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氯离子通道蛋白1在心肌纤维化进程中的表达特征
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作者 田香勤 谭朝阳 +3 位作者 李新芝 马克涛 李丽 司军强 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期173-178,共6页
目的探讨氯离子通道蛋白1(ANO1)在心肌纤维化进程中的表达特征,为抑制心肌纤维化寻找新的靶点。方法采用冠状动脉结扎法制作大鼠心肌梗死模型,1周后取心肌梗死组和假手术组大鼠左心室组织,采用免疫组织化学染色、免疫荧光双标记检测梗... 目的探讨氯离子通道蛋白1(ANO1)在心肌纤维化进程中的表达特征,为抑制心肌纤维化寻找新的靶点。方法采用冠状动脉结扎法制作大鼠心肌梗死模型,1周后取心肌梗死组和假手术组大鼠左心室组织,采用免疫组织化学染色、免疫荧光双标记检测梗死区和正常组织ANO1表达的变化;体外分离培养心肌成纤维细胞,采用免疫荧光标记、Real-time PCR和Western blotting检测心肌成纤维细胞中ANO1表达情况。结果制造模型1周后心肌梗死区ANO1表达明显增强,并与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共表达;ANO1蛋白明显表达于心肌成纤维细胞的核膜和胞质中,且表达强度和α-SMA具有相同的趋势;与刚分离贴壁心肌纤维细胞相比,ANO1在培养和48h后的心肌成纤维细胞中表达量明显增强。结论 ANO1在心肌成纤维细胞转化为成肌纤维细胞过程中表达量增加,提示ANO1可能在心肌纤维化进程中发挥重要调控作用。 展开更多
关键词 氯离子通道蛋白1 钙激活氯通道 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 免疫组织化学 大鼠
仔猪回肠绒毛M细胞的形态、分布及其与猪流行性腹泻病毒感染的关系 预览 被引量:3
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作者 李任峰 田香勤 +3 位作者 乔松林 郭军庆 周恩民 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期581-586,共6页
为了探索新生仔猪回肠绒毛上皮是否存在M细胞以及自然感染条件下猪流行性腹泻病毒(PEDV)与回肠绒毛M细胞之间的关系。采用免疫荧光、免疫组化及形态学方法研究了正常情况下仔猪回肠绒毛M细胞的分布特点和形态学特征,以及自然感染条件... 为了探索新生仔猪回肠绒毛上皮是否存在M细胞以及自然感染条件下猪流行性腹泻病毒(PEDV)与回肠绒毛M细胞之间的关系。采用免疫荧光、免疫组化及形态学方法研究了正常情况下仔猪回肠绒毛M细胞的分布特点和形态学特征,以及自然感染条件下PEDV与仔猪回肠绒毛M细胞之间的关系。免疫荧光结果证实正常仔猪回肠绒毛上皮存在M细胞,沿隐窝至绒毛顶端上皮方向,M细胞的数量逐渐减少。电镜下,正常仔猪的回肠绒毛M细胞具有典型的M细胞特征。自然感染PEDV的仔猪回肠绒毛M细胞病变明显,在其顶膜、细胞质、细胞核及其上皮下层均观察到成簇的PEDV颗粒,而相邻的其他上皮细胞病变不明显,且细胞内没有观察到病毒粒子。以上研究结果表明,新生仔猪回肠绒毛上皮存在M细胞,在绒毛的不同位置其分布比例存在差异。仔猪回肠绒毛M细胞可能是PEDV入侵肠道的重要通道。 展开更多
关键词 肠绒毛M细胞 新生仔猪 猪流行性腹泻病毒
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肾性高血压大鼠左心室整合素β1和黏着斑激酶的表达
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作者 田香勤 刘迎春 蔡新华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期391-395,共5页
目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中整合素β1(integrinβ1)和黏着斑激酶(FAK)的表达变化。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,40只SD大鼠随机分为假手术组(sham)、术后2周组、术后5周组和术后7周组,血压及左心室重量... 目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中整合素β1(integrinβ1)和黏着斑激酶(FAK)的表达变化。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,40只SD大鼠随机分为假手术组(sham)、术后2周组、术后5周组和术后7周组,血压及左心室重量指数评价造模成功后,取左心室组织,采用HE染色观察心肌细胞的形态变化,免疫组织化学和Western blotting检测各组左心室肌组织integrinβ1和FAK的表达。结果 HE染色结果显示,实验组大鼠左心室组织的心肌纤维走向紊乱,心肌细胞间隙变大;integrinβ1和FAK蛋白分别表达于心肌细胞膜和心肌细胞质近膜区,呈线样或细颗粒状分布;integrinβ1的表达强度在术后随时间呈逐渐上升趋势,至5周组趋于平稳;FAK在2周组的表达强度相对于假手术组明显下降(P〈0.01),实验组随术后时间增加表达量增强;Western blotting结果显示,integrinβ1和FAK在各手术组的表达均明显高于假手术组(P〈0.01),5周组较2周组下降明显(P〈0.01),7周组和5周组差异不明显(P〉0.05)。结论 Integrinβ1和FAK在心室肌的表达变化可能是高血压心肌肥厚的重要原因。 展开更多
关键词 整合素Β1 黏着斑激酶 心肌肥厚 肾性高血压 免疫组织化学 免疫印迹法 大鼠
肌节骨架蛋白ɑ-actinin和Myomesin-1在肾血管性高血压大鼠心室肌中的表达
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作者 田香勤 刘迎春 蔡新华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期683-687,共5页
目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中肌节骨架蛋白ɑ-actinin和Myomesin-1的表达变化规律。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,40只SD大鼠随机分假手术组(control)、术后2周组、术后5周组和术后7周组,血压及左室重量指数评... 目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中肌节骨架蛋白ɑ-actinin和Myomesin-1的表达变化规律。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,40只SD大鼠随机分假手术组(control)、术后2周组、术后5周组和术后7周组,血压及左室重量指数评价造模成功后,取左心室肌组织,采用免疫组织化学染色和Western blotting检测各组左心室肌组织ɑ-actinin和Myomesin-1的表达,并进行图像分析和统计学处理。结果ɑ-actinin和Myomesin-1蛋白表达主要呈点状或短棒状表达,在高血压进程中呈现弥散状分布的特点;免疫组织化学和Western blotting结果显示,与对照组相比,术后2周组ɑ-actinin和Myomesin-1蛋白表达均显著增高(P〈0.01);在高血压进程中,两蛋白的表达量均随时间增加而下降,组间比较差异具有统计学意义(P〈0.05);ɑ-actinin阳性表达区的宽度在高血压进程中呈先降低后升高的趋势,且相邻组间差异均具有统计学意义(P〈0.05)。结论ɑ-actinin和Myomesin-1参与高血压心肌肥厚的发生,提示肌节收缩能力与血压的高低有关。 展开更多
关键词 ɑ-actinin Myomesin-1 肌节 肾性高血压 免疫印迹法 大鼠
瘤内注射吉西他滨治疗大鼠脑胶质瘤的效果观察
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作者 崔爱玲 王巍东 +5 位作者 赵松鹤 李春玲 贾阿林 龚亮 胡红伟 李甜甜 《肿瘤研究与临床》 CAS 2013年第12期796-798,共3页
目的 观察吉西他滨瘤内给药治疗大鼠脑胶质瘤的效果,探讨治疗脑胶质瘤的有效化疗途径及药物.方法 50只SD大鼠随机分为对照组(5只),肿瘤组和治疗(1 mg/ml)组和治疗(4mg/ml)组,每组15只.除对照组外,所有大鼠均在纹状体部埋植导管,... 目的 观察吉西他滨瘤内给药治疗大鼠脑胶质瘤的效果,探讨治疗脑胶质瘤的有效化疗途径及药物.方法 50只SD大鼠随机分为对照组(5只),肿瘤组和治疗(1 mg/ml)组和治疗(4mg/ml)组,每组15只.除对照组外,所有大鼠均在纹状体部埋植导管,并接种9L胶质瘤细胞株以建立在体脑胶质瘤模型.治疗组于植入瘤细胞第9天,通过导管将吉西他滨(10μl,1 mg/ml和4 mg/ ml)分别注入瘤内.于给药第9天,每组随机取脑抽检(5只),观察瘤形态及大小;余者(每组10只)观察其饮食、行为、体质量及存活期,评价吉西他滨对大鼠脑胶质瘤的治疗效果.结果 于瘤内注入吉西他滨第9天取脑,发现各组肿瘤大小分别为:肿瘤组(44.69±7.52) mm3、治疗(1 mg/ml)组(22.44±5.37) mm3和治疗(4 mg/ml)组(18.72±7.13)mm3,肿瘤组与两治疗组间差异有统计学意义(P<0.05),但两治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05).治疗组大鼠体质量下降较肿瘤组为轻.肿瘤组平均存活期为23.8d.4 mg/ml组1只存活期比肿瘤组短,剩余4只及全部1 mg/ml组(10只)均长于肿瘤组.结论 吉西他滨可抑制脑胶质瘤生长,缓解大鼠体质量下降,延长模型动物存活期,对大鼠脑胶质瘤具有抑制作用. 展开更多
关键词 神经胶质瘤 吉西他滨 药物疗法 瘤内投药 大鼠
大鼠心肌肥厚中PTEN,p-PI3K蛋白表达对心肌纤维化的影响 预览 被引量:2
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作者 穆灵敏 王文锋 +1 位作者 郭志坤 张光谋 《河南师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 128-130,共3页
对健康成年SD大鼠采用皮下注射异丙肾上腺素造成心肌肥厚模型;取心肌组织,常规石蜡切片,Masson染色,观察心肌组织的成纤维细胞变化;免疫荧光染色检测PTEN和p-PI3K的表达及分布.结果与对照组相比,实验组细胞间纤维细胞增多;免疫荧光检测P... 对健康成年SD大鼠采用皮下注射异丙肾上腺素造成心肌肥厚模型;取心肌组织,常规石蜡切片,Masson染色,观察心肌组织的成纤维细胞变化;免疫荧光染色检测PTEN和p-PI3K的表达及分布.结果与对照组相比,实验组细胞间纤维细胞增多;免疫荧光检测PTEN和p-PI3K的阳性表达明显增高.表明PTEN和p-PI3K蛋白表达增高可能在心肌纤维化的发生和发展过程中起重要作用. 展开更多
关键词 PTEN p-PI3K 免疫组织化学 免疫荧光 心肌纤维化
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6-羟多巴损伤黑质导致迷走神经背核乙酰胆碱转移酶和酪氨酸羟化酶表达变化 被引量:1
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作者 连辉 蔡青青 王志勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期1754-1757,共4页
目的观察6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤大鼠黑质后迷走神经背核(dorsal motor nucleus ofthe vagus,10N)中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)含量的变化。方法... 目的观察6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤大鼠黑质后迷走神经背核(dorsal motor nucleus ofthe vagus,10N)中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)含量的变化。方法 16只SD大鼠根据随机数字表分为6-OHDA大鼠组和对照组。6-OHDA大鼠组双侧黑质(substantia nigra,SN)内注射6-OHDA,对照组双侧SN内注射等体积的生理盐水。6周后断头取脑,Nissl染色观察SN和10N中的Nissl小体,免疫荧光和免疫印迹检测SN内TH和10N内ChAT与TH的表达。结果与对照组比较,6-OHDA大鼠组SN内TH阳性细胞数量从(54±5)个减少至(13±2)个(P〈0.05),蛋白表达水平从0.62±0.13降低至0.34±0.11(P〈0.05),10N中ChAT阳性细胞数量从(37±3)个减少到(26±5)个(P〈0.05),TH阳性细胞数量从(6±3)个增加到(13±2)个(P〈0.05),背侧延髓内ChAT的蛋白表达水平从0.07±0.02下降至0.05±0.02(P〈0.05),TH蛋白表达水平从0.08±0.05增高到0.13±0.04(P〈0.05)。结论 6-OHDA大鼠10N中ChAT和TH表达变化可能与帕金森病患者的胃排空障碍存在一定的联系。 展开更多
关键词 6-羟多巴 迷走神经背核 乙酰胆碱转移酶 酪氨酸羟化酶
整合素β1在异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚组织中的表达
8
作者 武俊芳 郭志坤 +1 位作者 张东 高建辉 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第1期 79-83,共5页
目的观察心肌肥厚大鼠心肌组织中整合素β1的表达变化。方法在大鼠背部皮下分别注射7 d、28 d和56 d异丙肾上腺素(ISO),判定心肌肥厚指标,利用免疫组织化学和免疫印迹技术,观察整合素β1在肥厚左心室肌中的表达。结果免疫组化和Wester... 目的观察心肌肥厚大鼠心肌组织中整合素β1的表达变化。方法在大鼠背部皮下分别注射7 d、28 d和56 d异丙肾上腺素(ISO),判定心肌肥厚指标,利用免疫组织化学和免疫印迹技术,观察整合素β1在肥厚左心室肌中的表达。结果免疫组化和Western blot结果显示,整合素β1主要表达于心肌细胞膜。与对照组相比,实验各组大鼠的心肌组织的整合素β1表达明显(P〈0.05)。7 d、28 d和56 d各组间相比其表达含量逐渐增强。结论在心肌肥厚状态下,心肌细胞中的整合素β1表达增高,随着心肌肥大的进展其表达逐渐增加,提示整合素β1在心肌肥厚发生发展起重要作用。 展开更多
关键词 整合素Β1 免疫组织化学 免疫印迹 心肌肥厚模型 大鼠
哺乳动物心脏淋巴与心血管疾病
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作者 王耀峰 郭志坤 《临床心血管病杂志》 CSCD 北大核心 2012年第3期 166-168,共3页
心淋巴管道是心脏脉管系统的重要补充,对维持心脏生理功能和心脏组织液的平衡起关键作用。心淋巴管道的异常与心血管疾病的发生密切相关。本文主要阐述心淋巴管的位置和功能、心淋巴障碍与心肌损伤、传导系统障碍、心血管病变的关系和... 心淋巴管道是心脏脉管系统的重要补充,对维持心脏生理功能和心脏组织液的平衡起关键作用。心淋巴管道的异常与心血管疾病的发生密切相关。本文主要阐述心淋巴管的位置和功能、心淋巴障碍与心肌损伤、传导系统障碍、心血管病变的关系和促进淋巴回流在心脏病中的治疗意义。 展开更多
关键词 淋巴管 心肌损伤 心脏传导系统 心血管损伤
异丙肾上腺素诱导的大鼠肥厚心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达 被引量:5
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作者 郭志坤 武俊芳 +1 位作者 单卫华 高建辉 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 93-97,共5页
目的 探讨Ⅰ、Ⅲ型胶原在肥厚心肌组织中的变化特征.方法 SD大鼠60只,分为对照组和实验组,两组分别再分为1、4、8周组,每组10只.对照组背部皮下注射生理盐水4ml/(kg·d);实验组背部皮下注射异丙肾上腺素4mg/(kg·d).两组分... 目的 探讨Ⅰ、Ⅲ型胶原在肥厚心肌组织中的变化特征.方法 SD大鼠60只,分为对照组和实验组,两组分别再分为1、4、8周组,每组10只.对照组背部皮下注射生理盐水4ml/(kg·d);实验组背部皮下注射异丙肾上腺素4mg/(kg·d).两组分别注射1、4、8周,然后测定各组大鼠体重(BW)、心脏湿重(HW)、左室湿重(LVW),计算出HW/BW、LVW/BW;心肌组织冷冻切片,利用图像分析软件,测量心肌细胞横径(TDM)和心肌细胞截面积(CA).免疫组织化学法检测各组心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达.Western blotting方法检测心肌肥厚大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达及其含量.结果 免疫组织化学结果显示,注射异丙肾上腺素1周后,Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达明显增加,4周后有所下降.Western blotting结果显示,实验各组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均多于对照组(P<0.01);实验1周时Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达量最高,4周和8周均下降.实验4周和8周组与1周组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 心肌肥厚发生1周左右是Ⅰ、Ⅲ型胶原增加的高峰期,以后趋于稳定.心肌肥厚主要引起胶原量的变化,不破坏胶原纤维的网络结构. 展开更多
关键词 心肌肥厚 胶原蛋白 免疫组织化学 免疫印迹法 大鼠
肾性高血压模型大鼠左心室壁Ⅰ、Ⅲ型胶原网络重建 被引量:2
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作者 田香勤 王琳 +3 位作者 郭志坤 蔡新华 邢智钰 吕卫锋 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期673-678,共6页
目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原分布的变化规律。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,32只SD大鼠随机分为假手术组、术后2周组、术后5周组和术后7周组,利用无创动物血压分析测试仪评价高血压动物模型质量... 目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原分布的变化规律。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,32只SD大鼠随机分为假手术组、术后2周组、术后5周组和术后7周组,利用无创动物血压分析测试仪评价高血压动物模型质量,免疫组织化学、Western blotting和图像分析方法检测各组左心室肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的改变。结果与假手术组相比,Ⅰ、Ⅲ型胶原网络在术后2周均无明显变化,术后5周心肌细胞及肌束周围Ⅰ型胶原粗细纤维束呈断裂、聚集或部分缺如。心室壁小动脉管壁Ⅰ型胶原鞘不规整,纤维束断裂,胶原聚集或堆积,血管外膜粗纤维束向间质延伸;术后5周组肌细胞周围Ⅲ型胶原粗、细纤维束均出现严重松散或紊乱;血管壁Ⅲ型胶原鞘呈现松散现象。图像分析结果显示:术后5周组与术后7周组相比,Ⅰ型胶原平均吸光度和平均面积比均存在显著差异(P〈0.05);Ⅱ型胶原平均吸光度各组间无显著差异(P〉0.05),平均面积比术后2周组与术后5周组之间差异显著(P〈0.05)。Westernblotting检测结果表明,手术5周后Ⅰ型胶原蛋白表达量呈增高趋势,Ⅲ型胶原蛋白表达量呈降低趋势。结论高血压可导致左室壁Ⅰ、Ⅲ型胶原网络发生重建或破坏,血管外膜胶原结构严重受损。 展开更多
关键词 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 心肌 肾性高血压模型 免疫组织化学 免疫印迹法 大鼠
成年大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的共表达 被引量:2
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作者 田香勤 郭志坤 +1 位作者 蔡新华 徐晶 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期680-683,共4页
目的探讨成年大鼠心肌中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的组织学构筑及比例关系。方法采用免疫组织化学、免疫荧光双标记和Western blotting等方法,观察10只成年大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的构筑特点;利用图像分析系统对Ⅰ、Ⅲ型胶原进行定量分析。结果... 目的探讨成年大鼠心肌中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的组织学构筑及比例关系。方法采用免疫组织化学、免疫荧光双标记和Western blotting等方法,观察10只成年大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的构筑特点;利用图像分析系统对Ⅰ、Ⅲ型胶原进行定量分析。结果Ⅰ型胶原主要表达在心肌细胞群周围和血管外膜,多形成粗纤维,Ⅲ型胶原主要表达于每个心肌细胞周围和血管外膜,主要构成细纤维。免疫荧光双标记显示,粗、细两种胶原纤维均含有Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白。心肌Ⅲ型胶原总含量略高于Ⅰ型胶原。结论由粗细胶原纤维构成的心肌胶原网络是由Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白共同构成,任何一种蛋白改变都可能影响心肌间质的功能。 展开更多
关键词 心肌 胶原 免疫组织化学 免疫荧光 免疫印迹法 大鼠
与细胞骨架同源10号染色体有缺陷的磷酸酯酶和磷脂酰肌醇-3激酶在大鼠心肌肥厚中的表达 预览 被引量:2
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作者 穆灵敏 郭志坤 张光谋 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期 310-312,352,共4页
目的:研究异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚与细胞骨架同源10号染色体有缺陷的磷酸酯酶(PTEN)和磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)在心肌组织中的表达,为探讨心肌肥厚的信号转导机制和逆转心肌肥厚提供形态学资料。方法:健康成年SD大鼠皮下注射... 目的:研究异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚与细胞骨架同源10号染色体有缺陷的磷酸酯酶(PTEN)和磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)在心肌组织中的表达,为探讨心肌肥厚的信号转导机制和逆转心肌肥厚提供形态学资料。方法:健康成年SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素,造成心肌肥厚模型;取心肌组织,常规石蜡切片,H—E染色,观察心肌组织的病理变化;免疫组织化学显色和免疫荧光显色,检测PTEN和p-P13K的表达及分布。利用图像分析软件对PTEN和p-P13K的表达结果进行定量分析。结果:与对照组相比,实验组PTEN和p-P13K的阳性表达增高。结论:PTEN和p-P13K蛋白表达增高可能在心肌肥厚的发生和发展过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 同源10号染色体有缺陷的磷酸酯酶 磷脂酰肌醇-3激酶 免疫组织化学 免疫荧光 心肌肥厚 大鼠
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在Atelocollagen胶原支架上体外三维培养乳大鼠心肌 被引量:2
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作者 滕伟 郭志坤 +3 位作者 李琼 孙庆宁 王庆志 郁小兵 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期885-890,共6页
目的 在Atelocollagen胶原支架上三维培养具有收缩功能的乳鼠心肌细胞块,为进一步开展心肌组织工程奠定基础.方法 乳鼠心肌消化培养、纯化后,种植到Atelocollagen胶原支架上进行三维培养.应用倒置显微镜动态观察心肌细胞在Atelocollage... 目的 在Atelocollagen胶原支架上三维培养具有收缩功能的乳鼠心肌细胞块,为进一步开展心肌组织工程奠定基础.方法 乳鼠心肌消化培养、纯化后,种植到Atelocollagen胶原支架上进行三维培养.应用倒置显微镜动态观察心肌细胞在Atelocollagen胶原支架上的生长情况.对三维培养不同时间的心肌细胞块进行石蜡包埋、切片,分别进行HE染色、肌球蛋白免疫组织化学染色、肌球蛋白免疫荧光染色、透射电镜观察,对三维培养的细胞进行全面鉴定.结果 心肌细胞种植到Atelocollagen胶原支架上6h开始贴支架生长,培养2d心肌细胞相互融合,并与Atelocollagen胶原支架形成复合体,连同支架一起搏动.培养6d细胞与细胞间结合较前更紧密.培养10d细胞在Atelocollagen胶原支架孔中交织成网状,18~20d细胞充满大部分支架网孔,进一步形成紧密的心肌细胞块.在整个培养过程中,心肌细胞始终保持良好的自律性收缩.形态学鉴定证明,支架网孔中生长的主要是心肌细胞,极少数为纤维样细胞.结论 利用Atelocollagen胶原支架能够培养出较为理想的、具有收缩功能的三维心肌细胞块. Atelocollagen collagen scaffold is facilitated to cultured three-dimensional myocardium of neonatal rat in vitro TENG Wei GUO Zhi-kun LI Qiong SUN Qing-ning WANG Qing-zhi YU Xiao-bing 展开更多
关键词 Atelocollagen胶原支架 肌球蛋白 心肌细胞 三维培养 免疫组织化学 免疫荧光 乳大鼠
兔心室肌层淋巴管道的分布及形态特征 预览 被引量:1
15
作者 郭志坤 马丽萍 孙庆宁 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期 602-605,共4页
目的:研究兔心室肌淋巴管道的分布特点和形态特征.方法:免疫组织化学显色法、墨汁注射法和透射电镜技术显示左、右心室肌组织中的淋巴管道.结果:光镜下显示心肌间淋巴管道分为少量较粗的淋巴管、毛细淋巴管,有些毛细淋巴管无管腔.电... 目的:研究兔心室肌淋巴管道的分布特点和形态特征.方法:免疫组织化学显色法、墨汁注射法和透射电镜技术显示左、右心室肌组织中的淋巴管道.结果:光镜下显示心肌间淋巴管道分为少量较粗的淋巴管、毛细淋巴管,有些毛细淋巴管无管腔.电镜下显示心肌内有较粗的和细小的毛细淋巴管.较粗的毛细淋巴管腔内、外面有突起.较细的毛细淋巴管腔不规则.淋巴管和毛细淋巴管均走行于心肌细胞之间,大多与心肌细胞平行走向,有少量横向交通.毛细淋巴管不与毛细血管伴行.结论:兔正常心室肌内的淋巴管道分为淋巴管、毛细淋巴管,两者在心肌内形成纵横交错和粗细不等的淋巴管网.较小的毛细淋巴管可能是一种未开放的毛细淋巴管. 展开更多
关键词 毛细淋巴管 免疫组织化学 墨汁注射 透射电镜
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PTEN/PI3K信号通路在大鼠心肌肥厚中的表达 预览 被引量:2
16
作者 李琼 郭志坤 张光谋 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期 172-175,共4页
目的:观察PTEN/PI3K信号通路在大鼠心肌组织中的表达,探讨该通路在心肌肥厚发生、发展中的作用.方法:皮下注射异丙肾上腺素(ISO)建立大鼠心肌肥厚模型,测定大鼠体质量、心质量、心肌细胞横径和横截面积;采用免疫组织化学方法检测大... 目的:观察PTEN/PI3K信号通路在大鼠心肌组织中的表达,探讨该通路在心肌肥厚发生、发展中的作用.方法:皮下注射异丙肾上腺素(ISO)建立大鼠心肌肥厚模型,测定大鼠体质量、心质量、心肌细胞横径和横截面积;采用免疫组织化学方法检测大鼠心肌组织中肥大标志因子β-肌球蛋白(β-MHC)及PTEN/PI3K信号通路上PTEN、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB)、死亡相关因子(BAD)蛋白表达;利用计算机图像处理系统对各种蛋白进行定量分析.结果:模型组大鼠全心质量/体质量、左室质量/体质量、心肌细胞横径、心肌细胞截面积较对照组明显增加.模型组大鼠的心肌组织与对照组相比,β-MHC、PI3K与PKB表达水平均升高,PTEN和BAD表达水平明显降低.结论:PTEN在心肌肥厚中表达明显降低,起负性调节作用;PI3K/PKB信号通路激活,可能是导致心肌肥厚的机制之一,BAD可望成为生物学治疗靶点. 展开更多
关键词 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 死亡相关因子 心肌肥厚 大鼠
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大鼠脂肪组织来源的间充质干细胞向心肌样细胞分化的细胞特征 预览 被引量:2
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作者 李树雯 郭志坤 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期 99-103,共5页
目的探索大鼠脂肪组织来源的间充质干细胞(ADMSCs)向心肌细胞定向诱导分化的细胞特征。方法胰酶消化法分离出ADMSCs,对培养第3代细胞分别进行HE染色和CD44免疫细胞化学染色,利用光镜和激光共聚焦扫描显微镜观察其细胞特征和CD44的表达... 目的探索大鼠脂肪组织来源的间充质干细胞(ADMSCs)向心肌细胞定向诱导分化的细胞特征。方法胰酶消化法分离出ADMSCs,对培养第3代细胞分别进行HE染色和CD44免疫细胞化学染色,利用光镜和激光共聚焦扫描显微镜观察其细胞特征和CD44的表达;5-氮杂胞苷(5-aza)诱导,应用肌球蛋白重链(MHC)抗体进行免疫细胞化学染色,鉴定分化后的心肌样细胞;利用免疫组织化学观察脂肪组织中CD44阳性细胞的表达分布。结果大鼠脂肪组织分离的细胞生长迅速,培养后分为两类:一类为大型细胞,其数量较多、体积较大;另一类为小型细胞,其数量较少、体积较小。免疫细胞化学和激光共聚焦显微镜观察显示大细胞呈CD44弱阳性反应,小细胞呈强阳性反应。5-aza诱导后,发现7处细胞团明显分化为心肌样细胞,肌球蛋白呈强阳性反应。HE染色显示呈典型的心肌细胞的特征。脂肪组织中CD44阳性细胞位于脂肪小叶之间,数量较少,形态较小。结论培养的大鼠脂肪组织来源的ADMSCs分为大、小两类,小型细胞可能具有较强的分化为心肌样细胞的能力。 展开更多
关键词 脂肪组织来源间充质干细胞 诱导分化 CD44 心肌样细胞
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脂肪来源间充质干细胞的生物学特性及临床应用前景 预览 被引量:3
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作者 闫小滨 郭志坤 《解剖科学进展》 CAS 2009年第4期 416-419,共4页
组织工程技术发展的关键是获得具有来源方便、广泛、具有分化能力的种子细胞。脂肪来源间充质干细胞的发现及研究,证明了它可以充当这一角色。它具有多项分化潜能,在合适的诱导条件下可以分化为骨细胞、软骨细胞、神经前体细胞、心肌... 组织工程技术发展的关键是获得具有来源方便、广泛、具有分化能力的种子细胞。脂肪来源间充质干细胞的发现及研究,证明了它可以充当这一角色。它具有多项分化潜能,在合适的诱导条件下可以分化为骨细胞、软骨细胞、神经前体细胞、心肌细胞等。它的这些分化能力,给临床上一些疾病如组织缺损性疾病,心肌梗死,基因疾病的治疗带来了曙光。脂肪来源的干细胞,因其取材方便、安全和扩增速率高等特点必将在细胞治疗和组织工程方面有更广阔的应用前景。 展开更多
关键词 间充质干细胞 临床应用前景 生物学特性 脂肪 组织工程技术 分化能力 神经前体细胞 基因疾病
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心肌梗死后心淋巴管的改变及其意义 预览
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作者 孙庆宁(综述) 郭志坤(审校) 《国际心血管病杂志》 2009年第4期 205-208,共4页
心淋巴管作为心组织的主要组成之一,参与心肌间流体平衡的调节,对维持心肌正常代谢、心肌细胞内环境的稳定起着重要作用。阻断心淋巴循环可以引起心肌变性、水肿及心律失常,因此,心肌病诊断和治疗中应考虑到淋巴因素,尤其是心肌梗... 心淋巴管作为心组织的主要组成之一,参与心肌间流体平衡的调节,对维持心肌正常代谢、心肌细胞内环境的稳定起着重要作用。阻断心淋巴循环可以引起心肌变性、水肿及心律失常,因此,心肌病诊断和治疗中应考虑到淋巴因素,尤其是心肌梗死。心肌梗死后的心淋巴管再生将可能在临床治疗中具有重要意义。 展开更多
关键词 心淋巴管 淋巴管再生 心肌梗死
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