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医院感染细菌性肺炎患者多重耐药菌感染及30d内死亡危险因素分析 预览
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作者 李静 刘雪超 +2 位作者 孙惠敏 崔冰漪 刘秀玮 《检验医学》 CAS 2019年第4期300-304,共5页
目的探讨医院感染细菌性肺炎的病原谱和耐药情况,分析患者感染30d内死亡的危险因素。方法回顾性分析2017年1—12月唐山市中医医院医院感染细菌性肺炎患者的临床资料,分析病原菌分布及耐药情况。采用Logistic回归分析和Cox回归分析评估... 目的探讨医院感染细菌性肺炎的病原谱和耐药情况,分析患者感染30d内死亡的危险因素。方法回顾性分析2017年1—12月唐山市中医医院医院感染细菌性肺炎患者的临床资料,分析病原菌分布及耐药情况。采用Logistic回归分析和Cox回归分析评估相关危险因素。结果患者年龄、重症监护病房(ICU)入住>7d、接受有创机械性通气>7d是患者发生多重耐药(MDR)菌感染的独立危险因素;患者年龄、肺部肿瘤及合并机体其他部位感染是细菌性肺炎患者30d内死亡的独立危险因素。结论明确了医院感染细菌性肺炎患者发生MDR及30d内死亡的危险因素,为临床制定相应预防、治疗措施提供了理论依据。 展开更多
关键词 医院感染 细菌性肺炎 危险因素 多重耐药菌 死亡
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宋内志贺氏菌1173质粒基因组及耐药基因转移机制 被引量:1
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作者 张德福 赵禹宗 +7 位作者 刘东 冯娇 张明 曲道峰 周冬生 励建荣 殷喆 王丽 《微生物学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期467-475,共9页
【目的】研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla_(CTX-M-64)转移的机制。【方法】用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移实验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其... 【目的】研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla_(CTX-M-64)转移的机制。【方法】用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移实验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其他细菌,并对接合子是否产ESBL和携带耐药基因进行检验,利用VITEK~?2检测1173和接合子的耐药谱,提取质粒进行高通量基因组测序,并对质粒序列进行生物信息学分析,以研究其耐药基因转移机制。【结果】1173是产ESBL的多药耐药宋内志贺氏菌,携带的耐药基因有bla _(CTX-M-64)和bla _(TEM),其中的bla _(CTX-M-64)可通过接合转移作用传递给受体菌EC600,并使接合子具有相应的耐药谱。经序列测定和生物信息学分析表明,介导bla _(CTX-M-64)水平转移的是ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元。【结论】质粒携带的bla_(CTX-M-64)介导1173对多类抗菌药物的耐药,ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元介导bla_(CTX-M-64)在细菌间的转移。 展开更多
关键词 宋内志贺氏菌 质粒 多药耐药 转座单元 移动元件 blaCTX-M-64
γ射线终末辐照对同种异体肌腱病毒灭活效果及生物力学性能影响的研究 被引量:1
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作者 赵彦涛 刘思扬 +5 位作者 尹惠琼 白玉龙 韩丽伟 胡先同 朱加亮 衷鸿宾 《中国骨与关节杂志》 CAS 2018年第5期389-393,共5页
目的研究γ射线终末辐照灭菌对同种异体肌腱病毒灭活的效果及对肌腱生物力学性能的影响。方法采用细胞培养法,检测γ射线辐照(照射剂量25 kGy)灭活PRV、VSV、PPV、EMCV、HIV-1病毒的效果。取正常供体手部肌腱12根,直径4~5 mm,随机分... 目的研究γ射线终末辐照灭菌对同种异体肌腱病毒灭活的效果及对肌腱生物力学性能的影响。方法采用细胞培养法,检测γ射线辐照(照射剂量25 kGy)灭活PRV、VSV、PPV、EMCV、HIV-1病毒的效果。取正常供体手部肌腱12根,直径4~5 mm,随机分为实验组(辐照组)和对照组(新鲜不处理),进行病毒滴度检测,MTS力学试验机检测两组极限拉伸载荷。结果经过γ射线辐照可使污染在同种异体肌腱上的病毒滴度下降超过4 Log值,且盲传3代无病毒检出。辐照前后,同种异体肌腱极限拉伸载荷和组织结构差异无统计学意义(P〉0.05)。结论终末辐照灭菌(照射剂量25 kGy)是同种异体肌腱病毒灭活的有效方法,可避免引入其它化学试剂,且该工艺不会影响肌腱的极限拉伸载荷和组织结构。 展开更多
关键词 同种异体移植物 病毒灭活 灭菌 生物力学现象
大肠杆菌hfq和rne-710基因的双质粒无痕敲除技术
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作者 王净 吕瑞辰 +1 位作者 韩延平 杨瑞馥 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期602-612,共11页
基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段。以大肠杆菌K-12 MG1655基因组hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δrne-710∷Spe菌株,通过融合PCR方法分别构建缺失hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)的融... 基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段。以大肠杆菌K-12 MG1655基因组hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δrne-710∷Spe菌株,通过融合PCR方法分别构建缺失hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)的融合片段并连接至辅助质粒,缺失hfq和rne-710的片段经重组分别替换壮观霉素抗性盒,得到无痕敲除株Δhfq和Δrne-710。双质粒无痕敲除和融合PCR方法相结合为大片段基因缺失开辟了新的途径。 展开更多
关键词 大肠杆菌 HFQ rne-710 双质粒无痕敲除 融合PCR Ⅰ-Sce Ⅰ内切酶
呼吸道防护装备佩戴密合度测定仪的研制 预览
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作者 李劲松 张柯 +5 位作者 何春雷 胡凌飞 王桐 张友禄 王洁 李娜 《中国医学装备》 2018年第9期1-4,共4页
目的:根据呼吸道防护装备佩戴的要求,研制可对多种呼吸道防护装备与佩戴者面部密合度进行测试的密合度测定仪。方法:人员呼吸道防护装备佩戴密合度测定仪的硬件采用粒子生长技术和激光粒子计数技术,建立微气压传感技术,设计仪器的机械... 目的:根据呼吸道防护装备佩戴的要求,研制可对多种呼吸道防护装备与佩戴者面部密合度进行测试的密合度测定仪。方法:人员呼吸道防护装备佩戴密合度测定仪的硬件采用粒子生长技术和激光粒子计数技术,建立微气压传感技术,设计仪器的机械结构和控制系统结构;利用所研制的ZR-1220呼吸器密合度测定仪,测试300人次的防护口罩密合度,分析口罩的型号、佩戴方式、佩戴后人的面部表情及动作对口罩防护能力的影响。结果:经实验测试,该仪器设置的8个测试参数,即正常呼吸→深呼吸→左右摇头→上下摆头→朗读→做鬼脸→弯腰摸脚趾→正常呼吸,均满足密合度测试要求,且操作简便,系统界面友好。密合度测试软件针对人员在不同面部动作和面型下防护装备佩戴密合度的算法,解决检测信号与实际数值的对应关系,建立人机交互界面。结论:密合度测定仪性能达到国外同类仪器的性能指标,可以用作评价呼吸道防护装备面型密合度的测试仪器。 展开更多
关键词 呼吸道 防护装备 密合度 设计原理 粒子
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细菌全基因组关联研究的方法与应用 预览
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作者 杨超 杨瑞馥 +1 位作者 崔玉军 包其郁 《遗传》 CSCD 北大核心 2018年第1期57-65,共9页
随着测序技术的发展和全基因组序列的不断积累,全基因组关联研究(genome-wideassociationstudy,GWAS)在人类复杂疾病研究中取得了丰硕成果,10余年间发现了数以万计的疾病风险因子。同样,GWAS也为探索细菌表型的遗传机制提供了新的工具。... 随着测序技术的发展和全基因组序列的不断积累,全基因组关联研究(genome-wideassociationstudy,GWAS)在人类复杂疾病研究中取得了丰硕成果,10余年间发现了数以万计的疾病风险因子。同样,GWAS也为探索细菌表型的遗传机制提供了新的工具。自2013年第一项细菌GWAS(bacterialGWAS,BGWAS)工作发表以来,目前已有10多项相关研究报道,分别揭示了细菌宿主适应性、耐药性及毒力等表型的遗传机制,极大加深了人们对细菌遗传、进化及传播等方面的认识。本文对目前BGWAS的研究方法、应用成果及存在的问题进行了总结,并对BGWAS的研究前景进行了展望,旨在为微生物学领域开展BGWAS研究提供参考。 展开更多
关键词 全基因组关联研究 细菌 全基因组测序 表型 遗传机制
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新疆维吾尔自治区毛蠓属一新种及一新纪录种(双翅目:蠓科)
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作者 马合木提 张建 +3 位作者 郜振国 张晓兵 张松 虞以新 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第1期76-77,共2页
该文报道在新疆维吾尔自治区达坂城采获的新种双钩毛蠓(Dasyhelea biungula Ma et Yu,sp.nov.)和我国毛蠓新纪录种奥尔毛蠓(Dasyhelea auli Remm,1962),对其形态特征进行了描述。标本均保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学... 该文报道在新疆维吾尔自治区达坂城采获的新种双钩毛蠓(Dasyhelea biungula Ma et Yu,sp.nov.)和我国毛蠓新纪录种奥尔毛蠓(Dasyhelea auli Remm,1962),对其形态特征进行了描述。标本均保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。 展开更多
关键词 蠓科 毛蠓属 新种 新纪录
不同盐分浓度对副溶血弧菌毒力表型的影响 被引量:1
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作者 马立芝 郭李平 +5 位作者 王立祥 梁权辉 邱业峰 杨瑞馥 周冬生 吕志强 《中华医院感染学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期2401-2404,共4页
目的 研究副溶血弧菌(VP)在不同盐分浓度下毒力表型的变化.方法 利用小鼠致死性实验、兔回肠袢实验、Raw264细胞毒性实验和兔红细胞溶血活性实验比较标准强毒株RIMD2210633株在高盐(2%NaCl)和低盐(0.5 %NaCl)条件下毒力表型的变... 目的 研究副溶血弧菌(VP)在不同盐分浓度下毒力表型的变化.方法 利用小鼠致死性实验、兔回肠袢实验、Raw264细胞毒性实验和兔红细胞溶血活性实验比较标准强毒株RIMD2210633株在高盐(2%NaCl)和低盐(0.5 %NaCl)条件下毒力表型的变化.结果 0.5% NaCl试验组副溶血弧菌的生长速度较2%NaCl试验组有所减慢,而产生的肠积液量、对Raw264细胞的细胞毒性及对兔红细胞的相对溶血活性却显著高于2%NaCl试验组(P<0.05);然而0.5% NaCl试验组菌体的小鼠致死率却低于2%NaCl试验组,两组小鼠存活率分别为80.o%和53.3%.结论 在低盐条件下,VP的生长速度下降,肠毒性、Raw264细胞毒性和溶血活性均增强,而小鼠致死毒性反而减弱. 展开更多
关键词 副溶血弧菌 毒力表型 盐分浓度
广西1例HIV-1G亚型毒株全长基因序列的测定和分析
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作者 张敏 梁冰玉 +4 位作者 李天一 沈平 苏齐鉴 李敬云 李林 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期101-105,共5页
目的对广西1例HIV-1 G亚型毒株感染者体内病毒近似全长基因组进行序列测定并进行系统进化分析。方法对前期鉴定的1例HIV-1G亚型毒株感染者进行背景信息收集,并采集其外周血,提取病毒RNA,利用逆转录巢式-PCR技术分两段扩增并测定病毒近... 目的对广西1例HIV-1 G亚型毒株感染者体内病毒近似全长基因组进行序列测定并进行系统进化分析。方法对前期鉴定的1例HIV-1G亚型毒株感染者进行背景信息收集,并采集其外周血,提取病毒RNA,利用逆转录巢式-PCR技术分两段扩增并测定病毒近似全长基因序列。利用MEGA6软件对全长序列进行系统进化分析。结果获得了病毒近似全长基因组序列,长度为8847 bp。在系统进化树中,该毒株与G亚型参考株成簇,Bootstrap值为100%。系统溯源分析显示,该毒株与广西首次报道的G亚型JN106043毒株关系最近(Bootstrap值为100%,基因离散率为5%)。结论该毒株可能是由广西毒株传播所致,提示G亚型毒株在广西地区可能存在一定的局部流行,需进一步监测。该毒株序列的测定和分析对于广西地区HIV流行状况分析具有重要意义。 展开更多
关键词 HIV-1 G亚型 近似全长序列 系统进化树分析
流感病毒灭活疫苗可溶性微针制备及评价 被引量:2
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作者 李明辉 邱玉琴 +7 位作者 杨国忠 刘思齐 邢丽 张良艳 周娅 杨鹏辉 高云华 王希良 《免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期477-481,487共6页
目的 初步研究负载流感全病毒灭活疫苗可溶性微针体外评价方法和经皮免疫效果。方法 将流感全病毒灭活疫苗溶液与微针基质材料混匀干燥后复溶,体外血凝试验检测疫苗血凝素活性,透射电镜和动态光散射分析疫苗微针复溶后流感全病毒疫苗变... 目的 初步研究负载流感全病毒灭活疫苗可溶性微针体外评价方法和经皮免疫效果。方法 将流感全病毒灭活疫苗溶液与微针基质材料混匀干燥后复溶,体外血凝试验检测疫苗血凝素活性,透射电镜和动态光散射分析疫苗微针复溶后流感全病毒疫苗变化情况;选择筛选的材料羧甲基纤维素和硫酸软骨素作为主要基质与疫苗混匀制备微针溶液,滴加到微针制作模具上,抽真空使疫苗基质溶液填充针体,室温干燥、脱模,贴于猪皮肤检测微针硬度,将Cy7标记流感疫苗可溶性微针贴于小鼠腹部后活体成像检测流感疫苗皮内存留时间,动物免疫试验第2次免疫后14 d检测血抑效价。结果 通过血凝试验筛选出硫酸软骨素和羧甲基纤维素为主要基质,贴片疫苗血凝活性为96%和86%,显著高于其它3种材料贴片疫苗活性;透射电镜显示PBS对照组中流感灭活病毒颗粒多呈单个散在分布,罕见聚团,2种贴片复溶后流感灭活病毒多呈聚团,罕见单个病毒颗粒;动态光散射分析显示疫苗贴片复溶后病毒颗粒粒径明显增大,高于对照组中病毒粒径;皮肤组织病理显示2种疫苗微针均可刺穿猪皮肤;活体成像显示疫苗微针刺穿小鼠皮肤并溶解于皮内,疫苗存留时间较肌肉长;Balb/c小鼠免疫后分离血清,血凝抑制试验显示2种微针均产生血抑效价且硫酸软骨素微针血抑效价高于羧甲基纤维素微针。结论 可溶性疫苗微针可刺穿皮肤溶于皮内产生免疫应答,为微针疫苗的研究提供了思路。 展开更多
关键词 微针 可溶性 流感疫苗
实施传染病监测是预防控制传染病的有效途径 被引量:3
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作者 王丽萍 曹务春 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期417-418,共2页
传染病监测是我国疾病预防控制工作的重要内容之一。建国以来,我国传染病监测和报告制度不断完善,技术手段不断革新,在控制传染病暴发流行中发挥了不可替代的作用。当前全球传染病形势仍然较为严峻,传染病监测仍将是防控传染病的有... 传染病监测是我国疾病预防控制工作的重要内容之一。建国以来,我国传染病监测和报告制度不断完善,技术手段不断革新,在控制传染病暴发流行中发挥了不可替代的作用。当前全球传染病形势仍然较为严峻,传染病监测仍将是防控传染病的有效途径。本期“传染病监测”栏目的论文,针对不同监测数据进行分析、解释,将成为我国传染病控制研究方面的重要信息,为传染病防控研究提供科学依据。 展开更多
关键词 传染病 监测 预防 控制
利用蛋白质组技术快速鉴定噬菌体结构蛋白 预览
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作者 赵飞扬 邢少贞 +5 位作者 孙强 裴广倩 米志强 安小平 童贻刚 任慧英 《中国抗生素杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期760-765,共6页
为快速鉴定噬菌体的结构蛋白,并且发现具有新功能的蛋白,为噬菌体功能的研究提供基础。本研究用临床分离到的屎肠球菌为指示菌,从医院污水中分离到1株裂解性噬菌体,命名为vB_EfaP_IME199。对噬菌体大量培养、浓缩和纯化,然后进行蛋白质... 为快速鉴定噬菌体的结构蛋白,并且发现具有新功能的蛋白,为噬菌体功能的研究提供基础。本研究用临床分离到的屎肠球菌为指示菌,从医院污水中分离到1株裂解性噬菌体,命名为vB_EfaP_IME199。对噬菌体大量培养、浓缩和纯化,然后进行蛋白质组学分析、全基因组测序,进化分析,确定该噬菌体为短尾噬菌体科,全基因组序列长为18839bp,GC含量为34.6%。在线注释预测该噬菌体基因组功能基因,注释出22个ORFs,其中11个ORFs为假想蛋白序列,其余11个ORFs的功能已知。采用质谱技术对浓缩纯化的噬菌体进行蛋白质组分析,共鉴定出11个蛋白质,其中有6个蛋白为功能已知的结构蛋白,其余为假想蛋白。本实验利用蛋白质组技术快速有效的鉴定出噬菌体的结构蛋白,建立了一种噬菌体蛋白的分析方法,为该噬菌体的基因功能研究提供了基础。 展开更多
关键词 噬菌体 vB_EfaP_IME199 基因组学 蛋白质组学
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粪肠球菌噬菌体vB_EfaP_IME195的生物学特性及其全基因组分析 被引量:2
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作者 邢少贞 张湘莉兰 +5 位作者 裴广倩 方云 程实 米志强 安小平 童贻刚 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期305-313,共9页
【目的】以粪肠球菌为宿主菌,从医院的污水中筛选出相应的粪肠球菌噬菌体v B_Efa P_IME195,简称IME195,研究其生物学特性;并通过高通量测序得到其全基因组,深入研究其基因组学特征。【方法】以临床的耐药粪肠球菌为宿主菌,利用医院污水... 【目的】以粪肠球菌为宿主菌,从医院的污水中筛选出相应的粪肠球菌噬菌体v B_Efa P_IME195,简称IME195,研究其生物学特性;并通过高通量测序得到其全基因组,深入研究其基因组学特征。【方法】以临床的耐药粪肠球菌为宿主菌,利用医院污水筛选噬菌体并纯化;对噬菌体IME195生物学特性进行了深入研究,包括电镜观察噬菌体形态、最佳感染复数、一步生长曲线、噬菌体IME195对紫外线的敏感度、对温度的耐受程度、对p H的耐受程度、对氯仿是否敏感;通过蛋白酶K/SDS法提取噬菌体IME195全基因组;Ion Torrent高通量测序;测序后进行噬菌体全基因组序列组装、注释、进化分析和比较分析。【结果】通过噬菌体梯度稀释,双层培养基平板法得到噬菌斑边缘分明、斑体透明的裂解性噬菌体IME195,最佳感染复数为0.01,一步生长曲线显示IME195的潜伏期为30 min,暴发量为11。该噬菌体对紫外线比较敏感,对5%浓度的氯仿不敏感,噬菌体对高温比较敏感,该噬菌体在p H 6.0-8.0范围内具有良好的裂解活性;电镜观察结果显示该噬菌体属于尾病毒目短尾噬菌体科;全基因组分析表明:噬菌体IME195基因组大小只有18 607 bp(Gen Bank登录号为KT932700),G+C含量仅为33%。BLASTn比对结果表明,该噬菌体和Gen Bank中的噬菌体v B_Efae230P-4只有82%的相似性。对噬菌体IME195进行了全基因组功能注释和进化分析。【结论】分离鉴定了一株粪肠球菌噬菌体,进行了生物学特性、全基因组测序和生物信息学深入分析,为噬菌体治疗多重耐药细菌奠定了基础。 展开更多
关键词 粪肠球菌 噬菌体 生物学特性 全基因组测序 基因组分析
大肠杆菌小RNASgrS单分子原位成像方法的建立
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作者 王净 韩延平 杨瑞馥 《科学通报》 CSCD 北大核心 2017年第24期2804-2813,共10页
为了确定单分子Sgr S的空间定位,在野生株Escherichia coli MG1655基础上,构建敲除株(35)sgr S和过表达株(35)sgr S-p BAD-Sgr S,并以3株菌为供试菌株建立了定位大肠杆菌Sgr S的单分子荧光原位杂交(sm FISH)方法.优化条件为:杂... 为了确定单分子Sgr S的空间定位,在野生株Escherichia coli MG1655基础上,构建敲除株(35)sgr S和过表达株(35)sgr S-p BAD-Sgr S,并以3株菌为供试菌株建立了定位大肠杆菌Sgr S的单分子荧光原位杂交(sm FISH)方法.优化条件为:杂交后细菌洗涤次数为5次,涂片时加入Slow Fade Diamond Antifade Mountant防淬灭,细菌在杂交液和探针的混合液中经40℃杂交3 h,杂交前探针置98℃变性10 min,Alexa-555 WGA染料用来标记细胞壁.sm FISH操作步骤确定为:固定-洗涤-透化-预杂交-杂交-洗涤-染细胞壁-洗涤-涂片,最后使用N-SIM超分辨率显微镜观察成像.定位结果显示,Sgr S呈绿色点状荧光弥散分布于细菌胞浆中,Alexa-555 WGA染料标记细胞壁呈红色,从而完整地定位了大肠杆菌的形态.sm FISH方法和超分辨显微技术的结合可为深入研究细菌模式基因s RNA的定位以及s RNA介导的调控机制提供线索和技术支持. 展开更多
关键词 大肠杆菌 SRNA SgrS 单分子荧光原位杂交 超分辨率显微镜 Alexa-555 WGA
Q热性心内膜炎1例抗Ⅰ相和Ⅱ相抗原IgG抗体的跟踪监测报道
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作者 于永慧 王涛 +3 位作者 罗声栋 冯乐 孙志会 宋立华 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期160-160,F0003共2页
Q热(query fever,Qfever,不明热)是由贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,Cb)感染人导致的一种无特征性病症的发热疾病,临床上与流感等不易区分,常被误诊漏诊。Cb为人畜共患的专性胞内寄生菌,在我国分布广泛,禽、畜等动物足其主要宿主... Q热(query fever,Qfever,不明热)是由贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,Cb)感染人导致的一种无特征性病症的发热疾病,临床上与流感等不易区分,常被误诊漏诊。Cb为人畜共患的专性胞内寄生菌,在我国分布广泛,禽、畜等动物足其主要宿主和传染源,Cb可引起孕畜流产,造成经济损失。人感染Cb后,除出现类似流感的不明发热症状以外, 展开更多
关键词 Q热 贝氏柯克斯体 心内膜炎 免疫球蛋白G
磷酰胺吗啉代寡核苷酸关键中间产物的合成方法探索与工艺优化
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作者 陈晓睿 郭永建 +5 位作者 宋亚彬 张东娜 徐力昆 王保刚 窦媛媛 王洪权 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第8期662-666,共5页
目的探索与优化磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PMO)关键中间产物7'-羟基-N-三苯甲基吗啉代核苷单体合成工艺路线和方法,使其合成更加高效与便捷,为以PMO为结构基础的反义寡核苷酸类药物研究奠定基础。方法以N4-苯甲酰基胞苷,鸟苷与5-甲基尿... 目的探索与优化磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PMO)关键中间产物7'-羟基-N-三苯甲基吗啉代核苷单体合成工艺路线和方法,使其合成更加高效与便捷,为以PMO为结构基础的反义寡核苷酸类药物研究奠定基础。方法以N4-苯甲酰基胞苷,鸟苷与5-甲基尿苷作为起始原料,经过将核糖环结构改造为吗啉环并对关键化学基团保护等步骤合成7'-羟基-N-三苯甲基吗啉代核苷单体。结果分别得到N4-苯甲酰基-7'-羟基-N-三苯甲基吗啉代胞苷、N2-苯甲酰基-7'-羟基-N-三苯甲基吗啉代鸟苷和7'-羟基-N-三苯甲基吗啉代胸苷,并对三者合成的工艺方法进行了优化,对所合成的中间体和目标物进行了结构确证。结论优化后的7'-羟基-N-三苯甲基吗啉代核苷单体合成工艺高效、便捷且适合放大制备。 展开更多
关键词 磷酰胺吗啉代寡核苷酸 吗啉核苷单体 7’-羟基-N-三苯甲基吗啉代核苷 工艺优化
基于时间分辨荧光纳米颗粒的磁分离均相免疫分析方法
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作者 吴灿军 律清宇 +3 位作者 郝淮杰 赵成娜 郑玉玲 姜永强 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第8期689-693,共5页
目的建立一种基于时间分辨荧光纳米颗粒的磁分离均相免疫分析方法并用于检测降钙素原(PCT)重组抗原。方法以PCT单克隆抗体偶联铕离子荧光微球为检测抗体,另一株PCT单克隆抗体偶联生物素作为固相抗体,建立一种通过表面修饰有链霉亲和... 目的建立一种基于时间分辨荧光纳米颗粒的磁分离均相免疫分析方法并用于检测降钙素原(PCT)重组抗原。方法以PCT单克隆抗体偶联铕离子荧光微球为检测抗体,另一株PCT单克隆抗体偶联生物素作为固相抗体,建立一种通过表面修饰有链霉亲和素的磁珠分离铕离子荧光微球-检测抗体-降钙素原-固相抗体-生物素复合物的均相免疫分析方法。用该法检测PCT重组抗原,通过Sigma Plot分析该法的最低检测限。结果 PCT重组抗原的标准曲线匹配二次函数,函数方程为Y=19170.12+75493.74X-26.00X2(r=0.9986),PCT重组抗原检测灵敏度为0.04 ng/ml。结论铕离子荧光微球可作为标记物应用于磁分离均相免疫分析方法,并在PCT重组抗原检测中获得较高的检测灵敏度。 展开更多
关键词 降钙素原 时间分辨荧光法 铕离子荧光微球 磁珠 均相检测
基因间长链非编码RNA 524346在肝细胞癌中的表达及临床意义 预览
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作者 雷光林 杨鹏辉 +3 位作者 程思杰 严锦 张绍庚 王希良 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2017年第1期51-56,共6页
目的检测基因间长链非编码RNA524346(longintergenicnon-codingRNA524346,LincRNA524346)在肝细胞癌患者组织(癌、癌旁)及细胞系(正常肝细胞系LO2及肝癌细胞系SMMC-7721、HepG2和Huh7)中的表达情况,探讨LincRNA524346与肝细胞... 目的检测基因间长链非编码RNA524346(longintergenicnon-codingRNA524346,LincRNA524346)在肝细胞癌患者组织(癌、癌旁)及细胞系(正常肝细胞系LO2及肝癌细胞系SMMC-7721、HepG2和Huh7)中的表达情况,探讨LincRNA524346与肝细胞癌临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR法(real-timequantitativePCR,qRT-PCR)检测LincRNA524346在61例肝细胞癌患者癌组织、配对癌旁组织以及肝癌细胞系的表达水平,分析其与肝细胞癌患者临床病理特征之间的相关性。用受试者工作曲线(receiveroperatingcharacteristics,ROC)评价肝细胞癌组织中LincRNA524346的表达水平在肝细胞癌早期诊断中的效能。结果LincRNA524346在83.6%(51/61)肝细胞癌患者的癌组织中较配对癌旁组织表达下调,差异有统计学意义(P<0.01);LincRNA524346的表达水平与肝细胞癌患者的病理分期(P=0.021)、肿瘤数目(P=0.013)、是否合并门静脉癌栓(PVTT)(P<0.01)、肝硬化(P=0.005)和微静脉浸润(MVI)(P<0.001)具有显著相关性。结论LincRNA524346在肝细胞癌组织中表达降低,其有望作为潜在肝细胞癌早期诊断、转移的分子标志物。 展开更多
关键词 肝细胞 长链非编码RNA 实时荧光定量PCR
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一种条带免疫印迹试剂用于HIV抗体确证的效果评价 被引量:2
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作者 王晓林 梁姝 +4 位作者 孙国清 刘永健 常帅 李敬云 鲍作义 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期63-64,68共3页
目的评估一种条带免疫印迹试剂确证艾滋病病毒(HIV)抗体的效果。方法用蛋白印迹试验(WB)和条带免疫印迹试剂(LIA)平行检测1 035份标本,按照各自的说明书判断结果,对检测结果进行比较和分析。结果总体上,两种试剂检测的一致率为95.... 目的评估一种条带免疫印迹试剂确证艾滋病病毒(HIV)抗体的效果。方法用蛋白印迹试验(WB)和条带免疫印迹试剂(LIA)平行检测1 035份标本,按照各自的说明书判断结果,对检测结果进行比较和分析。结果总体上,两种试剂检测的一致率为95.3%,对经过确证的640份HIV抗体阳性标本(含2份HIV-1O组和2份HIV-2标本)的检测的结果完全一致。在339份WB试剂判断为阴性的标本中,LIA试剂有5份(1.5%)为不确定结果,而在362份LIA试剂判断为阴性的标本中,WB试剂有28份(7.7%)为不确定结果(χ^2=15.29,P〈0.001)。在初次检测的341份标本中,确证了17份为HIV抗体阳性,考核试剂检测5份为不确定,12份为阳性。结论 LIA试剂显示出非特异反应暨不确定结果少的优势,可考虑用于HIV抗体的常规确证,并在实际应用中不断改进完善。 展开更多
关键词 艾滋病病毒抗体确证 蛋白印迹试验 条带免疫印迹试验 艾滋病病毒抗体不确定
TEM-1型β内酰胺酶的原核表达纯化及活性验证 预览
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作者 李静 徐建余 +5 位作者 宁年智 刘传杰 黄洁 刘雪超 李涛 王慧 《生物技术通讯》 CAS 2017年第3期319-323,共5页
目的:产β-内酰胺酶是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一,该酶能水解青霉素、头孢菌素、碳青酶烯类等多种抗生素,其中TEM型是发现最早且种类最多的β内酰胺酶。探讨TEM-1型β内酰胺酶原核表达载体的构... 目的:产β-内酰胺酶是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一,该酶能水解青霉素、头孢菌素、碳青酶烯类等多种抗生素,其中TEM型是发现最早且种类最多的β内酰胺酶。探讨TEM-1型β内酰胺酶原核表达载体的构建、酶的纯化及活性验证。方法:利用PCR技术,以大肠杆菌全基因组为模板钓取TEM-1基因,构建pET22b(+)-TEM-1表达质粒,经测序鉴定后,转入大肠杆菌Transetta(DE3),IPTG诱导表达、亲和纯化,并通过抗生素水解实验验证其酶活性。结论:构建了可溶性表达TEM-1的工程菌,通过亲和纯化最终获得纯度达90%以上的TEM-1型β内酰胺酶,该酶可水解氨苄西林。结论:获得了对氨苄西林具有水解活性的TEM-1型β内酰胺酶,并对其进行了酶动力学参数检测,验证其抗生素水解特性,有利于对临床抗生素的合理应用做出指导。 展开更多
关键词 TEM-1 Β内酰胺酶 表达 纯化 酶动力学
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