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尿道下裂相关miRNA差异表达分析的初步探讨 预览
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作者 黄恩馥 陈娇 +3 位作者 曹戌 冯笑 张亚 周云 《临床小儿外科杂志》 CAS 2019年第4期335-340,共6页
目的通过筛选尿道下裂、术前经HCG治疗的尿道下裂以及正常包皮组织中miRNA差异表达,探究其与尿道下裂的发生以及术前HCG治疗影响预后的可能途径,为探究尿道下裂病因提供新思路。方法选取9例尿道下裂(其中3例术前进行HCG治疗)以及3例包... 目的通过筛选尿道下裂、术前经HCG治疗的尿道下裂以及正常包皮组织中miRNA差异表达,探究其与尿道下裂的发生以及术前HCG治疗影响预后的可能途径,为探究尿道下裂病因提供新思路。方法选取9例尿道下裂(其中3例术前进行HCG治疗)以及3例包茎患儿(对照组)为研究对象,分别取包皮组织抽提总RNA,利用芯片技术筛选各组差异性表达的miRNAs,并用RT-PCR技术对筛选结果进行验证。结果芯片筛选结果:与对照组比较,尿道下裂患儿的包皮组织里差异性表达的miRNAs中上调的19个,下调的15个。与术前行HCG治疗组的患儿相比,术前未行HCG治疗的尿道下裂患儿包皮组织里差异性表达的miRNA中上调的19个,下调的25个;RT-PCR验证结果:在差异性表达的miRNA中选择10个miRNA进行验证,其中5个miRNA与芯片结果相符,分别是let-7b-3p、miR-145-5p、miR-376a-3p、miR-377-3p和miR-1-3p。其中let-7b-3p、miR-145-5p、miR-376a-3p、miR-377-3p在尿道下裂组中低表达,在对照组和术前HCG治疗的尿道下裂组中高表达;miR-1-3p在术前HCG治疗的尿道下裂患儿中较未用药组中高表达。结论首次建立尿道下裂患儿miRNAs的基因表达谱,并筛选出在术前行HCG治疗尿道下裂、术前未行HCG治疗尿道下裂与包茎之间存在差异表达的miRNAs。根据筛选出的差异性表达的miRNAs,推测其与尿道下裂的关系,为今后疾病的预防以及提高治疗效果提供新的线索。 展开更多
关键词 尿道下裂/病因学 微RNAS 人绒毛膜促性腺激素 反转录酶-聚合酶连锁反应
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瘦素对新生期大鼠惊厥性脑损伤的保护作用及对海马CB-D28k表达的影响
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作者 李亚超 李丽丽 +4 位作者 金梅芳 高媛媛 陈妮娜 王丹丹 倪宏 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期280-284,共5页
目的探讨瘦素急性期干预对新生期大鼠惊厥性脑损伤的神经保护作用及海马组织CB-D28k表达的影响。方法采用随机数字表法将7日龄SD大鼠分为四组,即单纯对照组、瘦素对照组(Leptin组)、单纯惊厥组(RS组)及瘦素干预组(RS+Leptin组)。RS组和R... 目的探讨瘦素急性期干预对新生期大鼠惊厥性脑损伤的神经保护作用及海马组织CB-D28k表达的影响。方法采用随机数字表法将7日龄SD大鼠分为四组,即单纯对照组、瘦素对照组(Leptin组)、单纯惊厥组(RS组)及瘦素干预组(RS+Leptin组)。RS组和RS+Leptin组大鼠应用三氟乙醚诱导惊厥持续状态,连续7d。Leptin组和RS+Leptin组于每日惊厥后1h腹腔给予瘦素4mg/kg,连续干预7d(P7~P13)。于P14天,即末次惊厥后24h,每组随机取5只,取海马组织,采用蛋白免疫印迹技术(Western blot)检测海马CB-D28k的表达,采用实时PCR技术检测海马CB-D28kmRNA的表达。每组余10只于P33进行避暗测试。结果四组大鼠错误次数和潜伏期组间差异有统计学意义(F=5.471,F=13.775,P<0.05),RS组大鼠较对照组错误次数明显增多(次:1.40±0.52vs.0.80±0.42,P<0.05),RS+Leptin组大鼠较RS组错误次数明显减少(次:0.60±0.52vs.1.40±0.52,P<0.05);RS组大鼠较对照组潜伏期明显缩短(s:92.01±22.78vs.154.97±23.65,P<0.05),RS+Leptin组大鼠较RS组潜伏期明显延长(s:142.42±21.85vs.92.01±22.78,P<0.05)。CB-D28k及mRNA在四组大鼠海马组织中表达差异有统计学意义(F=26.963,F=24.420,P<0.05);与对照组比较,RS组海马组织CB-D28k及mRNA的表达量明显减少(1.29±0.20vs.0.44±0.09,1.08±0.16vs.0.49±0.10,P<0.05);与RS组比较,RS+Leptin组海马组织CB-D28k及mRNA的表达量明显增加(0.44±0.09vs.1.22±0.21,0.49±0.10vs.0.93±0.09,P<0.05)。结论急性期瘦素干预对新生期大鼠惊厥所致神经行为损伤具有神经保护作用,其作用机制可能与调节海马组织CB-D28k表达有关。 展开更多
关键词 瘦素 惊厥 CB-D28k
134例患儿万古霉素临床应用分析 预览
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作者 桂环 郁丹红 +3 位作者 于洋 何佳珂 周慧婷 毛晨梅 《医药导报》 CAS 北大核心 2018年第9期1061-1064,共4页
目的 分析万古霉素在儿科中的使用情况,促进万古霉素的安全合理使用。方法 采用回顾性调查分析方法,统计某院2016年9月1日—2017年8月31日使用万古霉素的314例住院患儿病历资料,收集用药相关信息进行分析。结果 134例患儿共进行192例次... 目的 分析万古霉素在儿科中的使用情况,促进万古霉素的安全合理使用。方法 采用回顾性调查分析方法,统计某院2016年9月1日—2017年8月31日使用万古霉素的314例住院患儿病历资料,收集用药相关信息进行分析。结果 134例患儿共进行192例次万古霉素血药浓度监测,其中男89例(66.42%),女45例(33.58%);来自血液科的患儿占56.72%,初始给药剂量在10~20mg·kg-1的患儿占92.54%,治疗有效率为88.06%,不良反应主要为皮疹,其发生率为2.99%。病原学检查培养出革兰阳性菌株38株,暂未发现耐万古霉素肠球菌。192例次血药谷浓度中,低于目标浓度范围下限的占66.67%。结论 该院万古霉素使用较为合理,但需要关注血药谷浓度不达标的问题,同时需要进一步研究影响万古霉素血药浓度的因素,更好地实行个体化治疗。 展开更多
关键词 万古霉素 血药浓度监测 谷浓度 合理用药
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干细胞和软骨细胞共培养用于构建四种无支架软骨的比较
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作者 韩絮 宿广昊 +2 位作者 张亚 胡斌 王晓东 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期1489-1493,共5页
目的观察4组高数量细胞团无支架离心管内聚集培养体系生成软骨组织的大小和生物学特点并对其进行评价。方法密度梯度离心法分离、培养骨髓间充质干细胞(BMSCs)。分离、培养兔关节软骨细胞(ACs)。阿利新蓝、蕃红花"O"-亮绿及Ⅱ型... 目的观察4组高数量细胞团无支架离心管内聚集培养体系生成软骨组织的大小和生物学特点并对其进行评价。方法密度梯度离心法分离、培养骨髓间充质干细胞(BMSCs)。分离、培养兔关节软骨细胞(ACs)。阿利新蓝、蕃红花"O"-亮绿及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定ACs。免疫荧光法鉴定BMSCs表面分子标志CD34、CD44、CD45和CD105。BMSCs和ACs按1∶3和2∶2的比例混合为共培养(CO)组,聚集共培养于15 ml离心管内。另取等量软骨细胞为AC组,等量BMSCs向ACs诱导转化的BMSCs诱导组(加入转化生长因子-β1的软骨诱导液)作对比研究。4组高数量细胞团分别培养1、2、3、4周后制成石蜡组织切片,阿利新蓝、蕃红花"O"-亮绿、Ⅱ型胶原免疫组织化学和HE染色后镜下观察。阿利新蓝比色法定量检测培养上清液糖胺聚糖(GAG)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测上清液Ⅱ型胶原含量。结果ACs阿利新蓝、蕃红花"O"-亮绿及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均阳性,BMSCs免疫荧光染色CD34(-)、CD44(+)、CD45(-)、CD105(+);单纯AC组、2∶2和1∶3共培养组阿利新蓝、蕃红花"O"-亮绿及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均阳性,BM诱导组3个染色弱阳性。HE可见AC组和1∶3组软骨细胞逐渐融合成初期软骨组织。2∶2和BM诱导组细胞也逐渐整合,但4周后未见软骨雏形形成。4周后AC组[(179.43±59.19) μg/ml]与2∶2[(158.06±23.77) μg/ml]、1∶3组[(160.06±30.58) μg/ml]的GAG含量比较差异无统计学意义(F=0.210,P=0.812),4周后AC组[(185.13±35.96) ng/ml]与2∶2[(169.72±32.56) ng/ml]、1∶3[(148.91±33.16) ng/ml] Ⅱ型胶原含量比较差异无统计学意义(F=0.680,P=0.515);AC组[(179.43±59.19) μg/ml]与BM诱导组[(70.74±40.17) μg/ml]GAG含量差异有统计学意义(t=3.980,P=0.001),AC组[(185.13±35.96) ng 展开更多
关键词 软骨细胞 骨髓间充质干细胞 共培养 无支架 组织工程软骨
运动训练对发育期惊厥性脑损伤大鼠搜寻策略及大脑皮质可塑性相关分子-1表达的影响 被引量:1
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作者 殷小平 李超 +1 位作者 周保健 倪宏 《中华物理医学与康复杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期486-491,共6页
目的 将发育期大鼠制成青霉素诱发反复惊厥模型,探讨运动训练对实验大鼠水迷宫搜寻策略和脑皮质可塑性相关分子PRG-1表达的远期影响。 方法 采用随机数字表法将出生21d(P21)的SD大鼠分为空白对照组、训练对照组、单纯惊厥组及惊厥训... 目的 将发育期大鼠制成青霉素诱发反复惊厥模型,探讨运动训练对实验大鼠水迷宫搜寻策略和脑皮质可塑性相关分子PRG-1表达的远期影响。 方法 采用随机数字表法将出生21d(P21)的SD大鼠分为空白对照组、训练对照组、单纯惊厥组及惊厥训练组。采用青霉素腹腔注射将单纯惊厥组及惊厥训练组大鼠制成反复惊厥动物模型;空白对照组、训练对照组则给予等量生理盐水腹腔注射。各组大鼠分别于P39~P43、P61~P64期间进行Morris水迷宫策略分析,检测大鼠学习及记忆功能。P49~P54期间训练对照组及惊厥训练组大鼠给予踏转轮训练,每天训练1次,每次训练30min,连续训练6d。待Morris水迷宫测试结束后(P66)采用荧光定量RT-PCR法观察各组大鼠可塑性相关基因-1(PRG-1)在大脑皮质中的表达。 结果 ①搜寻策略:各组大鼠边缘式搜寻比例均呈逐渐减少趋势,而趋向式和直线式搜寻比例均呈逐渐增加趋势。Ridit秩和检验显示第1次Morris水迷宫实验两惊厥组第2天及第4天成绩均明显落后于两对照组(P〈0.05);第2次水迷宫实验发现惊厥训练组第2天以后成绩明显提高,第4天时训练对照组及惊厥训练组成绩均明显优于单纯惊厥组(P〈0.05)。②记忆实验:对各组大鼠搜寻策略进行Ridit秩和检验,发现第1次水迷宫测试两惊厥组成绩均明显落后于两对照组(P〈0.05);第2次水迷宫测试单纯惊厥组搜寻策略明显落后于其它组(P〈0.05),而惊厥训练组成绩显著提高,与训练对照组无显著差异。③RT-PCR:训练对照组、单纯惊厥组、惊厥训练组PRG-1表达均明显高于空白对照组(P〈0.05);此外惊厥训练组PRG-1表达较单纯惊厥组有降低趋势,但差异无统计学意义(P〉0.05)。 结论 运动训练能显著改善发育期反复长程惊厥所致认知损伤,其治疗机制可能与调节脑皮质PR 展开更多
关键词 惊厥 运动训练 发育 可塑性相关分子 认知
重症患儿容量超负荷与急性肾损伤及预后的关系 预览
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作者 王三凤 陈娇 +2 位作者 陆春久 李晓忠 李艳红 《临床儿科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期508-511,共4页
目的探讨容量超负荷(FO)与危重患儿急性肾损伤(AKI)、病死率的相关性,及FO对死亡的预测价值。方法 选取入住儿童重症监护病房(PICU)的危重症患儿为研究对象进行前瞻性研究。评估其病程中FO水平,并于入院24小时内进行PRISMⅢ评... 目的探讨容量超负荷(FO)与危重患儿急性肾损伤(AKI)、病死率的相关性,及FO对死亡的预测价值。方法 选取入住儿童重症监护病房(PICU)的危重症患儿为研究对象进行前瞻性研究。评估其病程中FO水平,并于入院24小时内进行PRISMⅢ评分。以二元logistic回归评估在校正混杂因素后FO与AKI及病死率的关系,采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评估FO对死亡的预测价值。结果 共纳入362例患儿,平均FO≥5%26例(7.18%),发生AKI24例(6.63%),死亡18例(5.0%)。危重患儿入住PICU7天内,平均FO(OR=1.26,95%CI:1.10~1.43,P=0.001)和最大FO(OR=1.12,95%CI:1.02~1.23,P=0.018)均与AKI显著相关;然而在校正年龄和PRISMⅢ后,二者与AKI无相关(P>0.05)。在校正AKI和疾病严重程度等潜在的混杂因素后,平均FO与病死率仍显著相关(AOR=1.34,95%CI:1.12~1.60,P=0.002)。平均FO预测死亡风险的AUC为0.801(P<0.001)。结论 容量超负荷与危重患儿的AKI和预后相关,并对危重患儿的死亡有重要的预测价值。 展开更多
关键词 危重患儿 容量负荷 急性肾损伤 PRISMⅢ评分
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抗B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘小鼠模型的作用研究
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作者 丁林 陈正荣 +3 位作者 顾文婧 季伟 严永东 李毅平 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期740-746,共7页
目的 探讨阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘(neutrophilic asthma, NA)小鼠模型的干预作用.方法 BALB/c雌性小鼠24只,随机分成4组,分别为磷酸缓冲盐溶液(PBS)对照组(A组)、中性粒细胞哮喘组(B组)、抗B7-H3单克隆抗... 目的 探讨阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘(neutrophilic asthma, NA)小鼠模型的干预作用.方法 BALB/c雌性小鼠24只,随机分成4组,分别为磷酸缓冲盐溶液(PBS)对照组(A组)、中性粒细胞哮喘组(B组)、抗B7-H3单克隆抗体干预组(C组)、同型对照IgG组(D组).B、C、D组均给予OVA联合LPS致敏,OVA雾化激发,A组给予同等剂量的PBS注射和激发,C组和D组在诱导期分别注射50 μg抗B7-H3单克隆抗体和同型对照IgG.观察各组小鼠雾化时的症状;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织;显微镜下进行BALF细胞总数及分类计数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF细胞因子的水平;小鼠肺组织病理切片HE染色观察肺组织病理改变;PAS染色观察气道黏液的分泌;同时肺组织免疫组化法检测B7-H3表达水平.结果 (1)B组和D组小鼠雾化激发后出现呼吸急促、烦躁不安、频繁搔抓头面部等表现,C组喘息症状较B组有所缓解,A组活动自如.(2)B组、C组、D组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比及嗜酸性粒细胞百分比较A组均明显升高(P均〈0.05);C组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比较B组、D组降低(P均〈0.05);B组与D组比较无显著差异.(3)B组、C组、D组BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF水平较A组均显著性上升,其中B组、D组IL-6、TNF-α、IL-17和G-CSF水平比C组明显增高(P均〈0.05);IL-4水平B组和D组低于C组(P均〈0.05).(4)A组肺组织病理染色示无明显炎症细胞及黏液分泌;B组和D组炎症细胞、中性粒细胞浸润和黏液分泌较A组明显增多,C组较B组、D组有所减轻.(5)肺组织免疫组化显示A组几乎无表达B7-H3阳性细胞,B组和D组B7-H3阳性细胞数明显增多,C组较B组、D组阳性细胞数明显减少(P〈0.05).结论 阻断型抗小鼠B7 展开更多
关键词 抗B7-H3单克隆抗体 中性粒细胞哮喘 小鼠模型
尿道下裂子鼠生殖结节中的间充质-上皮转化作用
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作者 李晋昊 李祥 +1 位作者 张亚 周云 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期1173-1176,共4页
目的观察尿道下裂子鼠生殖结节中成纤维细胞的间充质-上皮转化现象,探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)导致尿道下裂的机制。方法取孕SD大鼠,随机分为DBP组和对照组。于怀孕第13~19天,DBP组按照800 mg/kg体重DBP溶入玉米油(DBP和玉米油... 目的观察尿道下裂子鼠生殖结节中成纤维细胞的间充质-上皮转化现象,探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)导致尿道下裂的机制。方法取孕SD大鼠,随机分为DBP组和对照组。于怀孕第13~19天,DBP组按照800 mg/kg体重DBP溶入玉米油(DBP和玉米油总剂量为3 ml/kg体重)后灌胃,对照组按照3 ml/kg体重玉米油灌胃。怀孕19 d取出子鼠,鉴别出DBP组中发生尿道下裂的雄性子鼠及对照组中的雄性子鼠并分为尿道下裂组和正常对照组,提取两组子鼠的生殖结节。用组织块法原代培养子鼠生殖结节中的成纤维细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,划痕实验检测细胞迁移能力变化,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达,Western blot检测E-cadherin、Vimentin的蛋白表达。结果对照组的尿道开口于生殖结节顶端,而尿道下裂组的尿道开口于生殖结节腹侧,肛门生殖结节距离[(1.43±0.04) mm]明显小于对照组[(2.27±0.09) mm,P=0.023]。子鼠尿道下裂发生率为40.5%。与对照组比较,尿道下裂组生殖结节成纤维细胞形态发生了变化,细胞呈多边型,丝状伪足变短,细胞排列较紧密,平均迁移距离缩短[12 h:(0.17±0.04) mm比(0.14±0.03) mm、24 h:(0.26±0.05) mm比(0.20±0.04) mm,P=0.041],E-cadherin的mRNA和蛋白相对表达量增加、Vimentin的mRNA和蛋白相对表达量降低(E-cadherin、Vimentin mRNA相对表达量:1.00±0.00比1.43±0.31(P=0.034)、1.00±0.00比0.51±0.12(P=0.031);E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量:0.15±0.06比1.59±0.84(P=0.005)、1.88±0.45比0.30±0.13(P=0.003)。结论DBP在诱导子鼠发生尿道下裂的过程当中,促进了子鼠生殖结节中成纤维细胞的间充质-上皮转化作用,这可能与导致尿道下裂的发生有关。 展开更多
关键词 子鼠 尿道下裂 邻苯二甲酸二丁酯 成纤维细胞 间充质-上皮转化
核转运信号蛋白1选择性抑制剂KPT-330诱导白血病细胞凋亡的分子机制
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作者 杜薇薇 李之珩 +6 位作者 李晓璐 曹岚 陶燕芳 徐利晓 任俊丽 潘健 卢俊 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期226-232,共7页
目的探讨核转运信号蛋白1(CRM1)选择性抑制剂KPT-330对急性白血病细胞凋亡的诱导作用及可能的分子机制。方法白血病细胞株[人急性早幼粒白血病细胞(NB4)、人慢性粒细胞白血病细胞(K562)、人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)]分为... 目的探讨核转运信号蛋白1(CRM1)选择性抑制剂KPT-330对急性白血病细胞凋亡的诱导作用及可能的分子机制。方法白血病细胞株[人急性早幼粒白血病细胞(NB4)、人慢性粒细胞白血病细胞(K562)、人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)]分为对照组(不予KPT-330处理)和KPT-330处理组(予终浓度0.01、0.10、0.20、0.50、1.00、5.00、10.00 μmol/L KPT-330孵育细胞)。应用细胞计数试剂盒(CCK-8)比色法观察KPT-330对白血病细胞的生长抑制作用;应用荧光显微镜观察KPT-330诱发白血病细胞形态的变化;应用Annexin V/PI标记流式细胞术分析KPT-330诱发的细胞凋亡;Western blot检测CRM1表达量及凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9 (Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、DNA修复酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的表达水平和活化状态;基因芯片分析KPT-330对急性白血病细胞基因表达谱及长链非编码RNA(lncRNA)表达谱的影响。 结果KPT-330呈剂量依赖性抑制白血病细胞的生长,并使CRM1表达下调;与对照组相比,实验组细胞出现了明显的形态异常,较低浓度的KPT-330(0.2 μmol/L和1.0 μmol/L)即可导致白血病细胞的明显凋亡,0.2 μmol/L KPT-330 24 h处理组NB4、K562、HL-60细胞凋亡率(%)分别为(4.95±0.21)%、(14.05±0.07)%、(4.95±0.63)%;0.20 μmol/L KPT-330 48 h处理组(6.10±0.56)%、(20.75±0.21)%、(5.85±0.07)%; 1.00 μmol/L KPT-330 24 h处理组(41.15±0.21)%、(35.45±0.35)%、(15.65±0.07)%;1.00 μmol/L KPT-330 48 h处理组(52.45±0.35)%、(47.45±2.47)%、(16.80±1.98)%,与对照组[24 h NB4、K562、HL-60:(3.30±0.28)%、(9.50±0.56)%、(2.00±0.14)%;48 h NB4、K562、HL-60:(3.70±0.14)%、(3.50±0.28)%、(2.15±0.21)%]比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。在多种 展开更多
关键词 KPT-330 核转运信号蛋白1 白血病细胞 凋亡 长链非编码RNA
与软骨细胞共培养促进BMSCs分化为软骨细胞 预览 被引量:1
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作者 冯笑 韩絮 +3 位作者 张亚 胡斌 黄恩馥 王晓东 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2017年第5期403-407,共5页
目的:将兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)和关节软骨细胞在离心管内聚集共培养获取软骨细胞,并与全软骨细胞比较离心管内培养的差异。方法:取兔骨髓和软骨,分离BMSC和软骨细胞分别进行培养,用阿利新蓝... 目的:将兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)和关节软骨细胞在离心管内聚集共培养获取软骨细胞,并与全软骨细胞比较离心管内培养的差异。方法:取兔骨髓和软骨,分离BMSC和软骨细胞分别进行培养,用阿利新蓝染色、番红花O-亮绿染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定软骨细胞;用免疫荧光法检测CD44、CD105、CD34、CD45的表达鉴定BMSC。取3×10^7/m L第3代BMSC和1×10^7/m L原代软骨细胞按3∶1比例混于离心管内,为共培养组;另将4×10^7/m L原代软骨细胞移入离心管内培养,作为软骨细胞组。培养4周,每周收集细胞上清液,检测细胞糖胺聚糖、Ⅱ型胶原含量。结果:软骨细胞组与共培养组在培养的1~4周中细胞大体形态、组织学变化无明显差别;两组细胞1~4周分泌糖胺聚糖比较差异无统计学意义(P〉0.05),Ⅱ型胶原量在第1周时有差异,后3周时无统计学差异(P〉0.05)。结论:BMSC和软骨细胞离心管内聚集共培养可诱导BMSC分化为软骨细胞,其数量和质量与单纯软骨细胞效果同等。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 软骨细胞 共培养
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手术应激影响患儿血浆高迁移家族蛋白1的表达及临床意义 预览
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作者 许云云 李嫣 +4 位作者 张奇 向永军 唐汝泽 汪健 黄洁 《南通大学学报:医学版》 2016年第5期444-447,共4页
目的:探讨手术患儿血浆中高迁移家族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)与手术应激程度、手术方式及术后并发症的关系,为临床预防和治疗术后感染提供新思路。方法:2013年6月—2014年12月苏州大学附属儿童医院外科病房收治的需... 目的:探讨手术患儿血浆中高迁移家族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)与手术应激程度、手术方式及术后并发症的关系,为临床预防和治疗术后感染提供新思路。方法:2013年6月—2014年12月苏州大学附属儿童医院外科病房收治的需经手术治疗的患儿53例,根据其临床表现和实验室结果分为:中度应激组与重度应激组、普外组与心胸外组、术后并发症组与无并发症组。收集术前(PRE)、术后即刻(POD0)、术后1 d(POD1)、术后3 d(POD3)和术后7 d(POD7)的血标本,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测各组患儿血浆中HMGB1和白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)的表达水平,分析HMGB1变化与手术应激程度、手术方式及手术后并发症之间的关系。结果:与早期炎症因子IL-6相比,炎症因子HMGB1在患儿血浆中的表达区间更为广谱;手术应激程度和手术方式均影响手术患儿血浆中HMGB1的表达水平(P〈0.05)。患儿血浆中HMGB1的表达与手术应激程度(尤其是内脏损伤程度)、手术方式、性别相关(P〈0.05),但与术后并发症不相关(P〉0.05)。结论:手术应激程度和手术方式均是导致HMGB1异常表达的关键因素,为此降低手术应激程度或优化手术方式将有助于适时抑制HMGB1的过度活化,从而减少并发症的发生。 展开更多
关键词 高迁移家族蛋白1 手术应激程度 手术方式 术后并发症 儿童
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诱导共刺激分子和诱导共刺激分子配体在系统性红斑狼疮患者外周血中表达的变化及临床意义
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作者 胡筱涵 安竞男 +4 位作者 沈宇 蒋觉安 武剑 刘翠平 张学光 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期691-697,I0002共8页
目的 检测SLE患者外周血淋巴细胞表面诱导共刺激分子(ICOS)和诱导共刺激分子配体(ICOSL)的表达,以及血浆中可溶性ICOSL的表达,探讨其临床意义.方法 流式细胞术检测45例SLE患者和39名健康志愿者外周血CD4+、CD8+T细胞表面ICOS及CD1... 目的 检测SLE患者外周血淋巴细胞表面诱导共刺激分子(ICOS)和诱导共刺激分子配体(ICOSL)的表达,以及血浆中可溶性ICOSL的表达,探讨其临床意义.方法 流式细胞术检测45例SLE患者和39名健康志愿者外周血CD4+、CD8+T细胞表面ICOS及CD14+单核细胞、CD19+B细胞表面ICOSL的表达;ELISA检测血浆可溶性ICOSL的表达,分析临床意义.采用Levene方差齐性检验,组间比较采用t检验,两变量间相关性采用Pearson相关分析.结果 与健康志愿者相比,SLE患者外周血CD4+、CD8+T细胞表面ICOS的表达均显著升高[(19.1±1.7)%与(14.0±1.5)%,t=2.156,P=0.035]、[(10.0±1.0)%与(6.4±1.0)%,t=2.587,P=0.012].CD14+单核细胞上ICOSL的表达高于健康志愿者个体[(2.94±0.88)%与(0.89±0.21)%,t=2.152,P=0.04],且与患者血浆C3、C4水平呈正相关(r=0.401,P=0.031;r=0.44,P=0.017).活动期组SLE患者血浆sICOSL的浓度显著高于非活动期组[(362±25) ng/ml与(278±15) ng/ml,t=2.356,P=0.025],且与CD14+单核细胞和CD19+B细胞表面ICOSL的表达均呈负相关(r=-0.4243,P=0.022;r=-0.4099,P=0.025).MMPI可显著抑制sICOSL产生.结论 SLE患者外周血淋巴细胞表面ICOS和ICOSL,以及血浆sICOSL异常表达,且与疾病活动度密切相关.提示ICOS/ICOSL信号通路可能参与SLE免疫病理进程. 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 共刺激分子 诱导共刺激分子 诱导共刺激分子配体
大肠埃希菌致脓毒症新生大鼠巨噬细胞及血中CD163表达研究
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作者 管欣娴 俞生林 +2 位作者 汪健 高沙沙 李毅平 《中国新生儿科杂志》 CAS 2016年第5期375-378,共4页
目的探讨CD163在大肠埃希菌致脓毒症新生大鼠巨噬细胞及血中的表达情况。方法选择72只无特定病原体的7日龄新生大鼠,随机分为实验组和对照组各36只。实验组新生大鼠腹腔注射大肠埃希菌建立脓毒症模型;对照组新生大鼠腹腔注射生理盐水。... 目的探讨CD163在大肠埃希菌致脓毒症新生大鼠巨噬细胞及血中的表达情况。方法选择72只无特定病原体的7日龄新生大鼠,随机分为实验组和对照组各36只。实验组新生大鼠腹腔注射大肠埃希菌建立脓毒症模型;对照组新生大鼠腹腔注射生理盐水。实验后分别在第2、4、6、12、24、48 h 6个时间点取标本,使用免疫组织化学法动态监测肺脏及肝脏巨噬细胞表面CD163的表达情况,使用酶联免疫吸附法监测血中分泌型CD163(s CD163)浓度。结果实验组新生大鼠肺脏和肝脏组织中巨噬细胞表面CD163表达水平随着实验时间延长逐渐降低(P〈0.001);2 h时实验组和对照组肝巨噬细胞表面CD163表达水平差异无统计学意义(P〉0.05);4 h及以后,实验组肝巨噬细胞表面CD163表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.01)。随实验时间延长,实验组血中s CD163水平呈逐渐上升趋势(P〈0.001);2 h时对照组和实验组血中s CD163表达水平差异无统计学意义(P〉0.05);4 h及以后,实验组血中s CD163表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.001)。结论 CD163在脓毒症发生发展过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 埃希氏菌属 脓毒症 巨噬细胞 CD163 大鼠
瘦素对新生期惊厥大鼠行为学及Bcl2蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 李丽丽 田甜 +1 位作者 章姝琪 倪宏 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期587-590,共4页
目的探讨瘦素对新生期惊厥大鼠的保护作用及其机制。方法20只6Et龄Spra—gue—Dawley(SD)大鼠随机分为四组:对照组(control组),瘦素组(1eptin组),惊厥组(RS组),惊厥+瘦素组(RS+leptin组),每组5只。在日龄6—12d时,Rs... 目的探讨瘦素对新生期惊厥大鼠的保护作用及其机制。方法20只6Et龄Spra—gue—Dawley(SD)大鼠随机分为四组:对照组(control组),瘦素组(1eptin组),惊厥组(RS组),惊厥+瘦素组(RS+leptin组),每组5只。在日龄6—12d时,Rs组和RS+leptin组每日使用三氟乙醚反复诱导建立新生期惊厥模型;在日龄13~22d时,leptin组和Rs+leptin组大鼠腹腔注射瘦素(2mg·kg^-1·d^-1);日龄30d时检测各组大鼠的神经行为发育学指标(前肢悬吊实验和旷场实验);日龄34d时取脑组织,Western blot检测大鼠大脑皮层Bcl2蛋白表达水平。结果(1)神经行为测试:前肢悬吊实验,RS组[(7.10±1.02)s]大鼠较control组[(15.95±6.11)s]前肢悬吊时间明显缩短(P〈0.05);RS+leptin组[(13.90±2.64)s]较RS组前肢悬吊时间明显延长(P〈0.05);旷场实验,RS组[(119.80±28.83)格]大鼠较control组[(191.00±37.27)格]水平移动明显减少(P〈0.05);RS+leptin组[(164.20±26.46)格]较RS组水平移动增加,但差异无统计学意义;RS组大鼠较control组修饰次数和便粒明显增加(P〈0.05);RS+leptin组较RS组修饰次数和便粒明显减少(P〈0.05);(2)免疫印迹结果:RS组(0.24±0.07)、leptin组(0.89±0.09)和RS+leptin组(0.56±0.07)大鼠较control组(1.02±0.01)Bcl2表达均明显下降,差异具有统计学意义(P〈0.05);RS+leptin组和leptin组较Rs组Bcl2表达均明显升高(P〈0.05)。结论瘦素可以通过上调节Bcl2表达改善三氟乙醚诱导的新生期大鼠惊厥性脑损伤。 展开更多
关键词 瘦素 惊厥 BCL2 脑损伤
新生猪溶血性黄疸模型的制备与验证 预览 被引量:1
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作者 李永富 马月兰 +3 位作者 聂玲 陈爽 金美芳 王三南 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期431-434,共4页
目的建立新生猪溶血性黄疸动物模型,以进一步研究新生儿溶血性黄疸的病理生理。方法 7日龄纯种大约克白猪分成实验组和对照组,每组各6只。并采用免疫新西兰大白兔的方法制备兔抗猪红细胞抗体,分离兔抗猪红细胞血清。实验组静脉注射兔抗... 目的建立新生猪溶血性黄疸动物模型,以进一步研究新生儿溶血性黄疸的病理生理。方法 7日龄纯种大约克白猪分成实验组和对照组,每组各6只。并采用免疫新西兰大白兔的方法制备兔抗猪红细胞抗体,分离兔抗猪红细胞血清。实验组静脉注射兔抗猪红细胞血清5 m L,对照组注射5 m L生理盐水。两组均每6 h采血送检血常规及肝功能。结果实验组注射兔抗猪红细胞血清18 h后血清胆红素水平高于对照组(64±30μmol/L vs 20±4μmol/L,P〈0.05),48 h达高峰(275±31μmol/L),96 h明显降低(95±17μmol/L),均高于对照组(P〈0.05)。注射抗血清后18 h,实验组红细胞降至(4.58±0.32)×10^12)/L,低于对照组[(5.09±0.44)×10^12)/L](P〈0.05);24 h实验组红细胞[(4.21±0.24)×10^12)/L]和HB(87±3 g)进一步降低,低于对照组[(5.11±0.39)×10^12)/L,97±6 g](P〈0.05);二组间的红细胞、血红蛋白差异在36-48 h达高峰。结论新生猪溶血性黄疸模型较好地模拟了人类溶血性黄疸的病理过程,为更进一步研究新生儿溶血病提供了良好的生物物质基础。 展开更多
关键词 新生儿溶血病 高胆红素血症 动物模型
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母胎之间血清唾液酸胎盘转运率 预览
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作者 乔阳 白增华 +2 位作者 王熲 金华 古桂雄 《中国生育健康杂志》 2015年第2期116-118,共3页
目的:研究健康孕妇妊娠晚期血清唾液酸及新生儿脐血血清唾液酸之间的相关性,探讨唾液酸胎盘转运率对胎儿唾液酸的影响,为评价健康母胎之间唾液酸转运能力提供参考。方法采集100名健康孕妇妊娠晚期空腹静脉血及分娩时胎儿脐静脉血,... 目的:研究健康孕妇妊娠晚期血清唾液酸及新生儿脐血血清唾液酸之间的相关性,探讨唾液酸胎盘转运率对胎儿唾液酸的影响,为评价健康母胎之间唾液酸转运能力提供参考。方法采集100名健康孕妇妊娠晚期空腹静脉血及分娩时胎儿脐静脉血,使用高效液相色谱法测定血清中的唾液酸浓度。结果妊娠晚期血清唾液酸与新生儿脐血清唾液酸含量正相关(r =0.243),唾液酸胎盘转运率波动范围为0.16~0.76。结论母婴唾液酸正相关可能是母体对胎儿逐渐增加的唾液酸需求的反应;脐带血唾液酸水平相对孕母血唾液酸,波动范围更窄,变化更小,推测唾液酸胎盘转运能力反映了孕妇血清唾液酸通过胎盘的能力。 展开更多
关键词 母亲 胎儿生长发育 唾液酸 脐带血 唾液酸胎盘转运率
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小于胎龄儿与适于胎龄儿化脓性脑膜炎临床特点的比较 预览 被引量:2
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作者 张明明 李毅平 俞生林 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1028-1031,共4页
目的探讨小于胎龄儿(SGA)和适于胎龄儿(AGA)化脓性脑膜炎(PM)临床特征的差异。方法选取58例足月新生儿PM患儿作为研究对象进行回顾性研究。根据出生体重与胎龄,将PM患儿分为SGA组(13例)和AGA组(45例)。比较两组临床表现、实... 目的探讨小于胎龄儿(SGA)和适于胎龄儿(AGA)化脓性脑膜炎(PM)临床特征的差异。方法选取58例足月新生儿PM患儿作为研究对象进行回顾性研究。根据出生体重与胎龄,将PM患儿分为SGA组(13例)和AGA组(45例)。比较两组临床表现、实验室检查结果及预后的差异。结果 SGA组的肌张力降低发生率高于AGA组(P〈0.05);SGA组脑脊液潘氏实验阳性率高于AGA组(P〈0.05);脑部影像学检查提示,SGA组的脑损伤发生率明显高于AGA组(P〈0.05)。结论 SGA发生PM后,脑损伤发生率更高,提示其预后较AGA更差。 展开更多
关键词 化脓性脑膜炎 脑损伤 小于胎龄儿 适于胎龄儿
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脂肪干细胞分化成血管内皮细胞前后miRNA的差异表达 被引量:2
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作者 张亚 周云 +3 位作者 朱璟晶 曹戌 金美芳 刘琳 《江苏医药》 CAS 2015年第8期880-883,F0002共5页
目的探讨人脂肪间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化前后microRNA(miRNA)的差异表达,预测其靶基因。方法对人脂肪间充质干细胞诱导成的血管内皮细胞进行鉴定后,提取人脂肪间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化前后的miRNA,微阵列芯片... 目的探讨人脂肪间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化前后microRNA(miRNA)的差异表达,预测其靶基因。方法对人脂肪间充质干细胞诱导成的血管内皮细胞进行鉴定后,提取人脂肪间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化前后的miRNA,微阵列芯片检测表达谱的变化,对有显著差异的miRNA进行实时荧光定量PCR验证,通过TargetScan、Miranda、PITA、RNAhybrid和microTar五个数据库预测靶基因。结果筛选、验证出四个显著差异表达的miRNA。其中,miR-29b-3p和miR-5096为显著上调,miR-143-3p和miR-145-5p为显著下调。预测到OCT4、SOX2、KLF4、TGFB2、IGF1、TAF11、TMEM169、UHRF1和OSBPL6等相关靶基因。结论人脂肪间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化前后存在显著差异性表达的miRNA,提示这些miRNA在其分化中有重要的调控作用。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 血管内皮细胞 微小核糖核酸
核因子阳性儿童急性髓细胞性白血病临床特征及预后因素分析 被引量:2
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作者 车琳 许云云 +11 位作者 庞丽 何海龙 胡绍燕 王易 卢俊 季正华 何亚香 黄益萍 邵雪君 杨乃超 潘健 赵文理 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期207-211,共5页
目的 探讨核因子(即CBF,包含AML1/ETO和CBF/MYH11)阳性儿童急性髓细胞白血病(AML)临床特点及影响其预后的相关因素.方法 回顾性分析苏州大学附属儿童医院2007年6月至2012年6月初诊并至少进行1个疗程以上化疗的非急性早幼粒细胞白血... 目的 探讨核因子(即CBF,包含AML1/ETO和CBF/MYH11)阳性儿童急性髓细胞白血病(AML)临床特点及影响其预后的相关因素.方法 回顾性分析苏州大学附属儿童医院2007年6月至2012年6月初诊并至少进行1个疗程以上化疗的非急性早幼粒细胞白血病(APL)和Down综合征的85例AML病例,分为低危、中危、高危3组,了解3组患儿生存预后,分别分析性别、FAB分型、初诊白细胞数、CBF是否阳性、染色体、诱导缓解疗程数、中枢神经系统白血病(CNSL)、复发、是否行造血干细胞移植(HSCT)等因素对预后影响,Kaplan-Meier生存曲线分析其中40例CBF阳性AML患儿的5年总生存(OS)率和无事件生存(EFS)率,并以CBF阴性者为对照.结果 低、中、高危3组AML 5年OS率分别为(66.5±11.6)%、(54.5±14.4)%、(42.7±7.2)%,差异有统计学意义(x2=6.085,P=0.048);5年EFS率分别为(62.2±14.0)%、(54.5±14.4)%、(41.9±7.3)%,差异无统计学意义(x2=1.060,P=2.589).CBF阳性分布为低危组22例,中危组3例,高危组15例;40例CBF阳性者存活23例,45例CBF阴性者存活24例,2组5年OS率分别为(51.8±8.8)%、(50.6±7.6)%,差异无统计学意义.复发病例共10例,其中CBF阳性患儿6例(死亡3例),阴性患儿4例(死亡2例).HSCT患儿共20例,CBF阳性者5例(死亡1例),阴性者15例(死亡3例).COX回归模型多因素分析显示,性别、诱导缓解化疗疗程数和HSCT对各组AML预后均有统计学意义,而FAB分型、初诊白细胞计数及CNSL则对预后无明显统计学意义(P均>0.05).结论单纯化疗对核因子阳性或阴性AML患儿的5年EFS率差异无统计学意义,而HSCT可明显改善CBF阴性及整体AML患儿的5年OS率. 展开更多
关键词 核因子 白血病 髓系 急性 预后 儿童
E2A/PBX1融合基因阳性儿童急性淋巴细胞性白血病的临床特点及预后分析 被引量:2
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作者 庞丽 赵文理 +6 位作者 车琳 郭豆豆 潘健 何海龙 邵雪君 何亚香 季正华 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期199-202,共4页
目的 探讨E2A/PBX1融合基因阳性儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)的临床特点及预后.方法 采用巢式反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对苏州大学附属儿童医院2007年1月至2011年12月初诊的450例ALL患儿骨髓进行E2A/PBXI融合基因检测.免疫... 目的 探讨E2A/PBX1融合基因阳性儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)的临床特点及预后.方法 采用巢式反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对苏州大学附属儿童医院2007年1月至2011年12月初诊的450例ALL患儿骨髓进行E2A/PBXI融合基因检测.免疫分型为B淋巴细胞系的有420例(成熟B淋巴细胞除外),其中20例表达E2A/PBX1(4.76%,20/420例)(E2A/PBX1阳性组),按ALL危险度分级标准归入中危组;以同期初诊的E2A/PBX1融合基因阴性且危险分度相同的85例ALL患儿作为对照(E2A/PBX1阴性组).比较2组的临床特点和5年无事件生存(EFS)率及总生存(OS)率.结果 E2A/PBXI阳性组与E2A/PBX1阴性组患儿在年龄、性别、初诊白细胞数和血红蛋白方面差异均无统计学意义(P均>0.05).E2A/PBX1阳性组患儿第33天微小残留病(MRD)数值较阴性组明显减低,2组比较差异有统计学意义(x2=15.78,P=0.001).E2A/PBX1阳性组与E2A/PBX1阴性组ALL患儿5年EFS率分别为(84.4±15.6)%、(73.5±15.6)%,OS率分别为(86.0±17.6)%、(81.8±17.6)%;2组复发率分别为10.5%、12.9%,中位复发时间分别为(8.9±5.3)个月、(26.2±8.0)个月,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 E2A/PBX1融合基因阳性ALL患儿的预后与融合基因阴性且同危险度的ALL患儿无明显差异,是儿童B淋巴细胞系ALL临床危险分级的中等危险预后因素. 展开更多
关键词 白血病 淋巴细胞 急性 儿童 E2A PBX1融合基因 临床特点 预后
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