径。 展开更多
关键词 大肠杆菌 HFQ rne-710 双质粒无痕敲除 融合PCR Ⅰ-Sce Ⅰ内切酶
宋内志贺氏菌1173质粒基因组及耐药基因转移机制 被引量:1
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作者 张德福 赵禹宗 +7 位作者 刘东 冯娇 张明 曲道峰 周冬生 励建荣 殷喆 王丽 《微生物学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期467-475,共9页
【目的】研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla_(CTX-M-64)转移的机制。【方法】用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移实验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其... 【目的】研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla_(CTX-M-64)转移的机制。【方法】用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移实验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其他细菌,并对接合子是否产ESBL和携带耐药基因进行检验,利用VITEK~?2检测1173和接合子的耐药谱,提取质粒进行高通量基因组测序,并对质粒序列进行生物信息学分析,以研究其耐药基因转移机制。【结果】1173是产ESBL的多药耐药宋内志贺氏菌,携带的耐药基因有bla _(CTX-M-64)和bla _(TEM),其中的bla _(CTX-M-64)可通过接合转移作用传递给受体菌EC600,并使接合子具有相应的耐药谱。经序列测定和生物信息学分析表明,介导bla _(CTX-M-64)水平转移的是ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元。【结论】质粒携带的bla_(CTX-M-64)介导1173对多类抗菌药物的耐药,ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元介导bla_(CTX-M-64)在细菌间的转移。 展开更多
关键词 宋内志贺氏菌 质粒 多药耐药 转座单元 移动元件 blaCTX-M-64
呼吸道防护装备佩戴密合度测定仪的研制 预览
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作者 李劲松 张柯 +5 位作者 何春雷 胡凌飞 王桐 张友禄 王洁 李娜 《中国医学装备》 2018年第9期1-4,共4页
目的:根据呼吸道防护装备佩戴的要求,研制可对多种呼吸道防护装备与佩戴者面部密合度进行测试的密合度测定仪。方法:人员呼吸道防护装备佩戴密合度测定仪的硬件采用粒子生长技术和激光粒子计数技术,建立微气压传感技术,设计仪器的机械... 目的:根据呼吸道防护装备佩戴的要求,研制可对多种呼吸道防护装备与佩戴者面部密合度进行测试的密合度测定仪。方法:人员呼吸道防护装备佩戴密合度测定仪的硬件采用粒子生长技术和激光粒子计数技术,建立微气压传感技术,设计仪器的机械结构和控制系统结构;利用所研制的ZR-1220呼吸器密合度测定仪,测试300人次的防护口罩密合度,分析口罩的型号、佩戴方式、佩戴后人的面部表情及动作对口罩防护能力的影响。结果:经实验测试,该仪器设置的8个测试参数,即正常呼吸→深呼吸→左右摇头→上下摆头→朗读→做鬼脸→弯腰摸脚趾→正常呼吸,均满足密合度测试要求,且操作简便,系统界面友好。密合度测试软件针对人员在不同面部动作和面型下防护装备佩戴密合度的算法,解决检测信号与实际数值的对应关系,建立人机交互界面。结论:密合度测定仪性能达到国外同类仪器的性能指标,可以用作评价呼吸道防护装备面型密合度的测试仪器。 展开更多
关键词 呼吸道 防护装备 密合度 设计原理 粒子
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细菌全基因组关联研究的方法与应用 预览
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作者 杨超 杨瑞馥 +1 位作者 崔玉军 包其郁 《遗传》 CSCD 北大核心 2018年第1期57-65,共9页
随着测序技术的发展和全基因组序列的不断积累,全基因组关联研究(genome-wideassociationstudy,GWAS)在人类复杂疾病研究中取得了丰硕成果,10余年间发现了数以万计的疾病风险因子。同样,GWAS也为探索细菌表型的遗传机制提供了新的工具。... 随着测序技术的发展和全基因组序列的不断积累,全基因组关联研究(genome-wideassociationstudy,GWAS)在人类复杂疾病研究中取得了丰硕成果,10余年间发现了数以万计的疾病风险因子。同样,GWAS也为探索细菌表型的遗传机制提供了新的工具。自2013年第一项细菌GWAS(bacterialGWAS,BGWAS)工作发表以来,目前已有10多项相关研究报道,分别揭示了细菌宿主适应性、耐药性及毒力等表型的遗传机制,极大加深了人们对细菌遗传、进化及传播等方面的认识。本文对目前BGWAS的研究方法、应用成果及存在的问题进行了总结,并对BGWAS的研究前景进行了展望,旨在为微生物学领域开展BGWAS研究提供参考。 展开更多
关键词 全基因组关联研究 细菌 全基因组测序 表型 遗传机制
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新疆维吾尔自治区毛蠓属一新种及一新纪录种(双翅目:蠓科)
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作者 马合木提 张建 +3 位作者 郜振国 张晓兵 张松 虞以新 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第1期76-77,共2页
该文报道在新疆维吾尔自治区达坂城采获的新种双钩毛蠓(Dasyhelea biungula Ma et Yu,sp.nov.)和我国毛蠓新纪录种奥尔毛蠓(Dasyhelea auli Remm,1962),对其形态特征进行了描述。标本均保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学... 该文报道在新疆维吾尔自治区达坂城采获的新种双钩毛蠓(Dasyhelea biungula Ma et Yu,sp.nov.)和我国毛蠓新纪录种奥尔毛蠓(Dasyhelea auli Remm,1962),对其形态特征进行了描述。标本均保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。 展开更多
关键词 蠓科 毛蠓属 新种 新纪录
肺炎衣原体及肺炎支原体临床血清学检测试剂的研发及应用 预览
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作者 王菲 李岩伟 +5 位作者 黄小兰 韩雪莲 贾楠 崔小岱 端青 张宝元 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第5期616-619,共4页
目的 通过实验获得工程重组肺炎支原体和肺炎衣原体的抗原,探讨其临床诊断价值;分析儿童肺炎支原体和肺炎衣原体的发病情况。方法 采集医院收治的社区获得性肺炎患儿的血标本进行肺炎支原体和肺炎衣原体检测,并通过PCR方法得到肺炎衣原... 目的 通过实验获得工程重组肺炎支原体和肺炎衣原体的抗原,探讨其临床诊断价值;分析儿童肺炎支原体和肺炎衣原体的发病情况。方法 采集医院收治的社区获得性肺炎患儿的血标本进行肺炎支原体和肺炎衣原体检测,并通过PCR方法得到肺炎衣原体的特异性抗原Cpn-MOMP和Cpn-CPAF和肺炎支原体P1-C和P1-B基因片段,应用工程重组抗原进行肺炎衣原体抗原特异性及灵敏度检测和肺炎支原体的灵敏度实验。结果 肺炎支原体及肺炎衣原体感染的阳性率随着年龄的增长而增加,肺炎衣原体冬季发病率较高。PCR方法可以得到完整的Cpn-MOMP和Cpn-CPAF基因片段,且Cpn-MOMP重组抗原产量高特异性较好。重组肺炎支原体P1-C和P1-B抗原产量较满意。结论 肺炎支原体及肺炎衣原体感染阳性率逐年升高,通过重组的Cpn-MOMP和Cpn-CPAF抗原可用于肺炎衣原体感染的血清学检测,具有临床应用前景。 展开更多
关键词 社区获得性肺炎 肺炎衣原体 肺炎支原体 儿童
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2013~2014年山东省4株柯萨奇B4型分离株遗传分析
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作者 王敏 韦庆娟 +6 位作者 李娟 江新泉 张振杰 童贻刚 丁淑军 王显军 史卫峰 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期22-29,共8页
尽管柯萨奇病毒B4(Coxsackievirus B4,CVB4)分离率不高,但是在我国引起儿童脑炎的病例屡屡报道。目前人们对CVB4基因组的遗传变异了解并不多,GenBank公共数据库仅仅存储有20几个CVB4全基因组序列,分离自我国的CVB4基因组序列不足10条... 尽管柯萨奇病毒B4(Coxsackievirus B4,CVB4)分离率不高,但是在我国引起儿童脑炎的病例屡屡报道。目前人们对CVB4基因组的遗传变异了解并不多,GenBank公共数据库仅仅存储有20几个CVB4全基因组序列,分离自我国的CVB4基因组序列不足10条。本研究对2013~2014年山东省分离的4株CVB4阳性样本进行高通量测序,测得其全基因组序列,利用Mega 5.1对CVB4型毒株全基因组及VP1片段进行系统发生及同源性分析,用RDP3和SimPlot 3.5.1软件进行基因重组分析。结果显示这4株病毒为柯萨奇病毒B4(Coxsackievirus B4,CVB4)型,全基因组序列长度分别为7 372bp、7 389bp、7 389bp和7 391bp,核苷酸同源性为97.1%~99.9%,氨基酸同源性为98.5%~99.9%。与2013年温州CVB4分离株CVB4/P11/2013/China(GenBank登录号:KP289433)分离株同源性最高,核苷酸及氨基酸同源性分别为97.1%~98.3%和98.6%~99.4%。对VP1基因进行系统发育树分析表明,VP1基因可划分成5个基因型,基因型内部序列距离小于15%,而基因型间距离均大于15%。另外,4株CVB4分离株VP1的进化关系较近,同近年来国内其他分离株单成一簇,属于基因型V分支。经RDP3和SimPlot 3.5.1软件分析发现,这四个CVB4分离株均发生了基因重组,分离株SDJN/CHN/2013可能发生了两次基因重组。综上,这4个CVB4分离株基因组高度相似,均位于基因型V分支,且基因组发生了基因重组。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒B4型(CVB4) 系统发育分析 VP1 基因重组
2014年山东省1株柯萨奇病毒B5分离株全基因序列分析
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作者 王敏 韦庆娟 +6 位作者 李娟 江新泉 张振杰 童贻刚 丁淑军 王显军 史卫峰 《中华预防医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期185-187,共3页
肠道病毒属于小RNA病毒科(picornaviridae)、肠道病毒属(enterovirus,EV)。基于肠道病毒衣壳蛋白VP1序列,将人EV分为4个组:HEV-A、HEV-B、HEV-C和HEV-D,其中HEV-B包括所有的ECHO病毒、柯萨奇病毒(coxsackievirus, CV)B组(CV... 肠道病毒属于小RNA病毒科(picornaviridae)、肠道病毒属(enterovirus,EV)。基于肠道病毒衣壳蛋白VP1序列,将人EV分为4个组:HEV-A、HEV-B、HEV-C和HEV-D,其中HEV-B包括所有的ECHO病毒、柯萨奇病毒(coxsackievirus, CV)B组(CVB)、CVA9、EV69以及近几年发现的一些新型别。目前,柯萨奇病毒B组有B1~B6血清型。 展开更多
关键词 手足口病 序列分析 柯萨奇B组5型病毒 全基因组 VP1基因
基于FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法 预览
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作者 罗森 丁朋晓 +2 位作者 李涛 王琴 王慧 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第5期739-745,共7页
目的利用FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法。方法构建针对破伤风毒素和B型肉毒毒素的双荧光标记底物的重组表达质粒,表达并纯化荧光标记底物重组蛋白;利用A型肉毒毒素轻链(ALc),B型肉毒毒素轻链(BL... 目的利用FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法。方法构建针对破伤风毒素和B型肉毒毒素的双荧光标记底物的重组表达质粒,表达并纯化荧光标记底物重组蛋白;利用A型肉毒毒素轻链(ALc),B型肉毒毒素轻链(BLc)和破伤风毒素轻链(TLc)分别对目的蛋白进行酶切反应。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件进行优化。酶动力学参数分别测定TLc和BLc切割底物荧光标记底物的Km和Kcat值。结果设计并成功构建荧光标记底物的重组表达质粒。表达并纯化后获得纯度为90%左右的重组蛋白,命名为CYVAMP。利用ALc、BLc和TLc分别对CYVAMP进行酶切,CYVAMP能被BLc和TLc识别切割而不能被ALc切割。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件优化得到:CYVAMP较适宜的范围为0.2~32μmol/L,酶标仪滤光片灵敏度设定的较合适的设置范围在65~110;(对于96孔板)动态实时检测间隔时间2 min较为合适,检测持续时间从30 min到120 min较合适。CYVAMP在内肽酶BLc作用下随反应时间变化与荧光值528与485比值作图最大时在1.5左右,最小在0.5左右。酶动力学参数测定得到BLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(17.6±2.6)μmol/L和(4.16±0.28)s^-1。TLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(40.8±3.5)μmol/L和(2.65±0.32)s^-1。结论成功构建基于FRET技术的分析法能满足对破伤风毒素和B型肉毒毒素的检测及抑制剂的高通量体外筛选所需。 展开更多
关键词 FRET 肉毒毒素 破伤风毒素 高通量筛选
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两质粒系统重配甲型HIN1流感病毒株的研究 被引量:1
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作者 周珊珊 杨晓岚 +5 位作者 孙芳 程晋霞 谷宏婧 段跃强 杨鹏辉 王希良 《免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期353-358,共6页
目的 构建两质粒冷适应流感病毒拯救系统,提高流感病毒的重配效率。 方法 本研究通过构建克隆载体pfastbac△plhHTB,将流感病毒A/Ann Arbor/6/60(H2N2)6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS)的双向转录表达元件定向克隆入此载体... 目的 构建两质粒冷适应流感病毒拯救系统,提高流感病毒的重配效率。 方法 本研究通过构建克隆载体pfastbac△plhHTB,将流感病毒A/Ann Arbor/6/60(H2N2)6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS)的双向转录表达元件定向克隆入此载体,获得pfastbac△plhHTBP6。同时将流感病毒A/California/7/2009(H1N1)表面基因(HA、NA)双向转录表达元件定向克隆入pENTR-1A质粒,获得pENTR-1AP2。将2个重组质粒共转染MDCK/COSI细胞,细胞上清接种10日龄SPF鸡胚,收取尿囊液,血凝实验筛选阳性株,并进行全面鉴定。 结果 本研究利用两质粒系统成功重配甲型H1N1流感病毒株,命名为TRG A/California/07/2009(H1N1)Vca,重配病毒株传代后HA效价为28,形态符合流感病毒典型特征,大小80-120 nm,具有冷适应、温度敏感表型。 结论 两质粒流感病毒拯救系统为高效重配流感疫苗株提供了新策略。 展开更多
关键词 反向遗传学 两质粒系统 流感病毒
天津蠓科二新种记述(昆虫纲:双翅目)
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作者 郭强 赖成材 虞以新 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2018年第5期494-495,498共3页
目的调查天津昆虫纲双翅目蠓科的种类和分布。方法网捕法采集。结果记述了天津昆虫纲双翅目蠓科二新种:大沽毛蠓和海河铗蠓,模式标本收藏于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。结论此次调查为天津蠓科昆虫分类研究提供... 目的调查天津昆虫纲双翅目蠓科的种类和分布。方法网捕法采集。结果记述了天津昆虫纲双翅目蠓科二新种:大沽毛蠓和海河铗蠓,模式标本收藏于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。结论此次调查为天津蠓科昆虫分类研究提供了新依据。 展开更多
关键词 蠓科 毛蠓属 铗蠓属 新种
产志贺毒素大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_PHB05的生物学特性及全基因组分析
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作者 陈义宝 孙二超 +3 位作者 杨斓 童贻刚 宋娇阳 吴斌 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期428-437,共10页
产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌,是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌,从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆... 产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌,是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌,从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆茵噬茵体,命名为vB_EcoM_PHB05。采用双层平板法筛选并纯化得到一株噬菌体.采用透射电镜观察噬菌体颗粒:使用Ion Torrent测序平台进行噬菌体全基因组测序,同时对噬菌体最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、裂解谱等生物学特性进行研究。结果表明,噬茵体vB_EcoM_PHB05在电镜下可见有一正多面体立体对称头部(直径约72nm),含收缩性尾部(尾长约45nm,尾宽20nm).为肌尾科噬菌体;提取基因组,酶切鉴定该噬菌体核酸类型为双链DNA;其最佳感染复数为0.1;一步生长曲线试验结果显示,噬菌体vB_EcoM_PHB05潜伏期约为20min,平均裂解量约58PFU/cell;基因测序结果表明.该噬菌体全基因组全长147659bp,G+C含量37.5%。噬菌体vB_EcoM_PHB05除对本身宿主茵产志贺毒素大肠杆菌(Escherichia coli034)产生裂解外,还裂解其它产志贺毒素大肠杆菌和沙门茵。噬菌体vB_EcoM_PHB05为一株广谱烈性噬菌体,其基因组中不合耐药基因及毒力基因,具有开发为抗产志贺毒素大肠杆菌制剂的潜力。 展开更多
关键词 产志贺毒素大肠杆菌噬菌体 分离鉴定 生物学特征 全基因组测序 基因组分析
B型肉毒毒素轻链的高效制备及活性鉴定
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作者 罗森 陈芳红 +1 位作者 李涛 王慧 《生物技术通讯》 CAS 2018年第1期59-63,共5页
目的 在大肠杆菌中高效表达B型肉毒毒素轻链 (BoNT/BLC) 并纯化, 研究其生物学活性.方法: 根据报道的BoNT/BLC基因序列设计引物, 从肉毒梭菌中扩增BoNT/BLC基因片段, 将其克隆至原核表达载体pET-22b中,重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE... 目的 在大肠杆菌中高效表达B型肉毒毒素轻链 (BoNT/BLC) 并纯化, 研究其生物学活性.方法: 根据报道的BoNT/BLC基因序列设计引物, 从肉毒梭菌中扩增BoNT/BLC基因片段, 将其克隆至原核表达载体pET-22b中,重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3) Rosetta感受态细胞, 构建重组大肠杆菌pET-22bBoNT/BLC/BL21 (DE3) Rosetta,在20℃条件下用IPTG诱导目的蛋白表达, 表达产物经HisTrapFF柱纯化, 用SDS-PAGE对目的蛋白进行鉴定, 并利用相应底物对纯化产物进行生物活性分析.结果与结论: 构建了重组大肠杆菌pET-22bBoNT/BLC/BL21 (DE3) Ro?setta, BoNT/BLC表达量达到了细菌总蛋白的30%左右, 通过-步亲和纯化目的蛋白后经SDS-PAGE检测其纯度在95%以上, 制备的重组LC的酶活略高于B型肉毒毒素全毒素, 可作为试剂用于BoNT/BLC抑制剂高通量体外检测方法的研究. 展开更多
关键词 肉毒毒素 金属内肽酶 原核表达
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同时产碳青霉烯酶IMP与NDM的肺炎克雷伯菌和霍氏肠杆菌的分离及耐药性研究
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作者 梁丽琪 冯娇 +5 位作者 蒋晓圆 曾利军 周冬生 梁权辉 殷喆 江凌晓 《中华医院感染学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第21期3201-3206,共6页
目的对分别分离自我国两家医院的多药耐药菌株肺炎克雷伯菌10677和霍氏肠杆菌128379进行耐药机制研究。方法通过16SrDNA鉴定菌种,PCR筛查菌株携带的耐药基因,应用改良Carba NP法检测菌株产碳青霉烯酶的类型,接合转移和电转化试验验证携... 目的对分别分离自我国两家医院的多药耐药菌株肺炎克雷伯菌10677和霍氏肠杆菌128379进行耐药机制研究。方法通过16SrDNA鉴定菌种,PCR筛查菌株携带的耐药基因,应用改良Carba NP法检测菌株产碳青霉烯酶的类型,接合转移和电转化试验验证携带IMP和NDM的质粒是否具有可转移性,全基因组测序获得细菌所携带的所有质粒序列,应用RAST、BLAST等对序列进行生物信息学分析。结果 10677和128379两株菌均产B类酶,且均携带碳青霉烯酶基因blaIMP和blaNDM。全基因测序结果显示10677和128379各包含两个分别携带blaIMP-4和blaNDM-1的质粒,分别为p10677-IMP、p10677-NDM、p128379-IMP和p128379-NDM。其中p10677-IMP、p10677-NDM和p128379-NDM可通过接合转移得到相应的接合子,p128379-IMP仅可通过电转的方式得到其电转化子。p10677-IMP和p128379-IMP均为IncN1型质粒,有三个共有的外源插入区,分别为包含有携带blaIMP-4的整合子In823b,IS1插入区,携带qnrS1基因的转座子Tn6292,除此外,p10677-IMP还包括携带fosA5基因的转座子Tn6412区以及IS26插入区。p10677-NDM和p128379-NDM为IncX3型质粒,包含两个共有的外源插入区,分别为ISKox3和携带blaNDM-1的耐药区,此外,p10677-NDM还包含一个独有的插入区ISEhe3。结论质粒p10677-IMP、p10677-NDM和p128379-IMP、p128379-NDM分别介导10677和128379多药耐药且均具有转移性,是这两株耐药菌传播的重要载体。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 霍氏肠杆菌 blaIMP blaNDM 碳青霉烯酶 质粒
新型疫苗佐剂Ov-ASP-1佐剂活性功能区的设计、表达及生物学特性研究 预览
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作者 郭晶晶 宁秀哲 +2 位作者 杨裔 寇志华 周育森 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期788-793,共6页
目的 获得保留Ov-ASP-1佐剂活性的功能区。方法 用前期制备的Ov-ASP-1单克隆抗体对Ov-ASP-1的9个肽进行特异性结合,根据肽的结合情况设计功能区ASPPRM,并进行密码子优化、构建原核表达载体后在大肠杆菌中表达。表达产物经Western印迹鉴... 目的 获得保留Ov-ASP-1佐剂活性的功能区。方法 用前期制备的Ov-ASP-1单克隆抗体对Ov-ASP-1的9个肽进行特异性结合,根据肽的结合情况设计功能区ASPPRM,并进行密码子优化、构建原核表达载体后在大肠杆菌中表达。表达产物经Western印迹鉴定后的用镍柱纯化蛋白,复性完全后对获得的ASPPRM活性蛋白进行生物学特性分析。结果 ASPPRM以包涵体形式表达,分子量为17kD。将其和OVA共同免疫小鼠后ASPPRM组抗OVA的IgG抗体显著高于OVA组。结论 本研究获得了保留佐剂活性的ASPPRM蛋白,为后续ASPPRM体内的免疫增效作用及Ov-ASP-1佐剂活性功能域的探索奠定基础。 展开更多
关键词 ASPPRM 佐剂活性 佐剂活性功能区
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长链非编码RNA XLOC-007123在乙型肝炎相关肝细胞癌中的表达及临床意义 预览
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作者 雷光林 王权 +5 位作者 程思杰 赖成材 王科宇 严锦 杨鹏辉 张绍庚 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2018年第2期309-313,共5页
目的检测长链非编码RNA(lncRNA)XLOC-007123在乙型肝炎相关肝细胞癌(HCC)患者组织(癌、癌旁)及肝癌细胞系中的表达,并分析其表达水平与临床病理特征的关系。方法选取2013年12月-2015年12月于解放军三〇二医院肝胆外科行HCC切除术... 目的检测长链非编码RNA(lncRNA)XLOC-007123在乙型肝炎相关肝细胞癌(HCC)患者组织(癌、癌旁)及肝癌细胞系中的表达,并分析其表达水平与临床病理特征的关系。方法选取2013年12月-2015年12月于解放军三〇二医院肝胆外科行HCC切除术的52例乙型肝炎相关HCC患者的肝癌组织;同时取同一患者的癌旁组织作为对照。应用荧光实时定量PCR检测lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC患者癌组织、配对癌旁组织以及肝癌细胞系中的表达水平。其中研究所用细胞系L02、HuH7、HepG2、SMMC-7721均由解放军三○二医院临床管理中心提供。非参数Wilcoxon秩和检验比较lncRNA XLOC-007123在癌组织和配对癌旁组织的表达水平;独立样本t检验比较不同HCC细胞系与正常肝细胞系间lncRNA XLOC-007123表达水平。临床指标差异分析采用χ~2检验。结果与癌旁组织相比,lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC患者的癌组织中表达显著下调(P〈0.01);与正常肝细胞株相比,IncRNA XLOC-007123在3种肝癌细胞系中均呈低表达(P值均〈0.05)。lncRNA XLOC-007123表达水平与患者的血清AFP水平和肿瘤分期相关,差异有统计意义(χ2值分别为7.738、7.589,P值均〈0.05)。结论 lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC组织中表达降低,且与临床患者血清AFP水平和病理分期有关联,推测lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC发生发展过程中发挥着调控作用,有望成为乙型肝炎相关HCC临床诊断的潜在标志物。 展开更多
关键词 肝细胞 肝炎 乙型 RNA 基因表达
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南昌市2009—2012年不同生境蠓类调查分析
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作者 刘仰青 柳小青 虞以新 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第3期267-270,共4页
目的了解南昌地区不同生境蠓科昆虫的分布及其季节消长等生态习性,为预防和控制蠓及蠓传疾病提供理论根据。方法 2009-2012年在南昌市城区5种生境内采用灯诱法对蠓科昆虫进行监测,每月监测2次,上、下旬各1次。利用SPSS 19.0和Excel 200... 目的了解南昌地区不同生境蠓科昆虫的分布及其季节消长等生态习性,为预防和控制蠓及蠓传疾病提供理论根据。方法 2009-2012年在南昌市城区5种生境内采用灯诱法对蠓科昆虫进行监测,每月监测2次,上、下旬各1次。利用SPSS 19.0和Excel 2007软件对不同生境的蠓密度及其季节消长进行分析。结果共采集蠓63 874只,隶属于8属88种,其中毛蠓属8种、裸蠓属9种、铗蠓属28种、蠛蠓属7种、库蠓属33种、阿蠓属、柱蠓属和贝蠓属各1种。其中发现并描述4个新种。以牲畜棚蠓密度最高,达4.12只/(灯·h)。居民区和医院均以毛蠓属蠓类数量最多,分别占各生境捕获总数的36.07%和43.50%;公园以铗蠓属和毛蠓属蠓类数量最多,分别占34.04%和31.92%;农户和牲畜棚均以库蠓属为主,分别占各生境的49.14%和86.35%。库蠓属和蠛蠓属是南昌地区的优势属种,其数量占捕获总数的41.79%。蠓科昆虫全年在7、9月有2个较固定的活动高峰。结论蠓科昆虫特别是吸血蠓在人、畜活动和生活等生境广泛分布,有潜在的蠓传人畜传染病的风险。 展开更多
关键词 蠓科 构成 生境 季节消长
一株新的溶血葡萄球菌溶原性噬菌体IME-SA4的诱导、全基因组测序和比较基因组分析
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作者 刘萍 彭帆 +3 位作者 胡琪 汤渝玲 康怀兴 童贻刚 《中国医师杂志》 CAS 2018年第4期546-550,共5页
目的从一株医院分离的溶血葡萄球菌SA98中诱导出一株新的溶血葡萄球菌溶原性噬菌体,观察其形态与大小,完成全基因组测序和分析基因组结构和进化关系。方法利用丝裂霉素C从溶血葡萄球菌SA98中诱导噬菌体,噬菌体经浓缩纯化后采用负染... 目的从一株医院分离的溶血葡萄球菌SA98中诱导出一株新的溶血葡萄球菌溶原性噬菌体,观察其形态与大小,完成全基因组测序和分析基因组结构和进化关系。方法利用丝裂霉素C从溶血葡萄球菌SA98中诱导噬菌体,噬菌体经浓缩纯化后采用负染电镜观察其形态和大小,提取该噬菌体的基因核酸并完成全基因组高通量测序,分析噬菌体全基因组的结构特征和进化关系。结果利用丝裂霉素C从溶血葡萄球菌中成功诱导出噬菌体IME-SA4,电镜观察显示,噬菌体IME-SA4头部呈立体对称,有一长尾;噬菌体IME-SA4基因组全长41 843 bp,比对分析发现IME-SA4只与亲缘关系最近的一株葡萄球菌噬菌体phiRS7有13%的同源性。结论笔者成功从溶血性葡萄球菌SA98中诱导出一株与其他葡萄球菌噬菌体同源性很低的新的溶原性噬菌体,其形态学研究、全基因组测序和比较基因组分析为进一步研究该类噬菌体特性和实际应用提供了依据。 展开更多
关键词 葡萄球菌 溶血性 葡萄球菌噬菌体 病毒激活 全基因组关联研究
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