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罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)新型AI-2信号分子受体RbsB蛋白结晶生长研究 认领
1
作者 樊博琳 潘丽霞 +3 位作者 王忠良 黎源 简纪常 王蓓 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期132-140,共9页
为了开展无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)核糖结合蛋白(Ribose binding protein B,RbsB)结构功能的研究,本实验根据已知无乳链球菌ZQ0910全基因组序列设计相关引物。采用PCR方法扩增其RbsB基因,随后将该基因定向克隆到原核表达载... 为了开展无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)核糖结合蛋白(Ribose binding protein B,RbsB)结构功能的研究,本实验根据已知无乳链球菌ZQ0910全基因组序列设计相关引物。采用PCR方法扩增其RbsB基因,随后将该基因定向克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达;采用HRV 3C蛋白酶切除GST标签,分子筛分离获得RbsB蛋白;运用生物信息学软件对RbsB基因序列进行分析,并对RbsB蛋白二级和三级结构进行预测;采用NeXtal Tubes JCSG Core Suite结晶试剂盒筛选蛋白结晶条件。研究结果表明,该基因全长为969碱基,编码322个氨基酸,RbsB蛋白理论分子量33.9ku,等电点为9.41,二级结构中α螺旋结构所占比重最高,建立RbsB蛋白三维结构模式图;经IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为59ku,筛选RbsB蛋白的初始结晶条件为(0.2mol/L di-Potassium hydrogen phosphate,20%(W/V)PEG3350;1.5mol/L ammonium sulfate,25%(V/V)Glycerol),获得RbsB蛋白结晶体。本研究结果可为无乳链球菌核糖结合蛋白(RbsB)的功能解析提供实验及理论基础。 展开更多
关键词 无乳链球菌 RbsB蛋白 蛋白纯化 结晶化
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基于线粒体DNA控制区序列的短棘鲾群体遗传学 认领
2
作者 高天翔 高兵兵 +2 位作者 李忠炉 单斌斌 宋娜 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期715-722,共8页
物种的遗传结构对推断群体历史动态如有效群体大小、地理分布变迁、基因流、遗传分化等具有重要意义。本实验采用线粒体DNA控制区高变区序列对采自我国海南和台湾的3个短棘鲾群体进行了遗传学比较研究。结果显示,92尾个体共检测到32个... 物种的遗传结构对推断群体历史动态如有效群体大小、地理分布变迁、基因流、遗传分化等具有重要意义。本实验采用线粒体DNA控制区高变区序列对采自我国海南和台湾的3个短棘鲾群体进行了遗传学比较研究。结果显示,92尾个体共检测到32个单倍型,其中共享单倍型7个;单倍型多样性指数的范围为0.61±0.12~0.86±0.05;核苷酸多样性指数的范围为0.0033±0.0024~0.0053±0.0034;32个单倍型构建的邻接关系树和最小跨度树均可分为2个单倍型类群,单倍型类群A共有22个单倍型,全部由海南文昌和三亚新村群体构成,单倍型类群B共有10个单倍型,除Hap13外,其余全部由台湾新竹群体构成;台湾新竹群体与海南2个群体之间存在显著差异,但海南文昌群体和三亚新村群体之间无显著差异;中性检验与核苷酸不配对分布分析的结果均显示,短棘鲾2个单倍型类群可能发生了群体扩张事件,扩张时间分别为52500~105000和67600~135200年前。 展开更多
关键词 短棘鲾 控制区 遗传多样性 群体遗传结构 隔离
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斜阳岛珊瑚礁区海泥可培养细菌的分离鉴定及其ECP抑菌作用 认领
3
作者 周诗慧 吴志豪 +2 位作者 廖嘉明 庞欢瑛 鲁义善 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期644-651,共8页
为探究斜阳岛珊瑚礁区海洋微生物的代谢产物活性,为天然材料制备新药物资源的开发提供一定的理论依据和实践指导,本研究从斜阳岛珊瑚礁区海泥分离纯化得到3株菌株,经鉴定分别为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、Sphingopyxis terrae和Fic... 为探究斜阳岛珊瑚礁区海洋微生物的代谢产物活性,为天然材料制备新药物资源的开发提供一定的理论依据和实践指导,本研究从斜阳岛珊瑚礁区海泥分离纯化得到3株菌株,经鉴定分别为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、Sphingopyxis terrae和Fictibacillus phosphorivorans,分别培养并提取3株细菌的胞外产物(extracellular products,ECP),与硝酸银制备成生物纳米银,OD法测定其抑菌(溶藻弧菌)动力曲线,用2倍稀释法测出3株菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别是21.2μg/mL、18.8μg/mL、20.0μg/mL,用牛津杯法分别测定了3株菌与溶藻弧菌的抑菌活性,抑菌直径分别是(12.20±0.18)mm、(1.32±0.12)mm、(10.81±0.15)mm,安全性实验表明此3株菌对鱼体是安全的。本实验对斜阳岛珊瑚礁区海泥中可培养细菌进行了初步分离与鉴定,并利用分离菌的胞外产物合成生物纳米银,结果显示其具有一定的抑菌效果,从而证明其具有开发新的天然防腐剂和新药的潜力。 展开更多
关键词 珊瑚礁 溶藻弧菌 分离鉴定 抑菌作用 生物纳米银
丁香酚对花鲈幼鱼的麻醉效果 认领
4
作者 虞为 吴进喜 +7 位作者 林黑着 文国樑 曹煜成 黄小林 黄忠 杨育凯 李涛 赵旺 《河北渔业》 2020年第4期4-7,11共5页
为研究丁香酚对花鲈(Lateolabrax maculatus)幼鱼的麻醉效果。采用静水方法在水温(27±1)℃下研究不同质量浓度丁香酚(20、25、30、40、50、60、80 mg/L和100 mg/L)对规格为(21.6±2.75)cm长和(110.3±30.67)g重的花鲈麻醉... 为研究丁香酚对花鲈(Lateolabrax maculatus)幼鱼的麻醉效果。采用静水方法在水温(27±1)℃下研究不同质量浓度丁香酚(20、25、30、40、50、60、80 mg/L和100 mg/L)对规格为(21.6±2.75)cm长和(110.3±30.67)g重的花鲈麻醉效果和呼吸频率的影响。25~100 mg/L质量浓度的丁香酚均能使花鲈进入深度麻醉期,且麻醉浓度与平均入麻时间呈负相关,与平均复苏时间成正相关;丁香酚质量浓度为50 mg/L时,麻醉效果较好。低浓度丁香酚20 mg/L对花鲈呼吸频率影响不明显。在质量浓度达到40~100 mg/L时,鱼体由麻醉期(A3)进入深度麻醉期(A4),呼吸频率迅速降低。以50 mg/L丁香酚将花鲈麻醉后再在空气中进行暴露,暴露时间与复苏时间呈正相关。暴露时间在2~30 min范围内的复苏率为100%。当时间增加至35、40和45 min时,复苏率降低至66%,33%和0。且暴露时间大于20 min花鲈只能进入恢复期3期(R3)。因此,50 mg/L的丁香酚麻醉液是花鲈幼鱼的理想麻醉浓度。 展开更多
关键词 丁香酚 花鲈(Lateolabrax maculatus) 幼鱼 麻醉
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以问题式教学法为基础的实验教学探索与实践 认领
5
作者 赵利容 冯妍 白秀娟 《实验室科学》 2020年第1期88-91,共4页
在问题式教学法基础上以两个实验项目为例,探讨以问题为中心的教学法在海洋环境监测实验教学中的应用和实践,详细阐述了通过教学目标、预习作业、实验指导书、实验过程中的具体“问题”,引导学生发现问题、分析问题,利用“问题”解决“... 在问题式教学法基础上以两个实验项目为例,探讨以问题为中心的教学法在海洋环境监测实验教学中的应用和实践,详细阐述了通过教学目标、预习作业、实验指导书、实验过程中的具体“问题”,引导学生发现问题、分析问题,利用“问题”解决“问题”的教学过程和方法。实践结果表明这种教学法使学生实验态度、测试结果、实验操作规范性和讨论分析情况发生了较大转变,学生实验技能、自主学习和思考能力都得到了提升,教学效果良好。 展开更多
关键词 问题式教学法 实验教学 海洋环境监测
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凡纳滨对虾对饲料中钙、磷的营养需求 认领
6
作者 安文强 黎文伟 +7 位作者 谭北平 杨奇慧 迟淑艳 董晓慧 刘泓宇 章双 杨原志 张海涛 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-11,共11页
水温28~31℃,盐度21~24,养殖凡纳滨对虾幼虾,投喂以乳酸钙为钙源、磷酸二氢钠为磷源,在钙添加水平为0%、0.5%、1.0%的条件下,分别添加0%、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%的磷配制的15种饲料,探讨凡纳滨对虾饲料中钙、磷的适宜添加量。8周的养... 水温28~31℃,盐度21~24,养殖凡纳滨对虾幼虾,投喂以乳酸钙为钙源、磷酸二氢钠为磷源,在钙添加水平为0%、0.5%、1.0%的条件下,分别添加0%、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%的磷配制的15种饲料,探讨凡纳滨对虾饲料中钙、磷的适宜添加量。8周的养殖试验结果显示,饲料钙、磷水平及钙、磷水平的交互作用极显著影响对虾质量增加率、特定生长率、蛋白质效率、饲料系数和存活率(P<0.01)。饲料钙、磷水平极显著影响对虾肌肉粗蛋白、粗脂肪和全虾粗蛋白的含量(P<0.01)。饲料钙、磷水平的交互作用极显著影响全虾粗蛋白和肌肉粗蛋白、粗脂肪的含量(P<0.01)。饲料钙水平极显著影响全虾和虾壳的钙、磷含量及肌肉磷含量(P<0.01),显著影响对虾肌肉钙含量(P<0.05)。饲料磷水平及钙、磷水平的交互作用极显著影响全虾、肌肉、虾壳的钙、磷含量(P<0.01)。饲料钙、磷水平及钙、磷水平的交互作用均不显著影响血清钙离子含量(P>0.05)。在本试验条件下,以特定生长率为判断依据,通过折线模型分析得出,饲料中添加0.5%的钙和0.88%的磷时凡纳滨对虾的特定生长率最高。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 生长性能 体成分 组织钙、磷含量 血清生化指标
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尼罗罗非鱼pik3r1基因的克隆和mRNA表达分析 认领
7
作者 谢彩霞 汪志文 +2 位作者 鲁义善 汤菊芬 简纪常 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第1期8-14,共7页
【目的】哺乳动物pik3r1基因参与多种免疫途径,探索pik3r1基因在罗非鱼(Oreochromis)中的作用。【方法】克隆尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)pik3r1(命名为On-pik3r1)cDNA全长,对该基因进行生物信息学分析,并运用荧光定量PCR方法分... 【目的】哺乳动物pik3r1基因参与多种免疫途径,探索pik3r1基因在罗非鱼(Oreochromis)中的作用。【方法】克隆尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)pik3r1(命名为On-pik3r1)cDNA全长,对该基因进行生物信息学分析,并运用荧光定量PCR方法分析无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)刺激后On-pik3r1 mRNA在各组织种的表达模式。【结果与结论】On-pik3r1基因编码区2190 bp,编码729个氨基酸,5′端非编码区(UTR)为542 bp,3′UTR为2248 bp,理论分子质量为83.99 ku,等电点为5.73。On-pik3r1与斑马拟丽鱼(Maylandia zebra)相似性最高(98.53%),与其他物种的同源性在70%以上,表明pik3r1在物种进化过程中高度保守。On-pik3r1在健康尼罗罗非鱼各组织中均有表达,在肌肉中表达量最高,其次是鳃、皮肤,在胸腺中表达量最低。经灭活无乳链球菌刺激后,On-pik3r1表达量在肠道、鳃、脾脏、头肾、脑部等5个组织中均极显著下调(P<0.01),在胸腺中表现为4 h时极显著下调(P<0.01),24、48、72 h时为显著下调(P<0.05)。On-pik3r1参与了罗非鱼的对无乳链球菌的免疫应答过程。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 pik3r1 基因克隆 表达 无乳链球菌
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尼罗罗非鱼的Galectin-8基因的原核表达及条件优化 认领
8
作者 牛继敏 牛金中 +3 位作者 黄瑜 刘鑫潮 简纪常 鲁义善 《安徽农学通报》 2020年第5期6-9,共4页
Galectin-8属于S型凝集素,是一种内源性凝集素,具有高亲力,含β-半乳糖苷,可识别重要的病原分子[1]。该蛋白质有2个功能结构域,均提供该家族中其他蛋白质类似的保守序列[2]。该研究基于尼罗罗非鱼Galectin-8 NCBI上发表的基因序列,利用p... Galectin-8属于S型凝集素,是一种内源性凝集素,具有高亲力,含β-半乳糖苷,可识别重要的病原分子[1]。该蛋白质有2个功能结构域,均提供该家族中其他蛋白质类似的保守序列[2]。该研究基于尼罗罗非鱼Galectin-8 NCBI上发表的基因序列,利用primer5.0设计1对引物,构建尼罗罗非鱼Galectin-8基因的原核表达载体,将重组后的质粒pGEX-4T-1-Galectin-8导入大肠杆菌中,通过PCR、连接、转化等,进行原核表达。对影响因素进行条件优化,使用优化后的浓度、时间、温度条件表达Galectin-8重组蛋白能得到最优表达量。Western blot检测纯化后的重组蛋白,结果显示,重组蛋白可以很好地结合GST-Tag标签的单克隆抗体,实验进一步证明罗非鱼Galectin-8的重组蛋白被成功表达,为罗非鱼Galectin-8后续相关功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 Galectin-8 原核表达 WESTERN BLOTTING 条件优化
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饲料碳水化合物水平对斜带石斑鱼生长性能、体成分、血浆生化指标及肠道和肝脏酶活性的影响 认领
9
作者 刘浩 杨俊江 +6 位作者 董晓慧 谭北平 杨奇慧 迟淑艳 刘泓宇 章双 杨原志 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期357-371,共15页
本试验旨在研究饲料碳水化合物水平对斜带石斑鱼生长性能、体成分、血浆生化指标及肠道和肝脏酶活性的影响。选择健康、初重(102.80±1.02)g的斜带石斑鱼300尾,随机分为5个组,每组3个重复,每个重复20尾。5组分别投喂碳水化合物水平... 本试验旨在研究饲料碳水化合物水平对斜带石斑鱼生长性能、体成分、血浆生化指标及肠道和肝脏酶活性的影响。选择健康、初重(102.80±1.02)g的斜带石斑鱼300尾,随机分为5个组,每组3个重复,每个重复20尾。5组分别投喂碳水化合物水平为7%、14%、21%、28%和35%的等氮等能的试验饲料。试验期8周。结果表明:1)28%组的特定生长率(SGR)、增重率(WGR)显著高于其他各组(P<0.05),28%组的饲料系数(FCR)显著低于7%和14%组(P<0.05),28%和35%组的蛋白质效率(PER)、肥满度(CF)和肝体比(HSI)显著高于7%组(P<0.05),35%组的脏体比(VSI)显著高于7%组(P<0.05)。2)7%组的干物质表观消化率显著低于21%、28%和35%组(P<0.05)。35%组的粗脂肪和能量表观消化率显著低于7%、14%和21%组(P<0.05)。3)28%和35%组的全鱼粗蛋白质含量显著低于7%组(P<0.05),35%组的全鱼粗脂肪含量显著高于其他各组(P<0.05),35%组的全鱼粗灰分含量显著小于7%、14%和28%组(P<0.05)。28%和35%组的肌肉粗脂肪含量显著高于7%组(P<0.05),7%组的肌肉粗灰分含量显著高于其他各组(P<0.05)。35%组的肝糖原含量显著高于7%、14%和21%组(P<0.05),35%组的肌糖原含量显著高于其他各组(P<0.05)。4)7%组的血浆总蛋白(TP)含量显著低于其他各组(P<0.05),21%、28%和35%组的血浆葡萄糖(GLU)含量显著高于7%和14%组(P<0.05),28%和35%组的血浆甘油三酯(TG)含量显著高于7%和14%组(P<0.05),28%和35%组的血浆总胆固醇(TC)含量显著高于7%、14%和21%组(P<0.05)。5)35%组的肝脏己糖激酶(HK)活性显著高于7%组(P<0.05),35%组的肝脏磷酸果糖激酶(PFK)活性显著高于其他各组(P<0.05),35%组的肝脏葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)活性显著高于7%、14%和21%组(P<0.05),21%和28%组的肝脏果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)活性显著高于7%、14%和35%组(P<0.05)。6)35%组的肠道胃蛋白酶(PS)活性显著高于7%、14%、28%组(P<0.05),35%组的肠道脂肪酶(LPS)活性显著低于7% 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 碳水化合物水平 生长性能 血浆生化指标 肝脏免疫酶 肠道消化酶
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对虾养殖环境中红酵母的筛选及其发酵工艺研究 认领
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作者 王金才 于鸽 +3 位作者 刘唤明 邓楚津 洪鹏志 汤宝贵 《安徽农业科学》 CAS 2020年第11期104-106,109,共4页
[目的]对对虾养殖环境中红酵母进行筛选,并对其发酵工艺进行研究。[方法]首先利用PDA固体培养基从对虾养殖环境中筛选出红酵母菌株HL-6;然后,根据26S rDNA基因序列的系统发育树分析,对菌株HL-6进行鉴定;最后,在单因素试验的基础上,通过... [目的]对对虾养殖环境中红酵母进行筛选,并对其发酵工艺进行研究。[方法]首先利用PDA固体培养基从对虾养殖环境中筛选出红酵母菌株HL-6;然后,根据26S rDNA基因序列的系统发育树分析,对菌株HL-6进行鉴定;最后,在单因素试验的基础上,通过正交试验对发酵工艺进行优化。[结果]经初步鉴定确定菌株HL-6为胶红酵母,该菌株的最佳发酵工艺如下:糖蜜浓度为8%,酵母膏浓度为1.5%,硫酸铵浓度0.6%,磷酸二氢钾浓度为0.3%,发酵温度为30℃,发酵时间为48 h。在此工艺条件下,发酵液中红酵母的活菌数高达11.2×10^8 CFU/mL。[结论]该研究对对虾养殖所用红酵母的发酵生产具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 对虾养殖环境 红酵母 筛选 发酵工艺
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香港围网渔业现状调查与对策研究 认领
11
作者 钟晓雯 颜云榕 《当代经济》 2020年第1期50-53,共4页
近年来,香港传统的围网渔业生产面临着渔民转移、渔业资源衰退和资金不足等诸多问题。为了解决以上问题,本文通过问卷调查和实地调研相结合的方法获取香港渔船基本情况和生产经济效益资讯,并利用SPSS主成分分析方法和回归模型对香港影... 近年来,香港传统的围网渔业生产面临着渔民转移、渔业资源衰退和资金不足等诸多问题。为了解决以上问题,本文通过问卷调查和实地调研相结合的方法获取香港渔船基本情况和生产经济效益资讯,并利用SPSS主成分分析方法和回归模型对香港影响围网渔业经济效益的因素进行分析,最后得出了结论:渔民学历、全年总成本和船质对围网渔业经济效益影响最大,应该从渔民教育、控制成本和渔船改造等方面入手,从而解决如今香港围网渔业所面临的困境。 展开更多
关键词 围网渔业 香港渔业 主成分分析 回归模型
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盐度对波吉卵囊藻叶绿素荧光参数的影响及PsbA基因的克隆与表达分析 认领
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作者 任佳佳 洪廷 +2 位作者 张宁 黄翔鹄 李长玲 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第3期30-39,共10页
【目的】研究波吉卵囊藻(Oocystis borgei)在不同盐度下叶绿素荧光参数的变化和编码叶绿体D1蛋白的PsbA基因的表达特性。【方法】利用叶绿素荧光仪测定不同盐度条件下波吉卵囊藻叶绿素荧光参数;利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆获取... 【目的】研究波吉卵囊藻(Oocystis borgei)在不同盐度下叶绿素荧光参数的变化和编码叶绿体D1蛋白的PsbA基因的表达特性。【方法】利用叶绿素荧光仪测定不同盐度条件下波吉卵囊藻叶绿素荧光参数;利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆获取波吉卵囊藻PsbA基因序列,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(qPCR)方法分析PsbA基因在不同盐度下的表达情况。【结果】高盐(盐度60)条件下PSⅡ最大光化学量子产量(F_v/F_m)及PSII实际光化学量子效率(ΦPSⅡ)显著下降(P<0.05)。克隆获得1314 bp波吉卵囊藻PsbA基因cDNA序列,包含1062 bp开放阅读框(ORF),预测编码353个氨基酸,该蛋白属于跨膜蛋白。qPCR结果表明,高盐(盐度60)条件下PsbA基因极显著下调(P<0.01)。【结论】高盐(盐度60)显著抑制波吉卵囊藻PsbA基因的表达和叶绿素荧光参数(F_v/F_m和ΦPSⅡ)的降低,表明波吉卵囊藻处于胁迫状态;而盐度10和30能促进PsbA基因的表达。 展开更多
关键词 波吉卵囊藻 盐度 叶绿素荧光参数 PSBA基因
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温度、盐度和照度对菌藻联合体氨氮吸收的影响 认领
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作者 王培明 李长玲 +3 位作者 黄翔鹄 李峰 李豫 陈怡卉 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第3期40-47,共8页
【目的】探究温度、盐度和照度对侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)和威氏海链藻(Thalassiosira weissflogii)联合体系氨氮吸收的影响。【方法】利用稳定同位素示踪技术测定侧孢芽孢杆菌和威氏海链藻对氨氮的吸收速率,分析不... 【目的】探究温度、盐度和照度对侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)和威氏海链藻(Thalassiosira weissflogii)联合体系氨氮吸收的影响。【方法】利用稳定同位素示踪技术测定侧孢芽孢杆菌和威氏海链藻对氨氮的吸收速率,分析不同环境因子水平下侧孢短芽孢杆菌和威氏海链藻联合体系对氨氮吸收的规律。【结果】单因子实验结果显示温度、盐度和照度对菌藻联合体氨氮吸收速率影响显著(P<0.05),当温度25~35℃,盐度20和照度8000 lx时菌藻联合体氨氮吸收速率较高;正交实验结果显示,温度25℃,盐度25和光照4000 lx是菌藻联合体氨氮吸收的最优组合条件,盐度是影响其吸收速率的主要因子,其次是温度和照度;威氏海链藻在菌藻联合体系氨氮吸收中占主要贡献。【结论】侧孢短芽孢杆菌和威氏海链藻所构建的联合体系可在高温、高盐和强光环境下实现对对虾池塘中过量氨氮的有效吸收,在改善我国华南地区对虾养殖池塘的水质方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 菌藻联合体系 侧孢短芽孢杆菌 威氏海链藻 氨氮 环境因子
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硝酸钠对波吉卵囊藻生长、生化组分及沉降的影响 认领
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作者 谢丽施 张宁 +1 位作者 李长玲 黄翔鹄 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第3期48-55,共8页
【目的】研究硝酸钠对波吉卵囊藻(Oocystis borgei)生长、生化组分及沉降的影响。【方法】采用分光光度计法、乙醇法、尼罗红染色法、苯酚硫酸法和考马斯亮蓝法,分别测定波吉卵囊藻在不同硝酸钠浓度下的生物量、叶绿素、脂质、总糖和蛋... 【目的】研究硝酸钠对波吉卵囊藻(Oocystis borgei)生长、生化组分及沉降的影响。【方法】采用分光光度计法、乙醇法、尼罗红染色法、苯酚硫酸法和考马斯亮蓝法,分别测定波吉卵囊藻在不同硝酸钠浓度下的生物量、叶绿素、脂质、总糖和蛋白质含量,分析波吉卵囊藻沉降与生长及生化组分的关系。【结果】1)硝酸钠对波吉卵囊藻沉降率有显著影响(P<0.05),当硝酸钠74.8 mg/L时,沉降6 h的沉降率达到75%,沉降效果最佳。2)硝酸钠对波吉卵囊藻生物量和叶绿素的影响显著(P<0.05),培养9 d时,硝酸钠37.4~748.0 mg/L组卵囊藻生物量和叶绿素含量较高,生长状态好,沉降率较高;经回归分析,沉降率与生物量呈正相关关系(R~2=0.8243),与叶绿素含量呈先增加后减少的抛物线关系(R^2=0.8198)。3)硝酸钠对波吉卵囊藻脂质和总糖含量的影响显著(P<0.05),硝酸钠质量浓度为37.4~2992.0 mg/L时,总糖和脂质含量少,沉降率较高;经一元回归分析,沉降率与脂质和总糖含量呈负相关关系,R^2分别为0.7705和0.6094。4)沉降率与生物量和叶绿素有显著正相关性,皮尔逊系数r分别为0.785和0.404;与脂质和总糖有显著负相关性,皮尔逊系数r分别为―0.788和―0.731。【结论】硝酸钠通过影响波吉卵囊藻的生长和生化组分来改变藻细胞的沉降率;波吉卵囊藻的沉降率与生长状态呈正相关关系,与脂质、总糖呈负相关关系,脂质和总糖含量越少,沉降效果越好,与蛋白质无显著相关关系。 展开更多
关键词 波吉卵囊藻 硝酸钠 生化组分 沉降
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波吉卵囊藻蛋白质提取方法比较及提取条件优化 认领
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作者 洪廷 任佳佳 +2 位作者 张宁 李长玲 黄翔鹄 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第3期56-64,共9页
【目的】探究基于考马斯亮蓝染色法的波吉卵囊藻(Oocystis borgei)蛋白质提取方法,以快速测定波吉卵囊藻的蛋白质含量。【方法】以凯氏定氮法为基准,以考马斯亮蓝法测定经反复冻融法、超声波破碎法和碱提法提取的波吉卵囊藻(鲜品)蛋白含... 【目的】探究基于考马斯亮蓝染色法的波吉卵囊藻(Oocystis borgei)蛋白质提取方法,以快速测定波吉卵囊藻的蛋白质含量。【方法】以凯氏定氮法为基准,以考马斯亮蓝法测定经反复冻融法、超声波破碎法和碱提法提取的波吉卵囊藻(鲜品)蛋白含量,比较各提取方法的提取效果;通过单因素和响应面实验,考察碱提法中提取温度、NaOH浓度和提取时间对波吉卵囊藻蛋白提取率的影响。【结果】碱提法显著优于其他提取方法(P<0.01);碱提法中,各因素对波吉卵囊藻蛋白提取率的影响显著性由大到小依次为提取温度、NaOH浓度、提取时间;最佳提取条件:提取温度74.5℃、NaOH浓度0.35mol/L、提取时间69min,此时蛋白得率为1.726%,与模型预测值1.731%接近,以凯氏定氮法测定的藻体蛋白质含量为基准,蛋白提取率高达99.20%。【结论】碱提法是波吉卵囊藻(鲜品)蛋白的最佳提取方法,采用响应面法建立的模型可较好地预测提取温度、NaOH浓度和提取时间对波吉卵囊藻蛋白提取率的影响。 展开更多
关键词 波吉卵囊藻 蛋白提取 快速提取 考马斯亮蓝法 响应面法
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紫外灯辐射强度稳定范围测定 认领
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作者 曹勤 潘传豪 +3 位作者 黄建盛 施钢 陈刚 汤保贵 《河北渔业》 2020年第2期5-10,17共7页
为了解紫外灯辐射强度稳定范围,利用紫外辐照计对10支(新旧各5支)15 W紫外灯管不同时段、不同位点(沿灯管方向和垂直于灯管中部方向)、不同高度下的辐射强度进行测量。结果表明:不同紫外灯打开后辐射强度趋于稳定的时长不同;不同位点处... 为了解紫外灯辐射强度稳定范围,利用紫外辐照计对10支(新旧各5支)15 W紫外灯管不同时段、不同位点(沿灯管方向和垂直于灯管中部方向)、不同高度下的辐射强度进行测量。结果表明:不同紫外灯打开后辐射强度趋于稳定的时长不同;不同位点处辐射强度存在差异;随着紫外灯管高度的增加辐射强度降低,在一定范围内,即使高度上升1 cm也会造成显著差异(P<0.05)。 展开更多
关键词 紫外灯 辐射强度 雌核发育
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急性低氧胁迫对大规格军曹鱼幼鱼肝脏氧化应激、能量利用及糖代谢的影响 认领
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作者 郭志雄 曾泽乾 +3 位作者 黄建盛 王维政 李洪娟 陈刚 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第3期134-140,共7页
【目的】研究军曹鱼在急性低氧应激时肝脏代谢机能状态变化。【方法】测定急性低氧胁迫前后肝脏氧化应激指标、能量利用指标及糖代谢指标的变化。【结果】1)急性低氧胁迫后,军曹鱼肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-... 【目的】研究军曹鱼在急性低氧应激时肝脏代谢机能状态变化。【方法】测定急性低氧胁迫前后肝脏氧化应激指标、能量利用指标及糖代谢指标的变化。【结果】1)急性低氧胁迫后,军曹鱼肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均降低,与胁迫前差异极显著(P<0.01);脂质过氧化物(LPO)活性、丙二醛(MDA)含量均升高,与胁迫前差异极显著(P<0.01);过氧化氢酶(CAT)活性略有降低,与胁迫前无显著性差异(P>0.05)。2)急性低氧胁迫后,军曹鱼肝糖原(LG)含量、ATP酶活性均下降,与胁迫前差异极显著(P<0.01)。3)急性低氧胁迫后,军曹鱼肝脏乳酸脱氢酶(LDH)、丙酮酸激酶(PK)、己糖激酶(HK)活性均升高,与胁迫前差异极显著(P<0.01)。【结论】急性低氧胁迫对军曹鱼幼鱼肝脏组织造成显著的氧化损伤,使肝脏氧化应激、能量利用及糖代谢相关指标发生显著变化。 展开更多
关键词 军曹鱼 急性低氧 氧化应激 能量利用 糖代谢
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双齿围沙蚕的生活史 认领
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作者 何润端 曹伏君 朱国萍 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期347-354,共8页
为系统了解双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis的生活史,通过人工培育方法观察了其胚胎和幼虫发育全过程,并通过解剖观察了卵的发生及正常个体变态为生殖态异沙蚕体的过程。结果表明:双齿围沙蚕的受精卵采取螺旋型卵裂,形成实心囊胚,经... 为系统了解双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis的生活史,通过人工培育方法观察了其胚胎和幼虫发育全过程,并通过解剖观察了卵的发生及正常个体变态为生殖态异沙蚕体的过程。结果表明:双齿围沙蚕的受精卵采取螺旋型卵裂,形成实心囊胚,经原肠胚后发育为担轮幼虫、疣足幼虫、稚沙蚕和成体沙蚕;卵的发育在体腔内经历卵原细胞期、小生长初级卵母细胞期、大生长初级卵母细胞期和成熟初级卵母细胞期后排出体外,并在受精后进一步形成次级卵母细胞和卵细胞;当正常个体变态为异沙蚕体时,会发生体长明显缩短、腹部变白、眼睛变大和疣足变薄等变化,异沙蚕体繁殖后死亡;研究过程中还观察到幼虫循环系统的发生和红斑等现象。本研究结果可为全面掌握双齿围沙蚕的生活史及开展人工养殖业提供基础数据。 展开更多
关键词 双齿围沙蚕 生活史 变态 异沙蚕体
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罗非鱼干扰素诱导蛋白35基因克隆及表达分析 认领
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作者 黄瑜 马嘉霖 +4 位作者 周棉鑫 陈敏琪 蔡佳 简纪常 汤菊芬 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第2期13-19,共7页
【目的】研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)干扰素诱导蛋白35(interferon induced protein 35,ifi35)在免疫反应中的作用。【方法】克隆获得罗非鱼ifi35基因开放阅读框序列(GenBank登录号:XM_003442606;On-ifi35),采用实时荧光定量... 【目的】研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)干扰素诱导蛋白35(interferon induced protein 35,ifi35)在免疫反应中的作用。【方法】克隆获得罗非鱼ifi35基因开放阅读框序列(GenBank登录号:XM_003442606;On-ifi35),采用实时荧光定量PCR技术检测On-ifi35在健康罗非鱼不同组织中的分布,以及不同刺激物刺激后的表达。【结果与结论】On-ifi35基因编码区为1125 bp,编码374个氨基酸,理论分子质量为42.79 ku,等电点为5.01。On-ifi35含有1个LZD结构域和2个Nmi/IFP 35 domain(NID)。多序列比对发现On-ifi35与其它物种的ifi35氨基酸序列同源性介于35.23%~93.32%之间,且与斑马拟丽鱼同源性最高。系统进化分析发现,On-ifi35与斑马拟丽鱼的ifi35聚为一支。实时荧光定量PCR分析显示,On-ifi35在健康罗非鱼各组织中均有表达,其中在脾脏组织中表达量最高,其次是胸腺、肝脏、心脏、肌肉、肠道、体肾、脑、鳃、头肾,在皮肤中表达量最低。经无乳链球菌和PolyI:C刺激后,On-ifi35表达量在脾脏、肠道、体肾和头肾中均发生显著性变化且呈现出显著的时序性。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 ifi35 基因 克隆 表达
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饲料精氨酸水平对斜带石斑鱼蛋白质沉积和相关免疫基因表达的影响 认领
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作者 崔晓 韩凤禄 +5 位作者 迟淑艳 谭北平 董晓慧 杨奇慧 刘泓宇 章双 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期399-410,共12页
为研究饲料中不同水平精氨酸对斜带石斑鱼蛋白质沉积和相关免疫基因表达的影响,实验配制7种等氮等脂的饲料,精氨酸浓度分别为2.13%、2.42%、2.71%、2.95%、3.20%、3.48%和3.74%。随机挑选健康的斜带石斑鱼[初始体质量(80.11±0.03)g... 为研究饲料中不同水平精氨酸对斜带石斑鱼蛋白质沉积和相关免疫基因表达的影响,实验配制7种等氮等脂的饲料,精氨酸浓度分别为2.13%、2.42%、2.71%、2.95%、3.20%、3.48%和3.74%。随机挑选健康的斜带石斑鱼[初始体质量(80.11±0.03)g]分成7组,每组设3个重复,每个重复25尾鱼,进行为期10周的养殖实验。结果显示,精氨酸浓度为2.71%组鱼体增重率和特定生长率显著高于2.13%和2.42%组,饲料系数显著低于2.13%组。2.71%组的蛋白质效率显著高于2.13%组和3.48%组,2.71%组的蛋白质沉积率与2.95%组无显著差异,显著大于其他组。以增重率为依据,经折线模型拟合得出,斜带石斑鱼对饲料中精氨酸的最适需求量为饲料的2.73%(饲料蛋白质的5.40%)。斜带石斑鱼血清胰岛素在3.20%组达到最大值,与3.48%组差异不显著,显著高于其他组。肌肉雷帕霉素靶蛋白(TOR)mRNA水平3.48%组显著高于2.13%、2.42%及2.71%组。2.42%组后肠b0,+AT基因表达量最高,显著高于其他各组。2.95%和3.20%组肾脏b~(0,+)AT基因表达量差异不显著,显著高于其他组。研究表明,适宜水平的饲料精氨酸可以刺激斜带石斑鱼胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的分泌,进而促进蛋白质的合成;提高鱼体肠道、肾脏及肝脏相关免疫基因的表达,提高机体免疫力,促进鱼体生长。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 精氨酸 蛋白质沉积 免疫基因表达
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