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MRI及DTI评估大鼠血管性认知障碍 预览 被引量:1
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作者 魏琳 黄明明 +2 位作者 曹笑婉 肖雁 余晖 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2018年第2期161-165,共5页
目的探讨早期诊断血管性认知障碍(VCI)的影像学指标。方法将30只SD大鼠分为模型组(20只)和对照组(10只),对模型组采用改良四血管法建立VCI大鼠模型,对照组行假手术处理,通过Morris水迷宫检测大鼠认知功能变化。于建模后2周、1... 目的探讨早期诊断血管性认知障碍(VCI)的影像学指标。方法将30只SD大鼠分为模型组(20只)和对照组(10只),对模型组采用改良四血管法建立VCI大鼠模型,对照组行假手术处理,通过Morris水迷宫检测大鼠认知功能变化。于建模后2周、1个月、3个月、5个月对2组大鼠行MRT2w和DTI扫描,利用手动分割ROI的方法分析海马体积及FA值变化;利用基于体素分析方法(VBA)分析大鼠FA值下降的脑区。最后处死大鼠,取脑组织切片进行HE和尼氏染色,观察海马区神经细胞受损情况。结果模型组大鼠的学习和记忆能力较对照组降低。与对照组相比,模型组大鼠术后3、5个月海马体积萎缩,且海马区FA值明显减低(P均〈0.05)。VBA分析结果显示,建模后1、3、5个月多处脑区FA值显著下降.且下降区域范同随时间延长逐渐扩大。病理结果娩示.海马区锥体细胞排列紊乱、结构模糊.尼氏小体溶解、消失。结论观察大鼠海马体积以及微观白质变化有助于早期诊断VCI;大脑FA值可作为早期诊断VCI以及评估严重程度的观察指标。 展开更多
关键词 认知障碍 大鼠 磁共振成像 扩散张量成像
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HPV16 E6/E7基因变异体D32E/M28V+L94P与CIN和宫颈癌的相关性 被引量:1
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作者 任婕 张其柱 +3 位作者 杨英捷 訾聃 周建奖 谭玉洁 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2015年第5期417-420,共4页
目的 检测HPV16 E6/E7基因变异在对照组、CIN及宫颈癌中的发生情况,探讨变异体与宫颈病变的相关性.方法 用核酸分子快速导流杂交基因分型技术进行HPV感染分型检测,PCR扩增HPV16 E6/E7基因,对基因进行切胶纯化后,双向测序.结果 DNA序列... 目的 检测HPV16 E6/E7基因变异在对照组、CIN及宫颈癌中的发生情况,探讨变异体与宫颈病变的相关性.方法 用核酸分子快速导流杂交基因分型技术进行HPV感染分型检测,PCR扩增HPV16 E6/E7基因,对基因进行切胶纯化后,双向测序.结果 DNA序列总变异发生率为76.5%(62/81),氨基酸总变异率为66.7%(54/81);E6、E7基因变异率均高于原型.E6/E7变异检出率在浸润癌组和对照组之间、癌前病变组和对照组之间进行比较,差异均有统计学意义(P<0.05).氨基酸序列E6-D32E(T96A)和E7-M28V(A82G)+ L94P(T281C)位点突变同时伴随存在,同变异体D32E/M28V+ L94P最为常见,检出率为35.8% (29/81),变异检出率在浸润癌组和对照组、癌前病变组和对照组之间进行比较,差异也有统计学意义(P<0.05).在浸润癌组与癌前病变组之间对同变异体D32E/M28V+ L94P进行分析,发现同变异体虽比原形增多,但在两组之间无统计学差异(P>0.05).结论 HPV16 E6/E7基因的变异体D32E/M28V+ L94P与宫颈浸润癌及癌前病变有关.HPV16 E6/E7基因变异体D32E/M28V+ L94P的致癌性在宫颈浸润癌及癌前病变中没有程度上的差异. 展开更多
关键词 乳头状瘤病毒 基因型 变异(遗传学) 宫颈疾病
氯化锂降低氧化应激水平改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆功能的机制 预览
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作者 向洁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期466-466,共1页
目的锂(Li)对神经退行性疾病有潜在神经保护作用,但其分子作用机制尚不清楚。在阿尔茨海默病(AD)发病机制中,氧化应激(OS)水平升高及β-淀粉样肽(Aβ)产生过多是重要的导致患者智力低下的致病因素之一。本课题探讨经氯化锂(Li Cl)处理的... 目的锂(Li)对神经退行性疾病有潜在神经保护作用,但其分子作用机制尚不清楚。在阿尔茨海默病(AD)发病机制中,氧化应激(OS)水平升高及β-淀粉样肽(Aβ)产生过多是重要的导致患者智力低下的致病因素之一。本课题探讨经氯化锂(Li Cl)处理的APP/PS1双转基因小鼠是否能减少Aβ的生成,以及其是否能通过调控糖原合成激酶-3β(GSK3β)/核因子E2相关因子(Nrf2)/血红素加氧合酶1(HO-1)通路来减轻该小鼠脑组织OS损伤,并逆转APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力水平的降低。方法应用免疫组化方法检测各组小鼠脑组织中老年斑的数量;用PCR法扩增模板DNA进行双转基因突变鉴定,筛选APP/PS1双转基因小鼠;转基因及野生型小鼠随机分为4组,即野生型组、野生型+Li Cl处理组、转基因+Li Cl处理组、转基因组。野生型+Li Cl处理组及转基因+Li Cl处理组小鼠4月或8月龄时每天1次用Li Cl灌胃处理(100 mg·kg-1,为期2个月),野生型组及转基因组小鼠则用同等容量的生理盐水进行灌胃处理;蛋白印迹法检测动物脑组织中GSK3β,p-GSK3β(ser9),Nrf2及HO-1蛋白表达水平;用生物化学方法测定各组小鼠脑组织与血清中SOD和GSH-Px活性及MDA含量;ELISA法测定脑组织内不可溶性Aβ含量;尼氏染色检测各组小鼠脑组织神经元尼式小体密度;行为学实验检测各组小鼠学习记忆能力。结果与野生型小鼠相比,6月及10月龄APP/PS1双转基因小鼠脑组织内可见明显的老年斑,不可溶性Aβ含量较高,以10月龄小鼠尤为明显(P<0.05);同时GSK3β活性明显增加,Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低,脑组织及血清中SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量增加(P<0.05);且转基因小鼠脑组织神经元中尼式小体密度明显减少,其学习记忆能力降低。而对4月或者8月龄APP/PS1双转基因小鼠予以Li Cl进行灌胃处理2月后,与未经处理的同龄APP/PS1双转基因小鼠相比,其脑组织内可见老年斑、� 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 APP/PS1双转基因小鼠 氯化锂 氧化应激 Β-淀粉样肽
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二氢杨梅素对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 预览
4
作者 刘金河 葛章文 +3 位作者 张望明 晏文涛 刘志 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第10期1140-1144,共5页
目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DM... 目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DMY对A549细胞的半数致死量(IC50值);选取IC50值附近浓度的DMY处理细胞,分别在24、48及72h时,采用MTT检测细胞存活率;肺癌A549细胞分为DMY组(终浓度大约为IC50值的DMY)及对照组,细胞培养48h时,采用Hoechst33342/PI双染法结合倒置荧光显微镜检测细胞凋亡,DNAladder凝胶电泳检测细胞内DNA的断裂程度。结果:DMY能显著抑制A549细胞的增殖,细胞抑制率随着DMY浓度的增加逐渐增高(P<0.01),呈明显的浓度依赖性,IC50值为(13.16±0.098)mg/L;以15mg/LDMY处理A549细胞,细胞存活率随着时间的延长逐渐降低(P<0.01),呈明显的时间依赖性;15mg/LDMY孵育A549细胞48h,Hoechst33342/PI染色后荧光显微镜下细胞核内呈现强蓝光,说明细胞处于凋亡状态,DNAladder凝胶实验检测发现凋亡DNA片段明显增加,出现Ladder现象。结论:DMY能抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡,可能与染色体DNA断裂有关。 展开更多
关键词 二氢杨梅素 肺肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 DNAladder凝胶电泳
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贵州省1115户居民家庭结构和乙肝感染家庭聚集性关系研究 预览
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作者 卜苏洪 黄文湧 +3 位作者 汪俊华 蒋芝月 官志忠 杨敬源 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第6期658-663,共6页
目的:探讨贵州省少数民族地区家庭结构与乙肝感染家庭聚集性的关系。方法:采用多阶段整群随机抽样的方法,从贵州省少数民族地区抽取1115户家庭1629人进行调查,并采集5mL静脉血,检测乙肝五项指标;采用二分类非条件Logistic回归模型分析,... 目的:探讨贵州省少数民族地区家庭结构与乙肝感染家庭聚集性的关系。方法:采用多阶段整群随机抽样的方法,从贵州省少数民族地区抽取1115户家庭1629人进行调查,并采集5mL静脉血,检测乙肝五项指标;采用二分类非条件Logistic回归模型分析,评估不同家庭结构和乙肝感染家庭聚集性关系。结果:3代同堂家庭乙肝感染家庭聚集性率最高(56.8%),隔代家庭HBV感染率最高(57.7%),不同家庭结构乙肝感染家庭聚集性差异有统计学意义(χ2=38.983,P<0.01);Logistic回归分析在调整相关危险因素后结果显示,与传统家庭相比,隔代家庭(OR=2.544,95%CI为1.254~5.160)、3代同堂家庭(OR=3.984,95%CI为2.497~6.357)、一起生活的人有HBsAg阳性(OR=7.379,95%CI为4.741~11.485),是乙肝感染的危险因素(P<0.05);接种过乙肝疫苗(OR=0.448,95%CI为0.207~0.972)、过去一年家庭总收入≥30000元(OR=0.408,95%CI为0.202~0.825)是家庭聚集性的保护因素(P<0.05)。结论:贵州省少数民族地区隔代家庭和3代同堂家庭是乙肝感染家庭聚集性的高危人群。 展开更多
关键词 家庭结构 肝炎 乙型 家庭聚集性 少数民族地区 影响因素
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贵州省两个少数民族地区乙肝感染家庭聚集性影响因素分析 预览
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作者 卜苏洪 黄文湧 +3 位作者 汪俊华 蒋芝月 官志忠 杨敬源 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期447-452,共6页
目的:分析贵州省少数民族地区1 629例乙型肝炎病毒(HBV)感染家庭聚集性的影响因素。方法:采用多阶段整群随机抽样的方法,抽取贵州省少数民族地区1 115户家庭1 629人进行调查,同时采集5 mL静脉血检测乙肝5项指标;采用两水平Logistic回归... 目的:分析贵州省少数民族地区1 629例乙型肝炎病毒(HBV)感染家庭聚集性的影响因素。方法:采用多阶段整群随机抽样的方法,抽取贵州省少数民族地区1 115户家庭1 629人进行调查,同时采集5 mL静脉血检测乙肝5项指标;采用两水平Logistic回归模型分析乙肝感染家庭聚集性的影响因素和保护因素。结果:1 629名居民乙肝感染率为50.6%、HBsAg阳性率为8.3%,1 115户家庭中有132户存在乙肝感染家庭聚集性;两水平Logistic回归分析结果显示,吸烟(OR=1.837,95%CI为1.057~2.917)、一起生活的人HBsAg阳性是贵州省少数民族地区乙肝感染家庭聚集性的危险因素;学生(OR=0.140,95%CI为0.025~0.797)、夫妻同房时使用安全套(OR=0.438,95%CI为0.207~0.927)、接种过乙肝疫苗(OR=0.281,95%CI为0.092~0.863)是保护因素。结论:生活行为方式和接种乙肝疫苗是贵州省少数民族地区乙肝感染家庭聚集性的主要影响因素。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 家庭特征 少数民族卫生 回归分析 影响因素
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慢性氟中毒大鼠脑组织Erk激酶、AMPA受体亚基GluR1和GluR2的表达及硫酸软骨素的保护作用
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作者 王纯 王胜远 +6 位作者 刘明海 何琪 钟毅 梁璐璐 何冬玲 官志忠 刘艳洁 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期446-452,共7页
目的研究慢性氟中毒中枢神经系统损伤的机制,探讨硫酸软骨素的神经保护作用。方法48只雌性SD大鼠,体重为90~120 g。按体重采用随机数字表法分为8组,每组6只,分别为对照组,自由饮用自来水;低、高剂量染氟组,自由饮用含氟量为10、50 mg/L... 目的研究慢性氟中毒中枢神经系统损伤的机制,探讨硫酸软骨素的神经保护作用。方法48只雌性SD大鼠,体重为90~120 g。按体重采用随机数字表法分为8组,每组6只,分别为对照组,自由饮用自来水;低、高剂量染氟组,自由饮用含氟量为10、50 mg/L的自来水;对照、低剂量染氟、高剂量染氟分别加生理盐水组,按要求饲养180 d后,用0.66 mg/kg生理盐水连续腹腔注射5 d(每天1次);低、高剂量染氟分别加硫酸软骨素组,按要求饲养180 d后,用0.66 mg/kg硫酸软骨素连续腹腔注射5 d(每天1次)。上述各组均饲以标准营养动物饲料,饲养周期为185 d,饲养结束后处死大鼠取脑组织。采用HE染色观察各组大鼠脑组织病理改变;免疫组织化学法(免疫组化)检测脑皮质中磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(phospho-Erk1/2),谷氨酸受体1、2(GluR1、GluR2)表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测脑皮质中Erk1/2、phospho-Erk1/2、GluR1、GluR2蛋白水平。结果各染氟组大鼠大脑皮质均可见神经元嗜酸性变化、丢失和层次排列不整齐,各染氟+硫酸软骨素组形态学改变均较各染氟组有明显改善。免疫组化结果显示,与对照组[(0.44±0.09)%、(1.49±0.05)%、(2.51±0.54)%]比较,低、高剂量染氟组phospho-Erk1/2[(1.47±0.09)%、(1.03±0.05)%]、GluR2[(2.37±0.06)%、(3.38±0.12)%]表达水平升高,GluR1[(1.49±0.02)%、(0.99±0.19)%]表达水平降低(P均< 0.05)。Western Blot结果显示,与对照组(1.00±0.12、1.76±0.33)比较,低、高剂量染氟组Erk1/2(3.10±0.76、1.99±0.01)、phospho-Erk1/2(3.27±0.25、2.67±0.05)蛋白水平升高(P均< 0.05);与低剂量染氟组比较,低剂量染氟+硫酸软骨素组Erk1/2、phospho-Erk1/2蛋白水平(1.30±0.31、2.20±0.34)明显降低(P均< 0.05)。与对照组(1.86±0.47、1.17±0.27)比较,低、高剂量染氟组GluR1蛋白水平(1.09±0.26、0.61 ±0.14)明显下降,GluR2蛋白水平(1.99±0.42、3.38±0.27)显著升高(P均< 0.05);与低 展开更多
关键词 大鼠 氟中毒 细胞外信号调节蛋白激酶1/2 受体 谷氨酸 硫酸软骨素
PNU通过PI3K/AKT信号通路上调星形胶质细胞HSP70的表达 预览
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作者 董智慧 吕菊 +5 位作者 任真奎 谢鹏 胡玉梅 官志忠 吴昌学 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第3期254-258,263共6页
目的:研究PNU对星形胶质细胞热休克蛋白70(HSF70)表达的影响,并探讨其机制。方法:分离新出生24 h内乳鼠大脑星形胶质细胞原代培养并鉴定,传1~3代待细胞成熟后分为正常对照组、PNU处理组,PI3K/AKT信号通路阻断剂(LY294002)处理组和PNU+LY... 目的:研究PNU对星形胶质细胞热休克蛋白70(HSF70)表达的影响,并探讨其机制。方法:分离新出生24 h内乳鼠大脑星形胶质细胞原代培养并鉴定,传1~3代待细胞成熟后分为正常对照组、PNU处理组,PI3K/AKT信号通路阻断剂(LY294002)处理组和PNU+LY294002处理组,正常对照组不做任何处理,PNU处理组用5μmol/L PNU分别处理6、12、18、24 h,LY294002处理组只加10μmol/L LY294002处理,PNU+LY294002处理组是先加10μmol/L LY294002处理2 h后、再加入5μmol/L PNU共同处理18 h,免疫印迹法观察各组星形胶质细胞内HSF70蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,PNU处理组星形胶质细胞内HSP70蛋白的表达上调(P<0.05);与PNU处理组比较,LY294002+PNU处理组星形胶质细胞内HSP70表达明显受到抑制(P<0.01)。结论:PNU通过PI3K/AKT信号通路调控星形胶质细胞HSP70蛋白表达。 展开更多
关键词 原代星形胶质细胞 热休克蛋白70 PNU PI3 K/AKT信号通路 阿尔茨海默症
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尼古丁通过PI3K/AKT信号通路上调星形胶质细胞HSF1的表达 预览
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作者 董智慧 任真奎 +4 位作者 吕菊 谢鹏 官志忠 吴昌学 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第3期259-263,共5页
目的:研究尼古丁对星形胶质细胞热休克转录因子1(HSF1)的表达的影响,并探讨其机制。方法:分离新出生24 h内乳鼠大脑皮质,进行原代培养并鉴定为星形胶质细胞,待细胞成熟后分为正常对照组、尼古丁处理组,PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002... 目的:研究尼古丁对星形胶质细胞热休克转录因子1(HSF1)的表达的影响,并探讨其机制。方法:分离新出生24 h内乳鼠大脑皮质,进行原代培养并鉴定为星形胶质细胞,待细胞成熟后分为正常对照组、尼古丁处理组,PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002处理组和尼古丁+LY294002处理组,正常对照组不做任何处理;尼古丁处理组用5μmol/L尼古丁分别处理星形胶质细胞6、12、18、24 h;LY294002处理组只加10μmol/L LY294002处理;尼古丁+LY294002处理组是先加10μmol/L LY294002处理2 h后,再加入5μmol/L尼古丁共同处理18 h,免疫印迹法观察各组HSF1蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,尼古丁处理组星形胶质细胞内HSF 1蛋白的表达上调(P<0.05);与尼古丁处理组比较,LY294002+尼古丁处理组星形胶质细胞内HSF1表达明显受到抑制(P<0.05)。结论:尼古丁通过PI3K/AKT信号通路上调星形胶质细胞HSF1蛋白表达。 展开更多
关键词 原代星形胶质细胞 热休克核转录因子1 尼古丁 PI3K/AKT信号通路 阿尔茨海默症
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激活原代星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体对PI3K/Akt/HSP70信号通路的影响 预览
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作者 董智慧 吕菊 +3 位作者 谢鹏 任真奎 官志忠 禹文峰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第22期5577-5581,共5页
目的研究尼古丁激活星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体(nAChR)对热休克蛋白(HSP)70表达的影响,探讨激活α7nAChR对阿尔茨海默病(AD)的神经保护作用及其机制。方法从刚出24 h内的小鼠的大脑皮质中分离出原代星形胶质细胞,培养并进行细胞... 目的研究尼古丁激活星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体(nAChR)对热休克蛋白(HSP)70表达的影响,探讨激活α7nAChR对阿尔茨海默病(AD)的神经保护作用及其机制。方法从刚出24 h内的小鼠的大脑皮质中分离出原代星形胶质细胞,培养并进行细胞纯度鉴定。将培养好的星形胶质细胞分为空白对照组、尼古丁组、α7nAChR阻断剂MLA组、MLA+尼古丁组、PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002组和LY294002+尼古丁组。用Western印迹法检测细胞内HSP70及P-Akt蛋白的表达情况。结果与对照组相比,尼古丁组中HSP70的表达水平显著升高(P<0.01);与尼古丁组相比,MLA+尼古丁组中HSP70蛋白表达水平受到明显抑制(P<0.05);LY294002+尼古丁组中HSP70蛋白表达水平明显受到抑制(P<0.05);且尼古丁可以显著上调P-Akt蛋白水平(P<0.05),该上调效应能被MLA或LY294002抑制(P<0.05)。结论尼古丁激活星形胶质细胞α7nAChRs,可通过PI3K/Akt信号通路上调HSP70蛋白表达水平。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 α7尼古丁胆碱能受体 热休克蛋白70 星形胶质细胞
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苗药验方“四大血”对胶原诱导关节炎大鼠IL-17和VEGF表达的影响 预览
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作者 袁桃花 李欣芯 +5 位作者 陈丽亚 曹胜宇 孙见飞 刘华 吴昌学 吴宁 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第6期664-669,共6页
目的:探讨苗药验方“四大血”(SX)对牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠白细胞介素17(IL-17)及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法:42只SD大鼠分为空白对照组(NG组,n=7)及造模组(n=35),除NG组外,所有大鼠用牛Ⅱ型胶原与等量不... 目的:探讨苗药验方“四大血”(SX)对牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠白细胞介素17(IL-17)及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法:42只SD大鼠分为空白对照组(NG组,n=7)及造模组(n=35),除NG组外,所有大鼠用牛Ⅱ型胶原与等量不完全弗氏佐剂混合乳化剂于尾根部皮下注射致炎、复制CIA动物模型,造模第14天将造模组大鼠均分为模型对照组(Mod组),SX高、中、低药物治疗组(分别给予SX40、20及10g/kg灌胃,21d,n=7)及阳性药物对照组(GTW组,给予雷公藤多甙片40g/kg灌胃,21d,n=7);于造模第14天、给药治疗第7、14及21天时检测足肿胀度(ER);给药第21天时,观察大鼠膝关节滑膜组织病理改变,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定大鼠膝关节滑膜组织VEGFmRNA的表达,ELISA法检测测大鼠血清IL-17及VEGF水平。结果:与Mod组相比,SX40、20及10g/kg组、GTW组大鼠足关节ER减轻,关节滑膜组织炎性细胞浸润明显下降,纤维组织增生及水肿程度减轻;治疗第21天时,与Mod组比较,SX40、20及10g/kg组大鼠膝关节滑膜组织VEGFmRNA水平、血清VEGF含量均显著降低(P<0.01),SX40、20g/kg组血清IL-17含量显著降低(P<0.01)。结论:SX能有效缓解CIA病情,其机制可能与降低IL-17和VEGF含量有关。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 白细胞介素17 血管内皮生长因子 苗药验方“四大血” 牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎大鼠模型 大鼠 Sprague-Dawley
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破骨细胞形成过程中唑来膦酸的作用途径及机制 预览 被引量:1
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作者 黄晓林 廖健 +4 位作者 洪伟 李芳 程余婷 周倩 董强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2716-2721,共6页
背景:唑来膦酸可用来治疗骨吸收疾病,但其确切机制不明确。目的:探讨唑来膦酸对RANKL诱导的破骨细胞形成的影响和机制。方法:通过CCK8实验检测小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的活力,分析最大半数抑制浓度(IC50)。体外用RANKL将RAW264.... 背景:唑来膦酸可用来治疗骨吸收疾病,但其确切机制不明确。目的:探讨唑来膦酸对RANKL诱导的破骨细胞形成的影响和机制。方法:通过CCK8实验检测小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的活力,分析最大半数抑制浓度(IC50)。体外用RANKL将RAW264.7细胞诱导为破骨细胞,鬼笔环肽和DAPI染色进行鉴定,并经抗酒石酸酸性磷酸酶染色来评估唑来膦酸在破骨细胞分化不同阶段对破骨细胞形成的影响,骨吸收实验检测破骨细胞骨吸收活性,最后Western blot检测IκBα、P38、JNK及ERK蛋白的表达。结果与结论:①唑来膦酸作用48 h,对RAW264.7细胞的最大半数抑制浓度(IC50)为33.9μmol/L,相比对照组,低于该浓度的唑来膦酸抑制破骨细胞分化;②唑来膦酸处理后骨吸收陷窝数目和面积明显减少(P <0.05);③蛋白表达水平上,唑来膦酸抑制RANKL诱导的IκBα磷酸化,其他蛋白磷酸化未见明显改变;④结果表明,唑来膦酸在体外可能通过调节NF-κB信号通路来抑制破骨细胞形成。 展开更多
关键词 破骨细胞 唑来膦酸 破骨细胞骨吸收 破骨细胞分化 核因子ΚB信号通路 核因子ΚB受体活化因子配体 国家自然科学基金
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热休克转录因子1及热休克蛋白70与阿尔茨海默病的关系 预览
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作者 禹文峰 董智慧 +1 位作者 任真奎 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第3期249-253,共5页
阿尔茨海默病(AD)是痴呆中最常见的一种神经退行性疾病,越来越多的证据表明,AD是一种“蛋白质错误折叠障碍性疾病”,具有蛋白质错误折叠、易聚集和成熟神经系统中选择性细胞丢失的共同特征。热休克蛋白(HSP)是细胞中一组重要的分子伴侣... 阿尔茨海默病(AD)是痴呆中最常见的一种神经退行性疾病,越来越多的证据表明,AD是一种“蛋白质错误折叠障碍性疾病”,具有蛋白质错误折叠、易聚集和成熟神经系统中选择性细胞丢失的共同特征。热休克蛋白(HSP)是细胞中一组重要的分子伴侣蛋白,它参与了辅助蛋白质合成、折叠、定位及转运等过程,并且在协助蛋白质水解、预防蛋白质错误折叠和聚集方面具有重要的作用,有研究证实HSP与AD存在密切的联系。HSP70是HSP中最保守、最丰富的一个伴侣蛋白。HSP70不但可抑制β-淀粉样肽(Aβ)相关的毒性作用,也在tau蛋白的聚积或降解中发挥重要作用。这些研究结果提示HSP70有可能成为AD治疗的新靶点,本文对HSP70及其上游调控因子HSF1与AD的关系作一综述。 展开更多
关键词 阿尔茨海默症 热休克转录因子1 热休克蛋白70 Β-淀粉样肽 炎症 氧化应激
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仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响
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作者 李若淳 曾明燕 +1 位作者 苏艳丽 吴昌学 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期654-656,670共4页
目的探讨仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响。方法将60只老年健康雄性SD大鼠腹腔注射D-半乳糖60 mg·kg-1,qd(连续6周)联合海马注射β-样淀粉蛋白25-35(Aβ25-35) 4 mmol·L-1,qd(第7周),构建阿尔茨海默病... 目的探讨仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响。方法将60只老年健康雄性SD大鼠腹腔注射D-半乳糖60 mg·kg-1,qd(连续6周)联合海马注射β-样淀粉蛋白25-35(Aβ25-35) 4 mmol·L-1,qd(第7周),构建阿尔茨海默病大鼠模型,并随机分为4组:低、中、高剂量实验组(建模期间予以灌胃仙茅苷24,48,72 mg·kg-1,qd),模型组(建模期间予以灌胃等量0. 9%Na Cl);另选15只老年健康雄性SD大鼠灌胃等量0. 9%Na Cl作为对照组。用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆功能,用苏木精-伊红(HE)染色及细胞凋亡原位检测(TUNEL)法分别观察海马区神经元凋亡情况。结果对照组、模型组及低、中、高剂量实验组大鼠穿台次数分别为(15. 12±1. 78),(5. 03±1. 17),(7. 45±1. 36),(9. 79±1. 21)和(12. 33±1. 09)次,模型组分别与低、中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05);海马神经元凋亡比例分别(8. 42±2. 13)%,(69. 78±9. 97)%,(38. 14±8. 62)%,(24. 77±5. 43)%和(10. 02±1. 46)%,模型组分别与低、中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论仙茅苷可缓解海马神经元损伤,抑制海马神经元凋亡。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 仙茅苷 海马 神经元 凋亡
初诊白细胞计数与儿童高白细胞急性淋巴细胞白血病预后的关系 预览
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作者 杨小燕 金皎 +11 位作者 黄璟 许键炜 吴西军 吴昌学 吴莎莎 马健娟 李燕 庹媛媛 杨红兰 潘海新 何志旭 胡绍燕 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第11期1311-1314,共4页
目的: 研究初诊外周血白细胞(WBC)计数与儿童高白细胞急性淋巴细胞白血病(HALL)预后的关系。 方法: HALL患儿121例,按照WBC计数分为WBC≥300×10^9/L组和〈300×10^9/L组,比较两组患儿的总生存率、无事件生存率及复发率... 目的: 研究初诊外周血白细胞(WBC)计数与儿童高白细胞急性淋巴细胞白血病(HALL)预后的关系。 方法: HALL患儿121例,按照WBC计数分为WBC≥300×10^9/L组和〈300×10^9/L组,比较两组患儿的总生存率、无事件生存率及复发率。 结果: 初诊时WBC≥300×10^9/L组HALL患儿无事件生存率低于WBC〈300×10^9/L组( P =0.034),复发率高于WBC〈300×10^9/L组( P =0.026),但两组总生存率比较,差异无统计学意义( P =0.147)。 结论: 初诊时外周血WBC≥300×10^9/L的HALL患儿无事件生存率低、复发率高。 展开更多
关键词 儿童 白血病 淋巴样 高白细胞 白细胞计数 无事件生存率 复发率
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幽门螺杆菌东、西方株CagA的序列差异及其对胃癌细胞生长与凋亡的影响 被引量:3
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作者 龙妮娅 熊林 +6 位作者 赵艳 袁航 李雅洁 陈学书 张晓怡 谢渊 周建奖 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2018年第4期848-855,共8页
【背景】幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是胃癌的主要致病因素,其分泌的细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin associated gene A,CagA)是目前已知唯一能被H.pylori注入胃上皮细胞并模拟细胞内蛋白发挥作用的癌蛋白,参与胃... 【背景】幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是胃癌的主要致病因素,其分泌的细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin associated gene A,CagA)是目前已知唯一能被H.pylori注入胃上皮细胞并模拟细胞内蛋白发挥作用的癌蛋白,参与胃癌的发生发展。【目的】比较H.pylori东亚株和西方株CagA结构差异,初步探讨H.pylori-CagA对胃癌细胞增殖与凋亡的影响。【方法】对H.pylori东亚株和西方株CagA的核酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,构建含东亚株和西方株cagA基因的真核表达载体,转染胃癌细胞AGS,用Western blot法检测CagA蛋白的表达,用CCK8法测定细胞的生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】生物信息学分析发现H.pylori东亚、西方菌株CagA的核酸序列和氨基酸序列均存在特征性差异。构建了含东亚、西方菌株cagA基因的表达载体[命名为GZ7/cagA(东亚株)和26695/cagA(西方株)]。与空载体组比较,GZ7/cagA和26695/cagA转染组均表达CagA蛋白,两组比较表达量无显著性差异,GZ7/cagA转染组细胞生长显著增加,而26695/cagA转染组细胞生长显著降低(P〈0.05)。GZ7/cagA转染组、26695/cagA转染组细胞的凋亡率分别为7.23±0.96及9.17±1.40,均高于空载体组(5.03±0.63),差异有统计学意义(P〈0.05)。【结论】东亚株与西方株CagA之间有结构和功能的差异,东亚株CagA能促进细胞增殖,而西方株CagA却抑制细胞增殖,但两者均能促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 CAGA 胃癌 细胞增殖 细胞凋亡
α-硫辛酸对6-羟多巴胺诱导PC12细胞损伤的保护作用 预览
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作者 李成朋 韩飞 +5 位作者 董智慧 罗坤 胡玉梅 官志忠 吴昌学 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第3期264-268,共5页
目的:研究α-硫辛酸(LA)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法:体外培养PC12细胞,通过CCK-8实验筛选出诱导PC12细胞建立帕金森病(PD)细胞模型的6-OHDA最佳浓度及对PD细胞模型保护的LA最佳浓度,Western blot... 目的:研究α-硫辛酸(LA)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法:体外培养PC12细胞,通过CCK-8实验筛选出诱导PC12细胞建立帕金森病(PD)细胞模型的6-OHDA最佳浓度及对PD细胞模型保护的LA最佳浓度,Western blot法检测LA预处理后对PD模型细胞中酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响。结果:75μmol/L 6-OHDA作用于PC12细胞共培养18 h后,PC12细胞活力下降35%;而经10μmol/L LA预处理PC12细胞1 h后,再用75μmol/L 6-OHDA与PC12共培养18 h,则PC12细胞活力下降20%,提示75μmol/L 6-OHDA与10μmol/L LA为最佳处理浓度;经过LA的干预,6-OHDA诱导PC12建立的PD细胞模型中TH表达显著升高(P〈0.05)。结论:LA对6-OHDA诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 Α-硫辛酸 6-羟多巴胺 PC12细胞 酪氨酸羟化酶 帕金森病 神经保护 氧化应激
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ApoE通过影响mir-30a-5p调控BDNF表达 预览
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作者 臧贵勇 潘开昌 +4 位作者 龙友国 余跃生 李成朋 官志忠 禹文峰 《中风与神经疾病杂志》 2018年第10期893-896,共4页
目的研究ApoE基因型是如何影响脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达,以更好的理解AD的发病机制。方法在SH-SY5Y细胞系和大鼠原代神经元中加入ApoE3和ApoE4重组蛋白,用real-time PCR、Western blot和ELIS... 目的研究ApoE基因型是如何影响脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达,以更好的理解AD的发病机制。方法在SH-SY5Y细胞系和大鼠原代神经元中加入ApoE3和ApoE4重组蛋白,用real-time PCR、Western blot和ELISA检测BDNF的表达水平;用luciferase assay、real-time PCR和Western blot证实BDNF是mir-30a-5p的靶基因;用TaqMan技术检测mir-30a-5p的水平。结果与对照组相比,ApoE3增加了BDNF的mRNA、蛋白水平和培养基中的BDNF浓度,而ApoE4减少了BDNF的mRNA、蛋白水平和培养基中的BDNF浓度;hsa-mir-30a-5p抑制BDNF的3’UTR的luciferase活性,mRNA和蛋白水平。ApoE3降低mir-30a-5p的表达,ApoE4增加mir-30a-5p的表达,而过表达mir-30a-5p inhibitor可以逆转ApoE4对BDNF的抑制效果。结论BDNF是mir-30a-5p的靶基因,ApoE是通过影响mir-30a-5p的水平来调控BDNF的表达。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 APOE 神经营养因子 mir-30a-5p
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TCMePyP的制备及对神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y光动力杀伤作用的研究 预览
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作者 王琪 肖雁 +1 位作者 肖勃 肖竦 《影像科学与光化学》 CSCD 2018年第5期453-463,共11页
在H 2TPyP上接入羧基进行修饰,得到TCMePyP。测定了TCMePyP的紫外-可见吸收光谱、荧光光谱。观察了SH-SY5Y细胞对新型卟啉化合物的摄取情况和光照条件下细胞内活性氧物质(Reactive oxygen species,ROS)的变化情况。进一步考察了新型卟... 在H 2TPyP上接入羧基进行修饰,得到TCMePyP。测定了TCMePyP的紫外-可见吸收光谱、荧光光谱。观察了SH-SY5Y细胞对新型卟啉化合物的摄取情况和光照条件下细胞内活性氧物质(Reactive oxygen species,ROS)的变化情况。进一步考察了新型卟啉化合物对神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y的抑制作用。结果表明:TCMePyP具备良好光敏药物的特性,脂溶性和水溶性良好;在可见光区有较强吸收;光动力条件下活性氧物质ROS随光照时间在一定范围内增加;TCMePyP对SH-SY5Y肿瘤细胞的增殖有抑制作用,杀伤效果明显;发射的荧光在SH-SY5Y肿瘤细胞内可以定位成像。因此,TCMePyP具有较好的医药应用前景。 展开更多
关键词 卟啉化合物 神经母细胞瘤 光动力杀伤作用 细胞内成像 活性氧物质
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L-亚氨基乙基鸟氨酸与过量氟共培养对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞一氧化氮/内皮型一氧化氮合酶表达的影响
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作者 朱丹 刘宇平 +1 位作者 桂传枝 官志忠 《中华地方病学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期455-460,共6页
目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸 (L-iminoethyl ornithine hydrochloride,L-NIO)对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以 ... 目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸 (L-iminoethyl ornithine hydrochloride,L-NIO)对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以 及一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性改变的影响。方法 将体外培养的 SH-SY5Y细胞分为对照组、低氟组、高氟组、L-NIO组、低氟 + L-NIO组、高氟 + L-NIO组,n = 3。对照组加入与实验组等体积的 培养液,低氟组和高氟组加入氟化钠(sodium fluoride,NaF)浓度分别为0.2、2.0 mmol/L,L-NIO组加入3 μmol/L L-NIO, 低氟 + L-NIO组和高氟 + L-NIO组分别加入0.2 mmol/L NaF和3 μmol/L L-NIO、2.0 mmol/L NaF和3 μmol/L L-NIO,培养时 间为48 h。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞中eNOS蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR)法检测细胞中eNOS mRNA表达水平,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,硝酸还原酶法和比色法检测细胞培养液 中NO含量和NOS活性。结果 与对照组(1.000 ± 0.026)比较, 低、高氟组eNOS蛋白表达量(1.108 ± 0.071、1.349 ± 0.057 )升高,L-NIO组(0.755 ± 0.148)下降(P均 〈 0.05);与低氟组比较,高氟组升高,低氟 + L-NIO组(0.802 ± 0.115)下 降(P均 〈 0.05);与高氟组比较,高氟 + L-NIO组(0.988 ± 0.135)下降(P 〈 0.05)。与对照组(1.000 ± 0.018)比较, 低、高氟组eNOS mRNA表达量(1.809 ± 0.099、2.416 ± 0.295)升高,L-NIO组(0.609 ± 0.077)下降(P均 〈 0.05);与低 氟组比较,高氟组升高,低氟 + L-NIO组(1.040 ± 0.034)下降(P均 〈 0.05);与高氟组比较,高氟 + L-NIO组(1.233 ± 0.152)下降(P 〈 0.05)。与对照组[(1.66 ± 0.07)%]比较,低、高氟组细胞凋亡率[(8.81 ± 0.27)%、(1 展开更多
关键词 人神经母细胞瘤细胞 内皮型一氧化氮合酶 一氧化氮
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