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乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall蛋白表达的影响 认领
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作者 方道成 谷江 +2 位作者 张永春 刘淼 胡媛媛 《国际泌尿系统杂志》 2021年第1期60-63,共4页
目的探讨乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall(THP)蛋白表达的影响。方法将45只SD雄性大鼠随机分为空白组、对照组和实验组各15只。对照组和实验组尾静脉注射纳米细菌混悬液1 mL制备大鼠肾结石模型,对照组大鼠尾静脉注射等... 目的探讨乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall(THP)蛋白表达的影响。方法将45只SD雄性大鼠随机分为空白组、对照组和实验组各15只。对照组和实验组尾静脉注射纳米细菌混悬液1 mL制备大鼠肾结石模型,对照组大鼠尾静脉注射等量生理盐水。实验大鼠于第2天灌胃1 mL乌梅提取物进行干预,空白组和对照组灌胃等量生理盐水。连续干预4周后,用代谢笼收集24 h尿液。检测尿液pH、Ca2+、柠檬酸(CA)和草酸(Oxa)的含量;采用ELISA试剂盒测定尿液中THP蛋白表达量;取肾脏组织HE染色,观察组织的病理变化以及肾组织中的钙盐结晶形态和结晶量,并进行钙盐结晶量化评分。结果与空白组相比,对照组肾脏组织中钙盐结晶积分显著升高(P<0.05),尿液中pH值和CA水平显著下降(P<0.05),Ca2+、Oxa水平和THP表达升高(P<0.05);与对照组相比,实验组肾脏组织中钙盐结晶积分显著下降(P<0.05),尿液中pH值和CA水平显著升高(P<0.05),Ca2+、Oxa水平和THP表达下降(P<0.05),HE染色显示肾小管内可见晶体沉积减少。结论乌梅提取物通过降低纳米细菌致肾结石大鼠THP蛋白表达和自身聚合,抑制肾脏组织中草酸钙结晶的形成。 展开更多
关键词 肾结石 模型 动物 大鼠 乌梅提取物 纳米细菌
纳米细菌对HK-2细胞的损伤机制及其防治 认领
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作者 王敬珅 王议鹤 +5 位作者 郝志强 杨恒 汪渊 李永乐 王勤章 钱彪 《实用医药杂志》 2020年第1期43-46,50,I0001共6页
目的探究纳米细菌(nanobacteria,NB)损伤人肾小管上皮细胞HK-2并导致晶体滞留的机制以及对该损伤提出防治策略。方法应用肾结石患者尿液培养NB,实验分5组:空白对照组、NB组、一水草酸钙(calcium oxalate monohydrate,COM)组、纳米级羟... 目的探究纳米细菌(nanobacteria,NB)损伤人肾小管上皮细胞HK-2并导致晶体滞留的机制以及对该损伤提出防治策略。方法应用肾结石患者尿液培养NB,实验分5组:空白对照组、NB组、一水草酸钙(calcium oxalate monohydrate,COM)组、纳米级羟基磷灰石(nanograde hydroxuapatite,nHAP)组和四环素干扰组。将HK-2细胞分别与各组作用物共培养6 h,12 h和24 h后,用透射电子显微镜观察HK-2细胞的形态学变化;加入COM晶体后用激光共聚焦显微镜观察各组细胞的晶体黏附情况。结果电镜结果可见,nHAP组和四环素干扰组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组。随着共培养时间延长,NB组、COM组细胞的晶体黏附量持续增加。当共培养24 h时,nHAP组可观察到少量晶体黏附。各时间点,四环素干扰组中晶体黏附量均显著少于NB组。结论NB可损伤HK-2细胞,且损伤程度和晶体黏附量与NB作用时间成正比。四环素可以抑制NB对HK-2细胞的损伤并减少损伤后的晶体滞留。 展开更多
关键词 肾结石 纳米细菌 HK-2细胞
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氧自由基在纳米细菌致肾结石形成过程中的作用 认领
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作者 王敬珅 郝志强 +7 位作者 杨恒 汪渊 李永乐 钱彪 郑丽英 冷欣 王艳军 张志强 《吉林医学》 CAS 2020年第9期2053-2057,共5页
目的:探究氧自由基在纳米细菌(Nanobacteria,NB)导致肾结石损伤过程中的作用。方法:实验分五组:空白对照组、NB组、一水草酸钙(Calcium oxalate monohydrate,COM)组、纳米级羟基磷灰石(Nanograde hydroxuapatite,nHAP)组和四环素(TET+NB... 目的:探究氧自由基在纳米细菌(Nanobacteria,NB)导致肾结石损伤过程中的作用。方法:实验分五组:空白对照组、NB组、一水草酸钙(Calcium oxalate monohydrate,COM)组、纳米级羟基磷灰石(Nanograde hydroxuapatite,nHAP)组和四环素(TET+NB)组。将HK-2细胞分别与各组作用物共培养6 h、12 h和24 h后,用透射电子显微镜观察HK-2细胞的形态学变化;超声粉碎细胞后检测Na^+/K^+ATP酶和Ca^2+/Mg^2+ATP酶活性;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量;最后加入COM晶体后用激光共聚焦显微镜观察各组细胞的晶体黏附情况。结果:电镜结果可见,nHAP组和四环素组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组。nHAP对HK-2细胞酶活性的抑制作用显著低于NB,四环素组细胞在各时间点的酶活性均高于NB组,差异有统计学意义(P<0.05)。各时间点,NB组培养液中H 2O 2和MDA的含量显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),nHAP组无明显变化(P>0.05),四环素组显著低于NB组,差异有统计学意义(P<0.05)。随着共培养时间延长,NB组、COM组细胞的晶体黏附量持续增加。当共培养24 h时,nHAP组可观察到少量晶体黏附。各时间点,四环素组中晶体黏附量均显著少于NB组。结论:NB可能通过诱导脂质过氧化反应损伤HK-2细胞,损伤程度和晶体黏附量与NB作用时间成正比,氧自由基物质,可加重过氧化反应,形成恶性循环。四环素可以抑制NB对HK-2细胞的损伤并减少损伤后的晶体滞留。 展开更多
关键词 肾结石 纳米细菌 HK-2细胞 氧自由基
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纳米细菌在骨关节疾病中的研究进展 认领
4
作者 彭伟秋 张祥洪 《吉林医学》 CAS 2020年第1期202-206,共5页
纳米细菌(nanobacteria NB)是时20世纪80年代Kajander等发现并命名以来,在生命科学领域引起了科学家们广泛的研究热情,是近30年来饱受关注和争议的研究课题[1]。研究者对NB的关注主要有三个方面:其一认为NB分布广泛,可感染任何生物组织... 纳米细菌(nanobacteria NB)是时20世纪80年代Kajander等发现并命名以来,在生命科学领域引起了科学家们广泛的研究热情,是近30年来饱受关注和争议的研究课题[1]。研究者对NB的关注主要有三个方面:其一认为NB分布广泛,可感染任何生物组织和细胞,具有较大的毒性。NB可能是地球上最小的细胞形式,也可能是地球和地外细胞生命起源的细胞前体[2]。其二认为NB与人类病理性钙化类疾病和结石类疾病密切相关,生物体内的结石和病理钙化性组织内都可以检测出NB的存在,NB可能是引起这些疾病的病原体[3]。其三是动物实验中利用NB已经成功研制出胆囊结石和肾结石的动物模型,并用这些动物模型开始结石类疾病的形成机制和治疗方法探讨[4-5]。对NB争议的焦点是截然不同的两个方面:支持者认为NB是一种新型的微生物,属革兰阴性菌,呈球状或球杆状,体积极小,基因序列分析表明NB含16SrRNA序列[6]。Martel等反对者却认为NB不是一种新型的微生物,现有生物体的所必须的大分子蛋白和DNA的体积最小直径必须至少在200纳米以上,NB体积太小不可能容纳这些大分子物质,多聚酶链反应检测没有发现NB中有确定DNA或RNA[7-9]。 展开更多
关键词 纳米细菌 生物矿化 类风湿性关节炎 骨关节炎 骨质疏松症
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细胞培养中“黑胶虫”污染的检测及防治 认领
5
作者 周怡婷 高增鸿 +3 位作者 杨嘉文 汪瑾 郭雅彬 马广伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第1期61-68,共8页
很多国内的细胞培养实验室受到"黑胶虫"(或称为"胶虫"、"焦虫")污染的困扰,类似的污染在国外通常称为"纳米细菌"(nanobacteria)污染,但"黑胶虫"/纳米细菌究竟是何物种抑或是一种非... 很多国内的细胞培养实验室受到"黑胶虫"(或称为"胶虫"、"焦虫")污染的困扰,类似的污染在国外通常称为"纳米细菌"(nanobacteria)污染,但"黑胶虫"/纳米细菌究竟是何物种抑或是一种非生命颗粒,至今还没有定论.我们将细胞培养中的污染物从培养基中分离出来,进行培养和形态学观察,并利用16S r DNA鉴定技术及VITEK-2微生物鉴定系统对"黑胶虫"进行鉴定,最后通过抗生素敏感试验及细胞结晶紫染色技术筛选出抑制"黑胶虫"增殖的抗生素及可用于细胞培养的工作浓度.形态学观察结果显示:"黑胶虫"在普通倒置显微镜下呈点状或片状;电镜下展示为杆状,长1 300~1 600 nm,宽400~500 nm;在激光共聚焦扫描显微镜400倍镜下进行原地"布朗运动". 16 S rDNA鉴定及VITEK-2微生物鉴定系统结果显示:本实验室分离的"黑胶虫"为一株短波单胞菌属(Brevundimonas)的新菌株,该菌株与Brevundimonas diminuta的相似性为97.8%,与Brevundimonas faecalis的相似性为98.1%.抗生素敏感试验结果显示:"黑胶虫"对氯霉素(25 mg/L)、红霉素(200 mg/L)和四环素(2.5 mg/L)敏感,对氨苄青霉素(50 mg/L)、嘌呤霉素(2 mg/L)、青霉素-链霉素双抗(100×)和庆大霉素-两性霉素B双抗(100×)均不敏感.细胞结晶紫染色结果显示:细胞培养基中添加一定浓度的氯霉素(25 mg/L)、红霉素(200 mg/L)或四环素(2.5 mg/L)均可抑制细胞培养中"黑胶虫"的增殖,降低其对细胞增殖的抑制作用.综上所述,本研究分离鉴定的"黑胶虫"为一种短波单胞菌,低浓度的氯霉素、红霉素或四环素均可降低该菌对细胞增殖的抑制作用.鉴于研究的局限性,我们不排除"黑胶虫"是其他物种的可能性,但是本研究为"黑胶虫"的种属鉴定及细胞无菌化培养提供了新的研究思路及方法,并有望帮助一些实验室解决"黑胶虫"污染的困扰. 展开更多
关键词 细胞培养 污染 “黑胶虫” 纳米细菌 抗生素
纳米细菌感染在女性膀胱过度活动症发生中的作用研究 认领
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作者 何鹏 王永权 +2 位作者 潘进洪 周占松 张恒 《重庆医学》 CAS 2019年第21期3634-3636,共3页
目的探讨纳米细菌(NB)感染在女性膀胱过度活动症(OAB)发生中的作用。方法对女性OAB患者尿液中培养细菌并采用PCR法扩增16S rRNA对其进行鉴定。将培养的膀胱黏膜上皮细胞分为实验组和空白对照组,12、24 h后进行显微、超微形态学的观察,... 目的探讨纳米细菌(NB)感染在女性膀胱过度活动症(OAB)发生中的作用。方法对女性OAB患者尿液中培养细菌并采用PCR法扩增16S rRNA对其进行鉴定。将培养的膀胱黏膜上皮细胞分为实验组和空白对照组,12、24 h后进行显微、超微形态学的观察,并测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)的水平。结果25例尿液标本中,可观察到17例(68%)管底出现絮状的乳白色沉淀物,将培养标本离心后通过16S rRNA进行扩增鉴定,发现15例(60%)在1406 bp处可见NB的特异性条带,证明所收集标本培养的细菌为NB。NB组细胞12 h胞浆内可见较大空泡样变,线粒体肿胀,24 h后部分细胞可见核膜溶解,核仁消失。NB组MDA和LDH水平在12、24 h均高于空白对照组(P<0.05)。结论NB对体外培养的膀胱黏膜上皮细胞可造成损伤,NB感染引起的膀胱黏膜炎症可能参与了女性OAB的发病。 展开更多
关键词 纳米细菌 细菌感染 膀胱疾病
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纳米细菌对人关节软骨细胞生物学形态的影响 认领
7
作者 彭伟秋 张祥洪 +3 位作者 韦钊岚 丘立标 张湘生 刘傥 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第1期11-13,共3页
目的观察纳米细菌损伤人膝关节软骨细胞的方式和特点。方法正常人膝关节软骨细胞分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组,分别加入吸光度值为0.280、0.035、0.002、0的纳米细菌液进行攻击,加入纳米细菌液24、48h时光镜下观察4组膝关... 目的观察纳米细菌损伤人膝关节软骨细胞的方式和特点。方法正常人膝关节软骨细胞分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组,分别加入吸光度值为0.280、0.035、0.002、0的纳米细菌液进行攻击,加入纳米细菌液24、48h时光镜下观察4组膝关节软骨细胞形态学变化及存活率,免疫荧光染色法观察中浓度组加入纳米细菌液0、1、2、4、8h时纳米细菌与软骨细胞的位置关系,流式细胞仪检测加入纳米细菌液24h时4组软骨细胞凋亡率。结果高浓度组加入纳米细菌液24h、中浓度组加入纳米细菌液48h,光镜下大部分软骨细胞坏死甚至未见完整细胞形态;加入纳米细菌液24、48h时,高浓度组软骨细胞存活率吸光度值(0.413±0.046、0.345±0.125)低于中浓度组(0.496±0.039、0.708±0.043)、低浓度组(0.539±0.047、1.018±0.048)和对照组(0.577±0.045、1.133±0.127)(P<0.05),中浓度组低于低浓度组和对照组(P<0.05),低浓度组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);纳米细菌可在较短时间内侵入至软骨细胞中,且随时间延长软骨细胞内纳米细菌荧光颗粒数目增多;加入纳米细菌液24h,高、中、低浓度组和对照组软骨细胞凋亡率[(1.541±0.046)%、(1.546±0.039)%、(1.539±0.047)%、(1.527±0.045)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论纳米细菌可损伤人关节软骨细胞,短时间内(24h)被攻击的软骨细胞未发现明显凋亡,高浓度纳米细菌可造成人关节软骨细胞更严重损伤。 展开更多
关键词 纳米细菌 人关节软骨细胞 凋亡 流式细胞仪
Claudin-14在纳米细菌肾结石形成中表达的动态研究 认领 被引量:2
8
作者 申茂磊 王勤章 +4 位作者 钱成 徐浩 郝志强 李鹏 钱彪 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2019年第1期64-67,共4页
目的本实验通过尾静脉注射用肾结石患者尿液培养的纳米细菌构建肾结石模型检测肾脏组织中Claudin-14(紧密连接蛋白-14)蛋白的表达情况,初步探讨Claudin-14在纳米细菌形成结石中的作用。方法60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组和纳米... 目的本实验通过尾静脉注射用肾结石患者尿液培养的纳米细菌构建肾结石模型检测肾脏组织中Claudin-14(紧密连接蛋白-14)蛋白的表达情况,初步探讨Claudin-14在纳米细菌形成结石中的作用。方法60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组和纳米细菌组,每组30只。正常对照组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射0.9%氯化钠注射液1.2mL,纳米细菌组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射等量的纳米细菌悬浊液。两组Wistar雄性大鼠注射后的10周内每周处死3只。每周采用病理组织学方法评估每组3只Wistar雄性大鼠成石情况,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组化方法连续10周检测紧密连接蛋白-14(Claudin-14)mRNA和蛋白的表达。结果①病理组织学检查结果:第4周以后纳米细菌组Wistar雄性大鼠肾小管内发现晶体颗粒,且主要分布于近、远曲小管,1~10周对照组Wistar雄性大鼠未见晶颗粒。②实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和免疫组化结果:3周内Claudin-14mRNA和蛋白在纳米细菌组中几乎未见表达,从第4周起Claudin-14mRNA和蛋白在纳米细菌组中表达水平增高并且对照组明显增高,1~10周间Claudin-14mRNA和蛋白在对照组中几乎未见表达。结论Claudin-14表达的增加可能在纳米细菌形成结石中起重要作用。 展开更多
关键词 紧密连接蛋白14 纳米细菌 肾结石
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纳米细菌及其与口腔结石性疾病的关系 认领
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作者 王宋庆 张志民 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第9期827-829,共3页
纳米细菌是一种有着独特钙化能力的微粒,近年来被发现与多种人类结石性疾病相关。本文从纳米细菌的生物特性入手,根据目前的研究进展,针对其与口腔结石性疾病的关系进行综述,旨在为进一步研究口腔中的纳米细菌提供参考。
关键词 纳米细菌 牙结石 涎石症 口腔疾病
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类风湿性关节炎患者纳米细菌感染情况对血清生物标记物表达的影响 认领
10
作者 李万峰 熊涛 +1 位作者 方绘 张女娇 《长沙医学院学报》 2019年第3期15-18,共4页
目的 :分析纳米细菌对类风湿性关节炎患者局部组织生物标记物表达的影响。方法:对我院54例类风湿性关节炎患者抽取血清进行纳米细菌检测,根据纳米细菌检出浓度分为3组,比较各组患者关节液中主要必需元素、血清中细胞因子、免疫生化指标... 目的 :分析纳米细菌对类风湿性关节炎患者局部组织生物标记物表达的影响。方法:对我院54例类风湿性关节炎患者抽取血清进行纳米细菌检测,根据纳米细菌检出浓度分为3组,比较各组患者关节液中主要必需元素、血清中细胞因子、免疫生化指标、骨代谢指标含量的差异。结果:各组患者血清中钙含量比较,差异有统计学意义(P <0.05);IL-1、TNF-ɑ、CRP含量比较,差异有统计学意义(P <0.05);IgM、IgA、抗CCPP含量比较,差异有统计学意义(P <0.05);CTX-1、RF、ESR含量差异比较,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 :类风湿性关节炎患者关节液中纳米细菌检出情况对其血清细胞因子、免疫指标等表达均有一定影响,纳米细菌检出浓度越高,患者血清中炎症因子和免疫指标表达含量相对越高。 展开更多
关键词 纳米细菌 类风湿性关节炎 关节液
纳米细菌肾结石模型血、尿生化的动态观测 认领
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作者 郝志强 王勤章 +4 位作者 钱成 徐浩 申茂磊 李朋 钱彪 《医学信息》 2019年第11期58-62,71共6页
目的构建纳米细菌Wistar雄性大鼠肾结石模型,动态监测血、尿生化各项指标,旨在为进一步研究纳米细菌在肾结石发生发展过程中所起的作用,提供数据支持,进而为肾结石病因学的下一步探索提供新思路。方法将60只大鼠随机分为纳米细菌组和空... 目的构建纳米细菌Wistar雄性大鼠肾结石模型,动态监测血、尿生化各项指标,旨在为进一步研究纳米细菌在肾结石发生发展过程中所起的作用,提供数据支持,进而为肾结石病因学的下一步探索提供新思路。方法将60只大鼠随机分为纳米细菌组和空白对照组,每组30只。纳米细菌组给予尾静脉注射1.2mlNB悬液,空白对照组给予尾静脉注射1.2ml生理盐水,实验周期为10周,每周每组各处死大鼠3只,处死前采集大鼠血、尿标本,供生化分析,并取两侧鲜活肾脏标本,用于病理结晶情况检测及计算肾体比。结果自第8周开始,纳米细菌组肾体比值大于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。截至第10周末,纳米细菌组大鼠肾脏晶体阳性11只,空白对照组均为阴性,纳米细菌组大鼠肾脏晶体阳性率高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,纳米细菌组第4~8周血肌酐、第3~8周血尿酸、第3~9周尿素氮及尿钙水平均升高,第8周纳米细菌组尿pH高于空白对照组差,第6~7周纳米细菌组血钙高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肾体比、结晶阳性率、血肌酐、血尿酸、血尿素、尿钙等重要指标的有效升高,均显示纳米细菌Wistar雄性大鼠肾结石实验模型的成功制备,这为进一步揭示NB在结石形成过程中所起的作用以及后续对肾结石病因学的进一步研究提供了良好的实验基础与数据支持。 展开更多
关键词 肾结石 纳米细菌 血、尿生化 肾功 大鼠肾结石模型
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胆结石来源纳米细菌抗生素敏感试验的初步研究 认领
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作者 朱明利 王晶晶 刘寿荣 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第11期1300-1302,共3页
目的了解氨苄西林、四环素、呋喃妥因对胆结石来源纳米细菌的抗菌作用,为胆结石治疗提供新的思路。方法按照?íft?íoglu等采用的方法,分为纳米细菌药敏组、纳米细菌对照组、空白对照组,分别培养14 d后,用酶标仪(650 nm)连续多... 目的了解氨苄西林、四环素、呋喃妥因对胆结石来源纳米细菌的抗菌作用,为胆结石治疗提供新的思路。方法按照?íft?íoglu等采用的方法,分为纳米细菌药敏组、纳米细菌对照组、空白对照组,分别培养14 d后,用酶标仪(650 nm)连续多时段测定其吸光度,用药敏组与对照组的生长曲线偏差来测定每种药物的抑菌效果,并用微量稀释法进行MIC和MBC试验。结果药敏组纳米细菌生长曲线介于纳米细菌对照组与空白对照组之间。无抗菌药物环境再培养14 d,药敏组纳米细菌的生长幅度低于纳米细菌对照组,纳米细菌的生长速度与抗菌药物作用的浓度呈反比。3种抗菌药物的MIC值分别为四环素1.95μg/ml、氨苄西林7.8μg/ml、呋喃妥因3.9μg/ml。结论氨苄西林、四环素、呋喃妥因对纳米细菌生长均具有抑制作用,是抑菌剂。 展开更多
关键词 纳米细菌 药物敏感性试验 四环素 氨苄西林 呋喃妥因
柠檬酸对纳米细菌致人肾小管上皮细胞损伤的保护作用 认领 被引量:1
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作者 董安涛 谷江 +4 位作者 张永春 杨锦春 张国庆 刘淼 夏剑锋 《临床泌尿外科杂志》 2019年第1期52-56,共5页
目的:体外观察柠檬酸对纳米细菌(NB)致人肾小管上皮细胞损伤的影响,并探讨其可能机制。方法:取对数生长期人肾小管上皮细胞并随机分为五组:对照组、损伤组、干预组A、干预组B及干预组C。检测各组细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(... 目的:体外观察柠檬酸对纳米细菌(NB)致人肾小管上皮细胞损伤的影响,并探讨其可能机制。方法:取对数生长期人肾小管上皮细胞并随机分为五组:对照组、损伤组、干预组A、干预组B及干预组C。检测各组细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和一氧化氮(NO)水平,实时荧光定量PCR检测ICAM-1mRNA相对表达量,Western blot检测ICAM-1、NF-κB p65、p-IκBα蛋白的表达。结果:与对照组比较,损伤组MDA含量、NO水平显著增加,SOD活性显著下降,柠檬酸干预后,MDA含量、NO水平降低,SOD活性升高,而且上述改变随柠檬酸浓度增加而明显,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测结果显示对照组、损伤组、干预组A、干预组B和干预组C ICAM-1mRNA相对表达量分别为1、36.56±2.65、17.36±1.51、6.76±0.95和2.77±0.46;Western blot法检测结果显示各组细胞ICAM-1蛋白相对表达量分别为0.35±0.05、0.93±0.03、0.86±0.04、0.81±0.04和0.70±0.03;NF-κB p65蛋白相对表达量分别为0.41±0.03、0.99±0.02、0.91±0.03、0.82±0.03和0.55±0.05;p-IκBα蛋白表达量分别为0.21±0.04、0.61±0.05、0.52±0.03、0.44±0.03和0.32±0.02。结论:NB作用于体外培养的人肾小管上皮细胞后可通过激活NF-κB通路来刺激细胞表达ICAM-1,而柠檬酸可显著抑制此过程,且具有剂量依赖性。 展开更多
关键词 柠檬酸 纳米细菌 肾小管上皮细胞 损伤
萝卜硫素干预纳米细菌诱导肾小管上皮细胞凋亡及线粒体自噬相关蛋白的表达 认领 被引量:1
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作者 蒲道静 郑府 +3 位作者 徐先顺 丁文娟 陈艳 邹照银 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第34期5503-5507,共5页
背景:萝卜硫素能改善肾小管上皮细胞氧化应激损伤,抑制细胞凋亡,对肾小管上皮细胞损伤作用具有保护作用,但萝卜硫素对肾小管上皮细胞线粒体自噬的影响还有待研究。目的:验证萝卜硫素对纳米细菌诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡及线粒体... 背景:萝卜硫素能改善肾小管上皮细胞氧化应激损伤,抑制细胞凋亡,对肾小管上皮细胞损伤作用具有保护作用,但萝卜硫素对肾小管上皮细胞线粒体自噬的影响还有待研究。目的:验证萝卜硫素对纳米细菌诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡及线粒体自噬相关蛋白表达的影响。方法:研究方案的实施符合恩施土家族苗族自治州中心医院对研究的相关伦理要求。纳米细菌取自恩施土家族苗族自治州中心医院泌尿外科临床确诊肾结石且未服药或手术患者的尿液,患者对实验方案完全知情同意。将人肾小管上皮细胞HK-2分为3组:对照组、纳米细菌组及萝卜硫素干预组(给予纳米细菌刺激同时加30μmol/L萝卜硫素)。采用CCK-8法检测HK-2细胞相对存活率,流式细胞仪检测HK-2细胞凋亡率,Western Blot方法检测凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)及同源性磷酸酶张力蛋白诱导的激酶1(PINK1)/帕金蛋白(Parkin)介导的线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ的表达。结果与结论:①萝卜硫素能有效改善纳米细菌对HK-2细胞增殖的抑制作用(P<0.05);②纳米细菌可上调促凋亡蛋白Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,诱导线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上升(P<0.05);而萝卜硫素处理可明显下调促凋亡蛋白Bax表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制PINK1、Parkin蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(P<0.05);③结果说明,萝卜硫素可抑制纳米细菌诱导的肾小管上皮细胞HK-2的凋亡,缓解其由PINK1/Parkin介导的线粒体自噬。 展开更多
关键词 萝卜硫素 肾小管上皮细胞 纳米细菌 线粒体自噬 细胞凋亡 BAX BCL-2 LC3-Ⅱ LC3-Ⅰ
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慢性Ⅲ型前列腺炎患者前列腺液中纳米细菌的检测 认领
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作者 杨彬 王靖宇 +3 位作者 郭强 张文瑾 袁帅 张雁钢 《山西中医学院学报》 2019年第4期296-297,301共3页
目的:通过利用不同方法对Ⅲ型前列腺炎(CPPS)患者前列腺液中纳米细菌的检测,了解纳米细菌(NB)在Ⅲ型前列腺炎发病中的作用。方法:本研究从临床78例Ⅲ型前列腺炎患者和75例正常健康男性对照组的前列腺液中通过过滤方法分离纳米细菌,特殊... 目的:通过利用不同方法对Ⅲ型前列腺炎(CPPS)患者前列腺液中纳米细菌的检测,了解纳米细菌(NB)在Ⅲ型前列腺炎发病中的作用。方法:本研究从临床78例Ⅲ型前列腺炎患者和75例正常健康男性对照组的前列腺液中通过过滤方法分离纳米细菌,特殊培养基培养4 w后观察,分别利用间接免疫荧光方法(IIFS法)和PCR进行检测。结果:Ⅲ型前列腺炎(CPPS)患者中,IIFS法鉴定纳米细菌阳性31例(39.7%),PCR法鉴定纳米细菌阳性37例(47.4%),对照组IIFS法及PCR鉴定纳米细菌均为5例(6.7%)。结论:CPPS患者前列腺液中存在NB,并且有较高的阳性率,NB感染与CPPS发生可能存在着密切的关系。 展开更多
关键词 前列腺炎 前列腺液 纳米细菌
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肾结石患者尿液纳米细菌感染与尿液成石危险因素的关系 认领 被引量:1
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作者 韩跃辅 彭潋 +2 位作者 方海林 黄洪才 陈东 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2019年第5期339-342,共4页
目的分析肾结石患者尿液纳米细菌(NB)感染与尿液成石危险因素的关系。方法:检测我院2016年1月至2019年2月1210例单侧肾结石患者的肾盂尿液NB浓度,根据纳米细菌浓度分为组1(0个/视野)、组2(1~2个/视野)和组3(≥3个/视野)共3组;同时收集... 目的分析肾结石患者尿液纳米细菌(NB)感染与尿液成石危险因素的关系。方法:检测我院2016年1月至2019年2月1210例单侧肾结石患者的肾盂尿液NB浓度,根据纳米细菌浓度分为组1(0个/视野)、组2(1~2个/视野)和组3(≥3个/视野)共3组;同时收集各组患者结石侧24 h尿液,进行尿液成石危险因素检测,比较各组患者尿钙浓度、尿镁浓度、尿枸橼酸浓度、尿草酸浓度、尿尿酸浓度的差异。结果组1、组2、组3患者结石侧24 h尿钙浓度分别为(74.959±21.664)、(94.354±28.579)、(92.998±23.26)mg/24 h,组1 vs.组2、组1 vs.组3差异均具有统计学意义(P=0.021,P=0.015)。尿镁浓度分别为(69.349±22.086)、(68.645±26.699)、(65.887±21.126)mg/24 h,尿枸橼酸浓度分别为(224.512±102.675)、(228.283±88.409)、(234.905±95.226)mg/24 h,尿草酸浓度分别为(36.714±11.131)、(38.735±12.416)、(37.561±15.182)mg/24 h,尿尿酸浓度分别为(35.691±11.891)、(37.958±15.889)、(36.902±13.606)mg/24 h,尿镁、尿枸橼酸、尿草酸以及尿尿酸3组间比较,差异均无统计学意义(P均> 0.05)。结论肾结石患者尿液NB感染与尿液成石危险因素之间关系密切。尿液NB感染可通过升高尿钙浓度增加尿液成石危险因素。 展开更多
关键词 纳米细菌 肾结石 成石危险因素 尿钙浓度
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“纳米细菌”样颗粒的研究进展及其在骨科疾病中的作用 认领 被引量:1
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作者 彭伟秋 张祥洪 《实用骨科杂志》 2019年第7期621-625,共5页
纳米细菌(nanobacteria,NB)在20世纪90年代由芬兰Kajander教授等发现并命名以来,在生命科学领域引起了科学家们广泛的关注并开展了研究,是近30年来饱受关注和争议的研究课题[1]。研究者对NB的关注主要有三个方面:其一认为NB分布广泛,可... 纳米细菌(nanobacteria,NB)在20世纪90年代由芬兰Kajander教授等发现并命名以来,在生命科学领域引起了科学家们广泛的关注并开展了研究,是近30年来饱受关注和争议的研究课题[1]。研究者对NB的关注主要有三个方面:其一认为NB分布广泛,可感染任何生物组织和细胞,具有较大的毒性。NB可能是地球上最小的细胞形式,也可能是地球和地外细胞生命起源的细胞前体[2]。其二认为NB与人类病理性钙化类疾病和结石类疾病密切相关,生物体内的结石和病理钙化性组织内都可以检测出NB的存在,NB可能是引起这些疾病的病原体[3]。其三是动物实验中利用NB已经成功研制出胆囊结石和肾结石的动物模型,并用这些动物模型开始结石类疾病的形成机制和治疗方法探讨[4-5]。 展开更多
关键词 骨科疾病 纳米细菌 病理性钙化 生物组织 动物模型 肾结石 生命科学 生命起源
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纳米细菌促进人胆囊上皮细胞凋亡的作用机制 认领
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作者 梁立洲 金宗睿 +3 位作者 徐邦浩 郭雅 彭民浩 文张 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1410-1413,共4页
目的观察纳米细菌(NB)与人胆囊上皮细胞的相互作用,探讨瓷化胆囊形成的机制.方法抽取瓷化胆囊及正常胆囊中胆汁,培养NB,电镜下观察培养出NB形态.取部分正常胆囊,原代培养人胆囊上皮细胞,免疫荧光检测上皮细胞标记角蛋白(CK19)的表达情况... 目的观察纳米细菌(NB)与人胆囊上皮细胞的相互作用,探讨瓷化胆囊形成的机制.方法抽取瓷化胆囊及正常胆囊中胆汁,培养NB,电镜下观察培养出NB形态.取部分正常胆囊,原代培养人胆囊上皮细胞,免疫荧光检测上皮细胞标记角蛋白(CK19)的表达情况.将1.0麦氏浊度(MCF)的NB分别诱导人胆囊上皮细胞0、12、24、48 h,通过检测细胞增殖及细胞计数试剂盒(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒、流式细胞仪检测细胞的损伤及凋亡率,蛋白质印迹法(Westernblot)检测B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、细胞色素C(Cyt-C)、活化半胱氨酸蛋白酶-9(cleaved Caspsae-9)蛋白的表达.结果瓷化胆囊与正常胆囊胆汁培养出NB阳性率分别为88.9%与15.0%,差异有统计学意义(x2=14.39,P<0.01).电镜下可见NB呈圆形或类圆形,大小不等,直径约80 nm.荧光显微镜下原代培养人胆囊上皮细胞CK19蛋白免疫荧光阳性,NB干预胆囊上皮细胞0、12、24、48 h,细胞存活率24、48 h显著下降,差异有统计学意义(F=305.501,P<0.01),LDH释放量24、48 h显著升高,差异有统计学意义(F=5 351.109,P<0.01),细胞凋亡在24、48 h显著增加,差异有统计学意义(F=597.457,P<0.01).Western blot检测bcl-2/bax值,在24、48 h显著下降,差异有统计学意义(F=1 336.833,P<0.01),Cyt-C相对表达量12、24、48 h明显升高,差异有统计学意义(F=1 422.101,P<0.01),cleaved Caspsae-9在24、48 h显著增加,差异有统计学意义(F=2 348.061,P<0.01).结论 NB通过线粒体途径促进人胆囊上皮细胞凋亡,可能与瓷化胆囊的形成密切相关. 展开更多
关键词 纳米细菌 胆囊上皮细胞 凋亡 瓷化胆囊
胆结石与胆汁中纳米细菌的检测与意义 认领
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作者 朱明利 王晶晶 +2 位作者 潘万能 刘寿荣 朱元东 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期3279-3283,共5页
目的研究胆结石患者胆汁及结石中纳米细菌(NB)的感染情况,分析纳米细菌与胆结石形成的关系,探讨纳米细菌在胆结石形成中的可能机制。方法选择2013年10月-2014年12月杭州市西溪医院外科手术患者,术中无菌收集胆汁43例(胆囊结石患者36例,... 目的研究胆结石患者胆汁及结石中纳米细菌(NB)的感染情况,分析纳米细菌与胆结石形成的关系,探讨纳米细菌在胆结石形成中的可能机制。方法选择2013年10月-2014年12月杭州市西溪医院外科手术患者,术中无菌收集胆汁43例(胆囊结石患者36例,非胆囊结石患者7例),结石30例。采用细胞培养的方法,对胆汁及结石中的纳米细菌进行分离培养。采用间接免疫荧光法、透射电镜负染法、茜素红钙染色法、PCR法等对纳米细菌进行鉴定。结果以间接免疫荧光法为金标准,胆汁中纳米细菌阳性率为44.18%(19/43),其中胆结石患者胆汁纳米细菌阳性率为50.00%(18/36),非胆囊结石患者胆汁中纳米细菌阳性率为14.29%(1/7);结石中纳米细菌阳性率为60.00%。胆囊结石患者胆汁与结石中NB的阳性率无统计学差异。钙染色法与间接免疫荧光法、PCR法与间接免疫荧光法检测纳米细菌无统计学差异。结论纳米细菌与胆结石密切相关。胆结石患者纳米细菌的感染率较高,可能会促进胆结石的形成。采用细胞培养、稀释双过滤的方法能从胆汁及结石中分离培养出纳米细菌;透射电镜负染法、间接免疫荧光法可作为纳米细菌鉴定的金标准,茜素红钙染色、PCR法可作为重要参考。 展开更多
关键词 胆囊结石 胆汁 纳米细菌 透射电镜负染法 间接免疫荧光法
Mirco-CT对纳米细菌大鼠肾结石的动态观测 认领 被引量:2
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作者 郝志强 王勤章 +3 位作者 倪钊 钱成 申茂磊 钱彪 《实用医药杂志》 2018年第4期336-339,共4页
目的构建纳米细菌Wistar雄性大鼠肾结石模型,并进行mirco-CT动态监测,为肾结石病因学的研究提供新的技术支持。方法将60只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为纳米细菌组(尾静脉注射1.2 ml NB悬液,30只)和对照组(尾静脉注射1.2 ml生理盐水,30... 目的构建纳米细菌Wistar雄性大鼠肾结石模型,并进行mirco-CT动态监测,为肾结石病因学的研究提供新的技术支持。方法将60只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为纳米细菌组(尾静脉注射1.2 ml NB悬液,30只)和对照组(尾静脉注射1.2 ml生理盐水,30只),共计处理10 W,每周每组处死3只,并取两侧鲜活肾标本,在mirco-CT下进行检测,并记录阳性指标个数,同时做病理组织学检验,对结晶阳性动物实验模型进行统计分析。结果mirco-CT检测结果:截至第10周末,纳米细菌组大鼠肾高密度影检出4只,对照组未检出;病理组织学检验结果:10 w计数,纳米细菌组大鼠肾晶体阳性11只,截至第10周末,纳米细菌组大鼠肾晶体阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论mirco-CT与病理组织学检验结果进行比较分析,计算其Kappa值≈0.4199,一致性较差。原因系二者在宏观与微观两个层面分别对结石形成进行监测,其中mirco-CT可以在不破坏标本的情况下,构建更加直观立体的三维模型,对结石形成的动态观测具有重要意义。 展开更多
关键词 肾结石 纳米细菌 mirco-CT 组织病理学检验
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