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9种生物杀菌剂对樱桃茎腐病菌的室内毒力测定 预览
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作者 林霞 于晓丽 +2 位作者 王群青 王培松 王英姿 《安徽农业科学》 CAS 2019年第2期129-131,共3页
[目的]测定不同生物杀菌剂对樱桃茎腐病菌的毒力。[方法]采用平皿法,分析3%多抗霉素WP、0.3%丁子香酚SL、1.5%苦参碱AS、2%蛇床子素EC、4%宁南霉素AS、80%乙蒜素EC、6%春雷霉素WP、0.5%香芹酚AS、10%井冈霉素AS对樱桃茎腐病菌的抑菌效果... [目的]测定不同生物杀菌剂对樱桃茎腐病菌的毒力。[方法]采用平皿法,分析3%多抗霉素WP、0.3%丁子香酚SL、1.5%苦参碱AS、2%蛇床子素EC、4%宁南霉素AS、80%乙蒜素EC、6%春雷霉素WP、0.5%香芹酚AS、10%井冈霉素AS对樱桃茎腐病菌的抑菌效果。[结果]除多抗霉素外,其余8种供试杀菌剂均对樱桃茎腐病菌表现出一定的毒力效果,但不同杀菌剂间的毒力差别较大。丁子香酚、乙蒜素、蛇床子素、春雷霉素、香芹酚、宁南霉素、苦参碱和井冈霉素对樱桃茎腐病菌烟草疫霉的EC50分别为0.0153、1.2925、10.6309、50.9932、117.4720、286.0092、413.9050和587.7674mg/L。丁子香酚对樱桃茎腐病菌的抑制效果最好,其次为乙蒜素和蛇床子素,春雷霉素、香芹酚、宁南霉素、苦参碱和井冈霉素的抑制效果较差,多抗霉素对樱桃茎腐病菌没有抑制效果。[结论]该研究为田间防治茎腐病和有效药剂的筛选提供理论依据。 展开更多
关键词 樱桃茎腐病 烟草疫霉 生物杀菌剂 毒力
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甘蔗花叶病毒辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备
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作者 许小洁 于伟鹏 +4 位作者 杨广玲 韩士玲 何梦君 杨旭 李向东 《山东农业科学》 2019年第3期87-91,共5页
利用RT-PCR克隆甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV) DWK1分离物辅助成分-蛋白酶(helper component-proteinase,HC-Pro)基因,酶切后连接原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-HC-Pro。将重组质粒转化大肠杆菌菌株Ros... 利用RT-PCR克隆甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV) DWK1分离物辅助成分-蛋白酶(helper component-proteinase,HC-Pro)基因,酶切后连接原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-HC-Pro。将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,经IPTG诱导后,表达出57 kD的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,多点注射法免疫新西兰长耳兔,制备SCMV HC-Pro抗血清。间接ELISA结果表明,该血清效价为1∶8 192。感染DWK1的玉米叶片病汁液稀释128倍时,该血清仍然能够有效检测出HC-Pro。Western-blot检测结果表明,该血清可特异性检测SCMV第Ⅰ组分离物DWK1和第Ⅳ组分离物DWK2,与同属的烟草脉带花叶病毒(TVBMV)和马铃薯Y病毒(PVY)均无反应。本研究为准确、快速检测SCMV HC-Pro并进一步研究其功能和作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 辅助成分-蛋白酶 原核表达 抗血清 检测
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牦牛酸奶酪中高产乳糖酶菌株分离鉴定及其酶学性质 预览
3
作者 陆云彪 王盈桐 +3 位作者 李学威 刘晓东 赵凤春 田园 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第5期124-129,共6页
为获得藏区牦牛酸奶酪中的产乳糖酶活力高的菌株,采用含X-gal的培养基进行初筛,从购买的10份样品中筛选到10株产乳糖酶细菌;发酵复筛后,发现其中RTM-111菌株的产酶活力最高。综合形态学特征、生理生化实验及16S rDNA序列分析,确定该菌... 为获得藏区牦牛酸奶酪中的产乳糖酶活力高的菌株,采用含X-gal的培养基进行初筛,从购买的10份样品中筛选到10株产乳糖酶细菌;发酵复筛后,发现其中RTM-111菌株的产酶活力最高。综合形态学特征、生理生化实验及16S rDNA序列分析,确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。对该菌株所产乳糖酶的酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为50℃,最适pH为7.5。稳定性实验表明,该酶在温度40~50℃、pH6.5~8.0时具有较高稳定性。金属离子Na+、Mg2+和Mn2+对酶活性具有较强的激活作用,而Cu2+、Zn2+和EDTA对酶活有显著的抑制作用。枯草芽孢杆菌RTM-111产乳糖酶活力高、酶的性质稳定,具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 牦牛酸奶酪 乳糖酶 分离 鉴定 酶学性质
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两种类型黄瓜花叶病毒卫星RNA的序列、结构以及对辅助病毒的致病性调控分析
4
作者 刘珊珊 于成明 +4 位作者 曹欣然 耿国伟 李向东 师科荣 原雪峰 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期365-372,共8页
黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)卫星RNA(satellite RNA,satRNA)通常影响CMV的致病性。本研究设计了检测satCMV的简并引物,通过RT-PCR从山东省泰安市3种自然发病寄主中检测到satCMV,发现了两类长度有明显差异的satCMV:白... 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)卫星RNA(satellite RNA,satRNA)通常影响CMV的致病性。本研究设计了检测satCMV的简并引物,通过RT-PCR从山东省泰安市3种自然发病寄主中检测到satCMV,发现了两类长度有明显差异的satCMV:白菜与萝卜中克隆的satCMV为339个核苷酸,二者的核苷酸一致率为99.41%;烟草中克隆的satCMV为383个核苷酸,与白菜和萝卜中satCMV的核苷酸序列一致率均为71.06%。系统进化分析表明这两类长度有明显差异的satCMV亲缘关系较远。两种类型的satCMV与CMV-Fny混合接种对CMV致病症状的调控存在明显差异。利用m Fold软件分析了两类不同长度的CMV卫星RNA基因组及其互补链的RNA结构特征,表明两类sat CMV与CMV互作的活跃度以及核心结构域存在差异。两类satCMV全基因组的克隆以及结构分析为研究不同类型satCMV与CMV的互作及其对CMV致病性的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 卫星RNA 系统进化 RNA结构
分离自土壤的丝葚霉属和鞘格孢属的2个新种
5
作者 吴悦明 耿月华 +1 位作者 孔金花 张天宇 《菌物研究》 CAS 2018年第2期84-86,共3页
报道了分离自我国土壤的丝葚霉属和鞘格孢属的2个新种,即沙生丝葚霉Papulaspora deserticola和竖孢鞘格孢Coleodictyospora verticalispora。其中,P.deserticola的分生孢子顶生,多单生,近球形,直径23.5-35.0μm,中部形成多个暗红褐色、... 报道了分离自我国土壤的丝葚霉属和鞘格孢属的2个新种,即沙生丝葚霉Papulaspora deserticola和竖孢鞘格孢Coleodictyospora verticalispora。其中,P.deserticola的分生孢子顶生,多单生,近球形,直径23.5-35.0μm,中部形成多个暗红褐色、相互挤压呈多角形或不规则形的细胞,直径5-10μm,外围包被一层近无色、光滑的细胞鞘膜;C.verticalispora的分生孢子多呈倒梨形,由多个近球形的细胞组成,隔膜处明显隘缩,红褐色,光滑或略粗糙,孢身外具一层淡褐色的泡状囊膜,21.8-40.6×12.5-21.8μm。对新种与各自相似种的区别进行了详尽讨论。新种的模式标本(干制培养物)保藏于山东农业大学植物病理学标本室(HSAUP),等模式标本(干制培养物)存放在中国科学院真菌标本馆(HMAS)。 展开更多
关键词 土壤真菌 暗色丝孢菌 分类
西瓜花叶病毒抗血清制备及其应用
6
作者 冀树娴 王姝雯 +3 位作者 王健 李向东 朱天生 田延平 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期833-837,共5页
西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)是危害葫芦科作物的重要病毒。制备特异性强、效价高的抗血清对快速准确检测和鉴定WMV具有重要意义。本研究将WMV外壳蛋白(Coatprotein,CP)基因克隆到原核表达载体pE-HISTEV获得pEHISTEV-WMV... 西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)是危害葫芦科作物的重要病毒。制备特异性强、效价高的抗血清对快速准确检测和鉴定WMV具有重要意义。本研究将WMV外壳蛋白(Coatprotein,CP)基因克隆到原核表达载体pE-HISTEV获得pEHISTEV-WMV-CP。将pEHISTEV-WMV-CP转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,成功表达出分子量约为36kDa的蛋白,与预期WMVCP大小一致。切胶回收WMVCP,与等体积弗氏不完全佐剂充分乳化后免疫健康新西兰大白兔。Westernblotting结果表明,制备的抗血清与WMVCP有反应,与同属的番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)和烟草花叶病毒属的黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaicvirus,CGMMV)均无反应。酶联免疫吸附测定(PTA-ELISA)结果表明,本研究制备的WMV抗血清效价为1:8192,并且能够检测稀释512倍的病毒汁液。利用该抗血清对田间采集的10个RT-PCR检测为阳性的样品进行检测,全部呈现阳性。本研究利用大肠杆菌表达的CP制备的WMV抗血清具有较高的特异性和灵敏度。研究结果为WMV的快速检测和鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 抗血清 外壳蛋白 原核表达 西瓜花叶病毒
分离自土壤的淡领瓶霉属和匍柄霉属的2个新种
7
作者 吴悦明 许俊杰 +1 位作者 高红 张天宇 《菌物研究》 CAS 2018年第4期201-204,共4页
报道了分离自中国土壤中淡领瓶霉属及匍柄霉属的2个新种:球孢淡领瓶霉Cadophora shaerospora及福建匍柄霉Stemphylium fujianensis。其中,C. shaerospora的产孢瓶体3~5个簇生,淡褐色,瓶状,光滑,长6.5~15.0μm,基部稍细,1.5~3.0μm宽,中... 报道了分离自中国土壤中淡领瓶霉属及匍柄霉属的2个新种:球孢淡领瓶霉Cadophora shaerospora及福建匍柄霉Stemphylium fujianensis。其中,C. shaerospora的产孢瓶体3~5个簇生,淡褐色,瓶状,光滑,长6.5~15.0μm,基部稍细,1.5~3.0μm宽,中部膨大,围领近无色。分生孢子单生或常链生,淡褐色,球形至阔卵形,2.5~4.5×2.0~3.0μm。S. fujianensis的分生孢子单生,顶生,椭圆形至广椭圆形,基部钝圆,顶端钝尖状或钝圆,淡褐色至中度褐色,具5~8个横隔膜,多个纵、斜隔膜,光滑,(26.5~) 40.0~59.5×17.0~31.0μm。脐部暗色疤痕状,4~6μm宽。对新种与各自相似种的区别进行了详尽讨论。新种的模式标本(干制培养物)保存于山东农业大学植物病理学标本室(HSAUP),等模式标本(干制培养物)存放在中国科学院真菌标本馆(HMAS)。 展开更多
关键词 土壤真菌 暗色丝孢菌 分类
马铃薯Y病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备
8
作者 王玉 黄显德 +4 位作者 魏代福 温亮 杨举田 陈秀斋 田延平 《山东农业科学》 2018年第1期111-114,共4页
采用RT-PCR方法扩增马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,将其连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒pEHISTEV-PVY-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,可以表达出分子量为35 k D的融合蛋白。切... 采用RT-PCR方法扩增马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,将其连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒pEHISTEV-PVY-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,可以表达出分子量为35 k D的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰大耳兔制备PVY CP抗血清。间接ELISA结果表明,该抗血清的效价为1∶16384,Western blot分析表明该抗血清只与感染PVY的普通烟植株有特异性反应,而与健康普通烟和感染PVX的普通烟植株无反应。本研究为PVY的血清学检测以及早期预警奠定了基础。 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒 衣壳蛋白 原核表达 抗血清制备
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甘蔗花叶病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备
9
作者 许小洁 张继武 +3 位作者 徐德坤 殷复伟 田延平 李向东 《山东农业科学》 2018年第8期106-109,共4页
将甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)第Ⅰ组分离物DWK1和第Ⅳ组分离物DWK2的衣壳蛋白(coat protein,CP)基因分别克隆到原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-Ⅰ-CP和pEHISTEV-SCMV-Ⅳ-CP。将两个重组质粒转化... 将甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)第Ⅰ组分离物DWK1和第Ⅳ组分离物DWK2的衣壳蛋白(coat protein,CP)基因分别克隆到原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-Ⅰ-CP和pEHISTEV-SCMV-Ⅳ-CP。将两个重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,均表达出分子量为38 kD的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰长耳兔5次,获得了SCMV-ⅠCP和SCMV-ⅣCP的多克隆抗体。间接ELISA结果表明,两种血清的效价均达到1∶8192。Western Blot结果表明,利用SCMV-ⅠCP制备的抗血清与DWK1反应更强,而利用SCMV-ⅣCP制备的抗血清与DWK2反应更强。本研究为SCMV检测及CP功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 衣壳蛋白 原核表达 抗血清 检测
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番木瓜环斑病毒山东分离物的全基因组序列分析
10
作者 黄显德 王玉 +3 位作者 闫志勇 田延平 古勤生 李向东 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期285-288,共4页
番木瓜环斑病毒(Papayaringspotvirus,PRSV)属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)。根据寄主范围可划分为P和W2个株系,其中P株系侵染番木瓜(CaricapapayaL.)和葫芦科(Cucurbitaceae)作物,而W株系只侵... 番木瓜环斑病毒(Papayaringspotvirus,PRSV)属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)。根据寄主范围可划分为P和W2个株系,其中P株系侵染番木瓜(CaricapapayaL.)和葫芦科(Cucurbitaceae)作物,而W株系只侵染葫芦科作物,两者血清学反应密切相关。PRSV可引起植株叶片褪绿、花叶、卷曲等症状,在果实表面形成环斑。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 序列分析 全基因组 马铃薯Y病毒属 分离物 葫芦科作物 山东 血清学反应
甘蔗花叶病毒第Ⅳ组分离物RT-PCR检测体系的建立及应用
11
作者 闫志勇 程德杰 +4 位作者 房乐 许小洁 田延平 贾曦 李向东 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期463-469,共7页
甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是引起我国玉米矮化叶病的主要病毒。根据其基因组序列,SCMV可以分为4个组,其中第Ⅳ组分离物属于新出现的强毒株系。为了快速检测SCMV尤其是Ⅳ组分离物的发生情况,我们针对SCMV Ⅰ-Ⅳ组及... 甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是引起我国玉米矮化叶病的主要病毒。根据其基因组序列,SCMV可以分为4个组,其中第Ⅳ组分离物属于新出现的强毒株系。为了快速检测SCMV尤其是Ⅳ组分离物的发生情况,我们针对SCMV Ⅰ-Ⅳ组及Ⅳ组分离物设计了6对引物,从中筛选出特异性最强的2对引物(Ⅰ-Ⅳ-2F/Ⅰ-Ⅳ-2R和Ⅳ-1F/Ⅳ-1R),进行PCR体系的优化。优化后的PCR体系为:退火温度51℃,d NTP终浓度为0.1 mM,引物终浓度为0.20μM,Taq DNA聚合酶终浓度为0.015 U·μL^-1。利用该体系,引物对Ⅰ-Ⅳ-2F/Ⅰ-Ⅳ-2R和Ⅳ-1F/Ⅳ-1R均能够从50 ng感病叶片或0.05 ng病毒RNA中检测出SCMV。通过优化两对引物浓度比例建立了能同时检测SCMV所有分离物及第四组分离物的双重PCR体系。利用该体系从山东、河南及云南均检测出SCMV第Ⅳ组分离物的发生。本研究为SCMV尤其是SCMV第Ⅳ组分离物的快速检测提供了技术支持。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 第Ⅳ组 检测 反转录-聚合酶链式反应
烟草丛顶病毒RNA依赖RNA聚合酶(RdRp)介导的体外复制体系
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作者 逯晓明 于成明 +5 位作者 王国鲁 王德亚 耿国伟 刘珊珊 师科荣 原雪峰 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期790-796,共7页
通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMAL—C2X为基础载体的原核表达载体pMAL—TB—RdRp。0.5mMIPTG诱导可特异性表达分子量约为120kDa的MBP.RdRp融合蛋白。温度梯度... 通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMAL—C2X为基础载体的原核表达载体pMAL—TB—RdRp。0.5mMIPTG诱导可特异性表达分子量约为120kDa的MBP.RdRp融合蛋白。温度梯度实验显示,18℃下诱导表达的MBP—RdRp融合蛋白的可溶性比例较高,约17%;经亲和层析纯化的MBP—RdRp可特异性识别TBTV正链和负链的3’末端序列,催化体外复制;对正负链的3’末端的体外复制效率存在差别,识别负链3’末端的体外复制效率明显高于正链3’末端。本研究创建的TBTV RdR0介导的体外复制体系为进一步研究TBTV基因组复制调控奠定了基础。 展开更多
关键词 烟草丛顶病毒 RNA依赖RNA聚合酶 体外复制
番木瓜环斑病毒西瓜株系衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备 被引量:1
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作者 黄显德 王玉 +2 位作者 田延平 古勤生 李向东 《山东农业科学》 2017年第12期86-89,共4页
以感染番木瓜环斑病毒西瓜株系(papaya ringspot virus-watermelonstrain,PRSV-W)的西葫芦叶片为供试材料,通过RT-PCR克隆PRSV-W衣壳蛋白(coatprotein,CP)基因,并将其连接到原核表达载体pEHISTEV上得到重组质粒pEHISTEV-PRSV-W-CP.... 以感染番木瓜环斑病毒西瓜株系(papaya ringspot virus-watermelonstrain,PRSV-W)的西葫芦叶片为供试材料,通过RT-PCR克隆PRSV-W衣壳蛋白(coatprotein,CP)基因,并将其连接到原核表达载体pEHISTEV上得到重组质粒pEHISTEV-PRSV-W-CP.将其转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后可表达分子量约为37kD的融合蛋白.将融合蛋白从凝胶中切下,乳化后免疫新西兰长耳兔,制备PRSV-W CP的抗血清.间接ELISA测定该血清效价为1∶8192.Westernblot检测结果表明,该抗血清只与感染PRSV的西葫芦样品有特异性反应,而与健康西葫芦、感染西瓜花叶病毒的西葫芦及感染马铃薯Y病毒的普通烟样品均无反应.本研究为PRSV的快速检测以及CP蛋白功能的研究奠定了基础. 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒西瓜株系 衣壳蛋白 原核表达 抗血清制备 检测
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对小麦黄花叶病毒存在抗性差异的2种小麦品种中eIF4E序列分析
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作者 耿国伟 顾珂 +3 位作者 于成明 李向东 田延平 原雪峰 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期568-572,共5页
小麦黄花叶病于1927年在日本首次报道,其病原包括小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)和中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)。我国各省麦区在1980年以后陆续报道了其发生与危害,对小麦生长发育构成严... 小麦黄花叶病于1927年在日本首次报道,其病原包括小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)和中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)。我国各省麦区在1980年以后陆续报道了其发生与危害,对小麦生长发育构成严重影响。 展开更多
关键词 小麦黄花叶病毒 EIF4E 序列分析 小麦生长发育 MOSAIC 病毒科 抗性差异 WHEAT WHEAT 分离物
甘蔗花叶病毒2个山东分离物的全基因组序列分析 被引量:1
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作者 程德杰 闫志勇 +3 位作者 黄显德 田延平 原雪峰 李向东 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期357-363,共7页
甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是引起我国玉米矮花叶病的主要病毒。本文从山东泰安采集到2个表现矮花叶症状玉米样品的分离物(命名为DWK1和DWK2),通过RT-PCR扩增全基因组片段并测定了其序列(GenBank登录号分别为KU171... 甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是引起我国玉米矮花叶病的主要病毒。本文从山东泰安采集到2个表现矮花叶症状玉米样品的分离物(命名为DWK1和DWK2),通过RT-PCR扩增全基因组片段并测定了其序列(GenBank登录号分别为KU171814和KU171815)。序列分析结果表明,DWK1和DWK2基因组全长分别为9 575和9 576个核苷酸(nucleotides,nt),开放阅读框均为9 192 nt,编码3 063个氨基酸的多聚蛋白。DWK1和DWK2的全基因组核苷酸一致率为81.7%,DWK1与山西分离物SX(AY569692)的核苷酸一致率最高,为90.9%;DWK2与河北分离物BD8(JN021933)核苷酸一致率最高,达99.4%。二者在系统进化树中分别被聚类到Ⅰ组和Ⅳ组。重组分析发现,DWK1是HN(AF494510)、Guangdong(AJ310105)和BD8 3个分离物的重组体。选择压力分析表明,SCMV 11个蛋白的dN/dS值都小于1,均处于负选择,但在P1、P3和CP中存在正选择位点。本研究结果可为甘蔗花叶病毒株系的监测及防控提供理论指导。 展开更多
关键词 全基因组序列 系统发育分析 重组分析 甘蔗花叶病毒
植物RNA病毒不依赖帽子翻译机制的研究进展
16
作者 王德亚 原雪峰 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期652-660,共9页
真核生物系统中,mRNA 5′末端帽子结构通过结合翻译起始因子eIF4E进而招募40S核糖体亚基,对蛋白翻译的起始调控至关重要,而3′末端poly(A)尾则通过介导mRNA环化提高翻译效率。然而,许多植物RNA病毒的基因组缺乏5′帽子结构,甚至3′末... 真核生物系统中,mRNA 5′末端帽子结构通过结合翻译起始因子eIF4E进而招募40S核糖体亚基,对蛋白翻译的起始调控至关重要,而3′末端poly(A)尾则通过介导mRNA环化提高翻译效率。然而,许多植物RNA病毒的基因组缺乏5′帽子结构,甚至3′末端也不带poly(A)尾,这些病毒进化产生了位于基因组RNA5′末端或3′末端的不依赖帽子翻译元件。本文将重点讨论位于植物病毒基因组RNA 3′末端的不依赖帽子翻译元件(Cap-independent Translation Element,3′CITE),就其结构特征、调控翻译起始和RNA环化等方面的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 植物RNA病毒 帽子 不依赖帽子翻译元件 RNA环化
2种类型的烟草扭脉病毒外壳蛋白基因的序列和结构分析 被引量:1
17
作者 张振甲 王德亚 +4 位作者 于成明 王增辉 师科荣 李凡 原雪峰 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期241-246,共6页
烟草丛顶病主要由烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)和烟草扭脉病毒(Tobacco vein distorting virus,TVDV)复合侵染引起。其中,TVDV的CP蛋白可分别包装TBTV和TVDV形成病毒粒子;但也存在TVDV单独侵染不携带TBTV的病样。本... 烟草丛顶病主要由烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)和烟草扭脉病毒(Tobacco vein distorting virus,TVDV)复合侵染引起。其中,TVDV的CP蛋白可分别包装TBTV和TVDV形成病毒粒子;但也存在TVDV单独侵染不携带TBTV的病样。本文利用RT-PCR对自然状态下携带TBTV的TVDV(采自云南弥渡)和不携带TBTV的TVDV(采自云南保山)的cp基因进行序列克隆,发现TVDV弥渡分离物的cp基因为618个核苷酸,而TVDV保山分离物的cp基因为621个核苷酸,二者的核苷酸序列一致性为90.02%,氨基酸序列一致性为89.81%;而长度相同的TVDV cp基因序列一致性为98.5%~100%。表明这2个cp基因属于2种不同类型。系统发育树分析也表明这2个cp基因属于进化距离较远的2个群。利用SWISS-MODEL进行同源建模,发现2种类型的TVDV CP蛋白的主要空间结构域基本一致,存在细小的结构域及结构域之间无规则卷曲角度的差异,整体空间结构没有发生明显改变。推断TVDV保山分离物CP蛋白中关键氨基酸的序列突变是导致CP无法包装TBTV,从而在病害传播过程中丢失TBTV的主要因素。 展开更多
关键词 烟草扭脉病毒 烟草丛顶病毒 外壳蛋白 同源建模
纺锤形芽孢杆菌L13对蓝莓生长及根际土壤生物学特性的影响 被引量:1
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作者 王君 杜秉海 +4 位作者 马海林 刘方春 丁延芹 姚良同 李丽 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期917-925,共9页
以八年生蓝莓品种“蓝丰”为供试植株,通过田间试验研究添加纺锤形芽孢杆菌L13在单一菌剂和复合微生物肥料中对植株生长及根际土壤的影响.试验设4个处理,其中单一菌剂即L13(P),以不施肥处理作为对照(CK);以灭菌后的腐熟鸡粪作为吸... 以八年生蓝莓品种“蓝丰”为供试植株,通过田间试验研究添加纺锤形芽孢杆菌L13在单一菌剂和复合微生物肥料中对植株生长及根际土壤的影响.试验设4个处理,其中单一菌剂即L13(P),以不施肥处理作为对照(CK);以灭菌后的腐熟鸡粪作为吸附载体接种酵母菌DY3和乳酸菌DY4作为普通生物肥(OF),在此基础上进一步接种L13作为复合微生物肥料(PF),以OF作为对照,分别研究单一菌剂和复合微生物肥料对蓝莓叶片酶活、果实品质、植株养分、根际土壤酶活和理化性质以及细菌群落结构的影响.结果表明:含L13的两种肥料都显著降低了果实中可滴定酸含量,提高了植株全氮、全钾含量以及土壤碱解氮、全氮、有机质含量,促进了蓝莓生长;L13在单一菌剂中的作用更为明显,和对照相比,叶片中丙二醛含量降低61.9%,果实中花青苷含量提高21.68%,可滴定酸含量降低13.61%,植株全氮、全磷、全钾分别提高4.12%、10.27%、8.63%,土壤蔗糖酶、酸性磷酸酶活性分别提高107.59%、21.36%,土壤碱解氮、有效磷、速效钾、全氮、有机质含量分别提高了49.66%、31.28%、21.95%、63.83%、84.54%,土壤p H降低,并且两个处理间各指标都达到了显著性差异.运用Illumina Miseq高通量测序分析根际土壤细菌群落结构发现,L13作为单一菌剂显著降低了土壤细菌菌群丰度和多样性,而在复合微生物肥料中菌群丰度和多样性增加;单一菌剂和复合微生物肥料都增加了变形菌门和厚壁菌门的比例,单一菌剂还增加了放线菌门的比例,复合微生物肥料增加了拟杆菌门的比例;放线菌目、芽孢杆菌目等的比例也有所增加;L13在单一菌剂中对蓝莓根际细菌群落结构的影响最为明显,厚壁菌门的改变是造成结构差异的主要因素.综上,纺锤形芽孢杆菌L13在两种微生物肥料中都能发挥其促生作用,在单一菌剂中作用更显著,土壤细菌群 展开更多
关键词 纺锤形芽孢杆菌 单一菌剂 复合微生物肥料 蓝莓 土壤 细菌群落结构
不同栽培条件下大球盖菇的经济效益
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作者 龚赛 赵淑芳 +3 位作者 聂阳 刘书程 张秀停 姜淑霞 《中国食用菌》 2016年第4期35-38,共4页
大球盖菇(Strophariarugosoannulata)是近年来在国内推广栽培的珍稀食用菌。2014年-2015年,在山东省济宁市任城区李营镇苗木栽培区,进行了大球盖菇大苗林地和春暖大棚栽培试验,对不同栽培场所、不同栽培时间、不同播种方式、不同... 大球盖菇(Strophariarugosoannulata)是近年来在国内推广栽培的珍稀食用菌。2014年-2015年,在山东省济宁市任城区李营镇苗木栽培区,进行了大球盖菇大苗林地和春暖大棚栽培试验,对不同栽培场所、不同栽培时间、不同播种方式、不同配方培养的菌种及不同配方栽培料等条件下大球盖菇产量和经济效益进行研究。结果表明,大棚栽培大球盖菇产量高于林下栽培,但综合经济、生态和社会效益分析显示,林地栽培优于大棚栽培;11月份播种、采用双层播种方式、选用麦粒培养的菌种及以稻壳50%、玉米芯30%、木屑20%的栽培料,其产量及经济效益高。 展开更多
关键词 大球盖菇 栽培条件 经济效益
融合海肾荧光素酶的重组病毒在移码和通读研究中的应用初探
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作者 于成明 王国鲁 +2 位作者 王德亚 师科荣 原雪峰 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期846-849,共4页
海肾荧光素酶(Renilla Luciferase,Rluc)可催化腔肠素(coelenterazine)氧化产生高能量中间产物,氧化过程同时发出蓝色生物荧光,最强荧光波长465mm。
关键词 荧光素酶 重组病毒 应用 通读 移码 氧化过程 中间产物
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