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大肠埃希菌质粒型碳青霉烯酶KPC-2检测和分析 被引量:14
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作者 蒯守刚 邵海枫 +3 位作者 王卫萍 史利宁 张小卫 范明 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1120-1123,共4页
目的研究普外科病区出现的4株碳青霉烯类药物耐药大肠埃希菌的分子流行病学特征及耐药机制。方法用K-B纸片法和琼脂稀释法进行药物敏感试验,三维酶抑制试验和EDTA—Na2协同试验分析酶的性质,通过脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)分析耐... 目的研究普外科病区出现的4株碳青霉烯类药物耐药大肠埃希菌的分子流行病学特征及耐药机制。方法用K-B纸片法和琼脂稀释法进行药物敏感试验,三维酶抑制试验和EDTA—Na2协同试验分析酶的性质,通过脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)分析耐药株的分子流行病学特征,特异性PCR及序列分析、接合试验、碱裂解法提取质粒和质粒转化试验研究碳青霉烯耐药的分子机制。结果4株大肠埃希菌对包括碳青霉烯在内的多种抗菌药物广泛耐药,PFGE显示4株分离株属于不同的克隆型,对碳青霉烯类药物的耐药主要由相对分子质量约56000的质粒携带的KPC-2基因介导,转化试验显示对氨基糖苷类和喹诺酮类药物的耐药性并未携带在同一质粒上。结论我院出现碳青霉烯耐药的大肠埃希菌,对碳青霉烯类药物的耐药主要由质粒介导的KPC-2基因引起。 展开更多
关键词 大肠杆菌 卡巴配能类 Β内酰胺酶类 抗药性 细菌
人精子蛋白17放射诱导表达细胞模型的构建 预览 被引量:2
2
作者 张春华 李芳秋 +2 位作者 杨爱龙 缪家文 朱锡旭 《生物技术通讯》 CAS 2007年第3期 454-456,共3页
目的:构建pEgr—Sp17重组质粒,并检测其在人卵巢癌细胞系H08910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达人精子蛋白Sp17的细胞模型。方法:用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导... 目的:构建pEgr—Sp17重组质粒,并检测其在人卵巢癌细胞系H08910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达人精子蛋白Sp17的细胞模型。方法:用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导特性的早期反应因子Egr-1和人Sp17基因的pEgr-Sp17重组质粒,利用脂质体介导其转染人H08910细胞,用免疫细胞化学方法检测X线照射后被转染细胞中Sp17的表达。在确证Sp17能瞬时表达后,继续用含G418的RPMI1640培养基培养细胞,筛选稳定表达Sp17的细胞株。结果:测序结果和酶切鉴定均证实pEgr—Sp17重组质粒构建正确;免疫细胞化学试验表明pEgr—Sp17重组质粒转染的人H08910细胞表达Sp17蛋白。结论:X线可诱导pEgr—Sp17重组质粒在人H08910细胞中表达Sp17蛋白,构建了Sp17蛋白放射诱导表达的卵巢癌细胞模型。 展开更多
关键词 精子蛋白Sp17 EGR-1启动子 X线 表达 卵巢癌细胞模型
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人肝癌组织中DSA强结合的γ-谷氨酰基转移酶单克隆抗体的制备 预览 被引量:4
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作者 王念跃 赵伟 +4 位作者 刘晨 张永臣 李勇 端木浩 黄宇峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期 336-337,共2页
目的制备与欧蔓陀罗凝集素(DSA)强结合的γ-谷氨酰基转移酶(γGT)的单克隆抗体(mAb),并对抗体进行鉴定。方法以纯化的人肝癌组织DSA强结合的γGT为抗原,免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤(SP2/0)细胞融合,经ELISA... 目的制备与欧蔓陀罗凝集素(DSA)强结合的γ-谷氨酰基转移酶(γGT)的单克隆抗体(mAb),并对抗体进行鉴定。方法以纯化的人肝癌组织DSA强结合的γGT为抗原,免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤(SP2/0)细胞融合,经ELISA筛选和有限稀释法获得稳定分泌mAb的细胞株。结果获得5株分泌抗DSA强结合γGT的mAb细胞株,其中3株分泌的mAb具有较高的特异性;ELISA法测定小鼠腹水mAb的效价≥625000;亚类鉴定mAb为小鼠IgG1。结论成功制备了抗DSA强结合γGT的单克隆抗体,为进一步建立免疫学检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 γ-谷氨酰基转肽酶 单克隆抗体 肝细胞癌 凝集素 色谱
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人肝癌组织特异性γ-谷氨酰转移酶分离纯化 预览
4
作者 王念跃 赵伟 +2 位作者 李勇 端木浩 黄宇峰 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2007年第7期 799-801,共3页
目的:分离纯化人肝癌组织中特异性γ-谷氨酰转移酶(GGT),为进一步制备其抗血清提供抗原材料,以便对肝癌早期诊断进行研究。方法:人肝癌组织经匀浆、离心、溶解、透析、凝胶层析及凝集素亲和层析等步骤进行分离纯化;纯化过程用IFCC... 目的:分离纯化人肝癌组织中特异性γ-谷氨酰转移酶(GGT),为进一步制备其抗血清提供抗原材料,以便对肝癌早期诊断进行研究。方法:人肝癌组织经匀浆、离心、溶解、透析、凝胶层析及凝集素亲和层析等步骤进行分离纯化;纯化过程用IFCC推荐方法监测GGT催化活性,紫外法监测蛋白质出峰图谱,Lowry法测定蛋白含量。结果:经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的GGT,其比活为10.58U/mg蛋白,纯化倍数为84.9,得率为1.60%。结论:该方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中特异性GGT。 展开更多
关键词 肝肿瘤 实验性/酶学 γ-谷氨酰转移酶/分离和提纯 色谱法 凝胶/方法 色谱法 亲和/方法
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血清精子蛋白17检测的双抗夹心ELISA法及在卵巢癌诊断中的应用 预览 被引量:2
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作者 缪家文 李芳秋 杨爱龙 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2007年第5期 445-447,450,共4页
目的:建立双抗夹心ELISA法检测血清中精子蛋白17(sperm protein 17,Sp17)水平。方法:以重组Sp17蛋白为免疫原制备兔抗Sp17抗体,建立Sp17双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其最小检出限、精确度、回收率,并检测42例正常人及28例卵巢癌患者... 目的:建立双抗夹心ELISA法检测血清中精子蛋白17(sperm protein 17,Sp17)水平。方法:以重组Sp17蛋白为免疫原制备兔抗Sp17抗体,建立Sp17双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其最小检出限、精确度、回收率,并检测42例正常人及28例卵巢癌患者血清Sp17水平。结果:该双抗夹心ELISA法敏感度高、特异性强、重复性好。卵巢癌患者与正常人血清Sp17含量有显著差别(P〈0.01),正常人血清中存在少量Sp17蛋白,而卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高者占39.3%。结论:卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高。测定血清Sp17水平的ELISA方法学确立为阐明Sp17在卵巢癌患者中的免疫生物学意义提供了实验手段。 展开更多
关键词 精子蛋白17(Sp17) 卵巢癌 ELISA
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精子蛋白17在上皮性卵巢癌中的异常表达 预览 被引量:8
6
作者 李芳秋 杨爱龙 +2 位作者 黄文斌 李南云 曾素耘 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第15期 1174-1177,共4页
目的:探讨精子蛋白17(sperm protein17,Sp17)在各类卵巢恶性肿瘤中的表达谱,并分析其意义。方法:用免疫组化技术检测65例卵巢恶性肿瘤组织标本Sp17的表达。结果:41例原发上皮性卵巢癌组织切片,18例不同程度地显示Sp17的异常表... 目的:探讨精子蛋白17(sperm protein17,Sp17)在各类卵巢恶性肿瘤中的表达谱,并分析其意义。方法:用免疫组化技术检测65例卵巢恶性肿瘤组织标本Sp17的表达。结果:41例原发上皮性卵巢癌组织切片,18例不同程度地显示Sp17的异常表达,阳性率为43.9%;免疫细胞化学染色还在卵巢癌患者腹水中发现Sp17阳性癌细胞。7例卵巢原发的非上皮性恶性肿瘤和17例卵巢转移癌组织切片(原发癌来源于胃、结肠、输卵管、胆囊和肺等器官),免疫组化染色均未检出Sp17。结论:Sp17在原发上皮性卵巢癌中常见蛋白质水平的异常表达,在其他卵巢恶性肿瘤中未见表达,有可能作为上皮性卵巢癌新的诊断标志和免疫治疗靶标。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤/病理学 精子 克隆 分子 重组融合蛋白质类/遗传学 免疫组织化学
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二球悬铃木花粉主要变应原蛋白编码基因克隆的制备 预览 被引量:2
7
作者 邢锐 齐名 +2 位作者 姚凯 黄宇烽 季晓辉 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期 1150-1154,共5页
目的:构建含二球悬铃木花粉主要变应原蛋白编码基因的重组质粒。方法:用PCR扩增二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的cDNA序列,将扩增的目的片段用双酶切法与质粒pET32a连接,CaCl2法转入工程菌DH5a制备基因克隆。碱裂解法提取质粒DN... 目的:构建含二球悬铃木花粉主要变应原蛋白编码基因的重组质粒。方法:用PCR扩增二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的cDNA序列,将扩增的目的片段用双酶切法与质粒pET32a连接,CaCl2法转入工程菌DH5a制备基因克隆。碱裂解法提取质粒DNA.测序鉴定目的片段存在。结果:构建了含二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的重组质粒。结论:用天然二球悬铃木花粉可成功地制备含有其主要变应原编码基因的重组质粒,用于变应原蛋白诱导表达。 展开更多
关键词 花粉 变应原 基因克隆
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人精子蛋白17单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量:13
8
作者 李芳秋 杨爱龙 +3 位作者 缪家文 张春华 吴波 张新华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 638-640,共3页
目的:制备抗精子蛋白17(Sp17)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:克隆人Sp17 cDNA,表达带有6-His标记的重组Sp17,用纯化的重组Sp17免疫BALB/c小鼠制备mAb。用ELISA筛选抗体阳性的细胞克隆。用免疫组化染色法及阻断试验鉴定... 目的:制备抗精子蛋白17(Sp17)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:克隆人Sp17 cDNA,表达带有6-His标记的重组Sp17,用纯化的重组Sp17免疫BALB/c小鼠制备mAb。用ELISA筛选抗体阳性的细胞克隆。用免疫组化染色法及阻断试验鉴定mAb的特异性:结果:获得2株杂交瘤细胞系3C12和3D6,其分泌的mAb的Ig亚类(型)分别为IgG1和IgM(κ),杂交瘤细胞培养上清的ELISA效价分别为1:64和1:32;腹水mAb的效价分别为1:1×10^5和1:5×10^4。用人和大鼠睾丸组织以及人精液精子免疫组化染色及阻断试验证明,抗Sp17mAb具有良好的特异性。抗Sp17mAb也可识别卵巢癌组织巾异常表达的Sp17。结论:成功地制备特异性的抗Spl7mAb,为研究该蛋白的功能、天然分布及异常表达奠定了基础。 展开更多
关键词 精子蛋白17 单克隆抗体 免疫组化染色
用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶 预览 被引量:5
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作者 王念跃 赵伟 +2 位作者 李勇 端木浩 黄宇峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 332-334,共3页
目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐... 目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐方法测定洗脱物的γGT催化活性,用紫外法监测蛋白出峰图谱,用Lowry法测定蛋白含量。结果经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的γCT,其比活为10.56U/mg蛋白,纯化倍数为84,9,得率为1.60%。结论该分离纯化方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中欧蔓陀罗凝集素强结合的γCT。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转移酶 人肝癌组织 凝集素 层析
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人血清氧化低密度脂蛋白自身抗体的提取和初步鉴定 预览 被引量:2
10
作者 汪俊军 朱雁飞 +1 位作者 强红娟 张春妮 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 4-6,共3页
目的 提取和鉴定人血清氧化低密度脂蛋白(Ox—LDL)自身抗体。方法 采用溴化氰活化的Sepharose 4B交联Ox—LDL制备免疫吸附层析柱,从正常人血清中提取抗Ox—LDL自身抗体,采用ELISA法鉴定其免疫反应性,散射免疫比浊法分析自身抗体种... 目的 提取和鉴定人血清氧化低密度脂蛋白(Ox—LDL)自身抗体。方法 采用溴化氰活化的Sepharose 4B交联Ox—LDL制备免疫吸附层析柱,从正常人血清中提取抗Ox—LDL自身抗体,采用ELISA法鉴定其免疫反应性,散射免疫比浊法分析自身抗体种类。结果 用NaHCO3、醋酸盐和KCNS溶液洗脱,分别收集洗脱峰。8份正常人血清中均收集到Ox—LDL自身抗体,与Ox—LDL均具有良好的反应性。自身抗体种类中以IgG为主,其次为IgM。结论 此法提取的抗Ox—LDL自身抗体同Ox—LDL具有良好的反应能力。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白 氧化修饰 自身抗体 动脉粥样硬化
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分化抑制因子基因在血液系统恶性肿瘤细胞中的表达 预览 被引量:1
11
作者 汪萍 李晓军 +3 位作者 黄宇烽 贾丽 马百坤 杨家新 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 134-136,共3页
目的 研究分化抑制因子(Id)基因在血液系统恶性肿瘤细胞中的表达。方法 提取血液病惠者及正常人外周血单个核细胞、人Burkitt’s B淋巴瘤细胞(Daudi)、人T淋巴细胞性白血病细胞(Jurkat)、人慢性髓性白血病细胞(K562)和人组织细... 目的 研究分化抑制因子(Id)基因在血液系统恶性肿瘤细胞中的表达。方法 提取血液病惠者及正常人外周血单个核细胞、人Burkitt’s B淋巴瘤细胞(Daudi)、人T淋巴细胞性白血病细胞(Jurkat)、人慢性髓性白血病细胞(K562)和人组织细胞性淋巴瘤细胞(U937)的细胞总RNA,根据Id1、Id2和Id3 cDNA全长序列合成三对引物,用RT-PCR方法对以上细胞中Id1、Id2和Id3 mRNA的表达进行半定量分析。结果 Id(Id1、Id2、Id3)mRNA在Daudi、U937、Jurkat、K562以及血液病患者的淋巴细胞中均有不同程度的的表达;Id2在正常人淋巴细胞中普遍表达;Id1和Id3几乎不表达或表达水平极弱。结论 不同的Id基因在不同分化阶段的淋巴细胞中有不同的表达水平,Id1、Id3的异常表达在淋巴细胞的分化、增殖及肿瘤的发生中可能发挥一定的作用。 展开更多
关键词 分化抑制因子(Id) RT-PCR 淋巴细胞 肿瘤
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刺梨汁和诺丽汁对人卵巢癌细胞株COC2抑制作用的研究 预览 被引量:15
12
作者 许国平 张春妮 +4 位作者 汪俊军 周毓 刘琦 李克 张双全 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 137-139,共3页
目的 探讨刺梨汁(RRTJ)、诺丽汁(NoniJ)及刺梨汁联合诺丽汁对卵巢癌细胞株COC,体外生长的抑制作用。方法 RRTJ组、NoniJ组及RRTJ+NoniJ组分别作用COC2细胞和健康人外周血单个核细胞。应用细胞计数测定细胞生长情况;流式细胞术分... 目的 探讨刺梨汁(RRTJ)、诺丽汁(NoniJ)及刺梨汁联合诺丽汁对卵巢癌细胞株COC,体外生长的抑制作用。方法 RRTJ组、NoniJ组及RRTJ+NoniJ组分别作用COC2细胞和健康人外周血单个核细胞。应用细胞计数测定细胞生长情况;流式细胞术分析细胞周期变化;Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡情况;并通过测定人单个核细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性分析对细胞的毒性作用。结果 RRTJ显著抑制COC2细胞的生长,并表现出剂量依赖性,4-16μl/ml的RRTJ与COC2细胞培养48h后,可将细胞阻滞于G0/G1期(P〈0.05);经Hoechst 33258染色,细胞核呈现荧光强度高的亮蓝色团块状。NoniJ与RRTJ联用后,上述作用显著增强。人单个核细胞培养上清液中LDH活性无显著增加,提示两种果汁对细胞均无毒性。结论 RRTJ抑制卵巢癌细胞株COC2细胞生长、增殖,并诱导其凋亡,NoniJ和RRTJ协同作用效果更显著。 展开更多
关键词 刺梨汁 诺丽汁 COC2细胞 生长抑制
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低密度脂蛋白循环免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶-1及其抑制物的作用 预览 被引量:3
13
作者 顾振华 汪俊军 +2 位作者 黄宇烽 刘恋 张春妮 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 131-133,共3页
目的 探讨低密度脂蛋白循环免疫复合物(LDL-IC)对U937细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法 分别采用不同浓度的天然低密度脂蛋白(N-LDL)、氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)及... 目的 探讨低密度脂蛋白循环免疫复合物(LDL-IC)对U937细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法 分别采用不同浓度的天然低密度脂蛋白(N-LDL)、氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)及其免疫复合物作用U937细胞,通过半定量RT-PCR分析U937细胞中MMP-1和TIMP-1基因表达的变化。结果 正常U937细胞几乎不表达MMP-1,而高表达TIMP-1。N-LDL对细胞MMP-1和TIMP-1 mRNA表达没有影响。Ox-LDL能引起MMP-1轻度表达,但显著地下调TIMP的表达;而天然、氧化LDL的循环免疫复合物均非常显著地增加MMP-1和降低TIMP-1的mRNA表达(P〈0.001),且较Ox-LDL对MMP-1的作用更为显著(P〈0.001),并具剂量效应。结论 N-LDL-IC和Ox-LDL-IC增强U937细胞MMP-1 mRNA表达,下调其抑制物TIMP-1的表达。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白 循环免疫复合物 U937细胞 基质金属蛋白酶-1 组织金属蛋白酶抑制剂-1 基因表达
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1个牙本质生长不全Ⅱ型家系疾病基因的连锁分析 预览 被引量:2
14
作者 崔英霞 侯燕宁 +4 位作者 王云华 郝丽君 拜红霞 李芳秋 黄宇烽 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 34-36,共3页
目的 对一个牙本质生长不全Ⅱ型家系疾病基因进行定位。方法 提取该家系18个成员的外周血DNA;在染色体4q21上选择6个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点,即D4S1534、GATA62A11、DSP(P)、DMP1、SPP1和D4S1563:用连锁... 目的 对一个牙本质生长不全Ⅱ型家系疾病基因进行定位。方法 提取该家系18个成员的外周血DNA;在染色体4q21上选择6个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点,即D4S1534、GATA62A11、DSP(P)、DMP1、SPP1和D4S1563:用连锁分析法分析该家系疾病基因与上述6个STR位点的连锁关系并进行染色体单倍型分析。结果 有2个位点最大LOD值〉3,分别是位点GATA62A11,得到最大连锁值3.86,(θ=0);位点DSP(P)最走连锁值4.72(θ=0),单倍型分析显示疾病基因位于4q21上的D4S1534-DMP1区域内。结论 牙本质生长不全Ⅱ型家系的疾病基因定拉在4q21上。 展开更多
关键词 牙本质生长不全Ⅱ型 短串联重复序列 连锁分析
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人精子蛋白17放射免疫分析的临床应用 预览 被引量:1
15
作者 王国洪 李芳秋 +3 位作者 孙伟 许瑞吉 张中书 王筱劼 《标记免疫分析与临床》 CAS 2006年第3期 141-142,共2页
为了探讨人精子蛋白17(Sp17)放免分析的临床意义,用自建的Sp17放免分析方法,测定了正常人及部分癌症患者血清Sp17值。结果显示,卵巢癌、子宫内膜癌患者血清Sp17值分别为36.02±27.95μg/L,40.29±21.15μg/L,与对... 为了探讨人精子蛋白17(Sp17)放免分析的临床意义,用自建的Sp17放免分析方法,测定了正常人及部分癌症患者血清Sp17值。结果显示,卵巢癌、子宫内膜癌患者血清Sp17值分别为36.02±27.95μg/L,40.29±21.15μg/L,与对照组15.60±7.66μg/L相比,有显著性差异(P〈0.01);而且部分卵巢癌、子宫内膜癌患者血清Sp17值明显升高。因此血清Sp17浓度的测定可能有助于卵巢癌、子宫内膜癌症等患者的诊断和治疗,值得进一步研究。 展开更多
关键词 放射免疫分析 精子蛋白17 卵巢癌 子宫内膜癌
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人精子蛋白17放射免疫分析方法的建立 预览
16
作者 王国洪 李芳秋 +3 位作者 孙伟 许瑞吉 张中书 王筱 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期 510-511,515,共3页
目的:建立人精子蛋白17(Sp17)的放射免疫分析方法。方法:用重组人Sp17(rhSp17)免疫动物制备高质量的抗血清,用氯胺T法制备^125I-rhSp17,建立了Sp17放射免疫分析方法,并测定了正常人(n=59)及35例患者(卵巢癌20例,子宫癌14... 目的:建立人精子蛋白17(Sp17)的放射免疫分析方法。方法:用重组人Sp17(rhSp17)免疫动物制备高质量的抗血清,用氯胺T法制备^125I-rhSp17,建立了Sp17放射免疫分析方法,并测定了正常人(n=59)及35例患者(卵巢癌20例,子宫癌14例,宫颈癌1例)血清Sp17值。结果:测定范围3.3~800μg/L;灵敏度为2.0μg/L;批内CV为7.5%-9.8%,批间CV为8.2%~13.2%。正常人血清Sp17值为(15.60±7.66)μg/L。以Sp17〉31.92μg/L为阳性,35例女性肿瘤患者血清标本15例阳性。结论:Sp17的放射免疫分析是一种简便、灵敏、特异的分析方法。可满足临床和科研的需要;Sp17的测定对研究该蛋白的功能、天然分布和异常表达有重要意义。 展开更多
关键词 放射免疫分析 精子蛋白17 人类
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心内直视手术患者血浆中性粒细胞防御素的动态研究 预览
17
作者 王永杰 张育才 +3 位作者 王冬 李晓洲 曹苏梅 武建国 《东南国防医药》 2006年第3期 167-169,共3页
目的定量观察心内直视手术患者围于术期血浆中性粒细胞肽(HNP1-3)的动态变化。探讨在体外循环(CPB)诱发全身炎症反应综合征(SIRS)早期诊断中的作用。方法建立ELISA法,对CPB患者围手术期不同时间血浆中HNP1-3含量进行定量测定.... 目的定量观察心内直视手术患者围于术期血浆中性粒细胞肽(HNP1-3)的动态变化。探讨在体外循环(CPB)诱发全身炎症反应综合征(SIRS)早期诊断中的作用。方法建立ELISA法,对CPB患者围手术期不同时间血浆中HNP1-3含量进行定量测定.同时测定血浆CK、CK~MB和C—RP台埴。结果21例CPB心脏直视手术患行CPB前血浆HNP1—3为(54.55±26.45)ng/ml;CPB后0,5h血浆HNP1~3含量为(435.45±500.13)ng/ml,比CPB前显著升高(P〈0.01)、CPB后4h血浆HNP1-3含量达峰值.为(454.18±651.20)ng/ml.此后开始下降;血浆CK、CK—MB和CRP峰值出现在CPB后24h,分别为(1587.46±1500.56)U/L、(38.18±39.27)U/L和(62.63±27.08)mg/L。结论血浆HNP1-3对CPB诱发SIRS反应敏感、迅速,血浆浓度的动态变化可能提示SIRS的严重程度和发展趋势。 展开更多
关键词 体外循环 中性粒细胞肽
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前列腺特异抗原的几个临床应用问题 预览 被引量:24
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作者 武建国 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 1-3,共3页
前列腺癌(prostate cancer,PCa)在欧美男性癌症中列第二位,肿瘤致死的原因中列第三位。我国男性中PCa发病率也逐年升高,20世纪60年代,上海地区PCa发病率为0.48/10万,至1995年即达3.7/10万。长春市8家大型医院统计,1999~200... 前列腺癌(prostate cancer,PCa)在欧美男性癌症中列第二位,肿瘤致死的原因中列第三位。我国男性中PCa发病率也逐年升高,20世纪60年代,上海地区PCa发病率为0.48/10万,至1995年即达3.7/10万。长春市8家大型医院统计,1999~2001年PCa病例数较1986~1988年增加了4.6倍。作为PCa的血清标志物,早年曾以Schulman等于1964年自前列腺组织中分离的具有前列腺特异性的酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PAP)为代表,但临床应用中敏感性和特异性都不理想。 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺特异抗原 临床应用
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老年人抗梅毒螺旋体抗体测定的假阳性率偏高 预览 被引量:218
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作者 武建国 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 241-243,共3页
梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subsp.pallidum)引起的一种古老的性病,经性接触传播,全球范围分布。新中国成立后,经大力整顿,至上世纪50年代后期,我国除台湾省外梅毒已基本根除。上世纪70年代末,随着资本... 梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subsp.pallidum)引起的一种古老的性病,经性接触传播,全球范围分布。新中国成立后,经大力整顿,至上世纪50年代后期,我国除台湾省外梅毒已基本根除。上世纪70年代末,随着资本主义腐朽文化与生活方式的入侵,梅毒在我国的发病率又逐年升高。2005年国家卫生部公布,在全国27种法定报告的甲、乙类传染病中,梅毒发病人数仅次于肺结核、乙型肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、淋病而高居第五位(2002年为第七位)。 展开更多
关键词 梅毒 血清学试验 老年人
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Id3启动子/荧光素酶基因载体的构建及其在WEHI-231细胞中的活性表达 预览 被引量:1
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作者 李晓军 秦喜九美 水口纯一郎 《南京大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2006年第2期 176-183,共8页
用PCR法从WEHI-231细胞基因组DNA扩增小鼠Ida(mId3)基因5’端含启动子序列的不同长度的DNA片段(mId3-pf)亚克隆至荧光索酶(Luc)报道基因载体PGV-B2,构建由mid3基因启动子片段控制的Luc报道基因重组载体mid3-pf/PGV—B2.用电穿... 用PCR法从WEHI-231细胞基因组DNA扩增小鼠Ida(mId3)基因5’端含启动子序列的不同长度的DNA片段(mId3-pf)亚克隆至荧光索酶(Luc)报道基因载体PGV-B2,构建由mid3基因启动子片段控制的Luc报道基因重组载体mid3-pf/PGV—B2.用电穿孔术将mId3-pf/PGV-B2导人培养的WEHI-231细胞,用抗小鼠IgM抗体刺激转染后的WEHI-231细胞,24h后测定胞内Luc活性.结果表明,4种Luc报道基因重组载体转染细胞均表现较高的mId3启动子活性,与空载体转染细胞相比,启动子活性分别升高25-60倍.抗IgM抗体刺激细胞后,Id3启动子活性较未刺激细胞均呈明显增高趋势,增高幅度可达2倍左右.表明抗IgM抗体诱导WEHI231细胞Id3的上调表达与Id3转录活性的升高有关. 展开更多
关键词 分化抑制因子(Id) B细胞抗原受体(BCR) WEHI-231细胞 抗IgM抗体
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