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贵州省两个少数民族地区乙肝感染家庭聚集性影响因素分析 预览
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作者 卜苏洪 黄文湧 +3 位作者 汪俊华 蒋芝月 官志忠 杨敬源 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期447-452,共6页
目的:分析贵州省少数民族地区1 629例乙型肝炎病毒(HBV)感染家庭聚集性的影响因素。方法:采用多阶段整群随机抽样的方法,抽取贵州省少数民族地区1 115户家庭1 629人进行调查,同时采集5 mL静脉血检测乙肝5项指标;采用两水平Logistic回归... 目的:分析贵州省少数民族地区1 629例乙型肝炎病毒(HBV)感染家庭聚集性的影响因素。方法:采用多阶段整群随机抽样的方法,抽取贵州省少数民族地区1 115户家庭1 629人进行调查,同时采集5 mL静脉血检测乙肝5项指标;采用两水平Logistic回归模型分析乙肝感染家庭聚集性的影响因素和保护因素。结果:1 629名居民乙肝感染率为50.6%、HBsAg阳性率为8.3%,1 115户家庭中有132户存在乙肝感染家庭聚集性;两水平Logistic回归分析结果显示,吸烟(OR=1.837,95%CI为1.057~2.917)、一起生活的人HBsAg阳性是贵州省少数民族地区乙肝感染家庭聚集性的危险因素;学生(OR=0.140,95%CI为0.025~0.797)、夫妻同房时使用安全套(OR=0.438,95%CI为0.207~0.927)、接种过乙肝疫苗(OR=0.281,95%CI为0.092~0.863)是保护因素。结论:生活行为方式和接种乙肝疫苗是贵州省少数民族地区乙肝感染家庭聚集性的主要影响因素。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 家庭特征 少数民族卫生 回归分析 影响因素
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高效严谨型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统的构建 预览
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作者 陈相好 谷俊莹 +8 位作者 崔古贞 刘芳 王彩霞 陈峥宏 洪伟 蔡梦迪 张峥嵘 綦廷娜 廖永慧 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期213-220,共8页
构建高效严谨型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统。将来源于pET28a 的T7-lac 操纵子与来源于pSY6 的II 型内含子组装构建大肠杆菌IPTG 诱导型Targetron 质粒系统。以lacZ 基因为例,选择lacZ-635s 和lacZ-1063a 两个位点为靶位点,利用构建... 构建高效严谨型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统。将来源于pET28a 的T7-lac 操纵子与来源于pSY6 的II 型内含子组装构建大肠杆菌IPTG 诱导型Targetron 质粒系统。以lacZ 基因为例,选择lacZ-635s 和lacZ-1063a 两个位点为靶位点,利用构建的IPTG 诱导型Targetron 系统进行基因打靶,通过分析诱导前和诱导后II 型内含子在靶位点的插入效率,验证大肠杆菌IPTG 诱导型Targetron 系统严谨性和打靶效率。最后,通过优化诱导剂浓度及诱导时间,建立高效严谨的诱导型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统。在没有IPTG 诱导时,II 型内含子在两个位点均不能插入,打靶效率均为0;当加入0.5 mmol/L IPTG 诱导45 min 时,其在lacZ-635s 位点的打靶效率提高到90.8±5.5%,在lacZ-1063a 位点的打靶效率提高到92.6±2.4%。成功建立高效严谨型大肠杆菌Targetron 基因打靶系统,旨为II 型内含子的机理研究及应用奠定基础。 展开更多
关键词 Targetron II 型内含子 诱导系统 大肠杆菌 LACZ
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组织蛋白酶B通过瞬时受体电位黏蛋白-1对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体活化的影响 预览
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作者 段娟娟 张启芳 +2 位作者 黄宗华 曾红梅 柏华 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期208-215,共8页
目的探索在细胞氧化应激模型和特异性基因沉默细胞模型中,组织蛋白酶B(CTSB)通过瞬时受体电位黏蛋白-1(TRPML1)对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的影响。方法对体外培养的BV2细胞分别用H2O2、钙敏感性受体激动剂... 目的探索在细胞氧化应激模型和特异性基因沉默细胞模型中,组织蛋白酶B(CTSB)通过瞬时受体电位黏蛋白-1(TRPML1)对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的影响。方法对体外培养的BV2细胞分别用H2O2、钙敏感性受体激动剂GdCl3、CTSB抑制剂CA-074Me单独或同时处理,用酶联免疫吸附实验方法检测白细胞介素-1β(IL-1β)和半胱天冬酶-1-蛋白;用定量PCR方法检测各组BV2细胞的NLRP3mRNA。用MTT法检测各组BV2细胞生长活力。用定量PCR方法检测BV2细胞中胱抑素C和TRPML1的mRNA,用Westernblot检测TRPML1、CTSB、组织蛋白酶D(CTSD)、组织蛋白酶L(CTSL)、组织蛋白酶V(CTSV)蛋白。针对TRPML1基因靶序列设计特异性小干扰RNA(siRNA),在BV2细胞中建立TRPML1基因沉默细胞株(命名为Tr-si-BV2细胞),通过H2O2处理,再用Westernblot检测Tr-si-BV2细胞或对照组细胞中的TRPML1、CTSB和转录因子EB(TFEB)蛋白。结果用H2O2处理后,BV2细胞中半胱天冬酶-1蛋白和NLRP3mRNA表达增加,加用GdCl3处理后,BV2细胞中IL-1β显著增加(P=0.0036);使用CA-074Me处理后,NLRP3mRNA(P=0.037)、半胱天冬酶-1(P=0.021)、IL-1β(P=0.036)均显著减少。H2O2组和H2O2+GdCl3组的细胞生长较慢。在H2O2浓度为200μmol/L的处理组,BV2细胞中CTSBmRNA与TRPML1mRNA、或CTSB与TRPML1蛋白的表达均有相似的变化;沉默TRPML1基因表达水平后能够抑制H2O2诱导的CTSB蛋白表达。组织蛋白酶CTSD、CTSL、CTSV的变化不受H2O2处理浓度高低的影响。在进行TRPML1基因沉默处理的BV2细胞中,H2O2+siRNA处理组与H2O2处理组比较,CTSB蛋白的表达显著减少(P=0.021)。结论在小胶质细胞的氧化应激模型中,CTSB具有调节NLRP3炎症小体活化的作用,这种作用有可能通过钙离子通道蛋白TRPML1介导。 展开更多
关键词 过氧化氢 组织蛋白酶B 炎症小体 基因沉默 瞬时受体电位黏蛋白-1
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反馈激活STAT3调控HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药的机制 预览
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作者 胡晓红 柏华 +2 位作者 段娟娟 雷秀 张启芳 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第4期305-310,共6页
目的探讨白介素-6(IL-6)在HER2阳性BT-474乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及其相关分子机制。方法建立BT-474耐拉帕替尼细胞株(BT-474R)。Western blot检测耐药标志蛋白P-gp的表达,MTT法检测BT-474R细胞的IC50。Caspase-Glo?3/7法检测... 目的探讨白介素-6(IL-6)在HER2阳性BT-474乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及其相关分子机制。方法建立BT-474耐拉帕替尼细胞株(BT-474R)。Western blot检测耐药标志蛋白P-gp的表达,MTT法检测BT-474R细胞的IC50。Caspase-Glo?3/7法检测拉帕替尼BT-474R与BT-474细胞的Caspase3/7酶活性的变化。Western blot法检测IL-6、p-STAT3、STAT3、Cleaved Caspase 3的蛋白表达水平;RNAi法沉默STAT3基因表达;Caspase-Glo?3/7法和Annexin V-FITC/PI染色检测沉默后细胞凋亡程度。结果 BT-474R组P-gp表达水平显著高于BT-474组(P<0.05)。拉帕替尼增强STAT3活性,沉默STAT3基因可恢复BT-474R细胞对拉帕替尼的敏感度、增加cleaved caspase 3蛋白表达水平和Caspase3/7酶的活性(P<0.01)。沉默STAT3增强了拉帕替尼诱导的耐药细胞凋亡(P<0.01)。拉帕替尼诱导的IL-6表达和分泌激活STAT3,用IL-6抗体抑制拉帕替尼诱导的IL-6,可以阻止拉帕替尼刺激STAT3活性。结论拉帕替尼通过诱导BT-474细胞分泌IL-6激活STAT3信号通路,增加HER2阳性乳腺癌细胞对拉帕替尼的耐药性。 展开更多
关键词 HER2阳性乳腺癌 拉帕替尼 白介素-6 (IL-6) 耐药性
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阿尔茨海默病患者不同脑区SOD-2与SIRT3的表达水平及相关性 预览
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作者 向洁 曹坤 +5 位作者 董阳婷 曾晓晓 徐毅 冉龙艳 邓婕 官志忠 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第5期497-502,共6页
目的:探讨过氧化物酶2(SOD-2)与沉默信息调节因子-3(SIRT3)在阿尔兹海默病(AD)患者不同脑区的表达,评估两者的相关性。方法:10例AD患者(AD组)和10例同龄正常人(对照组)尸体解剖后的脑组织,选择颞叶、额叶、海马和小脑脑区,应用免疫组织... 目的:探讨过氧化物酶2(SOD-2)与沉默信息调节因子-3(SIRT3)在阿尔兹海默病(AD)患者不同脑区的表达,评估两者的相关性。方法:10例AD患者(AD组)和10例同龄正常人(对照组)尸体解剖后的脑组织,选择颞叶、额叶、海马和小脑脑区,应用免疫组织化学方法检测不同脑组织中SOD-2及SIRT3的分布和表达,采用Spearman分析在不同脑区SOD-2与SIRT3表达水平的相关性。结果:与对照组相比,AD患者颞叶、额叶、海马中SOD-2和SIRT3阳性细胞数及IOD值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);而在小脑中SOD-2及SIRT3表达较弱,且两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);AD患者的颞叶、额叶、海马中SOD-2与SIRT3的表达呈正相关(r^2=0.425,P=0.041;r^2=0.411,P=0.046;r^2=0.402,P=0.049),而在小脑中则无明显相关关系(r^2=0.031,P=0.624)。结论:AD患者大脑颞叶、额叶、海马中SOD-2和SIRT3表达水平降低,且两者呈现一定的相关性,可能与该病的神经病理学改变有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 大脑 过氧化物酶-2 沉默信息调节因子3 免疫组织化学
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氯化锂对APP/PS1双转基因小鼠脑组织中β淀粉样蛋白含量的影响 预览
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作者 向洁 曾晓晓 +5 位作者 曹坤 董阳婷 徐毅 冉龙艳 邓婕 官志忠 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第5期503-508,共6页
目的:探究氯化锂(LiCl)对APP/PS1双转基因小鼠脑组织中β-淀粉样肽(Aβ)含量的影响。方法:用PCR及琼脂糖电泳方法分选4月及8月龄野生型及APP/PS1双转基因小鼠,将小鼠分为野生型(WT)组、WT+Li组、APP/PS1组及APP/PS1+Li组4组(n=6),WT+Li... 目的:探究氯化锂(LiCl)对APP/PS1双转基因小鼠脑组织中β-淀粉样肽(Aβ)含量的影响。方法:用PCR及琼脂糖电泳方法分选4月及8月龄野生型及APP/PS1双转基因小鼠,将小鼠分为野生型(WT)组、WT+Li组、APP/PS1组及APP/PS1+Li组4组(n=6),WT+Li组和APP/PS1+Li组小鼠采用LiCl灌胃2个月[100mg/(kg·d)],WT组及APP/PS1组采用等量生理盐水灌胃处理(试验检测时4组小鼠为6月及10月龄);采用免疫组织化学法检测6月及10月龄小鼠脑组织中老年斑数量,采用ELISA法测定小鼠脑组织内不可溶性Aβ含量。结果:灌胃结束时,与WT组小鼠比较,APP/PS1双转基因小鼠脑组织内老年斑数量、不可溶性Aβ含量均显著升高(P<0.05),10月龄小鼠更明显;与APP/PS1组小鼠比较,APP/PS1+Li组小鼠脑组织内老年斑数量及不可溶性Aβ含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LiCl可减少APP/PS1双转基因小鼠脑组织Aβ含量,这可能是其治疗精神性疾病的机制之一。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 老年斑 APP/PS1双转基因小鼠 Β-淀粉样肽 氯化锂 免疫组织化学法
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贵州苗药方“四大血”对CIA大鼠滑膜血管增生的作用机制 预览
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作者 袁桃花 黄宇键 +3 位作者 李佳豪 曹恒 吴昌学 吴宁 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期824-829,F0003共7页
目的研究贵州苗药方“四大血”(SX)对胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)大鼠滑膜血管增生的作用机制。方法42只SD大鼠随机分成“四大血”高、中、低剂量组(SX 40g/kg组、SX 20g/kg组、SX 10g/kg组),雷公藤多苷片对照组(GTW)、空白对照组(Nor)... 目的研究贵州苗药方“四大血”(SX)对胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)大鼠滑膜血管增生的作用机制。方法42只SD大鼠随机分成“四大血”高、中、低剂量组(SX 40g/kg组、SX 20g/kg组、SX 10g/kg组),雷公藤多苷片对照组(GTW)、空白对照组(Nor)、模型组(Mod),每组7只。构建牛Ⅱ型CIA大鼠模型。测量大鼠后肢足跖的肿胀程度并进行关节炎指数(AI)评分,蛋白免疫印记法检测滑膜组织中人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的表达,实时荧光定量法检测大鼠滑膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测大鼠血清VEGF的表达水平。结果 GTW组及SX各治疗组关节炎指数(AI)评分和足肿度都小于Mod组(P<0.01)。在光镜下观察大鼠足趾病理组织切片,Mod组可见大量炎性细胞浸润,各层组织结构混乱。与Mod组相比,SX组和GTW组炎性细胞浸润明显下降,纤维组织增生水肿减轻,炎性细胞数减少(P<0.01);血清中VEGF含量降低(P<0.01);GTW和SX40g/kg、10g/kg剂量组滑膜组织中VEGF、VEGFR-2mRNA的表达水平均降低(P<0.05,P<0.01);GTW组、SX组关节滑膜组织中PTEN的表达上升(P<0.05,P<0.01);SX组和GTW组AKT、PI3K蛋白表达下调(P<0.01)。结论 SX能上调负调控蛋白PTEN,进而减缓PI3K/AKT通路的活化程度,下调VEGF、VEGFR-2的表达。本研究为RA的治疗提供了新靶点。 展开更多
关键词 苗药验方“四大血” 类风湿性关节炎 PTEN/PI3K/AKT通路
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Y染色体DNA遗传标记在汉藏语系民族研究中的应用 预览
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作者 张秀秀 何燕 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期373-378,共6页
Y染色体DNA存在严格的父系遗传和非重组等特性,其上单核T酸多态性(Y-SNP)和短串联重复序列(Y-STR)已广泛用于人群或族群的父系遗传背景研究;本文针对Y染色体常用遗传标记Y-SNP和Y-STR的特性,综述其在汉藏语系民族的起源、迁徙和融合等... Y染色体DNA存在严格的父系遗传和非重组等特性,其上单核T酸多态性(Y-SNP)和短串联重复序列(Y-STR)已广泛用于人群或族群的父系遗传背景研究;本文针对Y染色体常用遗传标记Y-SNP和Y-STR的特性,综述其在汉藏语系民族的起源、迁徙和融合等相关研究中扮演的角色和重要作用。 展开更多
关键词 Y-SNP Y-STR 民族起源 民族迁徙 汉藏语系民族
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贵州土家族16个Y-SNP多态性研究 预览
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作者 张秀秀 喻艳琴 +6 位作者 田薇 李鸣 王婵娟 张婷 单可人 朱卫芳 何燕 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期379-385,共7页
目的:调查贵州土家族人群Y染色体上16个单核苷酸多态性(SNP)的遗传特点,探讨该人群与其他民族群体的遗传关系。方法:采用SNapShot法对68例贵州土家族男性个体16个Y-SNP位点进行复合扩增检测,用直接计数法计算等位基因频率、单倍型频率... 目的:调查贵州土家族人群Y染色体上16个单核苷酸多态性(SNP)的遗传特点,探讨该人群与其他民族群体的遗传关系。方法:采用SNapShot法对68例贵州土家族男性个体16个Y-SNP位点进行复合扩增检测,用直接计数法计算等位基因频率、单倍型频率与单倍群频率,运用IBM SPSS Statistics 24软件进行主成分分析(PCA);用Surfer 12软件根据采样地点的经纬度和主成分1、2、3绘制等值线图。结果:贵州土家族人群16个Y-SNP位点中M48、M407、M119、SRY465、M159的基因多样性(GD)值为0,其余11个Y-SNP位点的GD值的范围为0.029~0.497;16个Y-SNP位点共检出11种单倍型,单倍型多样性值(HD)为0.792;与已报道的中国南方8个少数民族单倍群分布频率比较,PCA、进化树与等值线图的结果基本相符。结论:从父系遗传角度分析,贵州土家族可能与湖南土家族、云南彝族、云南景颇族、云南汉族、贵州水族发生了基因交融,但又保留了其大部分独特的父系遗传特征。 展开更多
关键词 土家族 Y染色体 单核苷酸多态性 遗传多态性 贵州
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22个Y-SNP在贵州满族人群的分布 预览
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作者 张秀秀 国学红 +6 位作者 喻艳琴 朱卫芳 张婷 王婵娟 单可人 何燕 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期386-392,共7页
目的:调查贵州满族人群Y染色体上22个单核苷酸多态性(SNP)位点的分布情况,并探讨该人群与其他民族群体的遗传关系。方法:采用SNapShot法对70例贵州满族男性个体22个Y-SNP位点进行复合扩增检测,用直接计数法计算等位基因频率、单倍型频... 目的:调查贵州满族人群Y染色体上22个单核苷酸多态性(SNP)位点的分布情况,并探讨该人群与其他民族群体的遗传关系。方法:采用SNapShot法对70例贵州满族男性个体22个Y-SNP位点进行复合扩增检测,用直接计数法计算等位基因频率、单倍型频率与单倍群频率,运用SPSS 24软件进行主成分分析;根据单倍群频率用Arlequin 3.5软件计算13个群体的遗传距离(Fst)值,并根据Fst值用MEGA 7.0软件中的Neighbor-Joining法绘制系统进化树。结果:贵州满族群体22个Y-SNP位点的基因多样性值(GD)为0.028 6~0.492 3,22个Y-SNP位点所组成的单倍型共检出11种,单倍型多样性值(HD)为0.740 4;与已报道的中国12个民族人群单倍群分布频率比较,贵州满族与其他群体的Fst值介于0.162 8~0.497 2,其中贵州满族与新疆锡伯族之间的遗传距离最小(0.162 8),与内蒙鄂伦春族之间的遗传距离最大(0.497 2);主成分分析和聚类分析的结果基本一致。结论:从父系遗传角度分析,贵州满族既受其他民族基因融合的影响,又保留了北方民族的特征。 展开更多
关键词 满族 贵州 Y染色体 单核苷酸多态性 遗传多态性
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外源性H2S对血管性痴呆大鼠海马MDA、SOD、Cyt C表达的影响 预览
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作者 刘雨霞 郑菊 +5 位作者 肖子宇 张文萍 李毅 吴昌学 官志忠 肖雁 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期393-398,405共7页
目的:探讨外源性硫化氢(H2S)对血管性痴呆大鼠(VaD)学习记忆能力、脑组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及神经元细胞色素C(Cyt C)表达的影响。方法:60只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(VaD)、阳性对照... 目的:探讨外源性硫化氢(H2S)对血管性痴呆大鼠(VaD)学习记忆能力、脑组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及神经元细胞色素C(Cyt C)表达的影响。方法:60只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(VaD)、阳性对照组(Nimodipine)、NaSH低剂量组(Low-NaSH)及NaSH高剂量组(High-NaSH),除假手术组(仅分离双侧颈总动脉但不结扎)外,其余4组大鼠采用改良二血管法复制大鼠VaD模型,造模后阳性对照组给予尼莫地平10 mg/(kg·d)灌胃给药,NaSH低、高剂量组分别给予30μmoL/(kg·d)、100μmoL/(kg·d) NaSH灌胃给药,模型组及假手术组均给予等量生理盐水灌胃;给药30 d时,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,水迷宫测试结束后采用BCA蛋白定量法测定样本蛋白浓度记为C样本,结合标准曲线计算组织中MDA含量;用BCA法测定样本蛋白浓度C样本,计算组织中SOD活力单位;Western blot法检测海马胞浆Cyt C表达。结果:与Sham组比较,VaD组大鼠的学习记忆能力显著下降,神经元胞浆蛋白中Cyt C表达显著升高,脑组织中MDA含量显著增多、SOD活性显著升高(P<0.01);与VaD组大鼠比较,加NaSH处理后,大鼠学习记忆能力显著提高,神经元胞浆蛋白中Cyt C表达显著降低、脑组织中MDA含量及SOD活性均显著降低(P<0.01),与阳性对照组结果相近。结论:NaSH可改善VaD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与NaSH降低大鼠海马的氧化应激水平、保护神经元细胞中线粒体功能有关。 展开更多
关键词 痴呆 血管性 硫化氢 细胞色素C 氧化应激 水迷宫 丙二醛 超氧化物歧化酶
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不同时间氧糖剥夺再灌注对SH-SY5Y细胞线粒体自噬及功能的影响 预览
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作者 刘雨霞 郑菊 +5 位作者 张文萍 李毅 吴昌学 齐晓岚 官志忠 肖雁 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期399-405,共7页
目的:探讨不同时点氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞线粒体自噬及功能改变。方法:利用无糖DMEM及三气培养箱对SH-SY5Y细胞进行OGD/R,根据OGD/R不同时间将细胞分为control组、3 h/12 h组、3 h/24 h组、6 h/12 h组及6 ... 目的:探讨不同时点氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞线粒体自噬及功能改变。方法:利用无糖DMEM及三气培养箱对SH-SY5Y细胞进行OGD/R,根据OGD/R不同时间将细胞分为control组、3 h/12 h组、3 h/24 h组、6 h/12 h组及6 h/24 h组,OGD/R后采用流式细胞术检测细胞线粒体膜电位及活性氧(ROS)含量,采用Western blot法检测线粒体蛋白Beclin1及P62表达。结果:与control组比较,OGD/R后SH-SY5Y细胞线粒体膜电位发生去极化(P<0.01)、胞内ROS含量升高(P<0.01),3 h/24 h组、6 h/12 h组及6 h/24 h组线粒体Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01),,3 h/12 h、6 h/24 h组线粒体P62蛋白表达升高(P<0.05);OGD/R各组间比较,3 h/24 h组线粒体去极化程度、细胞内ROS含量及线粒体Beclin1蛋白表达水平均较3 h/12 h组显著升高(P<0.01),且6 h/24 h组ROS含量最高(P<0.01)。结论:SH-SY5Y细胞OGD/R后线粒体功能受损且线粒体自噬活性升高,且随着缺血时间及再灌注时间增加线粒体受损加重,线粒体自噬也增加。 展开更多
关键词 SH-SY5Y 再灌注 流式细胞术 活性氧 线粒体膜电位 线粒体自噬 氧糖剥夺
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燃煤型氟中毒对大鼠脑组织NO含量及NOS mRNA和蛋白表达的影响
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作者 桂传枝 冉龙艳 官志忠 《中国地方病防治杂志》 CAS 2019年第1期4-7,共4页
目的观察燃煤型氟中毒对大鼠脑组织NO含量及NOS mRNA和蛋白表达的影响。方法健康SD大鼠24只,体质量100~120g,按体质量随机分为3组,每组8只。对照组饲以常规饲料,低氟组和高氟组以氟病区燃煤烘烤的玉米为主要饲料(含氟量分别为11.30、104... 目的观察燃煤型氟中毒对大鼠脑组织NO含量及NOS mRNA和蛋白表达的影响。方法健康SD大鼠24只,体质量100~120g,按体质量随机分为3组,每组8只。对照组饲以常规饲料,低氟组和高氟组以氟病区燃煤烘烤的玉米为主要饲料(含氟量分别为11.30、104.20 mg/kg),来复制氟中毒大鼠模型,染氟时间为3个月。用氟离子选择电极法检测动物尿氟、骨氟、脑氟含量,观察大鼠海马CA1区神经元病理变化,用Biomias 2000图像分析系统测试大鼠海马CA1区神经元胞体平均面积、周长及平均灰度值,比色法测定脑组织NOS活性,硝酸还原酶法测定脑组织NO含量,蛋白印迹方法测定NOS蛋白水平;实时荧光定量PCR方法测定NOS mRNA水平。结果低、高氟组大鼠尿氟为(2.61±0.11)(4.39±0.13)mg/L,骨氟(2 734±137)(4323±203)mg/kg,脑氟(1.00±0.08)(1.14±0.02)mg/kg;与对照组尿氟(1.59±0.10)mg/L、骨氟(1 399±152)mg/kg、脑氟(0.41±0.06)mg/kg比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);尼氏染色显示,与对照组大鼠神经元平均灰度值(119.0±9.7)比较,染氟组大鼠均明显增加[低氟(153.0±8.9),高氟(159.4±2.9)];低氟组、高氟组大鼠脑组织总NOS活性[(8.57±2.40)、(11.49±3.10)kU/g]较对照组(16.80±3.20)kU/g显著性下降(P<0.05),高氟组大鼠脑组织NO含量(2.05±0.25)μmol/L较对照组(4.68±1.78)μmol/L显著性降低(P<0.05)。低氟组、高氟组大鼠脑组织NOS蛋白表达水平[(0.53±0.24),(0.82±0.28)]较对照组(0.17±0.02)显著增加(P<0.05/0.01),低氟组、高氟组大鼠脑组织NOS mRNA水平[(1.37±0.07),(1.38±0.08)]均较对照组(1.53±0.17)显著下降(P<0.05)。结论低剂量氟具有一定神经毒性,表现为食用燃煤型氟中毒病区燃煤烘烤的粮食低剂量、早期可导致动物脑氟含量增高,使大鼠海马CA1区神经元蛋白合成功能下降,脑组织NOS活性、NO含量、NOS蛋白及mRNA表达改变。 展开更多
关键词 氟化物中毒 大鼠 NONOS
α3神经型尼古丁受体基因下调对SH-SY5Y DYN1和AP180表达的影响 预览
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作者 吕园园 王晓玲 +3 位作者 邓于新 李毅 官志忠 齐晓岚 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期2225-2227,共3页
目的研究α3神经型尼古丁受体(nAChR)基因下调对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)发动蛋白(DYN)1和衔接蛋白(AP)180蛋白表达的影响,探讨α3nAChR的在AD发病机制中的神经保护作用。方法将重组质粒α3nAChRshRNAPlasmid转染到SH-SY5Y细胞中,48... 目的研究α3神经型尼古丁受体(nAChR)基因下调对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)发动蛋白(DYN)1和衔接蛋白(AP)180蛋白表达的影响,探讨α3nAChR的在AD发病机制中的神经保护作用。方法将重组质粒α3nAChRshRNAPlasmid转染到SH-SY5Y细胞中,48h后收集细胞,用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)和Western印迹法检测α3nAChR、DYN1和AP180蛋白表达。结果SH-SY5Y细胞转染α3nAChRshRNAPlasmid后,与对照组及空载组比较,α3nAChR、DYN1、AP180mRNA及蛋白水平均明显降低(P<0.05)。结论通过转染使SH-SY5Y细胞α3nAChR表达成功下调;α3nAChR下调降低细胞DYN1和AP180表达,可能影响了突触囊泡回收从而影响突触功能,与AD发病有一定关联。 展开更多
关键词 α3尼古丁受体 SH-SY5Y细胞 DYN1 AP180
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PPARγ激动剂对抗经氟诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤 预览
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作者 刘仙红 陈丹 +7 位作者 曾晓晓 董阳婷 邓婕 齐晓岚 吴昌学 李毅 宋辉 官志忠 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第10期1149-1153,共5页
目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对氟诱导人神经母瘤SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞,分为对照组、染氟组(NaF组)、单纯PPARγ激动剂组(R组)、干预组(R+NaF组,先加入1... 目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对氟诱导人神经母瘤SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞,分为对照组、染氟组(NaF组)、单纯PPARγ激动剂组(R组)、干预组(R+NaF组,先加入15d-PGJ22h后再加NaF),各组处理后培养48h,用蛋白印记法检测SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平,微量酶标法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,分析PPARγ蛋白与SOD活性及MDA含量的相关关系。结果:与对照组相比,R组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白水平、SOD活性及MDA含量无明显改变(P〉0.05),NaF组SHSY5Y细胞PPARγ蛋白水平和SOD活性明显降低,MDA含量明显增加(P〈0.05);R+NaF组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平及SOD活性明显高于NaF组、MDA含量明显低于NaF组(P〈0.05);SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平与SOD活性呈正相关关系(r=0.771,P〈0.05),与MDA含量呈负相关关系(r=-0.762,P〈0.05)。结论:过量氟会导致体外培养的SH-SY5Y细胞发生氧化损伤,而PPARγ激动剂15dPGJ2处理后可减轻氟诱导的细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖激活受体Γ 激动剂 氧化性应激 超氧化物歧化酶 丙二醛
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慢性氟中毒大鼠学习记忆能力与血清、海马及皮质脑组织中PGC-1α水平的相关性 预览
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作者 刘仙红 陈丹 +7 位作者 曾晓晓 董阳婷 邓婕 齐晓岚 吴昌学 李毅 宋辉 官志忠 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第10期1154-1158,1168共6页
目的:研究慢性氟中毒大鼠脑组织中过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子(PGC-1α)水平,探讨PGC-1α与学习记忆能力的关系。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组(饮水含氟量〈0.5mg/L)、低氟组(饮水含氟量为5.0mg/L)、高氟组(饮水... 目的:研究慢性氟中毒大鼠脑组织中过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子(PGC-1α)水平,探讨PGC-1α与学习记忆能力的关系。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组(饮水含氟量〈0.5mg/L)、低氟组(饮水含氟量为5.0mg/L)、高氟组(饮水含氟量为50.0mg/L),染氟时间分别为3个月及6个月;分别于染氟3月及6月时,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用氟离子选择电极法测定大鼠血清氟含量,用蛋白印记方法检测大鼠海马及皮质组织中PGC-1α蛋白表达水平,分析大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白水平与血清氟含量及空间学习记忆能力的相关性。结果:染氟大鼠逃避潜伏期较对照组显著延长、穿越平台次数及逗留平台象限时间明显缩短,以染氟6月组大鼠更明显(P〈0.05);血清氟含量随着染氟浓度的增高及染氟时间的延长而升高,高氟组大鼠血氟含量显著高于对照组,以染氟6月组大鼠尤为明显(P〈0.05);染氟大鼠海马区和皮质区的PGC-1α蛋白表达水平随着染氟浓度的增加和染氟时间的延长而逐渐下降,染氟6月组大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白与血氟含量呈负相关(r=-0.574、-0.516,P〈0.05)、与大鼠逗留平台象限时间呈正相关(r=0.76、0.60,P〈0.05)、与逃避潜伏期呈负相关(r=-0.542、-0.58,P〈0.05)。结论:慢性氟中毒大鼠大脑组织PGC-1α蛋白表达水平降低,可能是氟中毒大鼠空间学习记忆能力降低的机制之一。 展开更多
关键词 氟中毒 过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子 学习记忆能力 脑组织 大鼠 SPRAGUE-DAWLEY
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综合治理后贵州省燃煤型地氟病区人群健康状况研究进展 预览
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作者 官志忠 吴昌学 齐晓岚 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第10期1124-1128,共5页
地方性氟中毒(endemic fluorosis)简称地氟病,是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在3种类型,即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家,燃煤型地... 地方性氟中毒(endemic fluorosis)简称地氟病,是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在3种类型,即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家,燃煤型地氟病主要发生在我国中西部13个省、市、区,受威胁人口3430万人。 展开更多
关键词 燃煤污染 氟中毒 氧化性应激 综合治理 健康教育 效果评价
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α7神经型尼古丁受体激动剂PNU282987对小鼠海马组织突触相关蛋白的影响 预览
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作者 王晓玲 邓于新 +2 位作者 董阳婷 官志忠 齐晓岚 《中国老年学杂志》 北大核心 2018年第2期257-259,共3页
目的 探讨特异性激动小鼠α7神经型尼古丁受体(α7n AChR)水平对海马组织中突触相关蛋白表达的影响。方法选取6月龄非转基因C57雄性小鼠32只,随机分为对照组(Control),腹腔注射0.5、1.0 mg/kg、3.0 mg/kg PNU282987组各8只。采用Rea... 目的 探讨特异性激动小鼠α7神经型尼古丁受体(α7n AChR)水平对海马组织中突触相关蛋白表达的影响。方法选取6月龄非转基因C57雄性小鼠32只,随机分为对照组(Control),腹腔注射0.5、1.0 mg/kg、3.0 mg/kg PNU282987组各8只。采用Real-time PCR法和蛋白免疫印迹(Western印迹)法分别测定小鼠海马组织中囊泡相关蛋白突触素(Syn)、突触小体相关蛋白(SNAP)-25和突触后致密物(PSD)-95 mRNA及蛋白表达水平的变化。结果 与对照组相比,1.0 mg/kg PNU282987组、3.0 mg/kg PNU282987组中突触相关蛋白Syn、PSD-95、SNAP-25的mRNA和蛋白表达水平均显著增高。结论 特异性激动小鼠α7n AChR能够使海马组织中突触相关蛋白水平表达增加。这可能提示了α7n AChR与突触密切相关,这可能与其神经保护作用有关。 展开更多
关键词 α7神经型尼古丁受体 突触
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一氧化氮合酶在氟致大鼠原代海马神经细胞氧化损伤及细胞凋亡中的作用
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作者 朱丹 刘宇平 +1 位作者 桂传枝 官志忠 《环境与健康杂志》 北大核心 2018年第2期128-132,F0003共6页
目的采用一氧化氮合酶(e NOS)抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸(L-NIO)探讨一氧化氮合酶在氟致大鼠原代海马神经细胞氧化损伤及细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的大鼠海马神经细胞分为对照(空白培养基)组和Na F(0.05、0.1、0.2、0.4、... 目的采用一氧化氮合酶(e NOS)抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸(L-NIO)探讨一氧化氮合酶在氟致大鼠原代海马神经细胞氧化损伤及细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的大鼠海马神经细胞分为对照(空白培养基)组和Na F(0.05、0.1、0.2、0.4、0.5、1、2、4 mmol/L)单独染毒组及L-NIO(1、2、3、4、5、10μmol/L)单独染毒组,染毒48 h后,采用CCK-8法测定细胞活性。将大鼠海马神经细胞分为对照(空白培养基)组、Na F(0.2、1 mmol/L)单独染毒组、Na F和L-NIO联合染毒组(0.2 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO和1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO),染毒48 h后,检测细胞中e NOS蛋白和m RNA的表达水平及细胞凋亡情况以及细胞培养液中一氧化氮(NO)含量和NOS活力。结果与对照组相比,0.02-4 mmol/L Na F染毒组及4-10 mmol/L L-NIO染毒组大鼠海马神经细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P〈0.05)。与对照组相比,仅0.2、1 mmol/L Na F染毒组大鼠海马神经细胞中e NOS蛋白和m RNA的表达水平升高,除0.2 mmol/L Na F染毒组e NOS蛋白的表达水平外,差异均有统计学意义(P〈0.05)。与相同浓度Na F染毒组相比,0.2、1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO染毒组大鼠海马神经细胞中e NOS蛋白和m RNA的表达水平降低,差异均有统计学意义(P〈0.05)。与对照组相比,仅1 mmol/L Na F染毒组大鼠海马神经细胞的凋亡率升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。与相同浓度Na F染毒组相比,0.2、1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO染毒组大鼠海马神经细胞的凋亡率较低,差异均有统计学意义(P〈0.05)。与对照组相比,0.2、1 mmol/L Na F染毒组大鼠海马神经细胞培养液中NO含量和NOS活力较高。与相同浓度Na F染毒组相比,0.2、1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO组大鼠海马神经细胞培养液中NO含量和NOS活力较低,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论过量氟可致大鼠原代海马神经细胞NOS活力上升 展开更多
关键词 氟中毒 海马神经细胞 内皮型一氧化氮合酶 一氧化氮 L-亚氨基乙基鸟氨酸
基于mRNA-miRNA相互作用网络研究阿尔茨海默病机理
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作者 臧贵勇 潘开昌 +3 位作者 龙友国 余跃生 官志忠 禹文峰 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2018年第6期2776-2782,共7页
本研究基于表达谱数据系统分析了阿尔茨海默病中的差异表达基因;进一步的GO和KEGG富集分析研究了差异表达基因参与的生物学功能和生物学过程;最后通过mRNA-miRNA相互作用网络,挖掘了阿尔茨海默病中的关键基因和调控机理。研究表明,990... 本研究基于表达谱数据系统分析了阿尔茨海默病中的差异表达基因;进一步的GO和KEGG富集分析研究了差异表达基因参与的生物学功能和生物学过程;最后通过mRNA-miRNA相互作用网络,挖掘了阿尔茨海默病中的关键基因和调控机理。研究表明,990个基因在阿尔茨海默病中差异表达(p-value≤0.01,|log FC|≥2),其中332个基因(33.5%)上调,658个基因(66.5%)下调。功能富集(GO)表明,差异基因参与了Regulation of macrophage activation、Myelin sheath和structural constituent of cytoskeleton等功能。KEGG通路富集分析表明,差异基因参与了,Synaptic vesicle cycle、PI3K-Akt signaling pathway、Nicotine addiction、Dopaminergic synapse和Retrograde endocannabinoid signaling等重要的生物学通路。最后,mRNA-miRNA相互作用网络鉴定了在阿尔茨海默病中6个关键的基因,包括TP53INP1、MET、MBNL3、CEBPB、GNAS和SMARCA4,其中TP53INP1和MET在前人的研究中有报道与阿尔茨海默病密切相关,MBNL3、CEBPB、GNAS和SMARCA4是新发现的一些基因。这些基因可能参与了阿尔茨海默病的发生和发展,可以作为其调控位点和药物靶点。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 生物芯片 差异表达基因 miRNA-mRNA相互作用网络
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