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一个二化性家蚕醛酮还原酶基因的克隆及序列与表达分析
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作者 陈艳荣 朱娟 +4 位作者 蒋涛 谭志承 陈艳花 唐顺明 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期187-194,共8页
醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用。以二化性... 醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用。以二化性家蚕品系秋丰为材料,利用RT-PCR分别从滞育命运组和非滞育命运组克隆出AKR蛋白的cDNA序列。AKR蛋白序列由343个氨基酸组成,与黑腹果蝇和人的AKR分别有43%和38%的序列一致性。基于蛋白质序列构建的系统发育树显示,家蚕AKR蛋白属于AKR2E亚家族,其氨基酸序列与该家族成员序列一致性超过30%,故命名为AKR2E-like。将akr2e-like基因的cDNA序列克隆进表达载体pET-28a(+)中进行原核重组表达,SDS-PAGE电泳和Western blot分析显示重组蛋白被成功表达。qRT-PCR分析表明,ark2e-like基因表达受发育环境调节:在滞育诱导条件下,该基因在家蚕化蛹早期的表达量持续增加,在化蛹后第4天mRNA丰度达到最高值;而在非滞育诱导条件下,化蛹后ark2e-like基因表达量并无明显波动。上述结果表明,ark2e-like基因有可能在家蚕二化性品系的滞育准备期起关键作用。 展开更多
关键词 醛酮还原酶 滞育准备 家蚕 表达
强健优质家蚕品种丝雨二号 预览
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作者 裘智勇 吴怀民 +3 位作者 夏定国 楼黎静 钱文春 赵巧玲 《中国蚕业》 2019年第3期70-72,共3页
丝雨二号是中国农业科学院蚕业研究所、江苏科技大学和湖州市经济作物技术推广站协作育成的强健优质家蚕新品种。介绍了家蚕品种丝雨二号原种和一代杂交种的特性和饲育技术要点及注意事项。实验室鉴定和农村饲养成绩表明:丝雨二号体质... 丝雨二号是中国农业科学院蚕业研究所、江苏科技大学和湖州市经济作物技术推广站协作育成的强健优质家蚕新品种。介绍了家蚕品种丝雨二号原种和一代杂交种的特性和饲育技术要点及注意事项。实验室鉴定和农村饲养成绩表明:丝雨二号体质强健、发育整齐、丝质较优、稳产性好、繁育性能好。该品种于2015年9月2日通过国家农作物品种审定委员会审定,适宜在长江流域、黄河流域春、秋季饲养。 展开更多
关键词 家蚕品种 强健 优质 丝雨二号
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家蚕品种秋丰×白玉耐氟性状的遗传分析及耐氟主效基因的初步定位
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作者 裘智勇 沈东旭 +3 位作者 王宝林 夏定国 沈兴家 赵巧玲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-45,共6页
家蚕品种秋丰×白玉是一对耐氟性较强的夏秋用蚕品种,其中以亲本白玉A的耐氟性最强。以白玉A与耐氟性较弱的皓月B为亲本组配各种杂交世代进行耐氟性的遗传分析,结果表明在一定浓度的氟化物添食范围内,其耐氟性遗传呈显性遗传,受主... 家蚕品种秋丰×白玉是一对耐氟性较强的夏秋用蚕品种,其中以亲本白玉A的耐氟性最强。以白玉A与耐氟性较弱的皓月B为亲本组配各种杂交世代进行耐氟性的遗传分析,结果表明在一定浓度的氟化物添食范围内,其耐氟性遗传呈显性遗传,受主效基因控制,并且具有部分伴性遗传效应和明显的杂种优势。利用SSR分子标记对耐氟性状进行连锁分析,初步确定耐氟主效基因与第12连锁群中的2个标记(chr12-2990-1和chr12-2990-2)紧密连锁。 展开更多
关键词 家蚕 耐氟性 遗传分析 连锁分析
昆虫眠性调控相关基因的研究进展
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作者 毕思敏 王平阳 赵巧玲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期122-133,共12页
入眠是昆虫幼虫生长发育过程中非常重要的一种生理现象,其入眠蜕皮过程主要包括促前胸腺激素(PTTH)介导的蜕皮激素合成、蜕皮激素介导的信号转导和最终皮层溶离及色素沉积3个阶段,是一个复杂的生理过程,受到许多因素的影响,其中蜕皮激... 入眠是昆虫幼虫生长发育过程中非常重要的一种生理现象,其入眠蜕皮过程主要包括促前胸腺激素(PTTH)介导的蜕皮激素合成、蜕皮激素介导的信号转导和最终皮层溶离及色素沉积3个阶段,是一个复杂的生理过程,受到许多因素的影响,其中蜕皮激素和保幼激素等因素的影响较为显著。基于此,本文论述了蜕皮激素信号通路相关基因、保幼激素合成与代谢相关基因、相关神经肽基因及其他相关基因对昆虫眠性的影响。通过对这些基因进行综述,可以为系统研究家蚕等昆虫入眠蜕皮过程中的生理生化反应提供理论依据,对昆虫生长发育和生殖的研究以及农林害虫防控都有十分重要的意义。 展开更多
关键词 眠性相关基因 昆虫 蜕皮激素 保幼激素 神经肽
家蚕bmo-miR-0031-3p体内下调丝素轻链基因BmFib-L的表达 预览
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作者 陈艳花 蒋涛 +3 位作者 王雪珍 钱平 唐顺明 沈兴家 《浙江大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期229-236,共8页
为了研究家蚕微RNA(microRNA,miRNA)对丝素轻链基因BmFib-L表达的调控作用,以BmFib-LmRNA的3'非翻译区(3'untranslatedregion,3?UTR)为靶标,通过RNAhybrid软件分析,筛选出种子序列与BmFib-L3'TR完全互补的家蚕miRNA-bmo-miR... 为了研究家蚕微RNA(microRNA,miRNA)对丝素轻链基因BmFib-L表达的调控作用,以BmFib-LmRNA的3'非翻译区(3'untranslatedregion,3?UTR)为靶标,通过RNAhybrid软件分析,筛选出种子序列与BmFib-L3'TR完全互补的家蚕miRNA-bmo-miR-0031-3p(简称"miR-0031-3p")。分别构建miR-0031-3p表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-pre-miR-0031-3p-SV40]和BmFib-L3'UTR融合萤光素酶报告基因重组表达质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3'UTR-SV40],以海肾萤光素酶表达载体pRL-CMV为内参,共转染BmN细胞,通过检测双萤光素酶活性验证miR-0031-3p的功能;人工合成miR-0031-3p的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor),再进一步验证miR-0031-3p对BmFib-L的调控功能。结果显示,在BmN细胞中,miR-0031-3p显著抑制BmFib-L的表达。为了进一步验证miR-0031-3p在家蚕体内对BmFib-L表达的调控作用,在5龄第2天幼虫体腔内注射转染物,分别在体内过表达和抑制内源性miR-0031-3p,荧光定量分析靶基因表达水平。结果显示,miR-0031-3p在幼虫体内能够下调BmFib-L的表达。该研究结果有利于阐明家蚕miRNA功能和蚕丝蛋白表达调控的分子机制。 展开更多
关键词 微RNA 家蚕 bmo-miR-0031-3p 丝素轻链基因 转录后调控
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限食对家蚕寿命和繁殖性能及部分生理指标的影响 预览
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作者 谭志承 薛鹏 +2 位作者 许瑾 唐顺明 沈兴家 《中国蚕业》 2019年第2期12-19,共8页
为了探讨限食对模式昆虫家蚕寿命等的影响,以二化性家蚕品系秋丰为对象,设置自由采食组(AL组)--每日给桑2次、24 h自由进食,限制给食组(DR组)--每日给桑1次,16 h自由进食、停食8 h,调查了幼虫期和蛹期经过时间、成虫交配繁殖性能和存活... 为了探讨限食对模式昆虫家蚕寿命等的影响,以二化性家蚕品系秋丰为对象,设置自由采食组(AL组)--每日给桑2次、24 h自由进食,限制给食组(DR组)--每日给桑1次,16 h自由进食、停食8 h,调查了幼虫期和蛹期经过时间、成虫交配繁殖性能和存活时间,利用qRT-PCR技术分析了限食对家蚕3个果蝇寿命相关基因的同源基因Bmchico、Bmrpd3和BmAkh2在5龄3 d幼虫不同组织的表达水平;分析了血淋巴超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活力,可溶性蛋白含量和海藻糖水平。结果显示, DR组的给食量为AL组的61.03%,限食后蛹期3 d雌、雄蛹平均体质量分别为AL组的63.34%和63.52%;雌雄平均寿命955 h,比AL组延长131 h,差异达到显著水平(P<0.05);限食后雌蚕的造卵数没有明显变化(P>0.05),雄蛾交尾正常。3个寿命相关基因在DR组与AL组的不同组织中均呈现不同程度的表达差异。限食后血淋巴中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力整体水平提高,可溶性蛋白含量降低,海藻糖水平发生改变。该结果可为研究限食对人体的影响提供思路和借鉴。 展开更多
关键词 限食 寿命 长寿基因 健康 家蚕 模型
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m^6A修饰及其对病毒复制过程调控研究进展 预览
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作者 薛鹏 蒋涛 沈兴家 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期404-412,共9页
N^6-甲基腺嘌呤(N^6-methyladenosine,m^6A)修饰是一种在真核生物中普遍存在的RNA修饰方式,在mRNA转运、稳定、翻译等过程中具有重要作用。m^6A修饰在病毒复制周期中扮演不同的角色,病毒的复制和宿主对病毒的免疫反应都受到m^6A甲基化... N^6-甲基腺嘌呤(N^6-methyladenosine,m^6A)修饰是一种在真核生物中普遍存在的RNA修饰方式,在mRNA转运、稳定、翻译等过程中具有重要作用。m^6A修饰在病毒复制周期中扮演不同的角色,病毒的复制和宿主对病毒的免疫反应都受到m^6A甲基化的影响。本文总结了近年来关于m^6A修饰方面的分子作用机制及其对病毒复制以及宿主免疫反应的影响相关研究,以期为病毒生命周期中的表观遗传调控研究提供一定的参考。 展开更多
关键词 N^6-甲基腺嘌呤 RNA修饰 病毒 复制 免疫
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6个种源地不同桑树品种叶柄解剖结构与水分运输能力初探
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作者 沈萩荻 吴艳 +2 位作者 刘利 曹旭 程嘉翎 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-8,共8页
叶柄是水分和营养物质在茎和叶间运输的重要组织。采用石蜡切片技术和木材离析技术,分析6个种源地不同的桑树品种一年生扦插苗叶柄的显微结构特征,对叶柄的水分运输能力和抗蒸腾能力进行评价,并对桑树的抗旱性进行探讨。结果显示在6个... 叶柄是水分和营养物质在茎和叶间运输的重要组织。采用石蜡切片技术和木材离析技术,分析6个种源地不同的桑树品种一年生扦插苗叶柄的显微结构特征,对叶柄的水分运输能力和抗蒸腾能力进行评价,并对桑树的抗旱性进行探讨。结果显示在6个桑品种中,吴堡桑的叶柄角质层和厚角组织厚度较小,但维管束最为发达,具有较高的维管束面积占比、中等水平的导管直径和最大的导管长度,水分运输能力最强,同时还能保持对栓塞较强的抵抗性,推测其抗旱能力可能较强,适宜种植在较为干旱的地区;育711号的叶柄角质层较薄,云果桑1号叶柄的厚角组织最薄,这2个品种的叶柄具有较多的维管束,但其维管束面积占比、导管孔腔面积以及导管直径在6个品种中较小,故抗蒸腾能力与水分运输能力均较低,其抗旱能力可能相对较弱,更加适合在水分充足的环境中生长。研究结果为阐释桑树叶柄结构、水分运输能力与桑树抗旱能力之间的关系提供了一定的实验依据。 展开更多
关键词 桑树 叶柄 解剖结构 水分运输
"遗传学实验"教学改革思考与探索--以蚕学专业为例
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作者 孙霞 秦笙 +1 位作者 王学杨 李木旺 《教书育人:高教论坛》 2019年第8期102-103,共2页
遗传学是生物类、农学类专业的重要专业基础课程,遗传学实验是让这些专业学生更好掌握和理解遗传学基本理论的重要实验课程。本文总结了在遗传学实验这一既传统经典又发展迅速的实验课程与蚕学专业相结合的教学内容、教学方法和教学手段... 遗传学是生物类、农学类专业的重要专业基础课程,遗传学实验是让这些专业学生更好掌握和理解遗传学基本理论的重要实验课程。本文总结了在遗传学实验这一既传统经典又发展迅速的实验课程与蚕学专业相结合的教学内容、教学方法和教学手段,让学生不仅能够加深对遗传学基本理论知识的理解,更能让学生在养蚕基地这一开放的教学课堂中学到更多的与本专业相关的实践知识,最终达成预期的教学效果。 展开更多
关键词 遗传学实验 蚕学专业 教学方式 创新能力
一种桑树细菌性病原内生拮抗细菌的筛选、鉴定及其生防活性 预览
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作者 王彪 潘英豪 +3 位作者 侯佳蓝 戚昱琦 陈爱明 王娜 《微生物前沿》 2019年第3期110-120,共11页
本文从健康桑树叶片中筛选对桑青枯病和桑疫病病原菌有拮抗作用的内生细菌,并对其生防机制初步探索。实验利用常规方法从严格表面消毒的桑树叶片中分离纯化内生菌,采用抑菌圈法筛选拮抗菌;同时有机溶剂分段萃取拮抗菌产物,抑菌圈法分析... 本文从健康桑树叶片中筛选对桑青枯病和桑疫病病原菌有拮抗作用的内生细菌,并对其生防机制初步探索。实验利用常规方法从严格表面消毒的桑树叶片中分离纯化内生菌,采用抑菌圈法筛选拮抗菌;同时有机溶剂分段萃取拮抗菌产物,抑菌圈法分析活性物质存在组段,并定性分析活性物质的种类。结果显示,从三个品种健康桑树叶片中分离获得7株内生细菌,其中3株具有拮抗桑树病原菌的作用,分离自品种9703的编号为381的菌株作用效果最强。结合形态学和生理生化特征以及16SrRNA序列分析鉴定其为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。菌株381产生的活性抑菌物质主要存在于发酵液中,可用乙酸乙酯有效萃取。定性鉴定表明活性抑菌物质可能是生物碱、黄酮、二萜或三萜。同时平板定性分析显示菌株381可产生有机酸、纤维素酶和蛋白酶。研究结果对桑树细菌性病害无公害防治提供理论基础和参考依据。 展开更多
关键词 桑树 生防内生菌 桑疫病 桑青枯病 抑菌活性 筛选 鉴定
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强健优质家蚕新品种丝雨二号的育成 被引量:1
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作者 赵巧玲 吴怀民 +4 位作者 裘智勇 楼黎静 夏定国 钱文春 刘震玲 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期672-677,共6页
为适应高效省力化蚕业生产发展需求,培育健康体质和优良茧丝质均衡的家蚕新品种,采用杂交育种方法进行亲本筛选、性状选择及杂交组配,通过实验室比较鉴定和农村比较鉴定同时进行的培育模式,培育出综合性状优良的家蚕新品种丝雨二号。其... 为适应高效省力化蚕业生产发展需求,培育健康体质和优良茧丝质均衡的家蚕新品种,采用杂交育种方法进行亲本筛选、性状选择及杂交组配,通过实验室比较鉴定和农村比较鉴定同时进行的培育模式,培育出综合性状优良的家蚕新品种丝雨二号。其体质强健、发育整齐、丝质较优、稳产性好、繁育性能好。该品种的全国秋蚕期实验室共同鉴定成绩为:四龄起蚕虫蛹率92.44%,万蚕产茧量18.38kg,洁净95.49分,解舒率79.26%,鲜毛茧出丝率18.69%,茧层率23.68%,茧丝长1230m;秋蚕期生产鉴定成绩中的每盒种产茧量38.67kg;其原种公斤茧制种量在4.2张以上。丝雨二号于2015年9月2日通过国家农作物品种审定委员会审定,适宜在长江流域、黄河流域秋季饲养。 展开更多
关键词 家蚕 新品种 优质 强健 丝雨二号
樗蚕孵化酶基因的克隆与表达特征分析
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作者 浦月霞 刘龙山 +6 位作者 龚美霞 冉艳萍 贾雪峰 黄景滩 宋宪军 安春梅 唐顺明 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第3期382-389,共8页
樗蚕(Philosamia cynthia cynthia)是重要的野蚕资源。为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成c DNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长c... 樗蚕(Philosamia cynthia cynthia)是重要的野蚕资源。为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成c DNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长c DNA,命名为Pcc HE(Gen Bank登录号:MH119084)。Pcc HE基因c DNA全长为964 bp,由5'-UTR、3'-UTR和885bp的ORF组成,编码294个氨基酸;Pcc HE蛋白序列含有孵化酶特征序列锌指结合基序和Met-转角基序;基于Pcc HE氨基酸序列与16种动物孵化酶同源氨基酸序列构建的系统进化分析树显示,樗蚕与蓖麻蚕之间的亲缘关系最近。半定量RT-PCR检测Pcc HE在樗蚕胚胎发育早期的表达维持在较低水平,催青第3天小幅度增加,第9天时表达水平开始大幅上升,至孵化前达到最高水平;Pcc HE在5龄3 d幼虫中肠中高水平表达,并且在马氏管中也有表达,这是首次在昆虫马氏管中发现孵化酶基因的表达。上述结果表明,Pcc HE与樗蚕的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。 展开更多
关键词 樗蚕 孵化酶 基因克隆 表达特性
一种家蚕丝腺体外培养和基因瞬时表达分析的方法 预览
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作者 陈艳花 沈兴家 《中国蚕业》 2018年第4期32-34,共3页
家蚕是鳞翅目重要的模式生物,但是目前家蚕培养细胞系少,给家蚕基础研究带来不便,也影响了家蚕作为模式生物的应用。组织体外培养在一定程度上可以代表体内环境,且操作相对简单。我们尝试并建立了一种采用TC-100培养基体外培养丝腺... 家蚕是鳞翅目重要的模式生物,但是目前家蚕培养细胞系少,给家蚕基础研究带来不便,也影响了家蚕作为模式生物的应用。组织体外培养在一定程度上可以代表体内环境,且操作相对简单。我们尝试并建立了一种采用TC-100培养基体外培养丝腺组织的方法,取健康家蚕5龄2 d的幼虫,用75%乙醇进行表面消毒,灭菌水冲洗,剪开腹部表皮固定,用镊子轻轻拉出丝腺组织,用75%乙醇快速漂洗、PBS缓冲液冲洗2-3次,放入含有800 μL TC-100培养基的12孔细胞培养板的培养孔中,每孔4条丝腺组织,27 ℃培养;将0.64 μg增强荧光蛋白基因表达载体pcDNA3.0[ ie1-egfp- SV40]加入到25 μL不完全TC-100培养基中孵育15 min后转染丝腺组织,48 h后用荧光显微镜观察,培养基清澈,丝腺组织外形完好、发出亮绿色荧光,表明 egfp 在丝腺中得到了表达。为进一步验证体外培养丝腺的转染效果,将家蚕miR-0031 的抑制物(inhibitor)和阴性对照(inhibitor negetive control)各10 μL按照同样方法配成转染液,加入到放有丝腺组织的培养孔中,48 h收集丝腺组织,提取总RNA,荧光定量PCR检测靶基因 BmFib-L 的表达量,结果显示,inhibitor抑制miR-0031 的表达,促使 BmFib-L 的表达量上升,表明用体外培养丝腺进行转染等试验是可行的。该方法的建立为研究蚕丝蛋白基因表达调控的分子。 展开更多
关键词 家蚕 丝腺 体外培养 转染 瞬时表达
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色素代谢相关基因在家蚕褐色类鹑斑突变品系q-l^b4龄眠蚕表皮中的表达分析
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作者 裘智勇 王平阳 +2 位作者 夏定国 沈兴家 赵巧玲 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期841-848,共8页
家蚕体表色素主要有黑色素、蝶啶类色素和眼色素,不同家蚕品种的体色和斑纹都是表皮中黑色素、眼色素和蝶啶类色素等相互作用的结果。为了解家蚕褐色类鹑斑突变体(brown quail-like,q-l^b)幼虫表皮色素的代谢情况,利用qRT-PCR 技术分别... 家蚕体表色素主要有黑色素、蝶啶类色素和眼色素,不同家蚕品种的体色和斑纹都是表皮中黑色素、眼色素和蝶啶类色素等相互作用的结果。为了解家蚕褐色类鹑斑突变体(brown quail-like,q-l^b)幼虫表皮色素的代谢情况,利用qRT-PCR 技术分别检测q-l^b突变体和其对应的野生型品种0223金黄(0223JH)在4龄入眠后18 h新生表皮中37个色素代谢相关的基因的表达水平。结果表明,相对于野生型品种,大多数与黑色素、蝶啶类色素合成相关的关键基因在q-l^b突变体中表达上调,而与眼色素合成相关的关键基因表达下调,表明黑色素、蝶啶类色素在q-l^b突变体表皮中的含量都增加,而眼色素在q-l^b突变体表皮中的含量相对减少;与几丁质合成及尿酸转运相关的基因在q-l^b突变体表皮中也存在表达差异,其中大部分关键基因表达上调,表明更多的几丁质在q-l^b突变体新生表皮中合成,并伴随更多的尿酸被转运到表皮,与其他色素一起参与表皮构建,形成q-l^b突变体特殊的体色斑纹。此外,部分保幼激素代谢和核受体基因差异表达也可能影响了相关色素的合成及代谢。q-l^b突变体相对于野生型具有更复杂的体色和斑纹,这些基因的差异表达可能与此有关。研究结果为进一步阐述家蚕褐色类鹑斑产生的分子机制打下了基础。 展开更多
关键词 家蚕 褐色类鹑斑 差异表达基因 色素
家蚕orcokinin基因的选择性剪接与表达分析
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作者 王平阳 赵巧玲 +2 位作者 裘智勇 沈兴家 夏定国 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期849-858,共10页
Orcokinin(OK)是节肢动物门特有的一种神经肽,该神经肽自从在小龙虾中发现以来,便陆续在节肢动物门其他物种中鉴定到,然而由于其结构的复杂性和功能的多样性,对OK基因的结构与作用机制知之甚少。利用RACE克隆、qRT-PCR等方法对家蚕OK基... Orcokinin(OK)是节肢动物门特有的一种神经肽,该神经肽自从在小龙虾中发现以来,便陆续在节肢动物门其他物种中鉴定到,然而由于其结构的复杂性和功能的多样性,对OK基因的结构与作用机制知之甚少。利用RACE克隆、qRT-PCR等方法对家蚕OK基因(BmOK)的结构与表达进行分析。结果表明BmOK存在选择性剪接,形成2个转录本BmOKA和BmOKB;BmOKA由外显子exon1、exon2、exon3、exon5、exon6、exon7和exon8组成,全长BmOKB由外显子exon1、exon2、exon3和exon4组成。BmOKA由于选择性剪接又有4个亚型,分别为BmOKA1(CDS长度为534 bp)、BmOKA2(CDS长度为564 bp)、BmOKA3(CDS长度为570 bp)和BmOKA4(CDS长度为600 bp),占比为22∶13∶5∶1,4个亚型有相同的5′ UTR(62 bp)和3′ UTR(188 bp);BmOKB只有一种CDS(864 bp),5′ UTR序列与BmOKA相同(62 bp),但3′ UTR(168 bp)不同。BmOKA主要在家蚕腹神经索表达,在4龄眠后18 h表达量最低;BmOKB在头部和中肠的表达量相对较高,眠期表达量高于其他时期。BmOKA与斜纹夜蛾Orcokinin同源性最高,完整蛋白质前体的同源性为33.80%。本研究清晰地展示了家蚕BmOK基因的结构与表达模式,为后续分析BmOK基因的功能奠定了理论基础并提供实验依据。 展开更多
关键词 BmOK基因 选择性剪接 神经肽 家蚕
用实时直接分析质谱法(DART-MS)快速测定桑叶中的γ-氨基丁酸含量
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作者 李无双 郎文成 +2 位作者 马琳 李龙 武国华 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期567-572,共6页
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是桑叶中具有多种药理作用的重要组分之一。为了快速、准确测定桑叶中的GABA含量,建立了基于实时直接分析电离源-串联三重四极杆质谱(DART-MS)的桑叶GABA定性和定量分析方法。在DART离子源... γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是桑叶中具有多种药理作用的重要组分之一。为了快速、准确测定桑叶中的GABA含量,建立了基于实时直接分析电离源-串联三重四极杆质谱(DART-MS)的桑叶GABA定性和定量分析方法。在DART离子源和质量分析器同为正离子的模式下,采用选择反应监测模式(SRM)并选取m/z 104→87为定量离子对,以其峰面积(y)进行定量分析,所得线性回归方程为y=4 552 210.19x-11 927 811.70,线性系数R-2=0.998,且在GABA溶液质量浓度(x)为2.50-40.00μg/m L范围内的线性关系良好。对3种质量浓度(7.82、4.14、2.78μg/m L)桑叶样品提取液进行测定的相对标准偏差(RSD)分别为3.98%、5.60%、2.28%,表明该方法的精密度良好;加标回收率在85.60%-97.47%之间。应用DART-MS法对来源于江、浙、皖蚕区的6个桑品种的桑叶样品进行检测,桑叶提取液样品中的GABA质量浓度从高到低的桑品种依次为湖桑32号(7.82μg/m L±0.31μg/m L,江苏海安)、强桑2号(7.44μg/m L±0.21μg/m L,浙江杭州)、强桑1号(7.14μg/m L±0.50μg/m L,杭州)、农桑14号(5.88μg/m L±0.30μg/m L,杭州)、育711号(5.81μg/m L±0.18μg/m L,安徽合肥)、农桑14号(4.25μg/m L±0.29μg/m L,浙江海宁)。建立的DART-MS法用于测定桑叶中的GABA含量,具有简单、快速且灵敏度高等特点。 展开更多
关键词 实时直接分析质谱 桑叶 Γ-氨基丁酸 精密度 加标回收率
T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》标准简介 预览 被引量:1
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作者 沈兴家 高庆国 +4 位作者 王建民 李龙 周晓杰 陈薇伊 刘挺 《中国蚕业》 2018年第3期66-69,共4页
近年来,桑椹酒的研究得到了较快的发展,市场上出现了桑椹浸泡酒、桑椹发酵酒、桑椹蒸馏酒和桑椹白兰地等多种类型的桑椹酒。但是,桑椹酒标准研究相对滞后。2018年5月1日中国食品工业协会发布了首个桑椹酒标准T/CNFIA 104—2018《桑椹(... 近年来,桑椹酒的研究得到了较快的发展,市场上出现了桑椹浸泡酒、桑椹发酵酒、桑椹蒸馏酒和桑椹白兰地等多种类型的桑椹酒。但是,桑椹酒标准研究相对滞后。2018年5月1日中国食品工业协会发布了首个桑椹酒标准T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》。介绍了T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》标准规定的桑椹(果)酒的定义、分类、感官要求和主要理化指标,以及各指标的分析方法;阐述了该标准发布与实施的意义,有助于更好地理解和执行该标准。 展开更多
关键词 桑椹 果酒 质量标准 感官要求 理化指标
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家蚕滞育关联山梨醇脱氢酶基因的启动子活性分析 预览
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作者 朱娟 谢雨辰 +3 位作者 陈艳荣 唐顺明 易咏竹 沈兴家 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期391-397,共7页
【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启动... 【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启动子区序列,分别构建带有萤火虫荧光素酶报告基因的载体pGL3-BmSDH-P-luc,并与pRL-CMV报告质粒(含海肾荧光素酶报告基因)共转染家蚕BmN细胞,通过双荧光素酶检测系统检测BmSDH基因启动子活性;分别在BmN细胞培养基中添加昆虫保幼激素、蜕皮激素和滞育激素,通过双荧光素酶检测系统检测不同浓度激素处理对BmSDH-2a基因启动子活性的影响。【结果】BmSDH-1的转录起始位点为A(-41),BmSDH-2a的转录起始位点为C(-41),BmSDH-2b的转录起始位点为A(-40)(翻译起始位点为+1)。双荧光素酶检测结果表明,BmSDH-2a启动子活性极显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,BmSDH-2a 355 bp长度片段的启动子活性极显著高于674 bp和1 117 bp长度片段。用不同浓度滞育激素处理BmN细胞后,BmSDH-2a的1 117 bp启动子活性随着滞育激素浓度的升高有上升的趋势,当浓度高于100 ng/mL时启动子活性有所降低但仍保持在较高水平;用保幼激素进行处理后,随着激素浓度的升高启动子活性逐渐降低;蜕皮激素处理后,0.1 ng/mL激素显著增强启动子活性,当激素浓度继续升高启动子活性逐渐降低。【结论】确定了BmSDH基因的转录起始位点。BmSDH-2a启动子活性显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,一定浓度的蜕皮激素能显著提高BmSDH-2a启动子活性。研究结果有助于阐明BmSDH基因在家蚕滞育中的功能。 展开更多
关键词 家蚕 启动子 山梨醇脱氢酶 滞育 转录起始位点 表达调控
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科教协同彰显行业特色全面提升人才培养质量——江苏科技大学的实践剖析 预览
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作者 刘冠卉 屠洁 钱平 《教育界:高等教育研究(下)》 2018年第6期31-32,共2页
科教协同是地方应用型高校谋求特色发展的有效途径,更是培养创新性应用型人才的关键.科教协同育人模式的重点在于顶层设计、实体性平台的构建、教学组织形式的创新、师资与制度保障.文章通过研究江苏科技大学科教协同育人模式的改革实... 科教协同是地方应用型高校谋求特色发展的有效途径,更是培养创新性应用型人才的关键.科教协同育人模式的重点在于顶层设计、实体性平台的构建、教学组织形式的创新、师资与制度保障.文章通过研究江苏科技大学科教协同育人模式的改革实践与成效,为高等教育改革提出了建议。 展开更多
关键词 协同育人 科教融合 人才培养 行业特色
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银杏双黄酮药理作用的研究进展 预览 被引量:1
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作者 涂清波 孙云 +5 位作者 许婷 林颖 吕志阳 盛晟 王俊 吴福安 《山东医药》 2018年第19期112-114,共3页
银杏双黄酮是一种从银杏叶中提取出的黄酮类化合物。在抗氧化方面,银杏双黄酮是一种天然抗氧化剂,能清除自由基,减少脂质过氧化产物的生成与沉积,提高超氧化物歧化酶的活性,保护细胞膜。在抗凝扩血管方面,银杏双黄酮能有效降低血液黏稠... 银杏双黄酮是一种从银杏叶中提取出的黄酮类化合物。在抗氧化方面,银杏双黄酮是一种天然抗氧化剂,能清除自由基,减少脂质过氧化产物的生成与沉积,提高超氧化物歧化酶的活性,保护细胞膜。在抗凝扩血管方面,银杏双黄酮能有效降低血液黏稠度,拮抗血小板活化因子,抑制血小板聚集和血栓形成,保护血管内皮细胞,改善微循环。在神经保护方面,银杏双黄酮通过大幅抑制黑质中酪氨酸羟化酶的表达和纹状体中超氧化物歧化酶活性,可显著改善1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶诱导的帕金森病小鼠的协调运动能力。在抗炎方面,银杏双黄酮通过抑制环氧合酶、NF-κB炎症因子发挥作用。此外,银杏双黄酮在抗肿瘤和抗感染等方面均有抑制作用。 展开更多
关键词 银杏双黄酮 氧化应激 抗凝血 神经保护 抗肿瘤 抗感染
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