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β-拉帕醌联合BEZ235抑制乳腺癌细胞的增殖及迁移
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作者 李月 丁米娜 +2 位作者 朱坤 朴俊杰 陈丽艳 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期359-371,共13页
目的:探讨β-拉帕醌联合BEZ235对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响,及其可能的作用机制。方法:应用MTT法检测β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-468细胞增殖的影响,并计算联合用药指数(combination index,CI);应用蛋... 目的:探讨β-拉帕醌联合BEZ235对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响,及其可能的作用机制。方法:应用MTT法检测β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-468细胞增殖的影响,并计算联合用药指数(combination index,CI);应用蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白Ki67的表达水平;应用平板克隆形成实验检测MCF-7和MDA-MB-468细胞的集落形成能力;应用划痕愈合实验检测MCF-7和MDA-MB-468细胞的横向迁移能力;应用Transwell小室法检测MCF-7和MDA-MB-468细胞的纵向迁移和侵袭能力;应用蛋白质印迹法检测MCF-7和MDA-MB-468细胞中上皮-间质转化相关蛋白的表达。应用血管形成实验检测用β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合处理的MCF-7和MDA-MB-468细胞上清液培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)血管形成能力;应用蛋白质印迹法检测β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-468细胞中血管形成相关蛋白血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平的影响。结果:β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合处理组MCF-7和MDAMB-468细胞的增殖能力均显著低于未用药物处理的对照组(P值均<0.05);2药的CI值均<1,具有协同作用。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞中Ki67的表达水平均显著低于对照组和各单药组(P值均<0.05)。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞的集落形成数均显著少于对照组和各单药组(P值均<0.05)。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞的横向迁移能力、纵向迁移和侵袭能力均显著低于对照组和各单药组(P值均<0.05)。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞中上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin的表达水平均显著高于对照组和各单药组(P值均<0.05),Vimentin和Twist的表达水平均显著低于对照组和各单药组(P值均<0.05)。用β-拉帕醌联合BE 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 上皮-间质转化 肿瘤转移 β-拉帕醌 BEZ235
基于“互联网+”的生物化学实验教学改革实践 预览
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作者 陈丽艳 全吉淑 柳明洙 《基础医学教育》 2019年第4期318-320,共3页
生物化学是医学院校的重要基础课程之一,生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分。如何在传统教学中及时改进和完善原有的实验教学模式,是应用型医学人才培养模式改革的核心问题,也是提高教学质量的关键。通过构建基于“互联网+”的... 生物化学是医学院校的重要基础课程之一,生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分。如何在传统教学中及时改进和完善原有的实验教学模式,是应用型医学人才培养模式改革的核心问题,也是提高教学质量的关键。通过构建基于“互联网+”的混合式教学模式,对生物化学实验教学进行改革探索,对于提高教学效果是一种有益尝试。 展开更多
关键词 生物化学 实验教学 混合式教学模式 教学改革
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蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响 预览
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作者 朱坤 丁米娜 +2 位作者 杨洋 车拴龙 陈丽艳 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第17期140-144,共5页
目的:探讨蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,采用噻唑蓝比色法和平板克隆实验检测蒲公英萜醇对MCF-7细胞增殖的影响;Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡的形态变化;... 目的:探讨蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,采用噻唑蓝比色法和平板克隆实验检测蒲公英萜醇对MCF-7细胞增殖的影响;Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡的形态变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7有明显的增殖抑制作用(P<0.05);Hoechst染色结果显示,给药后细胞核内染色质凝集,核固缩,可见凋亡小体;Western blot结果显示,蒲公英萜醇可极显著提高Bax/Bcl-2的比值(P<0.01)以及上调活化型Caspase-3/9的表达(P<0.01),下调PARP的表达(P<0.01)。结论:蒲公英萜醇能够明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,并通过线粒体途径诱导其凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 蒲公英萜醇 凋亡 线粒体途径
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3-甲基腺嘌昤联合曲古霉素A抑制三阴性乳腺癌细胞生长 预览 被引量:1
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作者 朱坤 徐明 +2 位作者 丁米娜 林贞花 陈丽艳 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期1524-1527,共4页
目的:探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的影响及其可能的分子机制。方法:MTT法检测TSA对MDA-MB-231细胞活力的抑制作用;划痕实验检测细胞迁移能力... 目的:探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的影响及其可能的分子机制。方法:MTT法检测TSA对MDA-MB-231细胞活力的抑制作用;划痕实验检测细胞迁移能力的变化;Westernblot检测细胞自噬相关蛋白的变化;MTT法检测3-MA联合TSA对细胞活力的影响。结果:TSA可有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长,并呈剂量和时间依赖性;TSA抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力,并诱导细胞发生自噬;3-MA可有效抑制TSA诱导的乳腺癌细胞自噬,并进一步抑制细胞活力,差异有统计学意义。结论:3-MA可明显增加TSA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 曲古霉素A 3-甲基腺嘌呤 自唆
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蒲公英萜醇对乳腺癌细胞增殖及发生氧化应激反应的影响 预览
5
作者 朱坤 丁米娜 +1 位作者 李月 陈丽艳 《当代医药论丛》 2017年第19期10-12,共3页
目的 :探究蒲公英萜醇(Taraxerol)对乳腺癌细胞(MCF-7细胞)增殖及发生氧化应激反应的影响。方法 :将MCF-7细胞接种于96孔板中,在其中4孔的MCF-7细胞中分别加入12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L的蒲公... 目的 :探究蒲公英萜醇(Taraxerol)对乳腺癌细胞(MCF-7细胞)增殖及发生氧化应激反应的影响。方法 :将MCF-7细胞接种于96孔板中,在其中4孔的MCF-7细胞中分别加入12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L的蒲公英萜醇,对其中一孔的MCF-7细胞不进行添加蒲公英萜的处理。将未经处理的MCF-7细胞设为对照组(Control组),将其他的MCF-7细胞设为用药组。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测加入不同浓度的蒲公英萜醇对各用药组细胞增殖的影响,采用探针DCFH-DA检测各组细胞中活性氧(ROS)的变化,采用分光光度法测定各组细胞中上清液乳酸脱氢酶(LDH)及细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 :进行CCK-8检测的结果显示,在各用药组细胞中加入蒲公英萜醇后的第48 h和第72 h其增殖速度均明显下降,与对照组细胞相比差异有统计学意义,P〈0.05。与对照组细胞相比,各用药组细胞中ROS、LDH、MDA的水平均明显上升(P〈0.05),其中SOD的水平均明显下降(P〈0.05),且在各用药组细胞中加入蒲公英萜醇的浓度越高,其ROS、LDH、MDA、SOD水平的变化幅度越大。结论 :蒲公英萜醇可抑制乳腺癌细胞MCF-7细胞的增殖,其作用机制可能与其能够诱导该细胞发生氧化应激性损伤有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 蒲公英萜醇 氧化应激
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神经肽W对能量的稳态、应激和疼痛的影响研究进展
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作者 方龙云 金梅花 +2 位作者 徐京男 王明明 俞男寿 《延边大学医学学报》 CAS 2016年第4期311-313,共3页
神经肽W(NPW)是2002年被发现的下丘脑神经肽,为G蛋白偶联受体GPR7和GPR8的内源性配体.NPW受体存在于中枢神经系统及外周组织器官,认为可能作为神经递质或调质参与多种生理功能的调节.NPW受体的药理学作用及生理学特性已引起诸多学者关注.
关键词 神经肽W 能量代谢 应激 疼痛
组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA诱导人乳腺癌细胞凋亡及自噬 预览 被引量:2
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作者 周宪春 朱坤 +2 位作者 徐明 车拴龙 陈丽艳 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期735-738,共4页
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素(TSA)对人乳腺癌细胞凋亡及自噬的作用及其可能的分子机制。方法 采用MTT法检测T47D细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;Westernblot法检测凋亡及自噬相关蛋白的表达。结果 TSA对... 目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素(TSA)对人乳腺癌细胞凋亡及自噬的作用及其可能的分子机制。方法 采用MTT法检测T47D细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;Westernblot法检测凋亡及自噬相关蛋白的表达。结果 TSA对人乳腺癌细胞T47D具有增殖抑制作用(P〈0.05);TSA诱导T47D细胞发生凋亡,下调BCL-2/Bax比值,上调Caspase-3的表达(P〈0.05);同时自噬相关蛋白LC3B及Beclin-1的表达也明显增加(P〈0.05,P〈0.01)。结论 TSA体外能抑制乳腺癌细胞的增殖,其机制与诱导细胞凋亡和自噬作用有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 TSA 凋亡 自噬
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p21蛋白激活激酶4在三阴乳腺癌增殖中的作用及机制研究 预览 被引量:4
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作者 王子航 陈丽艳 米旭光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期636-639,共4页
目的:探讨p21蛋白激活激酶4(PAK4)在三阴乳腺癌细胞增殖存活中的作用机制。方法:在三阴乳腺癌BT549和MDA-MB-231细胞中转染PAK4干扰载体,荧光定量法和免疫印迹分析检测PAK4 mRNA和蛋白质表达量变化;MTT法检测转染PAK4干扰载体对三... 目的:探讨p21蛋白激活激酶4(PAK4)在三阴乳腺癌细胞增殖存活中的作用机制。方法:在三阴乳腺癌BT549和MDA-MB-231细胞中转染PAK4干扰载体,荧光定量法和免疫印迹分析检测PAK4 mRNA和蛋白质表达量变化;MTT法检测转染PAK4干扰载体对三阴乳腺癌细胞存活率的影响;细胞周期分析检测,转染PAK4干扰载体对三阴乳腺癌细胞细胞周期的影响;免疫印迹分析,转染PAK4干扰载体对三阴乳腺癌细胞对细胞信号通路的影响。结果:干扰内源PAK4表达后,三阴乳腺癌BT549和MDA-MB-231细胞的增殖率分别下降(36.51±4.24)%和(38.54±5.43)%,G0/G1期细胞所占比例显著增加到(66.40±2.82)%和(72.01±3.13)%,ERK1/2磷酸化显著降低;ERK通路抑制剂PD98059处理后,三阴乳腺癌BT549细胞的增殖率显著下降(46.41±7.16)%。结论:PAK4在三阴乳腺癌增殖中发挥关键作用,其促增殖作用是通过ERK通路实现的。 展开更多
关键词 三阴乳腺癌 PAK4 增殖 ERK
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PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235抑制人乳腺癌细胞增殖及促进细胞自噬 预览 被引量:3
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作者 王鹤儒 于洋 陈丽艳 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第8期1139-1141,共3页
乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一。P13K/Akt/mTOR信号通路作为调节细胞增殖的重要信号传导通路,在肿瘤细胞的增殖、迁移及耐药中也具有重要的调节作用。NVP-BEZ235为P13K和roTOR双重靶向抑制剂,具有抑制多种肿瘤恶性进展的作... 乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一。P13K/Akt/mTOR信号通路作为调节细胞增殖的重要信号传导通路,在肿瘤细胞的增殖、迁移及耐药中也具有重要的调节作用。NVP-BEZ235为P13K和roTOR双重靶向抑制剂,具有抑制多种肿瘤恶性进展的作用,但机制仍不明确。本研究旨在探讨NVP-BEZ235对乳腺癌细胞自噬作用的影响,为临床治疗乳腺癌提供新的实验数据。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞增殖 MTOR抑制剂 细胞自噬 PI3K P13K/AKT 信号传导通路 恶性肿瘤 信号通路
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NAD(P)H:醌氧化还原酶1过表达在甲状腺髓样癌预后评估中的意义 被引量:1
10
作者 金哲洙 崔雪莲 +4 位作者 张源 杨洋 李龙山 林贞花 陈丽艳 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期128-129,共2页
甲状腺髓样癌(MTC)约占全部甲状腺癌的8%~10%,其临床表现复杂多样,易于局部扩散和远处转移,恶性程度高,预后差。因此,寻找MTC的早期诊断及预后评估的有效分子靶标是临床治疗MTC亟待解决的关键问题。NAD(P)H:醌氧化还原酶1... 甲状腺髓样癌(MTC)约占全部甲状腺癌的8%~10%,其临床表现复杂多样,易于局部扩散和远处转移,恶性程度高,预后差。因此,寻找MTC的早期诊断及预后评估的有效分子靶标是临床治疗MTC亟待解决的关键问题。NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQ01)可专一性的催化真核细胞内醌类物质及其衍生物发生双电子还原反应,从而对醌类物质的损伤形成一种保护机制。 展开更多
关键词 甲状腺髓样癌 预后评估 醌氧化还原酶1 NAD(P)H:醌氧化还原酶 过表达 甲状腺癌 临床表现 远处转移
桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠肝脏磷酸化腺苷酸蛋白激酶表达的影响 被引量:2
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作者 崔敬兰 常影 李天洙 《延边大学医学学报》 CAS 2015年第4期286-288,共3页
[目的]探讨桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠肝脏磷酸化腺苷酸蛋白激酶(P-AMPK)表达的影响.[方法]制作STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组、阳性对照组、桦褐孔菌水提取物高、中、低剂量组.阳性对照组给予200mg/kg... [目的]探讨桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠肝脏磷酸化腺苷酸蛋白激酶(P-AMPK)表达的影响.[方法]制作STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组、阳性对照组、桦褐孔菌水提取物高、中、低剂量组.阳性对照组给予200mg/kg盐酸二甲双胍,桦褐孔菌水提取物各剂量组分别灌胃给予900,600,300mg/kg桦褐孔菌水提取物,正常对照组和糖尿病模型组灌胃给予等体积纯净水,每日1次,连续8周.测定实验前后空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白、糖耐量等指标,检测肝组织中磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PEPCK)和P-AMPK表达水平.[结果]与糖尿病模型组比较,桦褐孔菌各剂量组FBG值显著降低(P〈0.05),肝脏PEPCK表达明显降低(P〈0.05),P-AMPK表达显著升高(P〈0.05),且均表现出剂量依赖性.[结论]桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠具有较好的降低血糖作用,机制认为可能与上调腺苷酸蛋白激酶(AMPK)信号通路中P-AMPK表达,减少PEPCK表达,继而降低糖异生过程有关系. 展开更多
关键词 糖尿病 桦褐孔菌 大鼠
两种细胞建立肝细胞氧化损伤模型比较 被引量:10
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作者 金明 王玉娇 +1 位作者 金梅花 全吉淑 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期324-326,共3页
目的比较过氧化氢诱导人肝癌细胞株(Hep G2)与正常肝细胞株(Chang liver)建立的肝细胞氧化应激损伤模型。方法用不同浓度过氧化氢诱导Hep G2细胞和Chang liver细胞氧化应激损伤,采用噻唑蓝法检测细胞生长抑制率;分光光度法测定培养... 目的比较过氧化氢诱导人肝癌细胞株(Hep G2)与正常肝细胞株(Chang liver)建立的肝细胞氧化应激损伤模型。方法用不同浓度过氧化氢诱导Hep G2细胞和Chang liver细胞氧化应激损伤,采用噻唑蓝法检测细胞生长抑制率;分光光度法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,以及肝细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)含量。结果作用时间在0.5~4 h时,在75~600μmol/L浓度范围内,过氧化氢可浓度和时间依赖性地抑制2种肝细胞增殖,促使细胞内AST、ALT和LDH向培养液中释放;细胞中SOD和GSH活性明显降低,MDA含量明显升高,表明2种肝细胞氧化损伤模型构建成功;选择300μmol/L H2O2作用4 h为致Hep G2和Chang liver细胞氧化应激损伤的最佳条件,结果显示,Hep G2和Chang liver细胞的生长抑制率分别为62%和76%,培养液中ALT、AST、LDH活性分别为(18.2±0.2)、(34.2±4.6)、(544.2±26.8)和(19.1±0.1)、(30.3±2.5)、(536.8±22.3)U/L,细胞中MDA含量分别为(7.8±0.9)和(8.6±1.1)nmol/mgprot。结论Hep G2与Chang liver细胞均可用于氧化应激细胞损伤模型的制备。 展开更多
关键词 过氧化氢(H2O2) 氧化损伤 人肝癌细胞株(Hep G2) 正常肝细胞株(Chang liver)
TTF1-NP通过活化内质网应激CHOP通路抑制大鼠原发性肝癌生长作用 被引量:1
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作者 马子涵 张坤 +1 位作者 臧韵 张学武 《延边大学医学学报》 CAS 2015年第2期82-85,共4页
[目的]探讨TTF1-NP对大鼠原发性肝癌生长的抑制作用及其机制.[方法]采用二乙基亚硝胺(DEN)间断给药法建立大鼠肝癌模型,行HE染色观察TTF1-NP干预后大鼠肝脏的形态学变化;利用Western Blot技术检测TTF1-NP干预后大鼠内质网应激(ERS)C... [目的]探讨TTF1-NP对大鼠原发性肝癌生长的抑制作用及其机制.[方法]采用二乙基亚硝胺(DEN)间断给药法建立大鼠肝癌模型,行HE染色观察TTF1-NP干预后大鼠肝脏的形态学变化;利用Western Blot技术检测TTF1-NP干预后大鼠内质网应激(ERS)CHOP通路主要调控蛋白的表达情况.[结果]TTF1-NP对大鼠原发性肝癌的生长有抑制作用,随着TTF1-NP质量浓度的升高,GRP78,eIF2α,IRE1表达逐渐增加,而CHOP仅在高剂量组表达增加.[结论]TTF1-NP可通过活化ERS的CHOP通路抑制DEN诱发的大鼠原发性肝癌的生长. 展开更多
关键词 肝肿瘤 珍珠梅 内质网应激 大鼠
TTF1-NP诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的内质网应激作用 预览 被引量:3
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作者 肖斌 刘荣荣 +1 位作者 刘炳彤 张学武 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1118-1123,I0012共7页
目的:通过不同剂量长白山珍珠梅黄酮纳米粒(TTF1-NP)分别诱导不同种人肝癌细胞和人正常肝细胞凋亡,探讨TTF1-NP对不同细胞的作用及涉及的内质网应激作用机制。方法:以体外培养的不同种人肝癌细胞(Hep3B、HepG-2和PLC/PRF/5)和人... 目的:通过不同剂量长白山珍珠梅黄酮纳米粒(TTF1-NP)分别诱导不同种人肝癌细胞和人正常肝细胞凋亡,探讨TTF1-NP对不同细胞的作用及涉及的内质网应激作用机制。方法:以体外培养的不同种人肝癌细胞(Hep3B、HepG-2和PLC/PRF/5)和人肝细胞(Chang Liver)为模型,实验分为阴性对照组、阳性对照组(5-Fu)和TTF1-NP实验组,TTF1-NP处理浓度分别为50、100和200μmol·L-1。采用MTT法检测TTF1-NP对不同种细胞的生长抑制作用,选择最佳抑制效果细胞(HepG-2)为主要研究细胞株;利用流式细胞术检测细胞凋亡率;应用Western blotting和免疫细胞化学染色技术检测内质网应激关键蛋白表达情况;通过内质网应激抑制剂4-苯丁酸(4-PBA)作用,再次检测相关蛋白的表达情况。结果:与阴性对照组比较,不同浓度的TTF1-NP组4种细胞生长抑制率升高(P〈0.05或P〈0.01),且呈一定的浓度和时间依赖关系。细胞凋亡检测,与阴性对照组比较,TTF1-NP实验组随药物浓度增加其细胞凋亡率逐渐上升(P〈0.05或P〈0.01);内质网应激关键蛋白GRP78和caspase-4随着TTF1-NP浓度增加,表达水平逐渐升高(P〈0.05或P〈0.01)。4-PBA有效抑制GRP78和caspase-4表达,与TTF1-NP组比较差异有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论:TTF1-NP可诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡;内质网应激途径是TTF1-NP诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的主要作用机制之一。 展开更多
关键词 珍珠梅黄酮纳米粒 内质网应激 细胞凋亡 肝肿瘤
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桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠糖异生和胆固醇合成关键酶表达的影响 被引量:2
15
作者 李洁 常影 李天洙 《延边大学医学学报》 CAS 2014年第4期262-265,共4页
[目的]探讨桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠糖异生和胆固醇合成关键酶表达水平的影响.[方法]制备STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组(阴性对照组)、阳性对照组、桦褐孔菌水提取物大、中、小剂量组.阳性对照组给予20... [目的]探讨桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠糖异生和胆固醇合成关键酶表达水平的影响.[方法]制备STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组(阴性对照组)、阳性对照组、桦褐孔菌水提取物大、中、小剂量组.阳性对照组给予200mg/kg盐酸二甲双胍,桦褐孔菌水提取物给药组分别灌胃给予桦褐孔菌水提取物900,600,300mg/kg.每日1次,连续给药8周.实验前后测定大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、糖耐量及TG,TC,LDL-C,HDL-C等指标,检测肝组织PEPCK,G-6-PASE,HMG CoA还原酶蛋白表达水平.[结果]与阴性对照组比较,桦褐孔菌水提取物中、大剂量组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白,TC,TG及LDL-C水平显著降低(P〈0.05,P〈0.01),HDL-C水平增高(P〈0.05,P〈0.01),PEPCK,G-6-PASE及HMG CoA还原酶表达水平显著降低,且呈剂量依赖性.[结论]桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠具有较好的降低血糖和血脂水平的作用,其机制可能与降低PEPCK,G-6-PASE,HMG CoA还原酶的表达及减少糖异生和胆固醇合成过程有关. 展开更多
关键词 糖尿病 磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶 葡萄糖-6-磷酸酶 HMG CoA还原酶 蛋白质表达 大鼠
肝细胞核因子3对Ⅱ型葡萄糖载体启动子活性及蛋白表达的影响
16
作者 李天洙 曾海 柳明洙 《延边大学医学学报》 CAS 2013年第3期182-184,共3页
[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子3(HNF3)对Ⅱ型葡萄糖载体(GLUT2)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术将HNF3cDNA序列重组到表达载体pSV—sport上,GLUT2cDNA克隆到载体pGL3b上.通过CV-1细胞株的体外培养将HNF3转染CV-1培养细... [目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子3(HNF3)对Ⅱ型葡萄糖载体(GLUT2)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术将HNF3cDNA序列重组到表达载体pSV—sport上,GLUT2cDNA克隆到载体pGL3b上.通过CV-1细胞株的体外培养将HNF3转染CV-1培养细胞,应用荧光素酶活性测定和Westernblot方法观察HNF3对GLUT2的启动子活性及蛋白质表达的影响.[结果]HNF3可增高GLUT2的荧光素酶活性及蛋白质表达水平.[结论]HNF3可能通过调节GLUT2的表达参与胰岛素对血糖的调节过程. 展开更多
关键词 肝细胞核因子 葡萄糖载体 荧光素酶活性 蛋白表达
肝细胞核因子-1α对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体表达的影响
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作者 李天洙 张晓庆 崔敬兰 《延边大学医学学报》 CAS 2013年第4期260-262,共3页
[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子-1α(HNF—1v)对小鼠I型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将HNF-1acDNA序列重组到表达载体pSV—sport上,以HNF—1α转染CV-1细胞,应用Northernblot方法测定HNF-1α对mGL... [目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子-1α(HNF—1v)对小鼠I型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将HNF-1acDNA序列重组到表达载体pSV—sport上,以HNF—1α转染CV-1细胞,应用Northernblot方法测定HNF-1α对mGLUT1mRNA表达的影响.[结果]HNF—1α可提高mGLUTlmRNA表达水平及稳定性.[结论]HNF-1α可增强mGLUT1的表达,可能通过调节GLUT1的表达参与胰岛素对血糖的调节过程. 展开更多
关键词 肝细胞核因子 葡萄糖转运蛋白质类 易化性 小鼠
草苁蓉环烯醚萜对D-氨基半乳糖所致急性肝损伤小鼠肝组织抗氧化活性的影响 被引量:5
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作者 李迪 申镐源 +3 位作者 赵薇 赵文玺 金爱花 全吉淑 《延边大学医学学报》 CAS 2012年第2期98-100,共3页
[目的]研究草苁蓉环烯醚萜对D-氨基半乳糖(GalN)诱发的急性肝损伤小鼠肝组织抗氧化活性的影响.[方法]将实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、水飞蓟素组及草苁蓉环烯醚萜大、小剂量组.每日灌胃给予小鼠相应药物,共7d.实验末期,... [目的]研究草苁蓉环烯醚萜对D-氨基半乳糖(GalN)诱发的急性肝损伤小鼠肝组织抗氧化活性的影响.[方法]将实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、水飞蓟素组及草苁蓉环烯醚萜大、小剂量组.每日灌胃给予小鼠相应药物,共7d.实验末期,腹腔注射给予GalN,建立小鼠急性肝损伤模型,用比色法检测小鼠血清转氨酶及肝组织抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]与模型对照组比较,草苁蓉环烯醚萜大、小剂量组肝损伤小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶活性明显降低,肝组织超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高,MDA水平明显降低,相比较差异均具有统计学意义(P〈0.05).[结论]草苁蓉环烯醚萜对GalN诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,可提高肝组织抗氧化活性. 展开更多
关键词 肝损伤 列当属 环烯醚萜类 抗氧化 小鼠
草苁蓉水萃取物对小鼠肝癌移植瘤的生长抑制作用 被引量:2
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作者 王秋燕 王晶 +3 位作者 倪颖 赵文玺 金爱花 全吉淑 《延边大学医学学报》 CAS 2012年第2期107-109,共3页
[目的]研究草苁蓉水萃取物(BRAF)对小鼠H22移植瘤的生长抑制作用.[方法]将荷瘤小鼠随机分为模型对照组、BRAF大、中、小剂量(400,200,100mg/kg)组和5-氟尿嘧啶组,每日灌胃给予相应药物,共10d,隔日腹腔注射给予5-氟尿嘧啶,共5次.实... [目的]研究草苁蓉水萃取物(BRAF)对小鼠H22移植瘤的生长抑制作用.[方法]将荷瘤小鼠随机分为模型对照组、BRAF大、中、小剂量(400,200,100mg/kg)组和5-氟尿嘧啶组,每日灌胃给予相应药物,共10d,隔日腹腔注射给予5-氟尿嘧啶,共5次.实验末期处死动物,计算肿瘤生长抑制率,采用比色法检测血清总抗氧化活性(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量.[结果]与模型对照组比较,BRAF小、中、大剂量组移植瘤质量显著减小,肿瘤生长抑制率明显提高,血清T-AOC明显增高,血清MDA水平显著降低,相比较差异均有统计学意义(P〈0.05).[结论]BRAF对小鼠H22移植瘤生长具有明显的抑制作用,其机制可能与增高抗氧化能力有关. 展开更多
关键词 肝肿瘤 列当属 小鼠
人细胞骨架调节蛋白基因Nelin的原核表达与分离纯化 预览 被引量:4
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作者 尤听 时娜 +3 位作者 柳明洙 曹慧青 刘冬青 孟宪敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期 1128-1131,共4页
目的:原核表达并分离纯化人细胞骨架调节蛋白基因Nelin。方法:利用DNAstar软件预测Nelin的B细胞表位,选择Nelin基因B细胞表位较多、特异性最强的片段。用DNA重组技术,将此片段插入原核表达载体pE128a(+),构建C末端带有His6标签... 目的:原核表达并分离纯化人细胞骨架调节蛋白基因Nelin。方法:利用DNAstar软件预测Nelin的B细胞表位,选择Nelin基因B细胞表位较多、特异性最强的片段。用DNA重组技术,将此片段插入原核表达载体pE128a(+),构建C末端带有His6标签的原核表达载体pE128a-Nelin,转化大肠杆菌B121(DE3),IPTG诱导,产物用Ni^2+金属螯合吸附层析柱纯化。结果:成功构建了pE128a-Nelin表达载体,IFTG诱导后表达分子量约为17000的可溶性蛋白,Nelin-His6蛋白的表达量占菌体总蛋白的18%,经Ni^2+金属螫合层析柱纯化,得到了电泳纯的Nelin—His6蛋白。结论:建立了稳定的Nelin基因的表达体系,为其功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 Nelin基因 原核表达 分离纯化 B细胞表位
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