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冬枣黄酮的超声波提取方法研究 预览 被引量:3
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作者 马莉 何宝国 +1 位作者 江秀丽 胡迎芬 《青岛大学医学院学报》 CAS 2014年第1期46-48,共3页
目的 探讨超声波提取冬枣黄酮的最佳条件。方法 以冬枣提取物(DJ E)的抗氧化活性为测定指标,研究超声波提取时间、料液比、提取液浓度3个因素对黄酮提取率的影响,并在单因素试验的基础上设计L9(34)正交试验。结果 超声波提取冬枣黄... 目的 探讨超声波提取冬枣黄酮的最佳条件。方法 以冬枣提取物(DJ E)的抗氧化活性为测定指标,研究超声波提取时间、料液比、提取液浓度3个因素对黄酮提取率的影响,并在单因素试验的基础上设计L9(34)正交试验。结果 超声波提取冬枣黄酮的最佳工艺为:料液比1 B25,乙醇体积分数0 7.0,提取时间30 mi n。结论 该研究优化了超声波辅助提取冬枣黄酮的工艺参数。 展开更多
关键词 黄酮 超声处理
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青岛海域浒苔蛋白提取及其抗肿瘤活性的初步研究 预览 被引量:2
2
作者 郑恒睿 李荣贵 《青岛大学医学院学报》 CAS 2014年第2期124-126,共3页
目的提取浒苔蛋白并研究其对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法用20 mol/L的Tris—HCl(pH8.0)缓冲液悬浮新鲜浒苔,悬浮液反复冻融结合超声波细胞破碎法提取其中的浒苔蛋白。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)研究浒苔蛋白对乳癌细胞E... 目的提取浒苔蛋白并研究其对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法用20 mol/L的Tris—HCl(pH8.0)缓冲液悬浮新鲜浒苔,悬浮液反复冻融结合超声波细胞破碎法提取其中的浒苔蛋白。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)研究浒苔蛋白对乳癌细胞EMT6生长的抑制作用,观察肿瘤细胞形态学的变化。建立乳癌细胞EMT6荷瘤小鼠模型,研究浒台蛋白对荷瘤小鼠瘤径和瘤体质量的影响。结果浒苔蛋白粗提率为0.54%,主要是相对分子质量约为25000的蛋白。随着浒苔蛋白浓度的增加,肿瘤细胞存活率逐渐降低,抑制率逐渐增加;光镜观察结果显示,浒台蛋白作用48h后,肿瘤细胞出现明显的形态学改变。瘤体内注射浒苔蛋白可显著缩小瘤径和瘤体质量,抑瘤率达25%。结论浒苔蛋白在体内、体外均能够抑制肿瘤细胞的增殖,并呈明显的量效关系。 展开更多
关键词 浒台 蛋白质类 提取法 抗肿瘤活性
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太平洋磷虾磷脂提取工艺研究及脂肪酸组成分析 预览 被引量:5
3
作者 吕睛 隋晓 +2 位作者 刘坤 席璇 韩玉谦 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期236-240,共5页
本研究以太平洋磷虾为原料,着重探讨了乙醇浓度、液固比、提取温度、提取时间对磷虾磷脂得率及纯度的影响。结合单因素实验与正交实验分析,结果表明:最佳工艺条件为乙醇浓度95%、液固比6mL/g,提取时间4h,提取温度40℃,在此工艺... 本研究以太平洋磷虾为原料,着重探讨了乙醇浓度、液固比、提取温度、提取时间对磷虾磷脂得率及纯度的影响。结合单因素实验与正交实验分析,结果表明:最佳工艺条件为乙醇浓度95%、液固比6mL/g,提取时间4h,提取温度40℃,在此工艺条件下粗磷脂得率为17.58%,纯度为46.09%。再经4℃丙酮沉降后,磷脂纯度为78.85%。产物通过气相色谱分析,不饱和脂肪酸占52.46%,在多不饱和脂肪酸中EPA和DHA含量之和最高,其占总脂肪酸含量的24.51%。 展开更多
关键词 太平洋磷虾 磷脂 脂肪酸分析
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基于电子鼻技术的鲈鱼新鲜度评价 预览 被引量:52
4
作者 赵梦醒 丁晓敏 +2 位作者 曹荣 雷敏 刘淇 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期143-147,共5页
采用电子鼻获取不同保藏时间鲈鱼(Lateolabraxjaponicus)鱼鳃和鱼肉的气味信息,通过对数据进行主成分分析(PCA)、线性判别分析(LDA)和负荷加载分析,并结合感官评价、挥发性盐基氮(TVB-N)和菌落总数进行分析,建立一种基于电... 采用电子鼻获取不同保藏时间鲈鱼(Lateolabraxjaponicus)鱼鳃和鱼肉的气味信息,通过对数据进行主成分分析(PCA)、线性判别分析(LDA)和负荷加载分析,并结合感官评价、挥发性盐基氮(TVB-N)和菌落总数进行分析,建立一种基于电子鼻技术判别鲈鱼新鲜度的方法。结果表明,随着保藏时间的延长,电子鼻传感器的响应强度逐渐增大,鲈鱼鱼鳃和鱼肉的气味随之发生变化,且鱼鳃的气味响应强度大于鱼肉,其中2号传感器对第l主成分的贡献率最大;电子鼻分析结果与感官、TVB—N值和菌落总数结果基本一致。因此电子鼻可以用来区分不同新鲜度的鲈鱼,鱼鳃的区分效果优于鱼肉。 展开更多
关键词 电子鼻 鲈鱼 新鲜度 评价
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以蛤蜊壳为钙源的L-焦谷氨酸钙制备工艺 被引量:1
5
作者 魏玉西 崔育倩 +3 位作者 王文秀 宋惠平 柳翠青 艾桂花 《中国海洋药物》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期83-86,共4页
目的为了高值化利用海洋生物资源,以蛤蜊加工产生的大量废弃物——蛤蜊壳为钙源制备L-焦谷氨酸钙。方法蛤蜊壳经去除附着物、粉碎、水飞法处理等预处理步骤制成粉末状钙源蛤蜊壳粉,使之与L-焦谷氨酸直接进行合成反应合成L-焦谷氨酸钙... 目的为了高值化利用海洋生物资源,以蛤蜊加工产生的大量废弃物——蛤蜊壳为钙源制备L-焦谷氨酸钙。方法蛤蜊壳经去除附着物、粉碎、水飞法处理等预处理步骤制成粉末状钙源蛤蜊壳粉,使之与L-焦谷氨酸直接进行合成反应合成L-焦谷氨酸钙。为了获得最佳工艺条件,在蛤蜊壳粉过量的前提下,采用正交设计法考察了反应温度、反应时间对L-焦谷氨酸钙产量的影响,筛选了L-焦谷氨酸钙分离方法。结果在反应温度为60℃,反应时间为3h,采用真空浓缩到一定程度后再用95%乙醇使其结晶和重结晶,焦谷氨酸钙的产率最大可达88.82%。结论该工艺具有工艺简便、耗能少、产率高等特点,既可以将蛤蜊壳高值化利用制得性能优良的补钙健脑食品,又能解决蛤蜊壳对环境的污染问题。 展开更多
关键词 蛤蜊壳 L-焦谷氨酸钙 工艺条件 红外光谱
坛紫菜(Porphyra haitanensis)化学成分的研究 预览 被引量:1
6
作者 冯强 魏玉西 +2 位作者 齐君 王长云 吴同飞 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期15-18,共4页
利用硅胶色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、HPLC等技术,从坛紫菜(Porphyra haitanensis)乙醇提取物首次分离纯化得到了7个化合物,通过质谱(Ms)及核磁共振波谱(1HNMR、13CNMR)等现代波谱技术鉴定为:1,8-二羟基-9,10-蒽醌(1)... 利用硅胶色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、HPLC等技术,从坛紫菜(Porphyra haitanensis)乙醇提取物首次分离纯化得到了7个化合物,通过质谱(Ms)及核磁共振波谱(1HNMR、13CNMR)等现代波谱技术鉴定为:1,8-二羟基-9,10-蒽醌(1)、邻苯二甲酸二正丁酯(2)、邻苯二甲酸二异丁酯(3)、β-谷甾醇(4)、鲨肝醇(5)、(E)-N-2(1,3-二羟基-4-十八烯基)-十六酰胺(6)、胆甾醇(7)。其中,化合物1对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)的最低抑菌浓度(MIc)为80μg/mL。 展开更多
关键词 坛紫菜(Porphyra haitanensis) 化学成分 结构解析 抑菌活性
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亚临界1,1,1,2-四氟乙烷萃取-气相色谱-质谱法测定鱼肉中6种性激素残留 预览 被引量:9
7
作者 卢杰 冯晓梅 +3 位作者 隋晓 陈曼华 韩玉谦 薛长湖 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1487-1492,共6页
利用亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R134a)萃取技术,建立了鱼肉中6种性激素残留的气相色谱-质谱(GC—MS)分析方法。样品中的药物经过亚临界R134a萃取后,先进行冷冻过滤去脂,然后通过C18和NH2固相萃取小柱净化,最后经七氟丁酸酐衍... 利用亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R134a)萃取技术,建立了鱼肉中6种性激素残留的气相色谱-质谱(GC—MS)分析方法。样品中的药物经过亚临界R134a萃取后,先进行冷冻过滤去脂,然后通过C18和NH2固相萃取小柱净化,最后经七氟丁酸酐衍生后,采用GC—MS进行定性与定量分析。本实验确定了亚临界R134a萃取6种性激素的最佳条件为:萃取压力4MPa,萃取温度30℃,夹带剂用量6mL。在此条件下,6种性激素在5~1000μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99;检出限为0.2~1μg/kg(S/N=3)。在3种浓度添加水平(1,5和10μg/b)下,6种激素的平均回收率为70.5%~103.6%,相对标准偏差(RSD)为2.1%~12.5%。采用本方法进行实际样品检测时,在一份罗非鱼样品中检出己烯雌酚残留,残留量为14.6μg/kg。 展开更多
关键词 亚临界萃取 1 1 1 2-四氟乙烷 性激素 气相色谱-质谱 残留分析
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牛蒡葡萄酒的研制 预览
8
作者 杨启贤 亓霄 +2 位作者 崔爱英 方青秀 涂正顺 《中外葡萄与葡萄酒》 2011年第3期 60-62,共3页
以葡萄和优质新鲜的牛蒡为原料,按照一定比例,采用热处理、低温浸提、发酵、陈酿、窖藏等特殊工艺,通过控制发酵残糖的含量而制得的不同类型的、风味独特的牛蒡葡萄酒。结果表明,最佳工艺条件为牛蒡∶葡萄汁1∶5,葡萄酒专用酵母用量为0.... 以葡萄和优质新鲜的牛蒡为原料,按照一定比例,采用热处理、低温浸提、发酵、陈酿、窖藏等特殊工艺,通过控制发酵残糖的含量而制得的不同类型的、风味独特的牛蒡葡萄酒。结果表明,最佳工艺条件为牛蒡∶葡萄汁1∶5,葡萄酒专用酵母用量为0.06g/L,发酵温度为18~22℃。 展开更多
关键词 牛蒡葡萄酒 生产技术 研发
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贝类加工废弃物复合海鲜调味料的制备工艺 预览 被引量:17
9
作者 陈超 魏玉西 +3 位作者 刘慧慧 殷邦忠 赵玲 刘淇 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期433-436,共4页
通过对牡蛎汁、蛤蜊汁蛋白质含量测定及其酶解优化方法探讨,制得牡蛎汁、蛤蜊汁酶解液,并与扇贝裙边酶解液调配出复合调味料。结果表明,牡蛎汁和蛤蜊汁中多肽以及蛋白质含量较高,其酶解优化方案为使用酸性蛋白酶在pH3、60℃酶解5h,牡蛎... 通过对牡蛎汁、蛤蜊汁蛋白质含量测定及其酶解优化方法探讨,制得牡蛎汁、蛤蜊汁酶解液,并与扇贝裙边酶解液调配出复合调味料。结果表明,牡蛎汁和蛤蜊汁中多肽以及蛋白质含量较高,其酶解优化方案为使用酸性蛋白酶在pH3、60℃酶解5h,牡蛎汁和蛤蜊汁中多肽和蛋白质水解度为0.929。将牡蛎汁、蛤蜊汁酶解液与扇贝裙边酶解液调配制成的复合海鲜调味料,味道鲜美,游离氨基酸态氮含量(15.6mg/mL)高于市售同类产品(13.0mg/mL),且其中甘氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸、丝氨酸和脯氨酸7种重要呈味氨基酸含量约占总游离氨基酸的50%。 展开更多
关键词 蛤蜊汁 牡蛎汁 扇贝裙边 酶解 水解度 复合海鲜调味料
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金樱子发酵果酒生产工艺的研究 预览 被引量:2
10
作者 覃民扬 庄席福 +3 位作者 张有余 苏秀美 黄义华 涂正顺 《酿酒科技》 2010年第12期 76-77,共2页
利用野生金樱子果实为原料,选用葡萄酒酵母法国K1,果胶酶EXV等研制金樱子酒。探讨了金樱子发酵酒的生产工艺及关键技术,结果表明,发酵生产的金撄子果酒香气浓郁宜人,风格独特,典型性强。
关键词 果酒 金樱子 发酵 工艺
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一种促进蓝藻生长的海洋细菌的分离与鉴定 预览 被引量:7
11
作者 史亚萍 张宏 +1 位作者 郭道森 李荣贵 《青岛大学学报:工程技术版》 CAS 2010年第2期 41-46,共6页
从青岛海域的海水中分离出了一株促进蓝藻增殖的海洋细菌QD-3。该菌革兰氏染色呈阳性,周生鞭毛,其形态随着培养时间的不同而改变,培养10 h时,细胞呈短杆状,继续培养至48 h细胞呈球状。16S rDNA序列分析表明,该菌与乙酰微小杆菌DSM20416... 从青岛海域的海水中分离出了一株促进蓝藻增殖的海洋细菌QD-3。该菌革兰氏染色呈阳性,周生鞭毛,其形态随着培养时间的不同而改变,培养10 h时,细胞呈短杆状,继续培养至48 h细胞呈球状。16S rDNA序列分析表明,该菌与乙酰微小杆菌DSM20416(ExiguobacteriumacetylicumDSM20416)的同源性最高,16S rDNA的同源性高达99.6%,结合菌株的菌落形态、个体特征及生理生化反应,将QD-3菌株鉴定为乙酰微小杆菌QD-3(E.acetylicumQD-3)。该研究对经济蓝藻养殖和有害蓝藻控制研究有一定的参考价值。 展开更多
关键词 乙酰微小杆菌 鉴定 蓝藻 促进
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冬枣提取物对羟自由基诱导氧化损伤的抑制作用 被引量:2
12
作者 胡迎芬 马爱国 +3 位作者 蒋正尧 韩秀霞 马莉 陶丽萍 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期169-171,共3页
冬枣(ZizyhpusJujuba.cvdongzao)为鼠李科枣属植物,主要分布在山东、河北等地。据报道冬枣富含黄酮类物质,大量研究表明黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性。目前国内的研究报道,主要集中在枣树的栽培管理以及果实的贮藏、加工”... 冬枣(ZizyhpusJujuba.cvdongzao)为鼠李科枣属植物,主要分布在山东、河北等地。据报道冬枣富含黄酮类物质,大量研究表明黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性。目前国内的研究报道,主要集中在枣树的栽培管理以及果实的贮藏、加工”。本文通过体外试验研究冬枣乙醇提取物(WJE)对活性氧自由基清除和脂质过氧化抑制作用,以期为冬枣资源的开发利用提供科学依据。 展开更多
关键词 冬枣 羟自由基 氧化损伤
世界葡萄与葡萄酒概况(I) 预览 被引量:9
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作者 涂正顺 吴莹 +3 位作者 王甲佳 李甲贵 王华 李华 《中外葡萄与葡萄酒》 2009年第1期 73-75,共3页
2008年国际葡萄与葡萄酒组织(OIV)发布的统计资料,对世界葡萄与葡萄酒产业的状况和发展趋势进行了分析。本文根据2008年9月24日《第二届烟台国际葡萄酒节·葡萄酒产业高端论坛》与国际葡萄及葡萄酒组织(OIV)总裁卡斯特卢琪(Fe... 2008年国际葡萄与葡萄酒组织(OIV)发布的统计资料,对世界葡萄与葡萄酒产业的状况和发展趋势进行了分析。本文根据2008年9月24日《第二届烟台国际葡萄酒节·葡萄酒产业高端论坛》与国际葡萄及葡萄酒组织(OIV)总裁卡斯特卢琪(Federico Castellucci)先生的交流资料讲行编译,供参考。 展开更多
关键词 葡萄酒产业 世界 统计资料 发展趋势 国际 组织 总裁
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世界葡萄与葡萄酒概况(II) 预览 被引量:3
14
作者 涂正顺 吴莹 +3 位作者 王甲佳 李甲贵 王华 李华 《中外葡萄与葡萄酒》 2009年第2期 76-79,共4页
在全球范围内统计葡萄酒消费量存在极大的困难,总是会和实际有所出入。此外,在葡萄酒市场中不可忽视的工业用途(如:蒸馏酒精、醋和味美思等)的葡萄酒用量则很难统计。1996年起至今,全球葡萄酒消费量呈缓慢增长的趋势,2006年达到... 在全球范围内统计葡萄酒消费量存在极大的困难,总是会和实际有所出入。此外,在葡萄酒市场中不可忽视的工业用途(如:蒸馏酒精、醋和味美思等)的葡萄酒用量则很难统计。1996年起至今,全球葡萄酒消费量呈缓慢增长的趋势,2006年达到241亿L,预计2007年相比有小幅减少,为240.6亿L(图10)。 展开更多
关键词 葡萄酒市场 世界 全球范围 工业用途 消费量 统计 酒精 味美
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毛蚶提取物的抗氧化活性分析 预览 被引量:11
15
作者 王勇 杨静 +1 位作者 孙峋 李荣贵 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2008年第3期 11-14,共4页
目的制备毛蚶提取物并分析其抗氧化活性。方法利用Superdex-75,Sephadex LH-20凝胶柱层析等方法从毛蚶中分离纯化具有抗氧化活性的组分P3,采用铁氰化钾,DPPH等方法测定P3的还原力及清除自由基能力,同时采用茚三酮法、蒽酮法、考马... 目的制备毛蚶提取物并分析其抗氧化活性。方法利用Superdex-75,Sephadex LH-20凝胶柱层析等方法从毛蚶中分离纯化具有抗氧化活性的组分P3,采用铁氰化钾,DPPH等方法测定P3的还原力及清除自由基能力,同时采用茚三酮法、蒽酮法、考马斯亮蓝结合法、薄层层析等方法对该组分进行了定性分析。结果与结论从毛蚶中分离得到了具有抗氧化活性的组分P3,经定性分析推测该活性组分为糖肽。 展开更多
关键词 毛蚶 抗氧化 分离 纯化
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重组沙蚕激酶的诱导表达和分离纯化 预览 被引量:1
16
作者 黄琳 王斌 李荣贵 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第1期,共4页
将已构建好的表达载体pGEX-4T-2SAK转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合的沙蚕激酶蛋白,通过GST树脂亲和吸附和凝血酶酶切及冷冻干燥等步骤进行分离纯化,用SDS-PAGE分析要重组的目的蛋白及纯化后的蛋白。纯化后的沙蚕激酶... 将已构建好的表达载体pGEX-4T-2SAK转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合的沙蚕激酶蛋白,通过GST树脂亲和吸附和凝血酶酶切及冷冻干燥等步骤进行分离纯化,用SDS-PAGE分析要重组的目的蛋白及纯化后的蛋白。纯化后的沙蚕激酶经纤维平板法测定具有溶栓活性。冷冻干燥品经SDS-PAGE分析表明达到电泳纯。 展开更多
关键词 沙蚕激酶 重组融合蛋白 分离纯化
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干型樱桃酒酿制及相关技术的研究 预览 被引量:10
17
作者 杨启贤 徐莉莉 +1 位作者 王安香 涂正顺 《中国食品工业》 2008年第10期54-55,共2页
以新鲜的樱桃果实为原料,采取全汁、CO2浸渍法发酵,酿造出干型的樱桃果酒:滔色淡棕红色,颜色自然,果香纯正,酒体协调柔顺,后味绵延,具有樱桃酒的典型特征;并研究探讨了干型樱桃发酵酒的生产工艺及关键技术:发酵温度、澄清处理... 以新鲜的樱桃果实为原料,采取全汁、CO2浸渍法发酵,酿造出干型的樱桃果酒:滔色淡棕红色,颜色自然,果香纯正,酒体协调柔顺,后味绵延,具有樱桃酒的典型特征;并研究探讨了干型樱桃发酵酒的生产工艺及关键技术:发酵温度、澄清处理、CO2浸渍等。 展开更多
关键词 樱桃酒 干型 技术 酿制 发酵温度 典型特征 生产工艺 澄清处理
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中国特有野生水果欧李(Cerasus Humilis)香气成分的GC—MS分析 被引量:16
18
作者 薛洁 涂正顺 +2 位作者 常伟 贾士儒 王异静 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 2008年第1期125-129,共5页
研究中国特有樱桃属野生果树欧李(Cerosus Humilis)鲜果香气的化学成分。采用顶空-固相微萃取和气-质联用技术对其进行分离、测定,结合计算机检索技术鉴定分离的化合物,并根据面积归-法测定各成分的相对含量。试验结果表明,共鉴定... 研究中国特有樱桃属野生果树欧李(Cerosus Humilis)鲜果香气的化学成分。采用顶空-固相微萃取和气-质联用技术对其进行分离、测定,结合计算机检索技术鉴定分离的化合物,并根据面积归-法测定各成分的相对含量。试验结果表明,共鉴定出77个香气化学成分,占色谱流出组分总量的99.76%,主要为2-己烯醇(13.83%)、2-己烯醛(9.62%)、苯甲醛(6.88%)、3-己烯醇(6.57%)、乙酸乙酯(6.38%)、己醛(5.15%)、里哪醇(5.05%)、己醇(4.12%)、己酸(3.57%)、乙酸丁酯(3.03%)等成分。为欧李果实的加工、利用提供了科学依据。 展开更多
关键词 欧李 果实 香气成分 SPME GC/MS
中国葡萄酒进入日本市场的分析及思考 预览
19
作者 涂正顺 滨野吉秀 《中国食品工业》 2008年第10期32-32,34共2页
在中国,用于酿酒的葡萄栽培面积年年增加,葡萄酒产量正以每年十几个百分点的速度增长。在当前市场经济全球化的大环境下,积极参与国际竞争,努力开拓国际市场,已是中国葡萄酒行业发展的必然趋向。
关键词 中国葡萄酒 日本市场 经济全球化 葡萄酒行业 栽培面积 国际竞争 国际市场 酿酒
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双齿围沙蚕蛋白酶的纯化及其性质 预览 被引量:2
20
作者 汪靖超 赵峰 +1 位作者 李荣贵 王斌 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第8期800-806,共7页
目的:纯化双齿围沙蚕(Perinereis aibuhitensis Grube)蛋白酶,并对其性质进行研究.方法:将沙蚕匀浆液先后进行Superdex-75凝胶柱层析、MonoQTM阴离子交换柱层析及SP-Sepharose 4B阳离子交换层析进行纯化.将经过非还原性SDS-聚丙烯... 目的:纯化双齿围沙蚕(Perinereis aibuhitensis Grube)蛋白酶,并对其性质进行研究.方法:将沙蚕匀浆液先后进行Superdex-75凝胶柱层析、MonoQTM阴离子交换柱层析及SP-Sepharose 4B阳离子交换层析进行纯化.将经过非还原性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白酶电转移至含明胶的SDS-聚丙烯酰胺凝胶中,通过观察明胶的分解来确定电泳条带的蛋白酶活性.对纯化后蛋白酶的最适pH值,热稳定性,最适温度,蛋白酶抑制剂的影响,有机溶剂的稳定性,金属离子对酶活性的影响等性质进行了测定.结果:纯化后得到的一种蛋白酶,还原性SDSPAGE显示纯化的蛋白酶为两条带,分子量分别为M,34 900和M,33 900,而非还原性SDSPAGE出现了分子量分别为Mr 65 600、Mr 57 900、Mr 43 500的三条蛋白带,明胶蛋白酶活性图谱检测显示酶活性主要在约Mr 66 000处.该蛋白酶具较好的热稳定性,在pH 8-10和20-35℃的情况下有较高活性.PMSF对该酶有较强抑制作用,而有机溶剂对该酶没有明显的影响.结论:该蛋白酶由两个通过二硫键连接在一起的亚基构成,两亚基的分子量分别为Mr33 900和Mr 34 900;本文所采用的新的明胶蛋白酶活性图谱检测法是一种非常灵敏和有效的蛋白酶活性检测方法. 展开更多
关键词 纯化 蛋白酶 纯化双齿围沙蚕 性质
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