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消癌解毒方联合顺铂通过调控组蛋白去甲基化酶抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长 被引量:1
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作者 孙浩 沈卫星 +4 位作者 徐长亮 孙东东 谭佳妮 许惠琴 程海波 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第13期78-84,共7页
目的:观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法:BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂(2 mg·kg-1)、消癌解毒方(1×104mg·kg-1)及两者联合用药进行治疗,给药期... 目的:观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法:BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂(2 mg·kg-1)、消癌解毒方(1×104mg·kg-1)及两者联合用药进行治疗,给药期间称量并记录小鼠体质量和瘤体积,15 d后脱颈处死,剥离并称量瘤块质量,计算抑瘤率,苏木素-伊红(HE)染色观察心、肝、脾、肾和瘤块的病理情况,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察肿瘤细胞凋亡情况并统计凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),组蛋白去甲基化酶1(LSD1),组蛋白H3(Histone H3),组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化(Histone H3K4me2),组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(Histone H3K9me2)的表达水平。结果:与模型组相比,顺铂给药组小鼠体质量均有下降,其中消癌解毒方+顺铂组较单用顺铂组体质量增加(P〈0.01);消癌解毒方+顺铂较单用顺铂更能缩小移植瘤体积,提高抑瘤率(P〈0.01);更明显提高了肿瘤细胞凋亡率(P〈0.05,P〈0.01);更明显下调肿瘤组织Bcl-2表达水平,上调Bax表达水平(P〈0.05,P〈0.01);各给药组均能下调LSD1蛋白的表达,增加组蛋白H3K4,H3K9的二甲基化,消癌解毒方+顺铂组作用最为明显(P〈0.05,P〈0.01)。结论:消癌解毒方+顺铂用药对于4T1荷瘤小鼠抑瘤作用明显,其机制可能与下调组蛋白去甲基化酶水平有关。 展开更多
关键词 消癌解毒方 4T1荷瘤小鼠 顺铂 组蛋白去甲基化酶
小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制作用及其分子机制研究 预览
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作者 钱洁 谭佳妮 +4 位作者 程海波 沈卫星 徐长亮 刘陶世 孙东东 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期422-427,共6页
本研究的目的是为了探索小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响以及阐明小檗碱促乳腺癌细胞凋亡的分子机制。在实验过程中,我们通过MTT检测小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,采用Annexin-V/PI染色定量考察小檗碱对肿瘤细... 本研究的目的是为了探索小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响以及阐明小檗碱促乳腺癌细胞凋亡的分子机制。在实验过程中,我们通过MTT检测小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,采用Annexin-V/PI染色定量考察小檗碱对肿瘤细胞凋亡的影响,运用Western Blot实验检测肿瘤相关通路蛋白表达来进行研究。实验表明小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖具有抑制作用,使细胞中自噬因子Beclin 1表达增加,诱导细胞自噬泡的形成,导致肿瘤细胞发生凋亡。综上说明小檗碱是通过抑制AKT-mTOR通路,诱导MDA-MB-231细胞的自噬以及凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 小檗碱 乳腺癌 抗肿瘤 细胞自噬 AKT-mTOR通路
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消癌解毒方对CT26荷瘤小鼠IL-6/STAT3信号通路的影响 被引量:1
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作者 石文静 谭佳妮 +3 位作者 沈卫星 徐长亮 孙东东 程海波 《辽宁中医杂志》 2018年第6期1289-1292,I0005共5页
目的:观察消癌解毒方对荷瘤小鼠瘤组织内IL-6/STAT3信号通路的影响。方法:将40只雄性CT26荷瘤小鼠随机分为模型对照组(生理盐水灌胃2 m L·d^-1),消癌解毒方低、中、高剂量组(消癌解毒方中药灌胃5,10,20 g生药·kg~(-1)... 目的:观察消癌解毒方对荷瘤小鼠瘤组织内IL-6/STAT3信号通路的影响。方法:将40只雄性CT26荷瘤小鼠随机分为模型对照组(生理盐水灌胃2 m L·d^-1),消癌解毒方低、中、高剂量组(消癌解毒方中药灌胃5,10,20 g生药·kg~(-1)),奥沙利铂组(奥沙利铂腹腔注射5 mg·kg^-1),每组8只。连续给药14 d,末次给药2 h后处死小鼠,剥取瘤组织。采用末端转移酶标记技术(TUNEL)法观察小鼠瘤组织中细胞凋亡率;免疫组化染色法检测小鼠瘤组织中Cleaved Caspase-3蛋白表达;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测小鼠瘤组织中信号转导和转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3),磷酸化的信号转导和转录激活因子3(phospho-STAT3,p-STAT3),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)蛋白的表达。结果:TUNEL结果显示,与模型对照组比较,消癌解毒方各组小鼠瘤组织中细胞凋亡指数明显升高(P〈0.01);免疫组化结果显示,与模型对照组比较,消癌解毒方中、高剂量组可以显著增加Cleaved Caspase-3蛋白表达(P〈0.05);Western blot结果表明与模型对照组比较,消癌解毒方中、高剂量组可以显著降低pSTAT3,IL-6的蛋白表达(P〈0.05)。结论:消癌解毒方可以促进肿瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路,上调Cleaved Caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 消癌解毒方 结直肠癌 IL-6/STAT3信号通路
转化医学视角下的中药复方物质基础研究思路与建议 被引量:5
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作者 孙东东 沈卫星 +2 位作者 苗筠杰 闫秋莹 程海波 《中华中医药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期1415-1418,共4页
物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节。论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药... 物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节。论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药理论创新及药物创制;要统筹好给药前以及给药后两个环节;还要充分借助现代仪器分析技术和生命科学手段。 展开更多
关键词 中药复方 物质基础 转化医学 思路
消癌解毒方水提液化学成分分析及活性成分含量测定 被引量:1
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作者 闫秋莹 程海波 +3 位作者 沈卫星 徐长亮 李黎 孙东东 《中华中医药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期2914-2918,共5页
目的:建立HPLC-ESI-Q-TOF-MS同时鉴定消癌解毒方水提液中化学成分的方法,并使用UPLC-TQMS技术同时测定其中芦丁和半枝莲碱B含量。方法:ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)用于成分定性分析,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)梯... 目的:建立HPLC-ESI-Q-TOF-MS同时鉴定消癌解毒方水提液中化学成分的方法,并使用UPLC-TQMS技术同时测定其中芦丁和半枝莲碱B含量。方法:ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)用于成分定性分析,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)梯度洗脱,正离子模式下采集数据。定量分析使用Waters ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm),0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱,正、负离子检测模式。结果:消癌解毒方水提液中鉴定出20种化学成分,并同时测定其中芦丁和半枝莲碱B等成分含量,2种成分在测定的线性范围内线性关系良好,R2>0.9995,加样回收率98.88%、98.01%(RSD<3%)。结论:该方法能够快速、简便、高效地对消癌解毒方中化学成分进行定性、定量分析。 展开更多
关键词 消癌解毒方 液质联用 成分分析 含量测定 白花蛇舌草 半枝莲
消癌解毒方中有效成分在小鼠体内的组织分布研究 被引量:1
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作者 闫秋莹 程海波 +2 位作者 沈卫星 谭佳妮 孙东东 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期181-185,共5页
目的:使用液质联用方法对消癌解毒方水提液中芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B等在小鼠组织中的分布进行研究。方法:以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-2-酸甲酯(CDDO-Me)作为内标,以甲醇对组织中蛋白进行沉淀,通过液质联用技... 目的:使用液质联用方法对消癌解毒方水提液中芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B等在小鼠组织中的分布进行研究。方法:以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-2-酸甲酯(CDDO-Me)作为内标,以甲醇对组织中蛋白进行沉淀,通过液质联用技术对芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B含量进行测定,使用Waters ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱,正、负离子模式检测,检测离子质荷比(m/z)芦丁609.2、野黄芩苷463.3、半枝莲碱B558.4和CDDO-Me 506.7。结果:在小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织中,芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B在测定的线性范围内线性关系良好(r≥0.9913);方法的精密度和稳定性RSD小于均15%;回收率为89.89%~113.35%,RSD值小于15%,符合化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则。芦丁等3种成分在不同组织中分布情况各不相同,芦丁主要分布在肝脏和肾脏,其次为心脏和脾脏,肺脏中分布最少;野黄芩苷只在肺脏中检出;半枝莲碱B的分布趋势为肝脏、肾脏和心脏中,肺脏和脾脏中分布较少。结论:本方法能够方便、灵敏、准确地对小鼠组织中的芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B的含量进行测定。 展开更多
关键词 消癌解毒方 芦丁 野黄芩苷 半枝莲碱B 液质联用 组织分布
基于HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术分析白花蛇舌草二氯甲烷部位化学成分 被引量:1
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作者 孙东东 闫秋莹 +2 位作者 沈卫星 徐长亮 程海波 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期388-391,共4页
目的:通过HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位中的化学成分进行定性分析。方法:采用LC-MS/MS,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。通过质... 目的:通过HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位中的化学成分进行定性分析。方法:采用LC-MS/MS,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。通过质谱信息及元素组成,与相关文献数据对照分析,对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位进行成分鉴定。结果:共鉴定出12个化合物,分别为阿魏酸、对羟基香豆酸、葡萄糖乙苷、对甲氧基桂皮酸、quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-feruloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-glucopyranoside、kaempferol-3-O-[2-O-(6-O-Eferuloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-galactopyranoside、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、2-甲基-3-羟基蒽醌、aurantianmide acetate、β-谷甾醇、豆甾醇、豆甾醇-5,22-二烯-3β,7β-二醇。结论:采用LC-MS/MS方法同时鉴定白花蛇舌草中多种化学成分,方法简单,快速,结果准确,为进一步阐明白花蛇舌草的药效物质基础提供证据。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 化学成分 HPLC-ESI-Q-TOF-MS
液质联用分析芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B在小鼠灌胃给药后体内的组织分布 被引量:1
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作者 闫秋莹 程海波 +3 位作者 沈卫星 徐长亮 窦志华 孙东东 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1760-1766,共7页
目的:建立UPLC-MS同时测定小鼠组织中芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B的分析方法,并对该3种成分在小鼠体内的组织分布进行研究。方法:以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-28-酸甲酯(CDDO-Me)为内标,通过甲醇沉淀组织样品蛋白,... 目的:建立UPLC-MS同时测定小鼠组织中芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B的分析方法,并对该3种成分在小鼠体内的组织分布进行研究。方法:以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-28-酸甲酯(CDDO-Me)为内标,通过甲醇沉淀组织样品蛋白,使用LC-MS技术进行定量分析,采用ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,正、负离子检测模式,检测离子质荷比(m/z)为芦丁609.2、野黄芩苷463.3、半枝莲碱B 558.4和CDDO-Me 506.7。结果:在小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织中,芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B分别在0.005 00.160 0、0.004 00.133 0、0.00330.106 7μg·m L-1的线性范围内线性关系良好(r≥0.9913);方法的精密度和稳定性RSD均小于15%;回收率为90.0%98.4%,RSD小于15%,符合化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则。芦丁等3个成分在小鼠体内分布比较广泛,其中在肝脏和肾脏中分布较多,在肺脏中分布含量最低。结论:本方法经方法学验证,可对小鼠组织中的芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B含量进行测定;在用于小鼠体内化学成分的组织分布研究中,芦丁在肾脏中含量多、脾脏中最少,野黄芩苷在心脏中含量最多、肺脏中最少,半枝莲碱B在肝脏中含量最多、肾脏中最少。 展开更多
关键词 半枝莲 芦丁 野黄芩苷 半枝莲碱B 药物分布 药物代谢动力学 液相色谱-质谱联用
补肾活血方中4种有效成分对炎性因子释放抑制活性研究 被引量:3
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作者 孙东东 沈卫星 +2 位作者 王卓 晏婷婷 程海波 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期2674-2677,共4页
目的:观察补肾活血方中异欧前胡素、齐墩果酸、蜕皮甾酮、虎杖苷等4种有效成分对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及一氧化氮(NO)等炎性介质释放浓度的影响作用,探讨复方治疗骨关节炎的初步机制。方法:选取补肾活... 目的:观察补肾活血方中异欧前胡素、齐墩果酸、蜕皮甾酮、虎杖苷等4种有效成分对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及一氧化氮(NO)等炎性介质释放浓度的影响作用,探讨复方治疗骨关节炎的初步机制。方法:选取补肾活血方水提液中存在的具有潜在治疗骨关节炎活性的异欧前胡素等4种化合物,采用体外脂多糖(LPS)刺激的RAW264.74小鼠巨噬细胞为模型,利用酶联免疫法(ELISA)测定试药对模型细胞释放TNF-α、IL-6及NO的抑制作用。结果:异欧前胡素在100μg/m L,对TNF-α的释放有显著抑制作用(P〈0.01);异欧前胡素在20、100μg/m L,虎杖苷在100μg/m L对IL-6水平有显著抑制(P〈0.01);异欧前胡素与齐墩果酸在20、100μg/m L,蜕皮甾酮与虎杖苷在100μg/m L,对NO的释放具有显著抑制(P〈0.01)。结论:补肾活血方的治疗骨关节炎活性可能是通过抑制炎症介质释放,降低TNF-α、IL-6、NO等含量发挥作用,这对验证复方药效活性,探究效应物质基础具有重要意义。 展开更多
关键词 补肾活血方 骨关节炎 TNF-Α IL-6 NO
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