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糖渍石斛的工艺研究 预览
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作者 刘玉冰 梁钻好 +3 位作者 黎攀 查应洪 夏雨 杜冰 《现代食品》 2019年第7期57-62,共6页
利用发酵酒后剩下的石斛条残渣糖渍制作石斛蜜饯,开发石斛功能性休闲食品。考察一次糖液浓度、二次糖液浓度、加盐量、二次熬煮时间、干燥时间对石斛蜜饯感官风味的影响,并在单因素实验的基础上进行正交优化实验,得出糖渍石斛的最佳工艺... 利用发酵酒后剩下的石斛条残渣糖渍制作石斛蜜饯,开发石斛功能性休闲食品。考察一次糖液浓度、二次糖液浓度、加盐量、二次熬煮时间、干燥时间对石斛蜜饯感官风味的影响,并在单因素实验的基础上进行正交优化实验,得出糖渍石斛的最佳工艺:一次糖液浓度30%,熬煮20 min后浸渍8 h,冷冻过夜,二次糖液浓度调整为70%,加盐4.0%,慢火熬煮30 min并定期补糖至糖液浓度浓缩至90%,沥糖后60℃热风干燥30 min,此条件下得到的石斛蜜饯色泽正常,组织饱满,返砂适量,不吸潮不黏手,清香宜人,口感黏脆有嚼劲,感官评分为89.0分,整体评价属于优良等级。 展开更多
关键词 石斛 蜜饯 糖渍 糖液浓度
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ITS2条形码对白及属植物的初步分析研究 预览 被引量:2
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作者 宋爽 周洋帆 +6 位作者 黄丽 杨娟 文国松 徐绍忠 查应洪 赵明富 赵昶灵 《云南农业大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2017年第1期95-100,共6页
本研究通过ITS2条形码对云南白及本地种的分布情况初步了解,并对药用白及和云南本地种进行分析研究。选取滇东南、滇东北、滇西北、滇西的材料,进行DNA提取、PCR、测序,MEGA51软件进行序列比对、NJ系统聚类树构建,并预测ITS2二级结构... 本研究通过ITS2条形码对云南白及本地种的分布情况初步了解,并对药用白及和云南本地种进行分析研究。选取滇东南、滇东北、滇西北、滇西的材料,进行DNA提取、PCR、测序,MEGA51软件进行序列比对、NJ系统聚类树构建,并预测ITS2二级结构。结果表明:药用白及和本地种ITS2序列之间存在明显差异,在NJ树上分别聚为两类。ITS2可以区分药用白及和本地种,且可以作为初步分析药用白及真伪的潜在条形码。 展开更多
关键词 白及 ITS2 物种鉴定
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石斛汁乳酸发酵饮料的研制 预览 被引量:3
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作者 王超 何梓钰 +2 位作者 査应洪 杨淑仪 杜冰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期265-268,共4页
研究了凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌在石斛汁中的生长规律,及发酵过程中的总酸、还原糖、p H值、活菌数、氨基态氮含量变化和之间的内在联系。从活菌数、产酸速度、产品的感官、风味等方面进行了评价,筛选出适用于发酵石斛... 研究了凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌在石斛汁中的生长规律,及发酵过程中的总酸、还原糖、p H值、活菌数、氨基态氮含量变化和之间的内在联系。从活菌数、产酸速度、产品的感官、风味等方面进行了评价,筛选出适用于发酵石斛汁的乳酸菌种。研究表明,发酵48 h后,凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌发酵石斛汁的酸度(以乳酸计)分别达到7.85、6.93和7.66 mg/m L;还原糖含量分别减少了78.64%、67.28%和76.85%;从产酸能力和产酸速度来说,凝结芽孢杆菌、鼠李糖乳杆菌要优于植物乳杆菌。 展开更多
关键词 石斛汁 乳酸菌 发酵 饮料
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铁皮石斛生长进程及多糖积累研究 预览 被引量:6
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作者 曾淑华 文国松 +3 位作者 徐绍忠 查应红 杨生超 段承俐 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第10期2352-2356,2360共6页
对9个不同来源的铁皮石斛种质材料在一个生育期内的主要植物学性状和体内多糖积累情况实施了动态测定,并于采收时统计单位面积产量。结果表明,铁皮石斛营养体生长呈'S'型曲线变化,在当年的2~9月生长速度最快;9个铁皮石斛种质... 对9个不同来源的铁皮石斛种质材料在一个生育期内的主要植物学性状和体内多糖积累情况实施了动态测定,并于采收时统计单位面积产量。结果表明,铁皮石斛营养体生长呈'S'型曲线变化,在当年的2~9月生长速度最快;9个铁皮石斛种质材料的单位面积产量为90.65~407.08 g/m2,其中源于云南省广南县杨柳井乡、麻栗坡县天保镇、麻栗坡县麻栗镇的3个种质材料单位面积产量显著高于其他来源地的种质材料,单位面积产量分别为407.08、389.58、346.05 g/m2。在多糖积累上,9个铁皮石斛种质材料的多糖积累趋势一致,都是在当年12月为多糖积累的高峰期;其中源于福建省武夷山市种质材料的多糖含量最高,为25.23%,而源于云南省广南县杨柳井乡种质材料的多糖含量最低,为20.55%。 展开更多
关键词 铁皮石斛 植物学性状 产量 多糖 积累
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两种铁皮石斛总RNA提取方法的比较研究 预览 被引量:4
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作者 容天聚 文国松 +2 位作者 钱雄 查应洪 徐绍忠 《云南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期703-707,共5页
铁皮石斛是我国重点保护药材,因其富含多糖及次生代谢物,用普通的方法难以从叶中提取到能满足构建全长cDNA文库等分子生物学实验对高质量RNA需要的总RNA。分别通过对异硫氰酸胍法和CTAB法进行改良。异硫氰酸胍法:往裂解液中加入PVP... 铁皮石斛是我国重点保护药材,因其富含多糖及次生代谢物,用普通的方法难以从叶中提取到能满足构建全长cDNA文库等分子生物学实验对高质量RNA需要的总RNA。分别通过对异硫氰酸胍法和CTAB法进行改良。异硫氰酸胍法:往裂解液中加入PVP,通过PVP去除多酚;用56%热水水浴5min加速组织细胞裂解;抽提时间由原来15min缩短为5min;根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加裂解液。CTAB法:根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加CTAB裂解液;用LiCl对RNA进行选择性过夜沉淀;灵活处理,适当增大LiCl浓度。结果表明用改良后的2种方法均可提取到总RNA,经对比发现,改良CTAB法提取效果更好,可重复性强,抽取到的RNA更适合于后续的分子生物学实验。 展开更多
关键词 铁皮石斛 多糖 总RNA提取 异硫氰酸胍法 CTAB法
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铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与原核表达 预览 被引量:4
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作者 孟衡玲 杨生超 +1 位作者 查应洪 文国松 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期692-696,共5页
应用同源序列克隆法克隆了铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因cDNA全长,并进行了原核表达分析,为进一步研究该基因的时空表达、功能分析及多糖合成机理提供理论依据。结果表明:(1)铁皮石斛SPS基因cDNA全长3 502bp,编码区3 186bp,GenB... 应用同源序列克隆法克隆了铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因cDNA全长,并进行了原核表达分析,为进一步研究该基因的时空表达、功能分析及多糖合成机理提供理论依据。结果表明:(1)铁皮石斛SPS基因cDNA全长3 502bp,编码区3 186bp,GenBank登录号JF423929。该基因编码1 061个氨基酸,与文心兰的SPS基因氨基酸序列的一致性最高为93%,与其他科植物SPS基因的氨基酸序列的一致性均高于60%。(2)原核诱导表达结果显示,SPS基因在大肠杆菌中的重组蛋白分子质量约为118.7kD,其表达与序列分析推测的结论一致。(3)生物信息学分析表明,铁皮石斛SPS基因的二级结构包括了螺旋、β-折叠和无规则卷曲,是非跨膜结构的亲水性不稳定蛋白,有2个功能结构域,分别是蔗糖合成功能域及糖基转移功能域。 展开更多
关键词 铁皮石斛 蔗糖磷酸合成酶 基因克隆 原核表达
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铁皮石斛均一化全长cDNA文库的构建与序列分析 被引量:6
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作者 蒋敏 王江 +4 位作者 文国松 徐绍忠 查应洪 容天聚 钱雄 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期504-510,共7页
目的:为了获得药用植物铁皮石斛功能基因的信息和筛选功能基因。方法:以SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)方式合成全长cDNA,结合DSN(duplex—specific nuclease)均一化技术,构建铁皮石斛茎组织的均一... 目的:为了获得药用植物铁皮石斛功能基因的信息和筛选功能基因。方法:以SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)方式合成全长cDNA,结合DSN(duplex—specific nuclease)均一化技术,构建铁皮石斛茎组织的均一化全长cDNA文库。结果:该文库重组率为93.9%,文库滴度1.3×10^6cfu·mL-1插入片段平均大小1.5kb左右。随机挑取163个阳性克隆进行单侧测序,通过生物信息学分析,获得150个单一序列,其中147个序列与相应的同源蛋白匹配,GO(geneont ology)分类表明这些序列参与各种生化途径。8个序列包含了完整编码框,可判断为全长基因。结论:成功构建了铁皮石斛茎组织均一化全长cDNA文库,为满足铁皮石斛代谢途径等功能基因筛选和基因信息研究奠定了基础。 展开更多
关键词 铁皮石斛 均一化 CDNA文库 序列分析
铁皮石斛可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的相关性研究 预览 被引量:2
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作者 杨骏 孟衡玲 +3 位作者 杨生超 张薇 查应洪 文国松 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2012年第2期 62-67,共6页
通过对F型及H型铁皮石斛不同时期可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的测定,并对其相关性进行分析,分析了可溶性糖的合成与蔗糖代谢酶活性间的关系。结果表明,移栽后F型和H型铁皮石斛叶片中蔗糖磷酸合成酶的活性与季节性变化趋势一致,但F型较... 通过对F型及H型铁皮石斛不同时期可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的测定,并对其相关性进行分析,分析了可溶性糖的合成与蔗糖代谢酶活性间的关系。结果表明,移栽后F型和H型铁皮石斛叶片中蔗糖磷酸合成酶的活性与季节性变化趋势一致,但F型较H型高;蔗糖降解酶与可溶性糖含量及其还原糖间存在相关关系,达到显著水平。对可溶性糖和相关因子进行偏相关分析和通径分析可知,还原糖的直接通径系数最大为1.015,酸性转化酶的直接通径系数为负值(-0.356),与可溶性糖呈负相关关系,4个因子对可溶性糖含量的直接作用大小顺序为还原糖〉酸性转化酶〉中性转化酶〉蔗糖。 展开更多
关键词 铁皮石斛 可溶性糖 蔗糖代谢酶 相关性分析
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铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析 被引量:11
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作者 曾淑华 文国松 +3 位作者 徐绍忠 查应红 杨生超 段承俐 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 766-771,共6页
目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(pepc)基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR... 目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(pepc)基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80%左右,与其他科属植物的同源性达到70%以上,编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。 展开更多
关键词 铁皮石斛 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 基因克隆 同源性分析 RT-PCR
铁皮石斛蔗糖合成酶基因的克隆及表达分析 被引量:16
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作者 孟衡玲 段承俐 +3 位作者 萧凤回 杨生超 查应红 文国松 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期833-837,共5页
目的: 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale蔗糖合成酶基因并对其表达分析,为研究铁皮石斛多糖合成与蔗糖合成酶活性关系及调控表达提供理论依据。 方法: 基于GenBank上已知的蔗糖合成酶基因SS同源序列,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁... 目的: 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale蔗糖合成酶基因并对其表达分析,为研究铁皮石斛多糖合成与蔗糖合成酶活性关系及调控表达提供理论依据。 方法: 基于GenBank上已知的蔗糖合成酶基因SS同源序列,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛蔗糖合成酶基因全长,将目的片段转化大肠杆菌表达菌株BL21中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析。 结果: 成功克隆了铁皮石斛蔗糖合成酶基因,该基因cDNA全长2 424 bp,编码807个氨基酸 (命名为DOSS1),登录号HQ856835,该基因氨基酸序列与兰科植物Mokara yellow(AF530568)同源性达到95%,与Oncidium goldiana(AF530567)同源性达到90%,与禾本科植物的SS基因同源性在80%以上。并对其进行大肠杆菌原核表达诱导,诱导的工程菌能明显表达出一条相对分子质量约为92×103左右的蛋白质,与理论相对分子质量基本相符。 结论: 成功克隆了铁皮石斛蔗糖合成酶基因,并诱导出一条与理论蛋白相对分子质量相符的蛋白条带。 展开更多
关键词 铁皮石斛 蔗糖合成酶 基因克隆 表达分析
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