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人精子蛋白17放射诱导表达细胞模型的构建 认领 被引量:2
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作者 张春华 李芳秋 +2 位作者 杨爱龙 缪家文 朱锡旭 《生物技术通讯》 CAS 2007年第3期 454-456,共3页
目的:构建pEgr—Sp17重组质粒,并检测其在人卵巢癌细胞系H08910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达人精子蛋白Sp17的细胞模型。方法:用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导... 目的:构建pEgr—Sp17重组质粒,并检测其在人卵巢癌细胞系H08910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达人精子蛋白Sp17的细胞模型。方法:用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导特性的早期反应因子Egr-1和人Sp17基因的pEgr-Sp17重组质粒,利用脂质体介导其转染人H08910细胞,用免疫细胞化学方法检测X线照射后被转染细胞中Sp17的表达。在确证Sp17能瞬时表达后,继续用含G418的RPMI1640培养基培养细胞,筛选稳定表达Sp17的细胞株。结果:测序结果和酶切鉴定均证实pEgr—Sp17重组质粒构建正确;免疫细胞化学试验表明pEgr—Sp17重组质粒转染的人H08910细胞表达Sp17蛋白。结论:X线可诱导pEgr—Sp17重组质粒在人H08910细胞中表达Sp17蛋白,构建了Sp17蛋白放射诱导表达的卵巢癌细胞模型。 展开更多
关键词 精子蛋白Sp17 EGR-1启动子 X线 表达 卵巢癌细胞模型
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血清精子蛋白17检测的双抗夹心ELISA法及在卵巢癌诊断中的应用 认领 被引量:2
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作者 缪家文 李芳秋 杨爱龙 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2007年第5期 445-447,450,共4页
目的:建立双抗夹心ELISA法检测血清中精子蛋白17(sperm protein 17,Sp17)水平。方法:以重组Sp17蛋白为免疫原制备兔抗Sp17抗体,建立Sp17双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其最小检出限、精确度、回收率,并检测42例正常人及28例卵巢癌患者... 目的:建立双抗夹心ELISA法检测血清中精子蛋白17(sperm protein 17,Sp17)水平。方法:以重组Sp17蛋白为免疫原制备兔抗Sp17抗体,建立Sp17双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其最小检出限、精确度、回收率,并检测42例正常人及28例卵巢癌患者血清Sp17水平。结果:该双抗夹心ELISA法敏感度高、特异性强、重复性好。卵巢癌患者与正常人血清Sp17含量有显著差别(P〈0.01),正常人血清中存在少量Sp17蛋白,而卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高者占39.3%。结论:卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高。测定血清Sp17水平的ELISA方法学确立为阐明Sp17在卵巢癌患者中的免疫生物学意义提供了实验手段。 展开更多
关键词 精子蛋白17(Sp17) 卵巢癌 ELISA
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精子蛋白17在上皮性卵巢癌中的异常表达 认领 被引量:8
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作者 李芳秋 杨爱龙 +2 位作者 黄文斌 李南云 曾素耘 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第15期 1174-1177,共4页
目的:探讨精子蛋白17(sperm protein17,Sp17)在各类卵巢恶性肿瘤中的表达谱,并分析其意义。方法:用免疫组化技术检测65例卵巢恶性肿瘤组织标本Sp17的表达。结果:41例原发上皮性卵巢癌组织切片,18例不同程度地显示Sp17的异常表... 目的:探讨精子蛋白17(sperm protein17,Sp17)在各类卵巢恶性肿瘤中的表达谱,并分析其意义。方法:用免疫组化技术检测65例卵巢恶性肿瘤组织标本Sp17的表达。结果:41例原发上皮性卵巢癌组织切片,18例不同程度地显示Sp17的异常表达,阳性率为43.9%;免疫细胞化学染色还在卵巢癌患者腹水中发现Sp17阳性癌细胞。7例卵巢原发的非上皮性恶性肿瘤和17例卵巢转移癌组织切片(原发癌来源于胃、结肠、输卵管、胆囊和肺等器官),免疫组化染色均未检出Sp17。结论:Sp17在原发上皮性卵巢癌中常见蛋白质水平的异常表达,在其他卵巢恶性肿瘤中未见表达,有可能作为上皮性卵巢癌新的诊断标志和免疫治疗靶标。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤/病理学 精子 克隆 分子 重组融合蛋白质类/遗传学 免疫组织化学
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二球悬铃木花粉主要变应原蛋白编码基因克隆的制备 认领 被引量:3
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作者 邢锐 齐名 +2 位作者 姚凯 黄宇烽 季晓辉 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期 1150-1154,共5页
目的:构建含二球悬铃木花粉主要变应原蛋白编码基因的重组质粒。方法:用PCR扩增二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的cDNA序列,将扩增的目的片段用双酶切法与质粒pET32a连接,CaCl2法转入工程菌DH5a制备基因克隆。碱裂解法提取质粒DN... 目的:构建含二球悬铃木花粉主要变应原蛋白编码基因的重组质粒。方法:用PCR扩增二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的cDNA序列,将扩增的目的片段用双酶切法与质粒pET32a连接,CaCl2法转入工程菌DH5a制备基因克隆。碱裂解法提取质粒DNA.测序鉴定目的片段存在。结果:构建了含二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的重组质粒。结论:用天然二球悬铃木花粉可成功地制备含有其主要变应原编码基因的重组质粒,用于变应原蛋白诱导表达。 展开更多
关键词 花粉 变应原 基因克隆
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1个牙本质生长不全Ⅱ型家系疾病基因的连锁分析 认领 被引量:2
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作者 崔英霞 侯燕宁 +4 位作者 王云华 郝丽君 拜红霞 李芳秋 黄宇烽 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 34-36,共3页
目的 对一个牙本质生长不全Ⅱ型家系疾病基因进行定位。方法 提取该家系18个成员的外周血DNA;在染色体4q21上选择6个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点,即D4S1534、GATA62A11、DSP(P)、DMP1、SPP1和D4S1563:用连锁... 目的 对一个牙本质生长不全Ⅱ型家系疾病基因进行定位。方法 提取该家系18个成员的外周血DNA;在染色体4q21上选择6个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点,即D4S1534、GATA62A11、DSP(P)、DMP1、SPP1和D4S1563:用连锁分析法分析该家系疾病基因与上述6个STR位点的连锁关系并进行染色体单倍型分析。结果 有2个位点最大LOD值〉3,分别是位点GATA62A11,得到最大连锁值3.86,(θ=0);位点DSP(P)最走连锁值4.72(θ=0),单倍型分析显示疾病基因位于4q21上的D4S1534-DMP1区域内。结论 牙本质生长不全Ⅱ型家系的疾病基因定拉在4q21上。 展开更多
关键词 牙本质生长不全Ⅱ型 短串联重复序列 连锁分析
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用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶 认领 被引量:5
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作者 王念跃 赵伟 +2 位作者 李勇 端木浩 黄宇峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 332-334,共3页
目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐... 目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐方法测定洗脱物的γGT催化活性,用紫外法监测蛋白出峰图谱,用Lowry法测定蛋白含量。结果经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的γCT,其比活为10.56U/mg蛋白,纯化倍数为84,9,得率为1.60%。结论该分离纯化方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中欧蔓陀罗凝集素强结合的γCT。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转移酶 人肝癌组织 凝集素 层析
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人血清氧化低密度脂蛋白自身抗体的提取和初步鉴定 认领 被引量:2
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作者 汪俊军 朱雁飞 +1 位作者 强红娟 张春妮 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 4-6,共3页
目的 提取和鉴定人血清氧化低密度脂蛋白(Ox—LDL)自身抗体。方法 采用溴化氰活化的Sepharose 4B交联Ox—LDL制备免疫吸附层析柱,从正常人血清中提取抗Ox—LDL自身抗体,采用ELISA法鉴定其免疫反应性,散射免疫比浊法分析自身抗体种... 目的 提取和鉴定人血清氧化低密度脂蛋白(Ox—LDL)自身抗体。方法 采用溴化氰活化的Sepharose 4B交联Ox—LDL制备免疫吸附层析柱,从正常人血清中提取抗Ox—LDL自身抗体,采用ELISA法鉴定其免疫反应性,散射免疫比浊法分析自身抗体种类。结果 用NaHCO3、醋酸盐和KCNS溶液洗脱,分别收集洗脱峰。8份正常人血清中均收集到Ox—LDL自身抗体,与Ox—LDL均具有良好的反应性。自身抗体种类中以IgG为主,其次为IgM。结论 此法提取的抗Ox—LDL自身抗体同Ox—LDL具有良好的反应能力。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白 氧化修饰 自身抗体 动脉粥样硬化
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人精子蛋白17放射免疫分析方法的建立 认领
8
作者 王国洪 李芳秋 +3 位作者 孙伟 许瑞吉 张中书 王筱 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期 510-511,515,共3页
目的:建立人精子蛋白17(Sp17)的放射免疫分析方法。方法:用重组人Sp17(rhSp17)免疫动物制备高质量的抗血清,用氯胺T法制备^125I-rhSp17,建立了Sp17放射免疫分析方法,并测定了正常人(n=59)及35例患者(卵巢癌20例,子宫癌14... 目的:建立人精子蛋白17(Sp17)的放射免疫分析方法。方法:用重组人Sp17(rhSp17)免疫动物制备高质量的抗血清,用氯胺T法制备^125I-rhSp17,建立了Sp17放射免疫分析方法,并测定了正常人(n=59)及35例患者(卵巢癌20例,子宫癌14例,宫颈癌1例)血清Sp17值。结果:测定范围3.3~800μg/L;灵敏度为2.0μg/L;批内CV为7.5%-9.8%,批间CV为8.2%~13.2%。正常人血清Sp17值为(15.60±7.66)μg/L。以Sp17〉31.92μg/L为阳性,35例女性肿瘤患者血清标本15例阳性。结论:Sp17的放射免疫分析是一种简便、灵敏、特异的分析方法。可满足临床和科研的需要;Sp17的测定对研究该蛋白的功能、天然分布和异常表达有重要意义。 展开更多
关键词 放射免疫分析 精子蛋白17 人类
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人精子蛋白17放射免疫分析的临床应用 认领 被引量:1
9
作者 王国洪 李芳秋 +3 位作者 孙伟 许瑞吉 张中书 王筱劼 《标记免疫分析与临床》 CAS 2006年第3期 141-142,共2页
为了探讨人精子蛋白17(Sp17)放免分析的临床意义,用自建的Sp17放免分析方法,测定了正常人及部分癌症患者血清Sp17值。结果显示,卵巢癌、子宫内膜癌患者血清Sp17值分别为36.02±27.95μg/L,40.29±21.15μg/L,与对... 为了探讨人精子蛋白17(Sp17)放免分析的临床意义,用自建的Sp17放免分析方法,测定了正常人及部分癌症患者血清Sp17值。结果显示,卵巢癌、子宫内膜癌患者血清Sp17值分别为36.02±27.95μg/L,40.29±21.15μg/L,与对照组15.60±7.66μg/L相比,有显著性差异(P〈0.01);而且部分卵巢癌、子宫内膜癌患者血清Sp17值明显升高。因此血清Sp17浓度的测定可能有助于卵巢癌、子宫内膜癌症等患者的诊断和治疗,值得进一步研究。 展开更多
关键词 放射免疫分析 精子蛋白17 卵巢癌 子宫内膜癌
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心内直视手术患者血浆中性粒细胞防御素的动态研究 认领
10
作者 王永杰 张育才 +3 位作者 王冬 李晓洲 曹苏梅 武建国 《东南国防医药》 2006年第3期 167-169,共3页
目的定量观察心内直视手术患者围于术期血浆中性粒细胞肽(HNP1-3)的动态变化。探讨在体外循环(CPB)诱发全身炎症反应综合征(SIRS)早期诊断中的作用。方法建立ELISA法,对CPB患者围手术期不同时间血浆中HNP1-3含量进行定量测定.... 目的定量观察心内直视手术患者围于术期血浆中性粒细胞肽(HNP1-3)的动态变化。探讨在体外循环(CPB)诱发全身炎症反应综合征(SIRS)早期诊断中的作用。方法建立ELISA法,对CPB患者围手术期不同时间血浆中HNP1-3含量进行定量测定.同时测定血浆CK、CK~MB和C—RP台埴。结果21例CPB心脏直视手术患行CPB前血浆HNP1—3为(54.55±26.45)ng/ml;CPB后0,5h血浆HNP1~3含量为(435.45±500.13)ng/ml,比CPB前显著升高(P〈0.01)、CPB后4h血浆HNP1-3含量达峰值.为(454.18±651.20)ng/ml.此后开始下降;血浆CK、CK—MB和CRP峰值出现在CPB后24h,分别为(1587.46±1500.56)U/L、(38.18±39.27)U/L和(62.63±27.08)mg/L。结论血浆HNP1-3对CPB诱发SIRS反应敏感、迅速,血浆浓度的动态变化可能提示SIRS的严重程度和发展趋势。 展开更多
关键词 体外循环 中性粒细胞肽
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老年人抗梅毒螺旋体抗体测定的假阳性率偏高 认领 被引量:218
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作者 武建国 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 241-243,共3页
梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subsp.pallidum)引起的一种古老的性病,经性接触传播,全球范围分布。新中国成立后,经大力整顿,至上世纪50年代后期,我国除台湾省外梅毒已基本根除。上世纪70年代末,随着资本... 梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subsp.pallidum)引起的一种古老的性病,经性接触传播,全球范围分布。新中国成立后,经大力整顿,至上世纪50年代后期,我国除台湾省外梅毒已基本根除。上世纪70年代末,随着资本主义腐朽文化与生活方式的入侵,梅毒在我国的发病率又逐年升高。2005年国家卫生部公布,在全国27种法定报告的甲、乙类传染病中,梅毒发病人数仅次于肺结核、乙型肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、淋病而高居第五位(2002年为第七位)。 展开更多
关键词 梅毒 血清学试验 老年人
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前列腺特异抗原的几个临床应用问题 认领 被引量:24
12
作者 武建国 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 1-3,共3页
前列腺癌(prostate cancer,PCa)在欧美男性癌症中列第二位,肿瘤致死的原因中列第三位。我国男性中PCa发病率也逐年升高,20世纪60年代,上海地区PCa发病率为0.48/10万,至1995年即达3.7/10万。长春市8家大型医院统计,1999~200... 前列腺癌(prostate cancer,PCa)在欧美男性癌症中列第二位,肿瘤致死的原因中列第三位。我国男性中PCa发病率也逐年升高,20世纪60年代,上海地区PCa发病率为0.48/10万,至1995年即达3.7/10万。长春市8家大型医院统计,1999~2001年PCa病例数较1986~1988年增加了4.6倍。作为PCa的血清标志物,早年曾以Schulman等于1964年自前列腺组织中分离的具有前列腺特异性的酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PAP)为代表,但临床应用中敏感性和特异性都不理想。 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺特异抗原 临床应用
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载脂蛋白(a)多态性研究进展 认领 被引量:8
13
作者 刘恋 汪俊军 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期 387-389,共3页
脂蛋白(a)[lipoprotein(a),Lp(a)]作为动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)性心脑血管疾病的独立危险因素已得到了公认[1-2].Lp(a)由载脂蛋白(a)[apo(a)]和apoB经二硫键相连而成.血浆Lp(a)水平个体差异很大,主要由遗传决定,与性别、饮食... 脂蛋白(a)[lipoprotein(a),Lp(a)]作为动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)性心脑血管疾病的独立危险因素已得到了公认[1-2].Lp(a)由载脂蛋白(a)[apo(a)]和apoB经二硫键相连而成.血浆Lp(a)水平个体差异很大,主要由遗传决定,与性别、饮食、药物和其他脂质成分无关.apo(a)是一个具有多种多态性的糖蛋白,与血浆Lp(a)水平、As性心脑血管疾病的发生、发展密切相关.本文就近年有关apo(a)多态性的临床研究作一综述. 展开更多
关键词 载脂蛋白(a) 多态性 动脉粥样硬化
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多色荧光原位杂交技术的临床应用 认领 被引量:3
14
作者 王云华 崔英霞 +4 位作者 姚兵 郝丽君 拜红霞 宛传丹 黄宇烽 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期 438-440,T0001,共4页
目的检测来源不明的额外标记染色体和衍生染色体.方法用多色荧光原位杂交技术结合G显带技术和NOR技术,对1例47,XY,inv(9)(p11q13),+mar和1例46,XY,t(5;?)核型进行诊断.结果病例1的额外标记染色体片段来源于15号染色体,患者核型为47,XY,i... 目的检测来源不明的额外标记染色体和衍生染色体.方法用多色荧光原位杂交技术结合G显带技术和NOR技术,对1例47,XY,inv(9)(p11q13),+mar和1例46,XY,t(5;?)核型进行诊断.结果病例1的额外标记染色体片段来源于15号染色体,患者核型为47,XY,inv(9)(p11q13),+SMC(15).病例2的核型为46,XY,der(5)t(4,5)(q27;q35).在此基础上对患者的核型-表型进行了分析.结论多色荧光原位杂交技术结合细胞遗传学核型分析,对于来源不明的标记染色体和衍生染色体的诊断是非常有帮助的. 展开更多
关键词 多色荧光原位杂交 额外标记染色体 衍生染色体
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高龄卧床患者阴囊水肿的护理 认领 被引量:3
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作者 程童大 朱剑萍 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期 858-859,共2页
阴囊水肿为高龄长期卧床患者的并发症,由于皮肤弹性差,皮下脂肪少,尿袋包裹、长期卧床及全身营养代谢失调等,此部位易发生高度水肿、破溃感染[1],导致病人痛苦,加重病情,而且增加护理难度.
关键词 阴囊水肿 高龄 卧床 护理
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低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯蓄积和一氧化氮释放的影响 认领 被引量:2
16
作者 张春妮 张辰宇 +3 位作者 汪俊军 周毓 李文 刘建宁 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第4期 397-400,共4页
目的探讨低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和一氧化氮释放的影响.方法密度梯度超速离心从新鲜人血浆分离天然低密度脂蛋白,与抗低密度脂蛋白抗血清IgG组分制备低密度脂蛋白免疫复合物,低密度脂蛋白免疫复合物与... 目的探讨低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和一氧化氮释放的影响.方法密度梯度超速离心从新鲜人血浆分离天然低密度脂蛋白,与抗低密度脂蛋白抗血清IgG组分制备低密度脂蛋白免疫复合物,低密度脂蛋白免疫复合物与小鼠腹腔巨噬细胞孵育后采用酶荧光法检测细胞胆固醇酯含量,进行细胞形态学观察和组织化学分析,并用硝酸还原酶法测定细胞释放至培养基中的一氧化氮量.结果低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地诱导巨噬细胞内胆固醇酯的大量堆积,其效应显著强于氧化型低密度脂蛋白(P<0.01),经低密度脂蛋白免疫复合物处理的巨噬细胞呈典型泡沫细胞状,与猩红强染色,而天然低密度脂蛋白、抗低密度脂蛋白IgG处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的蓄积.此外,低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地抑制巨噬细胞一氧化氮的分泌.结论低密度脂蛋白免疫复合物不仅通过致小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化,也通过损伤巨噬细胞分泌一氧化氮的功能参与致动脉粥样硬化作用. 展开更多
关键词 生物化学 脂蛋白免疫复合物致动脉硬化作用 酶荧光法 低密度脂蛋白 免疫复合物 泡沫细胞 一氧化氮
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脂蛋白(a)循环免疫复合物诱导巨噬细胞胆固醇酯蓄积 认领 被引量:9
17
作者 汪俊军 顾振华 +3 位作者 李雯 刘恋 张春妮 范乐明 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期 1185-1188,共4页
目的探讨氧化、天然脂蛋白(a)[Lp(a)]循环免疫复合物(IC)致动脉粥样硬化作用.方法采用人源的氧化、天然Lp(a)与异源的抗载脂蛋白B(apoB)结合制备IC,观察不同浓度的Lp(a)-IC对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和泡沫细胞形成作用.结果氧... 目的探讨氧化、天然脂蛋白(a)[Lp(a)]循环免疫复合物(IC)致动脉粥样硬化作用.方法采用人源的氧化、天然Lp(a)与异源的抗载脂蛋白B(apoB)结合制备IC,观察不同浓度的Lp(a)-IC对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和泡沫细胞形成作用.结果氧化、天然Lp(a)-IC均引起巨噬细胞内胆固醇酯大量堆积,其效果强于Ox-Lp(a) (P<0.001),且随着剂量的增加而升高,并转化为泡沫细胞;而天然Lp(a)、抗apoB处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的堆积.结论 Lp(a)-IC导致巨噬细胞转化为泡沫细胞,参与动脉粥样硬化形成. 展开更多
关键词 脂蛋白(a) 自身免疫 泡沫细胞 冠状动脉硬化
人载脂蛋白AⅠ基因的克隆表达及功能 认领 被引量:3
18
作者 马百坤 郭利利 +1 位作者 方蓉 徐东刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期 273-277,共5页
载脂蛋白A Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,ApoA Ⅰ)由肝和小肠合成,结合其它载脂蛋白、游离胆固醇等血脂后以脂蛋白的形式进入血液循环.ApoaA Ⅰ的主要功能是,在脂蛋白的代谢过程中,ApoA Ⅰ不仅维持脂蛋白的结构和作为HDL受体的配体,还作为激... 载脂蛋白A Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,ApoA Ⅰ)由肝和小肠合成,结合其它载脂蛋白、游离胆固醇等血脂后以脂蛋白的形式进入血液循环.ApoaA Ⅰ的主要功能是,在脂蛋白的代谢过程中,ApoA Ⅰ不仅维持脂蛋白的结构和作为HDL受体的配体,还作为激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)的重要辅助因子,激活LCAT的活性,参与胆固醇的酯化.ApoA Ⅰ在胆固醇逆转运(reverse cholesterol transport,RCT)过程中起关键作用,促进组织细胞内胆固醇的清除,避免胆固醇在外周组织中沉积,从而降低动脉粥样硬化发病的危险性[1~4]. 展开更多
关键词 载脂蛋白AⅠ 克隆表达 EXPRESS Western total human 基因 was with the CLONE and cDNA The in RNA VEC HDL
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人精子蛋白17基因在大肠杆菌中的表达 认领 被引量:10
19
作者 杨爱龙 李芳秋 +1 位作者 张建琼 许联红 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第20期 1892-1894,共3页
目的: 克隆人精子蛋白17(hSp17)基因,构建重组表达载体并表达重组蛋白. 方法: 用RT-PCR法从人睾丸中克隆hSp17基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)/hSp17,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,用特异性hSp17的mAb进行Western ... 目的: 克隆人精子蛋白17(hSp17)基因,构建重组表达载体并表达重组蛋白. 方法: 用RT-PCR法从人睾丸中克隆hSp17基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)/hSp17,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,用特异性hSp17的mAb进行Western blot鉴定,Ni-NTA His-Bind树脂纯化重组蛋白. 结果: 克隆到hSp17 cDNA(456 bp)并经过DNA测序证实,表达和纯化得到重组蛋白hSp17(表观Mr为27 500),并经过Western blot鉴定. 结论: 成功克隆和表达hSp17 基因. 展开更多
关键词 人精子蛋白17 克隆 分子 基因表达 印迹法 蛋白质
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头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 认领 被引量:5
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作者 王卫萍 周丽娟 +1 位作者 邵海枫 张小卫 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期 431-432,共2页
目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的可靠性和临床实用性进行评估.方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的... 目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的可靠性和临床实用性进行评估.方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较.结果mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100%和98.9%,特异性均为100%,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97.8%、98.9%和97.8%,特异性均为100%.结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法. 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 头孢西丁 纸片扩散法
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