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动物体细胞克隆与转基因技术科普需求及认知度调研分析 预览
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作者 庄站伟 徐铮 +1 位作者 吴霄 马晓莉 《现代农业科技》 2019年第16期240-241,243共3页
当前,社会上存在着对“克隆”“转基因”的误解。为使民众对克隆和转基因有科学性的认知,本研究采取问卷调查的方式,获取公众对当前体细胞克隆和转基因技术的认知水平与态度的数据,以期为相关的科普活动提供参考。
关键词 体细胞克隆 转基因 问卷调查 科普宣传
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基于音频特征和模糊神经网络的禽流感病鸡检测 预览
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作者 张铁民 黄俊端 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期168-174,共7页
为了能在早期发现禽流感并进行预防,该文提出了一种基于音频特征和模糊神经网络的禽流感病鸡检测方法。依据获取的家禽音频和环境及其他噪声的谱熵差别大的特点,在复杂环境中分析并提取出鸡声,丢弃非鸡声段,对提取的鸡声进行分析及处理... 为了能在早期发现禽流感并进行预防,该文提出了一种基于音频特征和模糊神经网络的禽流感病鸡检测方法。依据获取的家禽音频和环境及其他噪声的谱熵差别大的特点,在复杂环境中分析并提取出鸡声,丢弃非鸡声段,对提取的鸡声进行分析及处理,计算短时过零率、短时能量以及短时过零率与短时能量混合特征,用作判别患禽流感的病鸡和健康鸡的依据。利用T-S模糊神经网络,对提取出来的家禽音频特征进行训练和识别,试验表明隶属度函数为钟形函数、隶属度个数为2时模糊神经网络对试验提取的3个鸡声特征组成的3组测试集的敏感性分别为75.47%、80.39%和76.92%,特异性分别为80.85%、79.59%和72.92%,正确识别率分别为78%、80%和75%。该研究为规模化家禽养殖场及大型家禽流通市场的禽流感病禽识别提供一套快速、高效检测方法。 展开更多
关键词 神经网络 识别 提取 谱熵 短时过零率 短时能量 鸡病检测
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微生物源果胶酶在猪PK15细胞中异源表达及其酶学性质分析 预览
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作者 莫健新 王豪强 +3 位作者 黄广燕 蔡更元 吴珍芳 张献伟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期736-745,共10页
果胶是植物细胞壁组分之一,是畜禽饲料中主要的抗营养因子,影响畜禽对日粮中能量和氮的利用效率。果胶酶在自然界中广泛存在于细菌、酵母和丝状真菌等微生物中,对解除果胶的抗营养作用、提高饲料利用率具有良好的效果。为了探索在猪细... 果胶是植物细胞壁组分之一,是畜禽饲料中主要的抗营养因子,影响畜禽对日粮中能量和氮的利用效率。果胶酶在自然界中广泛存在于细菌、酵母和丝状真菌等微生物中,对解除果胶的抗营养作用、提高饲料利用率具有良好的效果。为了探索在猪细胞中表达微生物源果胶酶基因的可行性,本研究通过脂质体转染法将微生物源果胶酶基因pg5a、pgI、pga3A和pgaA导入猪PK15细胞中进行异源表达,利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法测定这4种基因编码果胶酶的酶活力。结果显示,4种果胶酶基因均能在猪PK15细胞中转录出mRNA,但只有pg5a和pgI适应猪细胞表达系统。其中,果胶酶PG5A的最高酶活为0.95 U/mL,最适作用pH为pH4.0,在pH4.6~6.0范围内维持46%以上的酶活;PGI在pH5.0处获得最高酶活,为0.30 U/mL,在pH4.0~6.0范围内维持35%以上的酶活。消化蛋白酶耐受实验结果显示,PG5A和PGI对胃蛋白酶和胰蛋白酶均有较强的耐受能力,用1 mg/mL的猪胃蛋白酶处理2 h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为76%和71%;用1 mg/mL的猪胰蛋白酶处理2 h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为44%和93%。综上所述,果胶酶基因pg5a和pgI能在猪细胞中正常表达,其编码的果胶酶对猪消化道pH条件和消化蛋白酶具有较强的耐受能力,可作为制备转果胶酶基因猪的候选基因。 展开更多
关键词 果胶酶 果胶 抗营养因子 转基因
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基于校企合作的农业专业研究生培养浅探 预览
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作者 郑恩琴 杨杰 付晓兰 《文教资料》 2018年第12期99-100,共2页
农业专业研究生培养是我国研究生教育的重要组成部分,对我国农业现代化转型具有重要的作用。校企合作则是培养综合型、应用型人才的重要手段,在近年来的农业专业研究生培养中开始广泛采用这种模式,但由于我国农业专业学位研究生教育起... 农业专业研究生培养是我国研究生教育的重要组成部分,对我国农业现代化转型具有重要的作用。校企合作则是培养综合型、应用型人才的重要手段,在近年来的农业专业研究生培养中开始广泛采用这种模式,但由于我国农业专业学位研究生教育起步较晚,与之相关的校企业合作研究还不够系统和深入,导致其发展中存在一些问题。基于此,本文分析了基于校企合作的农业专业研究生培养存在的问题,提出了相应的解决策略,以期为农业专业研究生培养工作提供借鉴与参考。 展开更多
关键词 校企合作 农业专业 研究生教育
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不同电转仪的电转参数、质粒用量和拓扑结构对猪胎儿成纤维细胞转染效率的影响 预览 被引量:2
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作者 钟翠丽 李国玲 +5 位作者 莫健新 全绒 王豪强 李紫聪 吴珍芳 张献伟 《遗传》 CSCD 北大核心 2017年第10期930-938,共9页
为获得猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts,PFFs)最佳的电转染效率,本研究利用荧光激活细胞分选技术(fluorescence activated cell sorting,FACS)辅助优化NEPA 21和Nucleofector?2b两种电转仪电转染PFFs细胞的参数,比较不同质... 为获得猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts,PFFs)最佳的电转染效率,本研究利用荧光激活细胞分选技术(fluorescence activated cell sorting,FACS)辅助优化NEPA 21和Nucleofector?2b两种电转仪电转染PFFs细胞的参数,比较不同质粒用量和拓扑结构在ECM?830、NEPA 21和Nucleofector?2b中的转染效率。结果显示:NEPA 21电转PFFs的最佳穿孔参数为脉冲电压200 V,脉冲长度3 ms,脉冲间隔50 ms,脉冲次数3次,脉冲电压衰减幅度10%;Nucleofector?2b在U-023的转染参数下达到最高转染效率。ECM?830和Nucleofector?2b的最适质粒用量都为10μg,而NEPA 21为8μg;超螺旋质粒比线性化质粒的转染效率更高,且3种仪器中Nucleofector?2b转染效果最佳。本研究综合考虑电转仪、电转参数、质粒用量和拓扑结构的影响因素以优化PFFs的电转条件,为高效制备转基因猪及基因编辑猪的研究奠定基础。 展开更多
关键词 电转染 猪胎儿成纤维细胞 ECM?830 NEPA 21 Nucleofector?2b
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猪圆环病毒2型ORF2基因在Vero细胞中真核表达的研究
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作者 马晓莉 林彦星 +4 位作者 董建国 刘燕玲 刘清神 宋长绪 徐铮 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第11期12-15,19,250共6页
为了研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)ORF2基因在Vero细胞中的表达情况,试验利用PCR方法将扩增的PCV-2 ORF2基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建重组表达质粒pcDNA-ORF2,测序后对4株毒株的ORF2基因... 为了研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)ORF2基因在Vero细胞中的表达情况,试验利用PCR方法将扩增的PCV-2 ORF2基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建重组表达质粒pcDNA-ORF2,测序后对4株毒株的ORF2基因进行核苷酸序列和推导氨基酸序列同源性比较分析,并分别采用磷酸钙法和脂质体法将重组表达质粒pcDNA-ORF2导入哺乳动物Vero细胞内,通过间接免疫荧光试验验证重组表达质粒在Vero细胞中的表达情况。结果表明:PCR方法成功扩增出4株PCV-2毒株的ORF2基因;成功构建出重组表达质粒pcDNA-ORF2;4株毒株的ORF2基因核苷酸序列同源性在98.6%-99.1%之间,推导氨基酸序列的同源性在97.4%-98.7%之间;间接免疫荧光试验检测到Vero细胞内发出绿色荧光。说明重组表达质粒pcDNA-ORF2在Vero细胞中得到了正确表达。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ORF2基因 VERO细胞 真核表达载体 重组表达质粒 间接免疫荧光试验
猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的表达与纯化
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作者 张鹏飞 申翰钦 +4 位作者 刘相聪 刘燕玲 张乐宜 王磊 宋长绪 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第22期73-76,共4页
为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2(DE3),IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重... 为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2(DE3),IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重组表达的蛋白用Ni-IDA琼脂糖纯化树脂纯化,Western-blot及攻毒试验验证表达蛋白质的生物学功能。结果表明:成功构建了pCold TF-ExhA重组质粒,并且脱落毒素ExhA主要以可溶性形式表达,表达纯化的脱落毒素ExhA具有完整的生物学活性。说明表达的脱落毒素ExhA具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 葡萄球菌 脱落毒素ExhA 渗出性皮炎 蛋白表达 WESTERN-BLOT
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