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斜带石斑鱼( Epinephelus coioides )病毒性神经坏死病毒的纯化分析及检测方法建立 预览
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作者 葛辉 吴丽云 +8 位作者 周宸 黄种持 吴建绍 郑乐云 林琪 杨求华 吴水清 王艺磊 林克冰 《渔业研究》 2019年第2期96-105,共10页
根据GenBank中已有的鱼类病毒性神经坏死病毒(NNV)RNA2基因序列,设计引物,从福建厦门具有典型NNV发病症状的斜带石斑鱼中克隆了RNA2基因的全长序列,并将序列提交到GenBank获得登录号为MF510920,命名为XMNNV。系统进化树分析结果表明XMNN... 根据GenBank中已有的鱼类病毒性神经坏死病毒(NNV)RNA2基因序列,设计引物,从福建厦门具有典型NNV发病症状的斜带石斑鱼中克隆了RNA2基因的全长序列,并将序列提交到GenBank获得登录号为MF510920,命名为XMNNV。系统进化树分析结果表明XMNNV与RGNNV聚类在一起,与SJNNV、BFNNV和TPNNV等其他鱼类神经坏死病毒亲缘关系较远,说明本研究分离得到的XMNNV属于RGNNV基因型。通过超速离心方法对病毒进行提纯,得到了纯化的NNV病毒。电镜观察结果表明,病毒粒子直径20~25nm,结构为正二十面体,与已经报道的NNV结构一致。通过对XMNNV与其它RGNNVRNA2基因进行序列比对,在保守区设计引物,运用RT-PCR方法建立了RGNNV的PCR检测方法,该方法灵敏度高达67copies/μL。纯化的病毒对E11(条纹月鳢细胞系)和大黄鱼肌肉细胞进行感染,结果表明该病毒可以感染这两种鱼类细胞。E11细胞被感染病毒后,细胞出现空泡化,并最终导致细胞分解死亡;大黄鱼肌肉细胞感染后,细胞变圆,慢慢从培养皿壁脱落,最终解体死亡。另外,对感染后细胞进行PCR检测,结果显示为阳性,进一步确定了分离的NNV具有感染这两种细胞的能力。本研究通过电镜观察和PCR检测两种方法确定了患病石斑鱼携带NNV,通过对两种鱼类细胞的感染实验,确定了该病毒具有一定的感染能力。综上,本研究为石斑鱼NNV疾病的诊断提供了有效的方法,对石斑鱼NNV疾病的预防具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 神经坏死病毒 分离纯化 E11细胞系 大黄鱼肌肉细胞
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亚硝酸盐胁迫下发酵甘草对斜带石斑鱼血液指标与抗氧化能力的影响
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作者 翁秦江 李泽鑫 +3 位作者 鲁康乐 王玲 张春晓 宋凯 《饲料研究》 CAS 北大核心 2019年第5期24-27,共4页
试验旨在探究在饲料中添加发酵甘草对亚硝酸盐胁迫下斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)成活率、血液指标与抗氧化能力的影响。分别添加0.25%、0.50%发酵甘草的饲料投喂斜带石斑鱼幼鱼,经过8周的养殖试验后进行亚硝酸盐胁迫试验。结果表... 试验旨在探究在饲料中添加发酵甘草对亚硝酸盐胁迫下斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)成活率、血液指标与抗氧化能力的影响。分别添加0.25%、0.50%发酵甘草的饲料投喂斜带石斑鱼幼鱼,经过8周的养殖试验后进行亚硝酸盐胁迫试验。结果表明,亚硝酸盐胁迫后,添加0.25%发酵甘草组的存活率显著高于对照组(P<0.05)。添加0.25%、0.50%发酵甘草的血浆中的ALT活性均显著降低(P<0.05),血液皮质醇水平与对照组没有显著差异(P>0.05),添加0.50%的发酵甘草能够显著降低血浆中的HSP70含量(P<0.05);饲料中添加发酵甘草能够提高肝脏的SOD与GSH-Px的活性;添加0.25%、0.50%发酵甘草组的GSH-Px、T-AOC活性显著高于对照组(P<0.05),各添加组肝脏的MDA含量均显著降低(P<0.05)。 展开更多
关键词 亚硝酸盐胁迫 斜带石斑鱼 发酵甘草
拟穴青蟹不同发育时期胚胎基因表达的内参基因的筛选 预览
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作者 吕梁 张子平 +2 位作者 万海付 孙玉龙 王艺磊 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期457-464,共8页
为获得适用于研究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)不同发育时期胚胎基因表达的内参基因,本研究采用 3 个内参基因筛选软件 geNorm、NormFinder 及 BestKeeper 对微管蛋白α1A(Tuba1a)、核糖体蛋白 L13(Rpl13)、泛素(UBQ)、核糖体蛋白 S6... 为获得适用于研究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)不同发育时期胚胎基因表达的内参基因,本研究采用 3 个内参基因筛选软件 geNorm、NormFinder 及 BestKeeper 对微管蛋白α1A(Tuba1a)、核糖体蛋白 L13(Rpl13)、泛素(UBQ)、核糖体蛋白 S6 激酶(Rps6)、精氨酸激酶(Ak)、3-磷酸甘油脱氢酶(gapdh)、28S 核糖体 RNA(28S)、18S 核糖体 RNA(18S)和延伸因子 1A基因(EF-1α)等 9个常用候选内参基因在拟穴青蟹不同发育时期胚胎的表达稳定性进行分析。geNorm 分析表明, EF-1α和 Rpl13 的表达稳定性最高,并且采用 2 个内参基因同时校正目标基因的定量结果可以达到最优效果;NormFinder分析表明, gapdh和 EF-1α是 9个候选内参基因中表达最稳定的;BestKeeper分析表明, gapdh 的标准偏差和变异系数是 9 个候选基因中最低的。综合 3 个内参基因筛选软件,可以选用 EF-1α,或选用 EF-1α和 gapdh 双内参同时校正拟穴青蟹不同胚胎发育时期各基因的表达情况。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 荧光定量 PCR 内参基因 稳定性
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饲料中添加芽孢杆菌细胞壁对斜带石斑鱼生长、消化酶活性及免疫功能的影响 被引量:1
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作者 胡曦 杨红玲 孙云章 《饲料与畜牧》 2018年第5期45-48,共4页
以初始体重(7.3g)的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)为研究对象,研究饲料中添加芽孢杆菌全细胞壁对其生长、消化酶活性及免疫功能的影响。以豆粕、鱼粉、鱼油和面粉为主要原料配制基础饲料。试验组分别在基础饲料的基础上分别添... 以初始体重(7.3g)的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)为研究对象,研究饲料中添加芽孢杆菌全细胞壁对其生长、消化酶活性及免疫功能的影响。以豆粕、鱼粉、鱼油和面粉为主要原料配制基础饲料。试验组分别在基础饲料的基础上分别添加1.0×10^8cfu/g活性、热灭活芽孢杆菌以及相同数量菌体提取的全细胞壁,进行为期60d的养殖试验。结果表明,细胞壁组中的末均重、增重率和特定生长率均显著高于其他组,同时饲料系数显著下降(P〈0.05).但各组存活率均无明显差异。细胞壁组淀粉酶和脂肪酶活性显著高于对照组(P〉0.05)。全细胞壁对石斑鱼免疫功能也具有较好的改善效果,酸性磷酸酶、IgM、补体c3和总超氧化物歧化酶均明显高于对照组(P〈0.05)。以上结果说明.在本试验条件下.短小芽孢杆菌全细胞壁能显著提高斜带石斑鱼的生长性能、消化酶活性和免疫功能。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 芽孢杆菌 全细胞壁 生长性能 消化酶 免疫功能
市售三种食用贝类可培养细菌多样性研究 预览
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作者 张媛 徐晓津 +2 位作者 黄力行 赵玲敏 鄢庆枇 《集美大学学报:自然科学版》 CAS 2018年第5期327-331,共5页
为了解厦门市售三种食用贝类中可培养细菌的多样性,用自制培养基培养牡蛎、缢蛏、疣荔枝螺样品中的细菌,并根据16S rDNA测序结果,对所分离的细菌进行鉴定并进干亍系统发育分析。研究结果显示:从牡蛎中分离得到的35株细菌分属14个种... 为了解厦门市售三种食用贝类中可培养细菌的多样性,用自制培养基培养牡蛎、缢蛏、疣荔枝螺样品中的细菌,并根据16S rDNA测序结果,对所分离的细菌进行鉴定并进干亍系统发育分析。研究结果显示:从牡蛎中分离得到的35株细菌分属14个种,从缢蛏中分离得到的32株细菌分属16个种,从疣荔枝螺中分离得到的31株细菌分属7个种。结果表明市售牡蛎、缢蛏、疣荔枝螺体内含有较为丰富的细菌种类,而且分离得到的细菌(如解鸟氨酸拉乌尔菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等)大多数具有致病性,对食用人群具有潜在威胁,不建议直接生食或食用加工不当的贝类产品。 展开更多
关键词 牡蛎 缢蛏 疣荔枝螺 细菌多样性 致病性
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饲料中n-3高不饱和脂肪酸、降药残添加剂和虾青素添加水平对大黄鱼亲鱼繁殖性能的影响
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作者 席峰 《饲料研究》 CAS 北大核心 2018年第1期66-70,共5页
试验采用3因素3水平正交设计法研究饲料中n-3高不饱和脂肪酸(鱼油∶棕榈油混合比为2%∶2%、3%∶1%和4%∶0%)、降药残添加剂(0.3%、0.6%和0.9%)和虾青素(50、100和150 mg/kg)对大黄鱼繁殖性能的影响。试验亲鱼放养于4 m×4 m&#... 试验采用3因素3水平正交设计法研究饲料中n-3高不饱和脂肪酸(鱼油∶棕榈油混合比为2%∶2%、3%∶1%和4%∶0%)、降药残添加剂(0.3%、0.6%和0.9%)和虾青素(50、100和150 mg/kg)对大黄鱼繁殖性能的影响。试验亲鱼放养于4 m×4 m×4 m海上网箱中,分别投喂9种试验饲料(投喂时粉料与鲜杂鱼肉糜按1∶1混合制成软颗粒饲料后进行投喂)。饲养60 d后,转入室内水泥池进行催产试验,并统计各组亲鱼首次注射催产激素后3 d期间的浮性卵量、浮卵率、受精率、孵化率、初孵仔鱼畸形率、开口仔鱼存活率和仔鱼饥饿忍耐指数。结果表明,鱼油棕榈油为2%∶2%试验组与4%∶0%试验组浮卵量差异显著(P〈0.05)。随着虾青素添加水平的升高,大黄鱼受精率显著提高,其中100和150 mg/kg试验组显著高于50mg/kg试验组(P〈0.05),添加降药残添加剂对亲鱼的繁殖性能无显著影响(P〉0.05)。 展开更多
关键词 n-3高不饱和脂肪酸 降药残添加剂 虾青素 繁殖性能 大黄鱼
锯齿新米虾室内玻璃缸养殖技术 预览
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作者 李朝琪 张丽莉 +1 位作者 黄世玉 王国栋 《科学养鱼》 2018年第5期84-85,共2页
锯齿新米虾,俗称樱花虾,属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、匙指虾科、新米虾属,学名为Neocaridina denticulate,广泛分布于亚洲淡水水域。能够忍受较大范围的p H变化(6.5~8.0)和温度变化(4~30℃),并且性情温顺不会相互蚕食,容易... 锯齿新米虾,俗称樱花虾,属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、匙指虾科、新米虾属,学名为Neocaridina denticulate,广泛分布于亚洲淡水水域。能够忍受较大范围的p H变化(6.5~8.0)和温度变化(4~30℃),并且性情温顺不会相互蚕食,容易在室内小水体养殖。笔者养殖锯齿新米虾已超过3年,现将小型玻璃缸养殖过程和经验教训总结如下,希望为锯齿新米虾爱好者提供参考。为了描述方便下文将锯齿新米虾称为米虾。 展开更多
关键词 匙指虾科 养殖技术 玻璃缸 锯齿 室内 节肢动物门 小水体养殖 新米虾属
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染色体的识别及核型特征分析 预览
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作者 邹禹 郑娇 +3 位作者 张静 刘贤德 王志勇 蔡明夷 《厦门大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第2期208-213,共6页
(Miichthys miiuy)是我国南方重要的海水养殖种类.针对细胞遗传标记匮乏的问题,利用荧光染色、硝酸银染色(银染)、荧光原位杂交(FISH)等方法分析了的核型特征,发现的核型含24对端部着丝粒染色体(2n=48t),染色体经碘化丙啶... (Miichthys miiuy)是我国南方重要的海水养殖种类.针对细胞遗传标记匮乏的问题,利用荧光染色、硝酸银染色(银染)、荧光原位杂交(FISH)等方法分析了的核型特征,发现的核型含24对端部着丝粒染色体(2n=48t),染色体经碘化丙啶(PI)染色后,荧光强度呈现特定的二维分布模式;利用图像分析软件可转化为更直观的3D-光强度图,为染色体的识别、配对提供了丰富的信息.18S rDNA和5S rDNA双色FISH结果显示,的18S rDNA和5S rDNA均只有1对位点,分别位于1号染色体的近着丝粒区域和2号染色体的着丝粒区域.银染显示的核仁组织区域(NOR)和4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色显示的暗带,均与18S rDNA位点的位置相同.的端粒序列FISH信号分布于所有染色体的两端,未发现臂间端粒信号.综上,通过PI染色和图像分析软件解决了染色体识别困难的问题,并使用FISH方法分析了的核型特征,研究结果丰富了的细胞遗传学标记,也为研究石首鱼类染色体进化提供了基础数据. 展开更多
关键词 核型 荧光原位杂交 核糖体DNA 端粒序列
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织锦巴非蛤不同组织及性别总类胡萝卜素含量比较分析 预览
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作者 邓素贞 李庆昌 +4 位作者 韩芳 张晓林 蔡明夷 张静 刘贤德 《海洋通报》 CSCD 北大核心 2018年第2期165-168,208共5页
本文分析了织锦巴非蛤(Paphia textzle)斧足、外套膜、闭壳肌、鳃、性腺5个组织以及不同性别的总类胡萝卜素含量(TCC),结果显示:织锦巴非蛤5个组织的总类胡萝卜素含量除鳃与性腺之间没有显著性差异之外(P>0.05),其它各组织之间差异... 本文分析了织锦巴非蛤(Paphia textzle)斧足、外套膜、闭壳肌、鳃、性腺5个组织以及不同性别的总类胡萝卜素含量(TCC),结果显示:织锦巴非蛤5个组织的总类胡萝卜素含量除鳃与性腺之间没有显著性差异之外(P>0.05),其它各组织之间差异均达到极显著水平(P<0.01),各组织总类胡萝卜素含量从高到低依次为:斧足>性腺>鳃>外套膜>闭壳肌;不同性别织锦巴非蛤的斧足、外套膜、闭壳肌、鳃中总类胡萝卜素的含量没有显著差异(P>0.05),但精巢与卵巢中的总类胡罗卜素含量有极显著性差异(P<0.01),精巢中总类胡萝卜素的含量高于卵巢。本研究结果初步揭示了织锦巴非蛤中总类胡萝卜素含量的分布规律。 展开更多
关键词 织锦巴非蛤 组织 性别 总类胡萝卜素
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拟穴青蟹Sp-Sox14基因在胚胎发育和性腺发育过程中的表达 预览
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作者 梁可蓥 张子平 +2 位作者 廖佳倩 邹志华 王艺磊 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期204-215,共12页
为了解Sox14基因在拟穴青蟹胚胎发育和性腺发育过程中可能起到的调控作用,实验从青蟹性腺转录组数据库中得到全长为2558 bp的Sp-Sox14 c DNA序列,该序列编码一个包含427个氨基酸的蛋白,包含一个HMG-box。进化树分析表明,Sp-Sox14与其他... 为了解Sox14基因在拟穴青蟹胚胎发育和性腺发育过程中可能起到的调控作用,实验从青蟹性腺转录组数据库中得到全长为2558 bp的Sp-Sox14 c DNA序列,该序列编码一个包含427个氨基酸的蛋白,包含一个HMG-box。进化树分析表明,Sp-Sox14与其他节肢动物的Sox14亲缘关系较近。实时定量PCR结果显示,Sp-Sox14在成蟹雌雄各组织中均有不同程度的表达,其中在卵巢和雄蟹心脏中的表达量最高。在胚胎发育过程中,SpSox14在复眼色素形成期的表达量显著高于其他时期。在性腺不同发育阶段,Sp-Sox14在卵黄发生前期(O2)的表达量显著高于卵巢其他发育阶段;而在精巢发育过程中,其表达量在成熟精子期(T3)高于精母细胞期(T1)和精子细胞期(T2)。推测其参与卵巢的前期发育以及精子成熟等过程。整胚原位杂交结果显示,Sp-Sox14在青蟹胚胎复眼色素形成期阳性信号定位于头部以及鄂足附近,在近孵化期定位于复眼附近,幼体孵出期则在头部仍有少量信号,暗示其与青蟹神经器官的形成以及体节附肢的发生有关。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 Sp-Sox14 胚胎发育 性腺发育 基因表达
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大黄鱼性别特异SNP标记的开发与验证 预览
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作者 林晓煜 肖世俊 +1 位作者 李完波 王志勇 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期1329-1337,共9页
大黄鱼是我国养殖量最大的海水经济鱼类,其雌鱼生长显著快于雄鱼,但两性的外部形态差异不明显,也没有异形性染色体,依靠传统方法无法对其活体准确进行生理性别和遗传性别的判别与鉴定,需要开发性别特异的分子标记。本研究从2尾雌鱼和2... 大黄鱼是我国养殖量最大的海水经济鱼类,其雌鱼生长显著快于雄鱼,但两性的外部形态差异不明显,也没有异形性染色体,依靠传统方法无法对其活体准确进行生理性别和遗传性别的判别与鉴定,需要开发性别特异的分子标记。本研究从2尾雌鱼和2尾雄鱼、以及分别由50雌鱼与50尾雄鱼组成的2个混合样品的基因组重测序数据比较中筛选与性别显著关联的SNP位点,对其中11个位点分别设计引物在15尾雌鱼和15尾雄鱼中扩增出PCR产物进行Sanger测序验证,鉴定出1个与性别完全连锁的位点(SNP6,15尾雌鱼均为纯合、15尾雄鱼均为杂合)。然后,设计等位基因特异性PCR引物,其中包括2条雌性与雄性通用引物和1条雄性特异引物,在闽—粤东族与岱衢族大黄鱼合计近2200个个体中进行扩增,结果在全部雌鱼中都只扩增出1个348bp的条带,而在全部雄鱼中还扩增出1个194bp的Y染色体特异条带,检出率达到100%。研究表明,大黄鱼属于XX♀-XY♂类型的性别决定。本研究鉴定出一个雄性特异SNP标记,并建立了一种新的大黄鱼遗传性别鉴定技术,为大黄鱼单性育种、基因组选择育种和性别决定分子机制研究提供了重要的技术手段。 展开更多
关键词 大黄鱼 性别特异SNP 遗传性别鉴定 AS-PCR
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大黄鱼高温适应的转录组学分析 预览
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作者 邓素贞 韩兆方 +4 位作者 陈小明 李庆昌 肖世俊 李佳凯 刘贤德 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期1673-1683,共11页
为了探究大黄鱼高温胁迫条件下基因表达水平的变化,实验利用Illumina Hiseq 2500的125 pair-ended测序模式分别对大黄鱼高温处理组和常温对照组进行了转录组测序。对照组(3个生物学重复)和高温处理组(3个生物学重复)分别获得15.28和... 为了探究大黄鱼高温胁迫条件下基因表达水平的变化,实验利用Illumina Hiseq 2500的125 pair-ended测序模式分别对大黄鱼高温处理组和常温对照组进行了转录组测序。对照组(3个生物学重复)和高温处理组(3个生物学重复)分别获得15.28和13.92 Gb测序数据,GC含量平均值约为51%。过滤后的高质量测序reads使用Bowtie2软件比对到大黄鱼参考转录组序列上估计基因表达量,进而进行基因表达差异统计学检验。以常温对照组为参比,高温处理组中阈值设为|log2(FC)|〉2和FDR〈0.05,共检测到1 259条显著差异表达基因。其中,821条基因为高表达,438条基因为低表达。随机选取12条差异表达基因,运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行了验证,结果证实转录组分析可靠。进一步将所有差异表达的基因进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,结果发现大量差异表达基因的功能与氧化还原反应、蛋白质折叠和去折叠、糖和脂代谢以及某些疾病的发生相关。该研究结果为下一步深入研究大黄鱼高温适应的调控机制提供了重要的参考材料。 展开更多
关键词 大黄鱼 转录组测序 差异表达基因 QRT-PCR
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杂色鲍一种编码CRAD功能域基因的克隆及其在发育和应激中的表达 预览
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作者 张丽莉 和四梅 +1 位作者 王国栋 王艺磊 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1520-1530,共11页
为探讨Caspase募集功能域(CRAD)在鲍发育和应激中的作用,实验通过比对杂色鲍转录组序列和RACE扩增的方法,获得了杂色鲍一条含CRAD的基因全长cDNA,命名为HdCRAD;采用实时定量PCR的方法获得了该基因在发育和应激中的表达谱。结果显示,HdC... 为探讨Caspase募集功能域(CRAD)在鲍发育和应激中的作用,实验通过比对杂色鲍转录组序列和RACE扩增的方法,获得了杂色鲍一条含CRAD的基因全长cDNA,命名为HdCRAD;采用实时定量PCR的方法获得了该基因在发育和应激中的表达谱。结果显示,HdCRAD的cDNA全长1 371 bp,开放阅读框735 bp,编码244个氨基酸。编码蛋白具有保守的CRAD功能域。该基因在各检测组织中均可表达,在黏液腺中表达量最高;在发育各阶段也均有表达,面盘幼虫晚期表达量最高。在细菌感染、高温或缺氧应激处理后,血细胞的HdCRAD表达水平均有显著性变化。在担轮幼虫时期,RNA干扰该基因会显著提高幼虫畸形率;幼虫的caspase-8和DAD1的表达水平会显著上升,而caspase-3的表达水平会下降。研究表明,该基因参与了鲍幼虫发育过程;在成体免疫、耐高温和抗低氧中发挥了一定作用。 展开更多
关键词 杂色鲍 Caspase募集功能域(CRAD) 基因表达 发育 应激 RNAi
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叶黄素和虾青素对大黄鱼体色及抗氧化能力的影响 预览
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作者 韩星星 王秋荣 +1 位作者 叶坤 王志勇 《渔业研究》 2018年第2期104-110,共7页
为了探讨饲料色素对大黄鱼成鱼体色及其抗氧化能力的影响,在基础饲料中分别添加0mg/kg(对照组D1)、100mg/kg(D2)、200mg/kg(D3)、300mg/kg(D4)叶黄素和虾青素(1∶1)混合色素配制成4种等氮等能饲料,选择平均体质量为(365.54±5.83)g... 为了探讨饲料色素对大黄鱼成鱼体色及其抗氧化能力的影响,在基础饲料中分别添加0mg/kg(对照组D1)、100mg/kg(D2)、200mg/kg(D3)、300mg/kg(D4)叶黄素和虾青素(1∶1)混合色素配制成4种等氮等能饲料,选择平均体质量为(365.54±5.83)g的大黄鱼1800尾,随机分为4组,每组设置3个重复,每个重复150尾,进行为期60d投喂试验。结果表明,投喂30d后,色素添加组大黄鱼背部和腹部皮肤的黄色值(b*)显著高于对照组(P<0.05);实验结束时,除D2组的大黄鱼腹部皮肤的红色值(a*)显著高于其他组(P<0.05)外,各组之间大黄鱼背部及腹部皮肤亮度值(L*)和红色值(a*)均无显著性差异(P>0.05),各色素添加组的大黄鱼背部和腹部皮肤的黄色值(b*)无显著性差异(P>0.05),但均显著高于对照组(P<0.05);大黄鱼肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均随着色素添加水平的上升而升高,丙二醛(MDA)含量随着色素添加水平的上升而降低。因此,在本试验条件下,饲料中添加叶黄素和虾青素(1∶1)混合色素可以改善大黄鱼成鱼体色及提高其抗氧化能力,综上并考虑饲料成本,建议混合色素添加量为100~200mg/kg。 展开更多
关键词 大黄鱼 叶黄素 虾青素 体色 抗氧化能力
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大黄鱼Lc-UBE2D4基因的克隆及其表达分析 预览
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作者 韩坤煌 周鹏 +2 位作者 邹志华 张子平 王艺磊 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2017年第11期166-173,共8页
泛素缀合酶E2是蛋白质泛素化系统中的关键酶,对降解的靶蛋白的特异性选择起决定性作用,参与了细胞内80%以上的蛋白降解,对于细胞周期调控、细胞凋亡、基因转录及表达等生理活动具有重要的调控作用。本研究从已构建的大黄鱼(Larimichthy... 泛素缀合酶E2是蛋白质泛素化系统中的关键酶,对降解的靶蛋白的特异性选择起决定性作用,参与了细胞内80%以上的蛋白降解,对于细胞周期调控、细胞凋亡、基因转录及表达等生理活动具有重要的调控作用。本研究从已构建的大黄鱼(Larimichthys crocea)性腺线性化c DNA文库中筛选出泛素缀合酶(Ubiquitin-conjugating enzymes E2 D4,Lc-UBE2D4)同源基因片段,利用SMART-RACE方法克隆出其全长c DNA序列,并利用荧光定量PCR技术检测其在大黄鱼不同组织和性腺不同发育阶段的差异表达情况。结果显示,Lc-UBE2D4基因全长798 bp,其中ORF为441 bp,可编码147个氨基酸,含有一段典型的泛素缀合酶UBC结构域及其半胱氨酸激活位点。定量PCR结果分析发现,Lc-UBE2D4在脾脏和性腺中表达量较高,在脾脏和精巢的表达水平极显著高于其他各组织(P〈0.01),同时在卵巢中的表达亦显著高于除脾脏和精巢外的其他各组织(P〈0.05);通过对Lc-UBE2D4基因在性腺不同发育阶段表达模式的研究发现,该基因在精巢3个时期中的表达水平显著高于各发育阶段的卵巢(P〈0.05),推测Lc-UBE2D4基因在大黄鱼性腺发育过程中起着重要的调节作用,脾脏中的高表达也暗示其可能参与免疫机能。 展开更多
关键词 泛素化 Lc-UBE2D4 大黄鱼 组织表达 性腺发育
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共生珊瑚异养营养研究进展
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作者 杨阳楚翘 洪文霆 王淑红 《应用生态学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期4143-4149,共7页
共生珊瑚的异养营养指有虫黄藻共生的珊瑚在同化作用过程中,除通过虫黄藻光合作用获取营养之外,还可以从外界环境中直接摄取现成的有机物,经消化吸收后转变为自身的组成物质或储存为能量.国内外异地养殖或繁育虫黄藻共生珊瑚的研究多集... 共生珊瑚的异养营养指有虫黄藻共生的珊瑚在同化作用过程中,除通过虫黄藻光合作用获取营养之外,还可以从外界环境中直接摄取现成的有机物,经消化吸收后转变为自身的组成物质或储存为能量.国内外异地养殖或繁育虫黄藻共生珊瑚的研究多集中在光照、水流、水质等条件对珊瑚生长的影响,对共生珊瑚异养营养需求与供应方面的关注较少.本文从共生珊瑚异养营养来源、影响共生珊瑚异养营养供应的因素以及研究手段等方面,对国内外研究进展进行了综述,探讨异养营养供应对共生珊瑚的意义.总的来说,目前共生珊瑚异养营养的研究尚处于起步阶段,不论是研究方法或者珊瑚选择摄食的内在机制,都需要深入探究. 展开更多
关键词 共生珊瑚 异养营养 分子营养标记
大黄鱼脾酪氨酸激酶的克隆与表达分析 预览
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作者 王小龙 叶坤 +1 位作者 王志勇 韩芳 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2017年第6期662-668,共7页
克隆大黄鱼脾酪氨酸激酶基因(Larimichthys crocea spleen tyrosine kinase,LcSyk)并分析其结构,通过荧光定量PCR技术分析该基因的组织表达谱以及受LPS、PolyI:C和灭活副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)免疫刺激后的表达变化规律。... 克隆大黄鱼脾酪氨酸激酶基因(Larimichthys crocea spleen tyrosine kinase,LcSyk)并分析其结构,通过荧光定量PCR技术分析该基因的组织表达谱以及受LPS、PolyI:C和灭活副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)免疫刺激后的表达变化规律。结果显示:LcSyk基因cDNA全长2761bp,其中开放阅读框为1851bp,编码616个氨基酸,预测相对分子质量为70527,理论等电点为8.13;LcSyk在所检测到的大黄鱼组织(心脏、肝脏、脾脏、头肾、中肾、鳃、肠、胃、脑)中均有表达,属广谱型表达;不同组织间LcSyk的表达量存在差异,其中在头肾中的表达量最高,在中肾和脾脏中的次之,在胃中的表达量最低;大黄鱼受到LPS、PolyI:C和灭活副溶血弧菌免疫刺激后,脾脏、头肾和肝脏中LcSyk基因的表达水平明显上调,表明LcSyk在大黄鱼抵御病毒和细菌病原的免疫机制中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 大黄鱼 脾酪氨酸激酶 组织表达谱 副溶血弧菌 免疫刺激
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日本囊对虾组织蛋白酶B基因的原核表达及纯化 预览
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作者 黄媛 王艺磊 +4 位作者 张子平 岳亮 冯建军 郭松林 林鹏 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期86-92,共7页
采用原核表达的方法得到日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)组织蛋白酶B基因的重组蛋白。以日本囊对虾卵巢组织为试验材料,采用双标签(GST和His)的方法,用带有EcoR Ⅰ和NotⅠ酶切位点以及6×His-tag的特异引物扩增Cathepsin... 采用原核表达的方法得到日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)组织蛋白酶B基因的重组蛋白。以日本囊对虾卵巢组织为试验材料,采用双标签(GST和His)的方法,用带有EcoR Ⅰ和NotⅠ酶切位点以及6×His-tag的特异引物扩增CathepsinB的开放阅读框,并连接至表达质粒pGEX-4T-2中。将重组表达质粒导入大肠杆菌BL21中,在30℃条件下,用终浓度为1mmol/L的IPTG(isopropylp β-1-thiogalactopyranoside)诱导5h得到最佳诱导量,His亲和柱进行纯化,纯化蛋白依次于8、6、4、2、1、0mol/L尿素缓冲液中梯度透析,得到复性后可溶于水的重组蛋白,经SDS-PAGE检测,得到单一条带,其分子质量约为63ku。取冻干后的蛋白制备多克隆抗体,抗体效价达50000,经Western blot检测,同样可在63ku处得到该条带,表明制备的组织蛋白酶B(CB)多克隆抗体具有特异性,该抗体可特异识别CB蛋白。 展开更多
关键词 日本囊对虾 卵巢 组织蛋白酶B基因 原核表达 多克隆抗体
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时间分辨荧光免疫分析的新进展 预览 被引量:2
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作者 辛甜甜 郭松林 +2 位作者 王艺磊 冯建军 林鹏 《理化检验:化学分册》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期112-118,共7页
对2003-2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并... 对2003-2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TRFIA的发展前景进行了展望(引用文献82篇)。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 荧光共振能量转移-TRFIA 酶放大-TRFIA 纳米颗粒-TRFIA
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核糖体DNA在厦门白姑鱼和大黄鱼染色体上的比较定位 预览 被引量:2
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作者 廖梦香 郑娇 +3 位作者 王志勇 张静 刘贤德 蔡明夷 《水产学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1338-1344,共7页
为了探究石首鱼核型微观结构上的变化,实验利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)比较定位了厦门白姑鱼和大黄鱼18S rDNA和5S rDNA的分布特征。结果表明,厦门白姑鱼与大黄鱼在宏观核型以及18S rDNA和5S rDNA染... 为了探究石首鱼核型微观结构上的变化,实验利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)比较定位了厦门白姑鱼和大黄鱼18S rDNA和5S rDNA的分布特征。结果表明,厦门白姑鱼与大黄鱼在宏观核型以及18S rDNA和5S rDNA染色体分布等3个方面均存在较大差异。厦门白姑鱼的核型公式为2n=48t,臂数FN=48;单对18S rDNA信号分布于1号染色体臂间;单对5S rDNA信号分布于3号染色体近着丝粒区域。大黄鱼的核型公式为2n=2sm+4st+42t,臂数FN=50;单对18S rDNA信号分布于18号染色体短臂端部;5S rDNA信号9~11对,除一对分布于臂间外,其余全部分布于着丝粒端或短臂端部。综合其他石首鱼核型数据可以推断:厦门白姑鱼呈现原始核型特征,而大黄鱼核型是原始核型经染色体重排和/或转座衍生的特化核型;石首鱼宏观核型和18S rDNA分布模式总体保守,仅少数物种存在变化,而5S rDNA位点的分布模式存在高度的种间变化。本研究首次揭示了石首鱼物种间核型微观结构的变化,为进一步开展石首鱼分子细胞遗传学研究奠定了基础。 展开更多
关键词 厦门白姑鱼 大黄鱼 染色体 荧光原位杂交 RDNA
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