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富核糖核酸热带假丝酵母发酵培养基优化 预览
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作者 黄芳 李欣 +4 位作者 李沛 李库 王志 代俊 陈雄 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第6期35-42,共8页
以热带假丝酵母(Candida tropicalis)AY91009为试验菌株,以其核糖核酸(RNA)含量为目标,选取糖蜜为碳源,采用响应面法对其发酵培养基进行优化,建立酵母浸粉、NH4Cl和ZnSO4·7H2O的二次回归模型,确定培养基最佳配方为:糖蜜(30%含糖量)... 以热带假丝酵母(Candida tropicalis)AY91009为试验菌株,以其核糖核酸(RNA)含量为目标,选取糖蜜为碳源,采用响应面法对其发酵培养基进行优化,建立酵母浸粉、NH4Cl和ZnSO4·7H2O的二次回归模型,确定培养基最佳配方为:糖蜜(30%含糖量)140 mL/L、酵母浸粉2.90%、NH4Cl 1.37%、NaH2PO4·2H2O 0.10%、MgSO4·7H2O 0.20%、FeSO4·7H2O 0.05%、ZnSO4·7H2O 0.10%。在此优化培养基中发酵培养12 h,RNA含量达到11.58%,比优化前提高了35.6%。20 L罐分批发酵试验结果表明,细胞干质量达到32.38 g/L,RNA含量为6.69%,总RNA含量为2.17 g/L,为后续的高密度发酵研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 热带假丝酵母 核糖核酸 培养基优化 响应面试验法
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甾醇载体蛋白2抑制剂的研究进展 预览
2
作者 陶涛 杜馨 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期30-36,共7页
农业害虫对杀虫剂抗性的持续增加,严重威胁着农业可持续发展和人类生存。高效、安全的新型农药的创制是有效控制害虫的重要保证。胆固醇是昆虫细胞膜和脂蛋白的重要组成成分,是类固醇激素的合成前体。但昆虫本身缺乏合成胆固醇的关键酶... 农业害虫对杀虫剂抗性的持续增加,严重威胁着农业可持续发展和人类生存。高效、安全的新型农药的创制是有效控制害虫的重要保证。胆固醇是昆虫细胞膜和脂蛋白的重要组成成分,是类固醇激素的合成前体。但昆虫本身缺乏合成胆固醇的关键酶,无法从头合成胆固醇,需要从植物中摄取。甾醇载体蛋白2(SCP-2)在昆虫转运胆固醇的过程中起着关键作用。SCP-2可以作为筛选高效安全新农药的潜在靶标。本文就近几年筛选出的甾醇载体蛋白2抑制剂进行了总结。 展开更多
关键词 甾醇载体蛋白2 害虫防治 新农药创制 筛选方法 抑制剂
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芽孢杆菌在中国白酒酿造中的应用机理研究进展 预览 被引量:1
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作者 罗莉 李欣 +3 位作者 常煦 李兆飞 贾盼 李志军 《酿酒科技》 2019年第1期99-104,共6页
中国白酒因其独特的香型分类以及酿造方式,在国际酒类中独树一帜。多种微生物混合发酵体系是中国白酒区分绝大多数酒种的最具代表性的特点之一。作为一类古老的酒种,很早就在酿造工艺控制及制曲控制上形成一套完整的体系。在现代酿造学... 中国白酒因其独特的香型分类以及酿造方式,在国际酒类中独树一帜。多种微生物混合发酵体系是中国白酒区分绝大多数酒种的最具代表性的特点之一。作为一类古老的酒种,很早就在酿造工艺控制及制曲控制上形成一套完整的体系。在现代酿造学不断发展的今天,人们逐步将目光从宏观控制转向更深一层的微观控制,也认识到了酿造科学的核心——微生物。本文从多方面、多角度总结了目前中国白酒酿造中的一类特别的微生物——芽孢杆菌的应用及相关机理研究,对该类微生物的研究及应用有一定的指导作用。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 中国白酒 酿造 机理研究 应用研究
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苦荞营养、功能和香气成分的研究进展 预览
4
作者 周冉冉 李可心 +1 位作者 陈茂彬 张玉 《中国酿造》 北大核心 2018年第12期12-15,共4页
苦荞麦是我国传统的杂粮品种之一,有丰富的可开发功能性成分,可加工成多种保健食品和药品,市场发展前景十分广阔。该文对苦荞的营养、功能性成分和挥发性香气成分的研究进展进行综述,并对苦荞食品的深加工进行总结,为今后高营养附加值... 苦荞麦是我国传统的杂粮品种之一,有丰富的可开发功能性成分,可加工成多种保健食品和药品,市场发展前景十分广阔。该文对苦荞的营养、功能性成分和挥发性香气成分的研究进展进行综述,并对苦荞食品的深加工进行总结,为今后高营养附加值、优质风味苦荞食品的综合开发利用提供参考。 展开更多
关键词 苦荞麦 营养成分 功能成分 苦荞制品 香气成分 研究进展
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微生物葡萄糖氧化酶的研究进展 预览 被引量:2
5
作者 廖兆民 蔡俊 林建国 《食品与发酵工业》 CSCD 北大核心 2018年第7期308-315,共8页
葡萄糖氧化酶是一种能够专一性催化β-D-葡萄糖氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢的需氧脱氢酶,在食品、医药、化工、纺织、生物技术等领域具有重大应用价值。微生物是产葡萄糖氧化酶的主要来源,具有生长繁殖快、产酶效率高、纯化过程简单、... 葡萄糖氧化酶是一种能够专一性催化β-D-葡萄糖氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢的需氧脱氢酶,在食品、医药、化工、纺织、生物技术等领域具有重大应用价值。微生物是产葡萄糖氧化酶的主要来源,具有生长繁殖快、产酶效率高、纯化过程简单、适合商业化生产等特点。该文从产葡萄糖氧化酶的微生物来源、产酶菌株的基因工程改造及葡萄糖氧化酶的应用等方面对微生物葡萄糖氧化酶进行综述,为产葡萄糖氧化酶微生物的开发及基因工程技术在菌种选育上的应用提供理论参考。 展开更多
关键词 微生物 葡萄糖氧化酶 基因工程 理化性质
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紫色红曲霉中新型酯酶ESM1的纯化及其酶学特性研究 预览
6
作者 张玉 周冉冉 +2 位作者 李可心 黄宇 陈茂彬 《中国酿造》 北大核心 2018年第12期137-142,共6页
该研究以白酒大曲中筛选出的一株高产酯酶菌株HQ为研究对象,采用分子生物学对其进行菌种鉴定。通过硫酸铵二级沉淀、丁基琼脂糖凝胶柱和Superdex G-200柱对其所产的酯酶进行纯化,并进行N-端序列、质谱和酶学性质分析。结果表明,菌株HQ... 该研究以白酒大曲中筛选出的一株高产酯酶菌株HQ为研究对象,采用分子生物学对其进行菌种鉴定。通过硫酸铵二级沉淀、丁基琼脂糖凝胶柱和Superdex G-200柱对其所产的酯酶进行纯化,并进行N-端序列、质谱和酶学性质分析。结果表明,菌株HQ被鉴定为紫红曲霉(Monascus purpureus),经纯化获得一个分子质量为60kDa的酯酶,命名为ESM1。酯酶ESM1具有一段酸性蛋白酶的肽段序列,最适温度为60℃、最适pH值为7.0,在温度为50℃的环境和中性环境中表现出良好的稳定性。Zn^2+、Ca^2+和Na^+对ESM1有促进作用,其中Zn2+促进作用最高,Cu^2+、Mg^2+、Fe^2+和Mn^2+有抑制作用,其中Cu^2+的抑制作用最强。 展开更多
关键词 紫色红曲霉 酯酶 纯化 酶学性质
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卡他莫拉菌UspA1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2
7
作者 王辉 杨波 +8 位作者 赵可胜 李家吉 李新 孔萌萌 宫春杰 王毅 陶冶 张秋 胡征 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期102-109,共8页
为制备抗卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis,Mc)表面蛋白UspA1胞外结构域的多克隆抗体(PcAb),对UspA1蛋白进行生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段,找到其对应的基因序列并引入大肠杆菌偏好性密码子,对其优化后... 为制备抗卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis,Mc)表面蛋白UspA1胞外结构域的多克隆抗体(PcAb),对UspA1蛋白进行生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段,找到其对应的基因序列并引入大肠杆菌偏好性密码子,对其优化后化学合成全基因序列。将该基因序列按常规方法克隆入表达载体p ET-28a(+)后表达重组UspA1-His融合蛋白并纯化。以该纯化抗原免疫新西兰大白兔,经4次免疫后,用Protein A亲和层析柱从抗血清中纯化出抗UspA1-His融合蛋白PcAbIgG。经免疫荧光法、酶联免疫吸附法及Western blotting鉴定,抗UspA1-His融合蛋白PcAb能特异性识别UspA1蛋白的表面暴露区。该多抗的制备为下一步建立卡他莫拉菌快速检测技术奠定了基础。 展开更多
关键词 卡他莫拉菌 UspA1蛋白 原核表达 多克隆抗体
糯米甜酒曲根霉的筛选及强化曲的研究 预览 被引量:2
8
作者 魏浩林 周金虎 +4 位作者 刘凤春 管健 邓其锦 陈茂彬 方尚玲 《中国酿造》 北大核心 2017年第9期41-44,共4页
选取5种不同地域、较为畅销的市售糯米甜酒曲,以酒曲酶活力为评价指标,筛选出优良糯米甜酒曲。将优良酒曲中霉菌进行分离纯化,制作纯种根霉曲,与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)不同比例混合复配制作强化曲。通过强化曲与市... 选取5种不同地域、较为畅销的市售糯米甜酒曲,以酒曲酶活力为评价指标,筛选出优良糯米甜酒曲。将优良酒曲中霉菌进行分离纯化,制作纯种根霉曲,与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)不同比例混合复配制作强化曲。通过强化曲与市售酒曲的酒曲酶活力对比,并结合试制糯米甜酒的总糖、总酸、总酯、酒精度对比验证。结果表明,强化曲的最佳复配比例为:接种量为l%(其中根霉M9曲添加量0.90%,酿酒酵母添加量0.10%)。与市售甜酒曲相比,强化曲糖化力达796.5U/g,提高14.8%;液化力达694.2U/g,提高20.7%;试制糯米甜酒的总酯达0.78g/L,提高168.9%;酒精度达12.1%vol,提高92.1%。经感官评价,强化曲酿制糯米甜酒口感醇甜、风味突出,感官评分为96分。 展开更多
关键词 糯米甜酒曲 筛选 霉菌 强化曲
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丁酸梭菌的鉴定与发酵培养基配方优化 预览 被引量:5
9
作者 夏会丽 陈思思 +5 位作者 陈雄 代俊 黄亚男 谢婷 李爱玲 王志 《食品科学》 EI CSCD 北大核心 2017年第8期56-62,共7页
从河畔污泥中筛选出一株丁酸梭状芽孢杆菌(ClostridiumbutyricumHBUT-01),其16SrDNA核苷酸序列与ClostridiumbutyricumDSM10702T菌的16SrDNA(AQQF01000149)的核苷酸序列同源性为99%。采用响应面法对丁酸梭菌HBUT-01的培养基配方进... 从河畔污泥中筛选出一株丁酸梭状芽孢杆菌(ClostridiumbutyricumHBUT-01),其16SrDNA核苷酸序列与ClostridiumbutyricumDSM10702T菌的16SrDNA(AQQF01000149)的核苷酸序列同源性为99%。采用响应面法对丁酸梭菌HBUT-01的培养基配方进行优化,建立酵母粉、CaCO3和葡萄糖用量的二次回归模型,确定培养基最佳配方与质量分数为:葡萄糖1.60%、酵母粉0.72%、CaCO30.43%、蛋白胨2.50%、K2HPO40.05%、MgSO4·7H2O0.08%、MnSO4·H2O0.002%。10L罐分批发酵实验确定了丁酸的比生成速率(qp)、细胞得率系数(Yx/s)分别比优化前降低了20%和提高了132%,说明优化后酸胁迫效应得到了缓解,细胞活性得到了有效的维持,使得生物量(14h)达到了9.32×108CFU/mL,是优化前(4.16×108CFU/mL)的2.24倍。 展开更多
关键词 丁酸梭菌 16SrDNA 培养基优化 酸胁迫
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白酒功能菌的功能特性及应用研究 预览 被引量:4
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作者 管健 廖蓓 +4 位作者 李兆飞 魏浩林 曹敬华 陈茂彬 方尚玲 《中国酿造》 北大核心 2017年第8期1-5,共5页
在传统白酒酿造过程中,微生物对白酒的风味起着重要的作用,要提高白酒品质必须要对白酒功能菌进行研究。该文从功能菌的功能特性和菌种的应用两方面进行综述,介绍了白酒功能菌的功能特性以及其在不同香型白酒中的使用情况,并指出将不同... 在传统白酒酿造过程中,微生物对白酒的风味起着重要的作用,要提高白酒品质必须要对白酒功能菌进行研究。该文从功能菌的功能特性和菌种的应用两方面进行综述,介绍了白酒功能菌的功能特性以及其在不同香型白酒中的使用情况,并指出将不同种类的功能性微生物进行复配、优化、并应用于不同香型的白酒是功能菌研究的发展趋势。 展开更多
关键词 白酒 功能菌 特性 应用
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浓香型白酒夏冬两季生产车间及大曲中霉菌与放线菌的分离纯化 预览 被引量:3
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作者 李良 郑桂朋 +3 位作者 吴昊 岳智 陈茂彬 镇达 《中国酿造》 北大核心 2017年第11期54-58,共5页
为研究湖北咸宁浓香型黄鹤楼酒霉菌和放线菌的类型和特点,采用不同的培养基,对夏季和冬季车间样品微生物进行分离纯化及形态鉴别。结果表明,夏季车间空气中分离到15株霉菌,大曲中10株霉菌(104~105 CFU/g),窖泥中1株霉菌和1株放线菌(... 为研究湖北咸宁浓香型黄鹤楼酒霉菌和放线菌的类型和特点,采用不同的培养基,对夏季和冬季车间样品微生物进行分离纯化及形态鉴别。结果表明,夏季车间空气中分离到15株霉菌,大曲中10株霉菌(104~105 CFU/g),窖泥中1株霉菌和1株放线菌(102~103 CFU/g)。冬季车间空气中分离到9株霉菌,大曲中9株霉菌(104~105 CFU/g),窖泥中7株霉菌(103~104 CFU/g);窖泥霉菌菌落的气丝少,形态与空气及大曲中的主要霉菌差异显著。比较冬季和夏季样品,仅从冬季大曲的曲心和曲皮中分离到青霉,从夏季底泥中分离到一株放线菌,冬季的空气霉菌少于夏季,而冬季窖泥中的霉菌多于夏季。 展开更多
关键词 浓香型白酒 生产车间 大曲 霉菌 放线菌 分离纯化
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1株耐重金属细菌的筛选、鉴定及吸附性能研究 预览
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作者 代俊 黄珍 +3 位作者 徐智 李欣 王志 陈雄 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第5期66-70,共5页
为了更加有效地对重金属污染环境进行生物修复,从Cd污染废水中分离到1株耐Cd的菌株DJ16,经形态观察、生理生化特性、脂肪酸组分及16S rRNA基因序列分析确定该菌株属于沙雷氏菌属(Serratia).该菌株的重金属耐受性试验表明,菌株对Zn^2... 为了更加有效地对重金属污染环境进行生物修复,从Cd污染废水中分离到1株耐Cd的菌株DJ16,经形态观察、生理生化特性、脂肪酸组分及16S rRNA基因序列分析确定该菌株属于沙雷氏菌属(Serratia).该菌株的重金属耐受性试验表明,菌株对Zn^2+的耐受性最强,Cd^2+次之,Cu^2+最差。菌株的重金属富集试验显示,菌株对Cu^2+、Zn^2+的吸附量随培养时间的增加先增加后降低,对Cu^2+的吸附量在培养12G时最高,为6.8mg/g,对Zn^2+的吸附量也在培养12G时最高,为9.0mg/g.菌株对Cd^2+的吸附量随培养时间的增加而增加,培养36G时最高,为8.8mg/g.综上,该菌株在生物修复方面具有很大的应用前景. 展开更多
关键词 沙雷氏菌 菌种鉴定 重金属抗性 吸附特性
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玉米赤霉烯酮生物脱毒与降解的研究进展 预览 被引量:1
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作者 刘盼 蔡俊 《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第2期1-5,共5页
玉米赤霉烯酮(ZEN)是由镰刀菌属(Fusarium.sp)产生的污染范围比较广的一种毒素,它在自然界中广泛存在。物理、化学脱毒法成本高且对人类、动植物有一定的损害,生物法因其具有高效性、无污染且降解率高而被科学界关注。该文概述... 玉米赤霉烯酮(ZEN)是由镰刀菌属(Fusarium.sp)产生的污染范围比较广的一种毒素,它在自然界中广泛存在。物理、化学脱毒法成本高且对人类、动植物有一定的损害,生物法因其具有高效性、无污染且降解率高而被科学界关注。该文概述了玉米赤霉烯酮的物理、化学和生物脱毒方法,并对脱毒后的产物进行了简要介绍,对不同降解菌株的降解机制以及降解酶基因的表达和产物毒性进行了综述。 展开更多
关键词 真菌毒素 玉米赤霉烯酮 脱毒 生物降解
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高耐性酱油酵母选育及其高密度发酵调控 预览
14
作者 陈雄 李欣 +1 位作者 王志 代俊 《生物产业技术》 2017年第1期71-75,共5页
高耐性酵母广泛应用于食品、酿造、饲料、生物能源等行业,酵母的耐受性对其生产和应用有着决定性影响。高耐性酵母菌种改良是酵母资源利用的关键步骤,高密度发酵是克服耐性酵母产业化的主要瓶颈技术。对传统酿造食品酱油生产中常用的耐... 高耐性酵母广泛应用于食品、酿造、饲料、生物能源等行业,酵母的耐受性对其生产和应用有着决定性影响。高耐性酵母菌种改良是酵母资源利用的关键步骤,高密度发酵是克服耐性酵母产业化的主要瓶颈技术。对传统酿造食品酱油生产中常用的耐高盐酵母菌株的选育、耐性机制及其高密度发酵技术研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 高耐性酱油酵母 选育 抗逆机制 高密度发酵
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黄姜中薯蓣皂苷元提取工艺的优化 预览 被引量:2
15
作者 赵国强 王常高 +2 位作者 林建国 杜馨 蔡俊 《中成药》 CSCD 北大核心 2017年第9期1834-1837,共4页
目的优化黄姜中薯蓣皂苷元的提取工艺。方法先优化自然预发酵的温度(45、52、62℃)和时间(12、24、36 h)。再以纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶酶量为影响因素,薯蓣皂苷元得率为评价指标,正交试验优化提取工艺。结果最佳自然预发酵条件... 目的优化黄姜中薯蓣皂苷元的提取工艺。方法先优化自然预发酵的温度(45、52、62℃)和时间(12、24、36 h)。再以纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶酶量为影响因素,薯蓣皂苷元得率为评价指标,正交试验优化提取工艺。结果最佳自然预发酵条件为45℃发酵24 h,52℃发酵12 h,62℃发酵36 h;最佳提取条件为纤维素酶酶量50 U/g,木聚糖酶酶量100 U/g,果胶酶酶量120 U/g,薯蓣皂苷元得率0.845%,比恒温自然发酵下提高了69%。结论该方法稳定可行,可用于提取黄姜中薯蓣皂苷元。 展开更多
关键词 黄姜 薯蓣皂苷元 提取
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抗癌肽研究进展 预览 被引量:1
16
作者 岳硕豪 田弛 +1 位作者 胡元昭 张军林 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2017年第11期41-47,共7页
随着全球癌症患病比例的逐年增加,癌症已经成为全球死亡的主要原因和重大的公共卫生问题。抗癌肽能破坏肿瘤细胞膜结构或抑制癌细胞增殖和迁移以及肿瘤血管的形成,几乎不表现溶血性且对正常的人体细胞基本无损伤等优点,已经成为抗肿瘤... 随着全球癌症患病比例的逐年增加,癌症已经成为全球死亡的主要原因和重大的公共卫生问题。抗癌肽能破坏肿瘤细胞膜结构或抑制癌细胞增殖和迁移以及肿瘤血管的形成,几乎不表现溶血性且对正常的人体细胞基本无损伤等优点,已经成为抗肿瘤新药研究的一大热点。抗癌肽主要来源可分为4类:抗菌肽类如牛乳铁蛋白肽(Lfcin B)、天蚕素等,对细菌等微生物具有广谱高效的抑制活性,同时能够抑制多种癌细胞的增殖和生长,诱导癌细胞凋亡;多肽激素类如心房利钠肽(ANP)以及在ANP形成过程中的其他一些多肽,在临床上具有增加血管通透性、降压、利钠、利尿、舒张血管平滑肌、调节水盐平衡和抑制细胞增殖等作用,最近研究发现它们可以直接杀死肿瘤细胞或强力抑制癌细胞DNA的合成,从而抑制癌细胞的生长;多肽毒素类如蜂毒、蛇毒、蝎毒等毒性较强的生物毒素,对多种肿瘤均有抑制作用;内皮抑制素可以抑制肿瘤血管的生成抑制癌细胞的生长和转移。抗癌肽主要通过诱导细胞凋亡、破坏细胞的膜结构,改变细胞周围或细胞内p H以及增强免疫应答等多种机制来抑制癌细胞增殖。综述抗癌肽的来源、抑癌机理,并对抗癌肽的应用前景进行分析,旨为抗癌肽的深入研究和开发应用提供参考。 展开更多
关键词 抗癌肽 抗癌肽来源 抑癌机理
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抑制乳腺癌患者自体CD3AK细胞PD-1的表达对杀伤MCF-7/adr细胞的影响 预览
17
作者 刘力伟 刘波 +2 位作者 周敏 孙宏浩 潘跃银 《肿瘤防治研究》 CSCD 北大核心 2017年第9期580-584,共5页
目的探讨抑制PD-1表达后的乳腺癌患者自体CD3AK细胞对乳腺癌MCF-7/adr细胞的杀伤作用。方法采用慢病毒介导反转录技术将已构建的PD-1重组质粒转染入CD3AK细胞抑制PD-1的表达,流式细胞法检测PD-L1的表达情况;CD3AK细胞与MCF-7/adr细胞共... 目的探讨抑制PD-1表达后的乳腺癌患者自体CD3AK细胞对乳腺癌MCF-7/adr细胞的杀伤作用。方法采用慢病毒介导反转录技术将已构建的PD-1重组质粒转染入CD3AK细胞抑制PD-1的表达,流式细胞法检测PD-L1的表达情况;CD3AK细胞与MCF-7/adr细胞共培养,CCK-8法测定各组的杀伤率,分别由荷瘤BALB/c裸鼠尾静脉注入空白质粒组和PD-1质粒组细胞和0.9%氯化钠溶液,观察各组的抑瘤作用。结果反转录技术可有效抑制CD3AK细胞PD-1的表达(P〈0.01);RT-PCR结果显示lentiviral vector/PD-1使CD3AK细胞PD-1基因表达水平降低;CCK-8结果显示培养第14、21天的空白质粒组和PD-1质粒组对MCF-7/adr细胞的杀伤率分别为42.98%和62.68%,47.22%和66.95%(P〈0.01);裸鼠体内实验表明,PD-1质粒组CD3AK细胞能够显著抑制肿瘤的生长,其抑瘤率可达74.8%。结论 MCF-7/adr细胞表面高表达PD-L1,抑制PD1的表达可有效提高CD3AK细胞的杀伤能力。 展开更多
关键词 PD-1 自体CD3AK细胞 MCF-7/ADR PD-L1 杀伤作用
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两种半纤维素酶在毕赤酵母中的共表达 预览
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作者 杨青 张莉 +1 位作者 张华山 熊海容 《湖北农业科学》 2017年第10期1971-1972,1979共3页
基于定向改造的木聚糖酶(DSB)和甘露聚糖酶(ManA),通过不同的整合位点和抗性标记实现这两种酶在同一宿主GS115中的整合与筛选,获得了共表达菌株GS115/DSB-ManA。其热稳定性检测结果表明,该共表达菌株产出的DSB与ManA均有较高的热稳... 基于定向改造的木聚糖酶(DSB)和甘露聚糖酶(ManA),通过不同的整合位点和抗性标记实现这两种酶在同一宿主GS115中的整合与筛选,获得了共表达菌株GS115/DSB-ManA。其热稳定性检测结果表明,该共表达菌株产出的DSB与ManA均有较高的热稳定性。重组菌株两种酶的成功表达为复合酶制剂的研究和生产奠定了基础。 展开更多
关键词 木聚糖酶(DSB) 甘露聚糖酶ManA 毕赤酵母(Pichia pastoris) 共表达
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一株全基因合成的高温嗜碱甘露聚糖酶的酶学性质分析 预览
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作者 汪斌 张华山 熊海容 《湖北农业科学》 2017年第12期2356-2358,共3页
根据来源于褐色高温单孢菌(Thermomonospora fusca)YX基因组序列,预测并合成了甘露聚糖酶ManB全基因序列(Accession No.KJ806638),与表达载体pPIC9K重组后,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,筛选获得重组菌株ManB-GS115。其酶... 根据来源于褐色高温单孢菌(Thermomonospora fusca)YX基因组序列,预测并合成了甘露聚糖酶ManB全基因序列(Accession No.KJ806638),与表达载体pPIC9K重组后,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,筛选获得重组菌株ManB-GS115。其酶学性质检测结果表明,该酶最适温度为70℃,最适pH为9.0。该甘露聚糖酶ManB在碱性高温环境下有较高的酶活力,可应用于食品、酿造、饲料、纺织和医药等工业领域。 展开更多
关键词 甘露聚糖酶 毕赤酵母(Pichia pastoris) 基因合成 酶学性质
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介导两种半纤维素酶分泌表达的信号肽比较
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作者 杨青 汪斌 +3 位作者 王亚伟 张华山 熊海容 张莉 《中国生物工程杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期15-22,共8页
木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶,广泛应用于诸多领域。选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1,以α-factor为参照,分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶Man A,选择适合DSB... 木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶,广泛应用于诸多领域。选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1,以α-factor为参照,分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶Man A,选择适合DSB和Man A表达的信号肽以提高胞外酶活水平。结果表明不同信号肽引导的两种半纤维素酶的酶活水平相差较大:对DSB(分子量为23k Da),α-factor介导的表达效率明显优于其它3种信号肽;但对Man A(分子量为30k Da),Dse4和α-factor介导的表达效率相当且明显优于Scw11和Exg1。因此在X33中表达DSB时应选用α-factor,而表达Man A时应选用Dse4或α-factor。此外胞内酶活的结果显示α-factor介导的DSB和Man A重组菌胞内滞留酶活明显高于其它信号肽,而分子量为30k Da的Man A的滞留酶活又明显高于分子量为23k Da的DSB,因此在表达Man A蛋白时,选用其它的信号肽,如Dse4,会减少外源蛋白在胞内的滞留从而在一定程度上提高外源蛋白的分泌量。因此为毕赤酵母表达系统鉴定更多可用的信号肽并筛选到针对目的蛋白的最优信号肽奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 信号肽 巴斯德毕赤酵母 木聚糖酶(DSB) 甘露聚糖酶(ManA)
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